Name: دراسة مورفولوجيا القلب مشخصين وغذائها في الماوس (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 22 s
Description: اكتشف تقنية تصوير القلب بالموجات فوق الصوتية المدمجة مع التحليل النسيجي لتقييم وظيفة القلب ومورفولوجيا الفئران المعدلة وراثياً. هذه الطريقة توفر بديلاً اقتصادياً للأجهزة عالية التكلفة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

العمل تدعمها "الحكومة الفرنسية" (الوكالة الوطنية للبحوث، والوكالة الوطنية للمعلومات) من خلال برنامج "الاستثمار من أجل المستقبل" سيجناليفي لابيكس (مرجع ANR-11-لابكس-0028-01) ومن المنح إلى ك. د. و من الرابطة صب sur la البحوث السرطان، مؤسسة دي فرانس، وخطة Inserm السرطان. د. ب ف أ-تلقي والزمالات من لوس أنجليس من أجل مؤسسة "بحوث ميديكال" ومن مدينة نيس، على التوالي. في اتشوكارديوجراف ومحول تم التكرم المقدمة من شركة فيليبس. ونحن نشكر بوردر ألف وديشتر س.، M. كوتاجار-بوسيرت، لاندوار أ، مارتريس أ، بيانكارديني أ وفاغنر م. س. لمساعداتها التقنية الماهرة.

