اختبار كائن رواية الاعتراف للتحقيق في التعلم والذاكرة في الفئران

الهدف العام من هذا الاختبار السلوكي هو اختبار جوانب مختلفة من التعلم والذاكرة في الفئران. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على العديد من الأسئلة في مجال إدراك القوارض ، من أساسيات تطوير فهم أعمق ، لجوانب معينة من التعلم في الذاكرة والفئران ، بالإضافة إلى القضايا الأكثر تعقيدا ، مثل الضعف الإدراكي ، بما في ذلك نماذج الأمراض ، مثل مرض الزهايمر ، إلى استكشاف التعزيز المعرفي المحتمل. الميزة الرئيسية ل ORT هي بساطتها وكفاءتها ومرونتها ودراسة التعلم والذاكرة في الفئران.

سيوضح هذا الإجراء أندريه جيلتي ، فني مختبر من مختبرنا. ابدأ باختيار كائنات بحجم الخلد يمكن تمييزها بسهولة من قبل ولكن لها درجة مماثلة من التعقيد في الميزات ، مثل الملمس أو الشكل أو السطوع لتقليل أي تفضيل محتمل للكائن المستحث قد يؤدي إلى تحيز النتائج. بالإضافة إلى ذلك ، لتقليل التفضيلات المستحثة بشكل أكبر ، تأكد من أن الفئران قادرة على التسلق على كلا الكائنين أو أيا من الكائنين.

تؤدي القدرة على التسلق على جسم ما إلى زيادة الاهتمام بالاستكشاف. ثم لتقليل ضغط الإضاءة الساطعة ، استخدم الإضاءة المنخفضة التي تم إبطالها مع إضاءة مركز المتاهة حوالي 20 حظا. تأقلم الفئران مع أي غرف اختبار جديدة لمدة ساعة واحدة على الأقل قبل استخدامها كل يوم وحافظ على درجة الحرارة والرطوبة مماثلة لظروف السكن العادية.

لاحظ أنه يجب التعامل مع الفئران مرة إلى مرتين في اليوم لمدة دقيقة واحدة على الأقل ، على مدار أسبوع إلى أسبوعين قبل الاختبار. أخيرا ، بالنسبة للساحة الرئيسية ، استخدم غرفة مربعة مصنوعة من البلاستيك الأبيض أو الأسود غير المسامي على النقيض من لون الماوس. ابدأ بإزالة الماوس من قفص منزله ووضعه في منتصف الساحة الفارغة المفتوحة.

اسمح باستكشاف الساحة مجانا لمدة خمس دقائق. بمجرد أن يصبح قفص المنزل فارغا ، احفظه لاستخدامه كقفص احتجاز في اليوم التالي. في نهاية خمس دقائق ، قم بإزالة الماوس وضعه في قفص احتجاز.

لا تعيد الماوس إلى قفصه الأصلي ، وإلا فقد يؤثر ذلك على سلوك الفئران المتبقية المراد اختبارها. ثم قم بتنظيف الجهاز جيدا بين الفئران ، باستخدام 70٪ حجم الإيثانول لكل حجم. بعد ذلك ، ابدأ مرحلة التدريب أو T1 ، عن طريق وضع كائنين متطابقين في أرباع متقابلة من الساحة.

على سبيل المثال ، واحد في الركن الشمالي الغربي والآخر في الركن الجنوبي الشرقي. اربط أي أشياء خفيفة جدا على الأرض باستخدام معجون تثبيت الإزالة. وازنة استخدام كل مجموعة من الكائنات بالإضافة إلى موقع الكائن الجديد لكل زاوية من الزوايا الأربع للساحة.

تأكد من معرفة القطر المستخدم لأي ، بحيث يكون الاستخدام القطري في يوم التدريب هو الشكل المستخدم في يوم الاختبار لكل فأر. بعد 24 ساعة من التعود ، أخرج الماوس من قفصه المنزلي وضعه في وسط الساحة ، على مسافة متساوية من الكائنين المتطابقين لبدء التدريب. اسمح بالاستكشاف المجاني لمدة لا تقل عن خمس دقائق ، إذا قمت بدمج سلالة من الفئران المعروفة بنشاط حركي أو استكشاف منخفض ، فقم بتمديد التجربة إلى 10 دقائق لجميع الفئران في المجموعات.