<ol><li>Ormandy, E. H., Dale, J., Griffin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+engineering+of+animals%3A+ethical+issues%2C+including+welfare+concerns%5BTitle%5D)+AND+%22Can+Vet+J%22%5BJournal%5D)">Genetic engineering of animals: ethical issues, including welfare concerns.</a> Can Vet J. 52 (5), 544-550 (2011).</li>
<li>Karl, T., Pabst, R., von Hörsten, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+of+mice+in+pharmacological+and+toxicological+research%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping of mice in pharmacological and toxicological research.</a> Exp Toxicol Pathol. 55 (1), 69-83 (2003).</li>
<li>Phoon, C. K., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+Imaging+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular Imaging in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 6 (1), 15-38 (2016).</li>
<li>Wagner, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisome+proliferator-activated+receptor+beta+stimulation+induces+rapid+cardiac+growth+and+angiogenesis+via+direct+activation+of+calcineurin%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Peroxisome proliferator-activated receptor beta stimulation induces rapid cardiac growth and angiogenesis via direct activation of calcineurin.</a> Cardiovasc Res. 83 (1), 61-71 (2009).</li>
<li>Wagner, K. D., Vukolic, A., Baudouy, D., Michiels, J. F., Wagner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+Conditional+Vascular-Specific+Overexpression+of+Peroxisome+Proliferator-Activated+Receptor+Beta%2FDelta+Leads+to+Rapid+Cardiac+Hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22PPAR+Res%22%5BJournal%5D)">Inducible Conditional Vascular-Specific Overexpression of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Beta/Delta Leads to Rapid Cardiac Hypertrophy.</a> PPAR Res. 2016, 7631085(2016).</li>
<li>Ghanbarian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dnmt2%2FTrdmt1+as+Mediator+of+RNA+Polymerase+II+Transcriptional+Activity+in+Cardiac+Growth%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Dnmt2/Trdmt1 as Mediator of RNA Polymerase II Transcriptional Activity in Cardiac Growth.</a> PLoS One. 11 (6), e0156953(2016).</li>
<li>Meguro, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclosporine+attenuates+pressure-overload+hypertrophy+in+mice+while+enhancing+susceptibility+to+decompensation+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cyclosporine attenuates pressure-overload hypertrophy in mice while enhancing susceptibility to decompensation and heart failure.</a> Circ Res. 84 (6), 735-740 (1999).</li>
<li>de Araújo, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regular+and+moderate+aerobic+training+before+allergic+asthma+induction+reduces+lung+inflammation+and+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Med+Sci+Sports%22%5BJournal%5D)">Regular and moderate aerobic training before allergic asthma induction reduces lung inflammation and remodeling.</a> Scand J Med Sci Sports. 26 (11), 1360-1372 (2016).</li>
<li>Benavides-Vallve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+strategies+for+echocardiographic+evaluation+of+left+ventricular+function+in+a+mouse+model+of+long-term+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">New strategies for echocardiographic evaluation of left ventricular function in a mouse model of long-term myocardial infarction.</a> PLoS One. 7 (7), e41691(2012).</li>
<li>Colazzo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+left+atrium+and+left+atrial+appendage+structure+and+function%3A+echocardiographic+and+morphologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Murine left atrium and left atrial appendage structure and function: echocardiographic and morphologic evaluation.</a> PLoS One. 10 (4), e0125541(2015).</li>
<li>Pachon, R. E., Scharf, B. A., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Best+anesthetics+for+assessing+left+ventricular+systolic+function+by+echocardiography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Best anesthetics for assessing left ventricular systolic function by echocardiography in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (12), H1525-H1529 (2015).</li>
<li>Gao, S., Ho, D., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiography+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Echocardiography in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 71-83 (2011).</li>
<li>Mor-Avi, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+and+evolving+echocardiographic+techniques+for+the+quantitative+evaluation+of+cardiac+mechanics%3A+ASE%2FEAE+consensus+statement+on+methodology+and+indications+endorsed+by+the+Japanese+Society+of+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Current and evolving echocardiographic techniques for the quantitative evaluation of cardiac mechanics: ASE/EAE consensus statement on methodology and indications endorsed by the Japanese Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 24 (3), 277-313 (2011).</li>
<li>Collins, K. A., Korcarz, C. E., Lang, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+echocardiography+for+the+phenotypic+assessment+of+genetically+altered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Use of echocardiography for the phenotypic assessment of genetically altered mice.</a> Physiol Genomics. 13 (3), 227-239 (2003).</li>
<li>Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+evaluation+of+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic evaluation of ventricular function in mice.</a> Echocardiography. 24 (1), 83-89 (2007).</li>
<li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 281 (5), H1938-H1945 (2001).</li>
<li>Moran, C. M., Thomson, A. J., Rog-Zielinska, E., Gray, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+echocardiography+in+the+assessment+of+cardiac+physiology+and+disease+in+preclinical+models%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Physiol%22%5BJournal%5D)">High-resolution echocardiography in the assessment of cardiac physiology and disease in preclinical models.</a> Exp Physiol. 98 (3), 629-644 (2013).</li>
<li>Fayssoil, A., Tournoux, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyzing+left+ventricular+function+in+mice+with+Doppler+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Fail+Rev%22%5BJournal%5D)">Analyzing left ventricular function in mice with Doppler echocardiography.</a> Heart Fail Rev. 18 (4), 511-516 (2013).</li>
<li>Schoensiegel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+throughput+echocardiography+in+conscious+mice%3A+training+and+primary+screens%5BTitle%5D)+AND+%22Ultraschall+Med%22%5BJournal%5D)">High throughput echocardiography in conscious mice: training and primary screens.</a> Ultraschall Med. 32, Suppl 1. S124-S129 (2011).</li>