في نهاية التجربة التدريبية ، قم بإزالة الماوس وضعه في قفص الاحتجاز. بمجرد أن يصبح قفص المنزل فارغا ، احفظه لاستخدامه كقفص احتجاز في يوم الاختبار. تأكد من تنظيف الجهاز والأشياء بين الفئران.

بعد ذلك ، ابدأ مرحلة الاختبار أو T2 ، عن طريق وضع الكائن المألوف المستخدم أثناء التدريب وكائن جديد واحد في أرباع متقابلة من الساحة. استخدم نفس المواقع التي تستخدمها أثناء التدريب لكل ماوس. في الفاصل الزمني T1 إلى T2 للاختيار ، قم بإزالة الماوس من قفص منزله وضعه في الساحة المركزية ، على مسافة متساوية من الكائن المألوف والكائن الجديد.

اسمح بالاستكشاف المجاني لمدة 10 دقائق. أخيرا ، في نهاية تجربة الاختبار ، قم بإزالة الماوس وضعه في قفص الاحتجاز. للتحليل ، يتم تعريف الاستكشاف على أنه الأنف الموجه نحو الجسم في غضون سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات مع كنس الاهتزاز النشط.

ومع ذلك ، فإن الماوس الجالس على الكائن ، لا يتم احتسابه في وقت الاستكشاف. لكل من T1 و T2 ، سجل أول خمس دقائق واحسب إجمالي وقت الاستكشاف لكلا الكائنين لكل جلسة. إذا لم يستوف الماوس الحد الأدنى لوقت الاستكشاف البالغ 20 ثانية لكلا الكائنين، فاستمر في تسجيل النقاط بعد خمس دقائق حتى يتجاوز إجمالي الاستكشاف 20 ثانية.

قم بتمديد وقت T1 و T2 إلى 10 دقائق لسلالات الفئران التي لديها استكشاف منخفض ولا تفي بهذا المعيار الأدنى بمقدار خمس دقائق كما لوحظ أثناء الاختبار التجريبي. أخيرا ، إذا لم تصل الفئران إلى 20 ثانية كحد أدنى من الاستكشاف لكلا الكائنين إما T1 أو T2 في 10 دقائق ، فاستبعدها من التحليل لأنه لا يمكن تأكيد أن قضى وقتا كافيا في الاستكشاف للتعلم والتمييز. مهمة التعرف على الكائنات هي طريقة فعالة ومرنة لدراسة التعلم والذاكرة في الفئران ، حيث ثبت أن مثبطات الفوسفودي ستراز 2 تتحسن أثناء هذه المهمة.

بالمقارنة مع السيارة ، فإن إدارة مثبطات PDE2 60-7550 أو ND7001 ، عززت الذاكرة بشكل كبير بطريقة تعتمد على الجرعة ، عند إعطائها قبل 30 دقيقة من التدريب. عندما تدار في نقاط زمنية مختلفة, بالنسبة للتدريب والاختبار, خليج مثبط PDE2 60-7550 عزز بشكل كبير ذاكرته عند إعطائه 30 دقيقة قبل التدريب, وكذلك مباشرة بعد التدريب و 30 دقيقة قبل الاستدعاء. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في غضون يومين إلى ثلاثة أيام إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر إجراء دراسات تجريبية واختيار الفاصل الزمني T1 إلى T2 بعناية ، لأن اختيار فاصل زمني خاطئ قد يؤدي إلى سوء التأثير. باتباع هذا الإجراء ، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل متاهة الحظيرة من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل الاختلافات في التعلم ، والتي لا يمكن معالجتها بالكامل باستخدام اختبارات التعرف على الكائنات. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال التعلم والذاكرة لاستكشاف الآليات البيولوجية الأساسية للذاكرة ، وكذلك استكشاف الآليات المحتملة لمختلف العجز المعرفي في القوارض.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إعداد وتصميم تجربة مناسبة باستخدام اختبار التعرف على الكائنات ، بما في ذلك إجراء دراسات تجريبية واختيار الكائنات واختيار الفاصل الزمني المناسب من T1 إلى T2. شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.