<li>Yariswamy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac-restricted+Overexpression+of+TRAF3+Interacting+Protein+2+%28TRAF3IP2%29+Results+in+Spontaneous+Development+of+Myocardial+Hypertrophy%2C+Fibrosis%2C+and+Dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Cardiac-restricted Overexpression of TRAF3 Interacting Protein 2 (TRAF3IP2) Results in Spontaneous Development of Myocardial Hypertrophy, Fibrosis, and Dysfunction.</a> J Biol Chem. 291 (37), 19425-19436 (2016).</li>
<li>Jara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac-Specific+Disruption+of+GH+Receptor+Alters+Glucose+Homeostasis+While+Maintaining+Normal+Cardiac+Performance+in+Adult+Male+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Cardiac-Specific Disruption of GH Receptor Alters Glucose Homeostasis While Maintaining Normal Cardiac Performance in Adult Male Mice.</a> Endocrinology. 157 (5), 1929-1941 (2016).</li>
<li>Kerr, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stability+and+function+of+adult+vasculature+is+sustained+by+Akt%2FJagged1+signalling+axis+in+endothelium%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Stability and function of adult vasculature is sustained by Akt/Jagged1 signalling axis in endothelium.</a> Nat Commun. 7, 10960(2016).</li>
<li>Wagner, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+vessel+development+requires+activation+of+the+TrkB+neurotrophin+receptor+by+the+Wilms%27+tumor+transcription+factor+Wt1%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Coronary vessel development requires activation of the TrkB neurotrophin receptor by the Wilms' tumor transcription factor Wt1.</a> Genes Dev. 19 (21), 2631-2642 (2005).</li>
<li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Wilms%27+tumour+suppressor+Wt1+is+a+major+regulator+of+tumour+angiogenesis+and+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">The Wilms' tumour suppressor Wt1 is a major regulator of tumour angiogenesis and progression.</a> Nat Commun. 5, 5852(2014).</li>
<li>Yang, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+conscious+and+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of cardiac function in conscious and anesthetized mice.</a> Am J Physiol. 277 (5 Pt 2), H1967-H1974 (1999).</li>
<li>Rottman, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+changes+in+ventricular+function+assessed+echocardiographically+in+conscious+and+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Temporal changes in ventricular function assessed echocardiographically in conscious and anesthetized mice.</a> J Am Soc Echocardiogr. 16 (11), 1150-1157 (2003).</li>
<li>Quiñones, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+quantification+of+Doppler+echocardiography%3A+a+report+from+the+Doppler+Quantification+Task+Force+of+the+Nomenclature+and+Standards+Committee+of+the+American+Society+of+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Recommendations for quantification of Doppler echocardiography: a report from the Doppler Quantification Task Force of the Nomenclature and Standards Committee of the American Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 15 (2), 167-184 (2002).</li>
<li>van Laake, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+cell+therapy+and+assessment+of+cardiac+function+using+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Monitoring of cell therapy and assessment of cardiac function using magnetic resonance imaging in a mouse model of myocardial infarction.</a> Nat Protoc. 2 (10), 2551-2567 (2007).</li>
<li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Wilms%27+tumor+suppressor+Wt1+is+expressed+in+the+coronary+vasculature+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">The Wilms' tumor suppressor Wt1 is expressed in the coronary vasculature after myocardial infarction.</a> FASEB J. 16 (9), 1117-1119 (2002).</li>
<li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+induction+and+inheritance+of+epigenetic+cardiac+hypertrophy+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">RNA induction and inheritance of epigenetic cardiac hypertrophy in the mouse.</a> Dev Cell. 14 (6), 962-969 (2008).</li>
<li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Image+to+ImageJ%3A+25+years+of+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li>
<li>Ruifrok, A. C., Johnston, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+histochemical+staining+by+color+deconvolution%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Quant+Cytol+Histol%22%5BJournal%5D)">Quantification of histochemical staining by color deconvolution.</a> Anal Quant Cytol Histol. 23 (4), 291-299 (2001).</li>
<li>Lazzeroni, D., Rimoldi, O., Camici, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+Left+Ventricular+Hypertrophy+to+Dysfunction+and+Failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+J%22%5BJournal%5D)">From Left Ventricular Hypertrophy to Dysfunction and Failure.</a> Circ J. 80 (3), 555-564 (2016).</li>
<li>Ismail, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistologic+labeling+of+murine+endothelium%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Pathol%22%5BJournal%5D)">Immunohistologic labeling of murine endothelium.</a> Cardiovasc Pathol. 12 (2), 82-90 (2003).</li>
<li>Benton, R. L., Maddie, M. A., Minnillo, D. R., Hagg, T., Whittemore, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Griffonia+simplicifolia+isolectin+B4+identifies+a+specific+subpopulation+of+angiogenic+blood+vessels+following+contusive+spinal+cord+injury+in+the+adult+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Griffonia simplicifolia isolectin B4 identifies a specific subpopulation of angiogenic blood vessels following contusive spinal cord injury in the adult mouse.</a> J Comp Neurol. 507 (1), 1031-1052 (2008).</li>
<li>Ayoub, A. E., Salm, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+morphological+diversity+of+microglia+in+the+activated+hypothalamic+supraoptic+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Increased morphological diversity of microglia in the activated hypothalamic supraoptic nucleus.</a> J Neurosci. 23 (21), 7759-7766 (2003).</li>
<li>Maddox, D. E., Shibata, S., Goldstein, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulated+macrophages+express+a+new+glycoprotein+receptor+reactive+with+Griffonia+simplicifolia+I-B4+isolectin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Stimulated macrophages express a new glycoprotein receptor reactive with Griffonia simplicifolia I-B4 isolectin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 79 (1), 166-170 (1982).</li>
<li>dela Paz, N. G., D'Amore, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+versus+venous+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Arterial versus venous endothelial cells.</a> Cell Tissue Res. 335 (1), 5-16 (2009).</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

وقد وضعت أساليب مختلفة لتقييم هيكل القلب ووظيفة في الفئران، بما في ذلك تخطيط صدى القلب وتعزيز التباين التصوير بالرنين المغناطيسي والصغرى الأشعة المقطعية والحيوانات الأليفة مسح. نظراً للفعالية من حيث التكلفة والبساطة، تخطيط صدى القلب هو الأسلوب الأكثر استخداماً للتحليل الوظيفي في الفئران11. بشكل عام، بسبب صغر حجم القلب وتواتر ارتفاع معدل ضربات القلب في الفئران، ومحولات الطاقة مع تردد &#62; ينبغي أن تستخدم 10 ميجاهرتز، على الرغم من أن قد تم الإبلاغ عن قياسات ناجحة مع 8 أو 9 ميجاهرتز محولات الطاقة<su...

وتتوفر مجموعة كبيرة ومتنوعة من نماذج الماوس المعدلة وراثيا، وعدد الدراسات الدوائية في الفئران عالية1،2. تخطيط صدى القلب، والتصوير بالرنين المغناطيسي هي النهج الشائع استخدامها لتوصيف وظيفة القلب ومورفولوجيا في هذه النماذج الماوس3المظهرية. وهدف البروتوكول المقدم تحليل وظيفة القلب ومورفولوجيا في الفئران الكبار. فهو يجمع بين مشخصين، النسيجي، وقياسات المناعي. فحص مشخصين يستخدم على نطاق واسع في الفئران4،5،،من67،،من89،10،11، 12. باشون et al. وحدد 11 205 الدراسات المنشورة في تداولو تعميم البحوثو المجلة الأمريكية الفسيولوجيا-القلب والدورة الدموية علم وظائف الأعضاءو أبحاث القلب والأوعية الدموية بين 2012 و 2015 أن ويستخدم فحص مشخصين في الحيوانات.
يتم استخدام تخطيط صدى القلب لتعريف تعمل القلب في الفئران المعدلة وراثيا5،6،،من1314،،من1516، 17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22، فضلا عن تحليل وظيفة القلب في تضخم المزمنة الناجمة عن الحمل الزائد، واحتشاء عضلة القلب الاسكيمية، ونماذج اعتلال عضلة القلب في الفئران (استعرض في12). تسمح معدات تحسين تخطيط صدى القلب لهذا الإجراء القياسي البطين الأيسر (LV) الانقباضي والانبساطي الأبعاد وتصوير دوبلر الأنسجة، شعاعية التباين احتشاء عضلة القلب، وتقييم وظيفة LV الإقليمية ومحمية التاجي 12-ومن الناحية المثالية، ينبغي إجراء دراسة مشخصين في الفئران واعية لتجنب الآثار السلبية للتخدير في تقلص وظيفة، مراقبة المنعكس اللاإرادي، ومعدل القلب11. ومع ذلك، يقتصر هذا النهج بشرط لتدريب الحيوانات؛ صعوبات في الحفاظ على درجة حرارة الجسم ثابتة؛ التحف الحركة؛ الإجهاد؛ ترددات عالية جداً في القلب؛ والحاجة إلى مالا يقل عن اثنين من المحققين لإجراء التجربة، لا سيما إذا كان يجري التحقيق في عدد كبير من الحيوانات. من المثير للاهتمام، أفادت دراسة أجريت مؤخرا لا توجد فروقات في معلمات مشخصين في الحيوانات المدربة وغير المدربة19. ونحن أداء قياسات مشخصين في تخديره من الفئران. التخدير مختلف البروتوكولات ستناقش أدناه.
على الرغم من أن الدقة القياسية تخطيط صدى القلب (&#62; 10 ميجاهرتز) هي كافية لتدبير LV الانقباضية وأبعاد االنقباضي ووظيفة القلب في الفئران الكبار، الطريقة محدودة في وصف الظواهر الهيكلية الكامنة وراء. وهكذا، أن نجمع بين القياسات في فيفو مع غذائها وتحاليل إيمونوهيستولوجيكال لقياس الكثافة القطر والسفينة كارديوميوسيتي، على سبيل المثال،. يمكن أيضا إجراء التحقيقات غذائها وإيمونوهيستولوجيكال الأخرى، مثل تحديد انتشار الأسلحة، ودراسة المبرمج، قياسات حجم احتشاء، تحديد التليف، والتعبير علامة محددة، على نفس النوع من معالجة الأنسجة ولكنها ليست موضوع هذا البروتوكول. ويوفر خليط في فيفو الفحص مشخصين بتحليلات النسيجي أفكاراً إضافية في التعديلات الهيكلية الكامنة. في خطوة إضافية، يمكن أن نكمل هذه القياسات مع التحقيقات الجزيئية وهيكلية فائقة. تحاليل نسيجية لا إكمال دراسة مشخصين بل أيضا أصبحت لا غنى عنها عندما حل ضربات القلب غير كافية. وهذا هو الحال خاصة في نماذج الفئران المعدلة وراثيا التي هي قاتلة الجنينية23،24.

تقنيات الحياة <table><tbody><tr><td>المترافقة رباعي ميثيل رودامين من جنين القمح (WGA</td><td>) ، المجسات الجزيئية</td><td>W849</td><td></td></tr><tr><td>الماعز البيوتينيل المضاد للأرانب IgG الأجسام المضادة</td><td>Vectorlabs</td><td>BA-1000</td><td></td></tr><tr><td>Avidin / Biotin</td><td>Blocking Kit Vectorlabs</td><td>SP-2001</td><td></td></tr><tr><td>VECTASTAIN Elite ABC HRP Kit (بيروكسيداز ، قياسي) Vectorlabs</td><td></td> <td>PK-6100</td><td></td></tr><tr><td>وسيط تركيب VECTASHIELD المضاد للبهتان مع DAPI</td><td>Vectorlabs</td><td>H-1200</td><td></td></tr><tr><td>SIGMAFAST 3،3'-أقراص ديامينوبنزيدين</td><td>Sigma</td><td>D4168</td><td></td></tr><tr><td>محلول بيروكسيد الهيدروجين</td><td>Sigma</td><td>H1009</td><td></td></tr><tr><td>الأجسام المضادة ل Pecam-1 (CD31)</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>جل نقل الموجات فوق الصوتية ، جل أكواسونيك 100</td><td>باركر</td><td></td><td></td></tr><tr><td>مسبار الموجات فوق الصوتية الخطي ، مخطط صدى القلب L15-7io</td><td>Philips Healthcare</td><td></td><td></td></tr> ، مجهر <tr><td>الرعاية الصحية</td><td></td><td></td><td>IE33 xMATRIX</td> Philips</tr> ، مجموعة مرشحات <tr><td>Leica DMi8</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr> مجموعة الترشيحات <tr><td>DAPI</td><td>Leica</td><td>11525304</td><td></td></tr> مجموعة <tr><td>الترشيحات TxR</td><td>Leica</td><td>11525310</td><td></td></tr><tr><td>كاميرا رقمية ، بقعة منزلق ملونة SPOT RT3</td><td> برنامج تصوير التصوير</td><td></td><td></td></tr><tr><td>, SPOT 5.2 البرامج المتقدمة والأساسية</td><td>التصوير</td><td></td><td></td>الموضعي</tr><tr><td>التصوير الكمبيوتر</td><td>Dell</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fine Scissors</td><td>أدوات العلوم</td><td>الدقيقة 14028-10</td><td></td></tr><tr><td>مقص كبير</td><td>أدوات العلوم</td><td>الدقيقة 14501-14</td><td></td></tr><tr><td>شفرات مشرط</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>10023-00</td><td></td></tr><tr><td>أدوات العلوم الدقيقة من Graefe Falls</td><td></td><td>11650-10</td><td></td></tr><tr><td>ماكينة حلاقة القوارض</td><td>Harvard Apparatus</td><td>34-0243</td><td></td></tr><tr><td>كاسيت لتضمين البارافين</td><td>Sakura</td><td>4155F</td><td></td></tr><tr><td>محايد مخزن Formalin</td><td>Sakura</td><td>8727</td><td></td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Sakura</td><td>8733</td><td></td></tr><tr><td>Paraffine TEK III</td><td>Sakura</td><td>4511</td><td></td></tr><tr><td>جهاز التضمين الآلي ،</td> محطة تضمين البارافين Tissue-Tek VIP <td>Sakura</td><td>6032</td><td></td></tr> شفرات microtome <tr><td>Tissue-Tek TEC 5</td><td>Sakura</td><td>5229</td><td></td></tr> ، شرائح الفحص <tr><td>المجهري Accu-Edge S35</td><td>Sakura</td><td>4685</td><td></td></tr> ، زلات غطاء <tr><td>Tissue-Tek</td><td>Sakura</td><td>9533</td><td></td></tr><tr><td>، Tissue-Tek</td><td>Sakura</td><td>9582</td><td></td></tr><tr><td>تركيب متوسط Tissue-Tek</td><td>Sakura</td><td>1408</td><td></td></tr><tr><td>صناديق الشرائح</td><td>Sakura</td><td>3958</td><td></td></tr><tr><td>محلول اليوزين</td><td>Sakura</td><td>8703</td><td></td></tr><tr><td>محلول الهيماتوكسيلين</td><td>Sakura</td><td>8711</td><td></td></tr><tr><td>microtome ، RM2125RT</td><td>Leica</td><td>720-1880 (VWR)</td><td></td></tr> <tr><td>حمام مائي ، Leica HI1210</td><td>Leica</td><td>720-0113 (VWR)</td><td></td></tr><tr><td>الإيثانول</td><td>VWR</td><td>ACRO444220050</td><td></td></tr><tr><td>أنابيب 15 مل</td><td>VWR</td><td>734-0451</td><td></td></tr><tr><td>طبق زجاجي ملطخ</td><td>VWR</td><td>برطمانات تلطيخ MARI4220004</td><td></td></tr><tr><td>VWR</td><td></td><td></td> حاضنة VWR MARI4200005 <td></td></tr><tr><td></td><td>الموثق</td><td>9010-0012</td><td></td></tr><tr><td>أقراص DAB وبيروكسيد الهيدروجين اليوريا ، أقراص SIGMAFAST 3،3 & Prime ؛ أقراص ديامينوبنزيدين</td><td>Sigma</td><td>D4293</td><td></td></tr><tr><td>PBS (10X) 70011044</td><td></td><td></td> <td>الترمو-فيشر العلمي</td></tr></tbody></table>

دراسة مورفولوجيا القلب مشخصين وغذائها في الماوس

Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

عدد متزايد من نماذج الماوس المعدلة وراثيا قد أصبحت متاحة في السنوات الأخيرة. وعلاوة على ذلك، العدد الدراسات الدوائية في الفئران مرتفع. توصيف المظهرية من هذه النماذج الماوس يتطلب أيضا دراسة وظيفة القلب ومورفولوجيا. تخطيط صدى القلب، والتصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي) هي الأساليب المستخدمة شيوعاً لتوصيف وظيفة القلب ومورفولوجيا في الفئران. مشخصين والتصوير بالرنين المغناطيسي المعدات المتخصصة لاستخدامها في القوارض الصغيرة مكلفة وتتطلب مساحة مخصصة. ويصف هذا البروتوكول قياسات القلب في الفئران باستخدام نظام مشخصين سريرية مع تحقيق الأوعية الدموية بشرية 15 ميغاهيرتز. وتجري القياسات على تخديره من الفئران الكبار. ثلاثة على الأقل من تسلسل الصور وتسجل وتحليلها لكل الحيوانات في وضع M في عرض قصير-محور باراستيرنال. بعد ذلك، يتم إجراء الفحص النسيجي القلب، ويتم تحديد أقطار كارديوميوسيتي على الهيماتوكسيلين-agglutinin ويوزين-أو جنين القمح (WGA)-الملون مقاطع البارافين. وتبلغ كثافة السفينة مورفوميتريكالي العزم بعد إيمونوستينينج بيكم-1. البروتوكول قد تم تطبيقها بنجاح على الدراسات الدوائية ومختلفة الوراثية الحيوانية نماذج تحت ظروف خط الأساس، وكذلك بعد تجريبي احتشاء عضلة القلب بربط دائم (الشريان التاجي تنازلي الأمامي الأيسر الفتى). في تجربتنا، مشخصين التحقيق يقتصر على الحيوانات تخديره وعملياً في الفئران الكبار وزنها على الأقل 25 غراما.

في الشكل 1، تثبت تسجيلات مشخصين الممثل فائدة تخطيط صدى القلب لتحديد تعمل القلب في الفئران المعدلة وراثيا. يمكن بسهولة التعرف على الفرق بين ماوس مع وظيفة القلب العادي (الشكل 1A) وحيوان مع البطين الأيسر المتوسعة وانخفاض وظيفة LV (الشكل 1B). ويبين الشكل 2 مقارنة كارديوميوسيتي قياسات القطر في الحيوانات دون (الشكل 2A) ومع تضخم القلب (<strong clas...

كثيرا ما يستخدم الفحص مشخصين في الفئران. وقد وضعت أجهزة الموجات فوق الصوتية ذات الدقة العالية باهظة الثمن لهذا الغرض. ويصف هذا البروتوكول إجراء مشخصين بأسعار معقولة جنبا إلى جنب مع تحليل شكلي نسيجية لتحديد مورفولوجيا القلب.

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

الهدف العام من هذا الفحص بتخطيط صدى القلب المقترن بالاستقصاءات النسيجية هو دراسة وظيفة القلب ومورفولوجيته في نماذج مختلفة من الفئران المعدلة وراثياً تحت الظروف المرجعية والظروف المرضية الفسيولوجية. للبدء، وأثناء إمساك الفأر بخفة من ذيله، استخدم ميزاناً مختبرياً قياسياً لتحديد وزن جسم الحيوان. بعد تخدير الفأر وفقاً للبروتوكول المذكور في النص، اضغط بخفة على القدم الخلفية ولاحظ ما إذا كانت الساق تنقبض.استخدم ماكينة حلاقة تجارية للقوارض لحلاقة الجانب الأيسر من الصدر والإبط الأيسر. ضع الحيوان على وسادة تدفئة مضبوطة على 40 إلى 42 درجة Celsius في وضعية جانبية يسرى ضحلة، بحيث يكون الرأس عند الساعة 12 والذيل عند الساعة 6. ثم استخدم الشريط اللاصق لتثبيت الذراع اليسرى والساق اليسرى والذيل.ضع جل تخطيط صدى القلب المُدفأ مسبقاً على الصدر المحلوق وعلى رأس المسبار. بعد ذلك، ضع مسبار تخطيط صدى القلب في الموضع الموازي للقص من الجهة اليسرى، مع توجيهه نحو الجانب الأيمن من الرقبة للحصول على عرض ثنائي الأبعاد للمحور الطولي الموازي للقص عند مستوى العضلة الحليمية. ثم أدر المسبار 90 درجة باتجاه عقارب الساعة للحصول على عرض للمحور القصير.قم بتحديد الحد الأدنى لإعداد العمق ومستوى التقريب لرفع جودة الصورة ومعدل الإطارات إلى أقصى حد. اضبط سرعة المسح على القيمة القصوى. سجل صور M-mode الموجهة ثنائية الأبعاد في عرض الوصول القصير.سجّل ثلاث مجموعات على الأقل، تتكون كل مجموعة من ثلاثة أنصاف حلقات لنبضات القلب لكل حيوان. بعد الحصول على تسجيلات ناجحة، قم بإزالة الشريط من الأطراف والذيل. امسح جل تخطيط صدى القلب من وسادة تدفئة صدر الفأر ومن المحول.اترك الفأر تحت الملاحظة على وسادة التدفئة، مغطىً بمناديل ورقية لتجنب التعرض غير الضروري للضوء وفقدان الحرارة حتى يستيقظ. بعد ذلك، أعد الحيوان إلى القفص. قم بتحليل صور وضع M-mode المسجلة من عرض الوصول القصير لتحديد أبعاد ووظائف البطين الأيسر أو LV.باستخدام تحديد الواجهة الدموية النسيجية في الصور المخزنة، قم بقياس سمك الجدار الأمامي للبطين الأيسر (LV) في مرحلتي الانقباض والانبساط، والقطر الداخلي للبطين الأيسر في نهاية الانقباض ونهاية الانبساط، وسمك الجدار الخلفي للبطين الأيسر في مرحلتي الانقباض والانبساط. قم بقياس الأبعاد الانبساطية في وقت أقصى أبعاد انبساطية ظاهرة للبطين الأيسر، وأبعاد نهاية انقباض البطين الأيسر عند نهاية أقصى إزاحة انقباضية أمامية للجدار الخلفي للبطين الأيسر. اضغط على شاشة اللمس فوق أيقونة التحليل (analyze) ثم فوق أيقونة LVAWd.ضع الفرجار الإلكتروني على الواجهة بين تجويف البطين الأيمن والجدار الأمامي للبطين الأيسر في مرحلة الانبساط. بعد ذلك، ضع الفرجار الإلكتروني على الواجهة بين الجدار الأمامي للبطين الأيسر وتجويف البطين الأيسر للحصول على سمك الجدار الأمامي للبطين الأيسر في مرحلة الانبساط. ضع الفرجار على الواجهة بين تجويف البطين الأيسر والجدار الخلفي للبطين الأيسر للحصول على القطر الداخلي للبطين الأيسر في مرحلة الانبساط.ضع الفرجار على الحد الفاصل بين الجدار الخلفي للبطين الأيسر والتامور للحصول على سمك الجدار الخلفي للبطين الأيسر في نهاية الانبساط. وبالنسبة لأبعاد البطين الأيسر في الانقباض، اضغط على أيقونة LVAWs في شاشة اللمس وضع الفرجار الإلكتروني على الحد الفاصل بين تجويف البطين الأيمن والجدار الأمامي للبطين الأيسر أثناء الانقباض. ثم ضع الفرجار الإلكتروني على الحد الفاصل بين الجدار الأمامي للبطين الأيسر وتجويف البطين الأيسر للحصول على سمك الجدار الأمامي للبطين الأيسر في الانقباض.ضع الفرجار عند الحد الفاصل بين تجويف البطين الأيسر والجدار الخلفي للبطين الأيسر للحصول على القطر الداخلي والقطر الانقباضي للبطين الأيسر. ضع الفرجار عند الحد الفاصل بين الجدار الخلفي للبطين الأيسر والتامور للحصول على سمك الجدار الخلفي للبطين الأيسر في مرحلة الانقباض. بعد التضحية بالحيوانات وفقاً لبروتوكول النص، قم بقياس أوزان أجسامها.بعد ذلك، استخدم مسحة كحولية بتركيز 70% لتطهير الصدر والبطن. قم بإجراء شق مستعرض في الجلد، على بعد سنتيمتر واحد من الجهة القاصية لعظمة القص. ثم باستخدام ملقط غير حاد، قم بإزالة الجلد من الصدر بالتحرك في اتجاه الرأس.باستخدام ملقط دقيق، أمسك عظمة القص بخفة وافتح الحجاب الحاجز عن طريق إدخال الطرف غير الحاد لمقص دقيق. اقطع القفص الصدري على كلا الجانبين بشكل موازٍ لعظمة القص. ثم حرك عظمة القص في اتجاه الرأس.حدد موقع القلب في التجويف الصدري. باستخدام ملقط دقيق، أمسك الجذع الوعائي للقلب واستخدم مقصاً دقيقاً للقص أسفل العضو. بعد ذلك، قم بقياس وزن القلب وحساب نسبة وزن القلب إلى وزن الجسم.انقل القلب إلى 2 ملليلتر من محلول الفورمالين المنظم المتعادل بتركيز 10% في أنبوب سعة 15 ملليلتر، ثم ثبّت العضو عند درجة حرارة 4 درجات مئوية طوال الليل. لإجراء صبغ agglutinin القمح (WGA)، ضع الشرائح التي تم تحضيرها مسبقاً في WGA المقترن بـ Tetramethylrhodamine، واحضن العينات في درجة حرارة الغرفة داخل غرفة رطبة لمدة ستين دقيقة. استخدم PBS لغسل العينات ثلاث مرات لمدة خمس دقائق في كل مرة.ثم استخدم وسط تثبيت فلوري يحتوي على DAPI لتثبيت المقاطع. تُحفظ المقاطع عند درجة حرارة أربع درجات مئوية في الظلام قبل التحليل. تُظهر هذه التسجيلات التصويرية للقلب بالصدى فائدة تخطيط صدى القلب في تحديد الأنماط الظاهرية القلبية في الفئران المعدلة وراثياً.يمكن تمييز الفرق بين فأر يتمتع بوظيفة قلبية طبيعية وحيوان يعاني من تضخم في البطين الأيسر (LV) وانخفاض في وظيفة البطين الأيسر بسهولة. يظهر هنا مقارنة لقياسات قطر الخلايا العضلية القلبية في حيوانات بدون تضخم قلبي وأخرى مصابة به، وذلك باستخدام مقاطع قلبية بارافينية مصبوغة بصبغة H&E وقياسات للمقاطع الطولية لأنسجة القلب. يوضح هذا الشكل قياس الأقطار المستعرضة للخلايا العضلية القلبية باستخدام مقاطع بارافينية مصبوغة بـ WGA مأخوذة من قلوب فئران المجموعة الضابطة وحيوانات تعاني من تضخم قلبي.توضح هذه اللوحات فائدة الكيمياء النسيجية المناعية لـ PECAM1 في المقاطع القلبية لتحديد كثافة الأوعية الدموية في أنسجة القلب الطبيعية والقلوب التي تعاني من زيادة في تكوين الأوعية الدموية.

echocardiographic-histological-examination-cardiac-morphology

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

تخطيط صدى القلب عبر الصدر يقدم طريقة موسع لتقييم وظيفة القلب في الفئران. ويمكن استخدام مزيج من الموجات فوق الصوتية والتصوير دوبلر طرائق الحصول على قياسات ثلاثية الأبعاد للقلب داخل القلب وتدفق الدم ، والتي توفر معا بتقييم أداء القلب وضغط الدم الانقباضي الانبساطي.

ضربات القلب عبر الصدر في الفئران

هذا الفيديو يوضح استخدام السكك الحديدية محمولة عالية التردد الموجات فوق الصوتية لفحص أداء ضربات القلب على الماوس تخدير. تصف كل من الأساليب التقليدية قياسات ثنائية الأبعاد ، والرصد واسطة من وظيفة القلب ، بالإضافة إلى الأدوات الحديثة ، وأكثر قوة مثل لون دوبلر ، والتحليل السلالة ، فضلا عن عامة وهادفة التصوير التباين.

فأري ضربات القلب والتصوير بالموجات فوق الصوتية

يصف هذا الفيديو بروتوكولا لإجراء تخطيط صدى القلب على فأر المختبر.

تخطيط صدى القلب بالفئران: تقنية غير جراحية لتقييم مورفولوجيا القلب

توفر هذه المقالة بروتوكول لتقييم تخطيط صدى القلب من البطين الأيمن حجم وارتفاع ضغط الدم الرئوي في الفئران. وتشمل التطبيقات تحديد النمط الظاهري وتقييم المسلسل في المعدلة وراثيا ونماذج الماوس التي يسببها السم من اعتلال عضلة القلب وأمراض الأوعية الدموية الرئوية.

تقييم تخطيط صدى القلب من القلب الحق في الفئران

والهدف من هذا البروتوكول هو تقييم noninvasively التغييرات الهيكلية والوظيفية القلب في نموذج الفأر من أمراض القلب التي أنشأتها انقباض الشريان الأورطي عرضية، وذلك باستخدام B- و M-وضع تخطيط صدى القلب واللون / نبض موجة دوبلر التصوير.

تقييم القلب المورفولوجية والوظيفية التغييرات في الفأر نموذج من مستعرض الأورطي انقباض بواسطة تخطيط صدى القلب التصوير

يوفر هذا البروتوكول وصفا مفصلا لنهج تخطيط صدى القلب للتنميط الظاهري الشامل لوظيفة القلب وصمام القلب في الفئران.

النهج والبروتوكولات تخطيط صدى القلب لالشامل التوصيف المظهري لأمراض القلب الصمامية في الفئران

يصف بروتوكول التالية منهجية لاقتناء وتحليل الصور تخطيط صدى القلب استخدامها للحصول على حجم اليسار الأذيني (LAV) قطر، الأورطي (آو)، وقطر الشريان الرئوي (السلطة الفلسطينية) في الفئران. هذا الأسلوب هو غير الغازية، إجراء غير المحطة التي تسمح تقييم وظيفة القلب.

فأري ضربات القلب من الأذين الأيسر، الأورطي، والشريان الرئوي

هنا نحن نصف ومقارنة موقفين للحصول على وجهة نظر أربع غرف apical في الفئران. هذه المواقف تمكن من التحديد الكمي للوظيفة البطينية الصحيحة، وتوفير نتائج قابلة للمقارنة، ويمكن استخدامها بالتبادل.

قياس صدى القلب للمعلمات الانبساطيالبطينية اليمنى في الماوس

في هذا البروتوكول، نصف إجراءات التحليل النوعي والكمي للأنماط الظاهرية التنموية لدى الفئران المرتبطة بعيوب القلب الخلقية.

تحليل عيوب القلب الخلقية في أجنة الفئران باستخدام أساليب النسيج النوعي والكمي

يصف البروتوكول الحالي تقييم تخطيط صدى القلب لمورفولوجيا البطين الأيسر ووظيفته وتدفق الدم التاجي في الفئران حديثي الولادة البالغة من العمر 7 أيام.

توصيف تخطيط صدى القلب لبنية البطين الأيسر ووظيفته وتدفقه التاجي في الفئران حديثي الولادة

توضح هذه المقالة تفاصيل طرق تشخيص أمراض القلب الخلقية للفئران (CHD) باستخدام تخطيط صدى القلب الجنيني ، والتشريح ، والتقاط الصور الفلورية الأسقفية (EFIC) باستخدام المجهر الأسقفي متحد البؤر (ECM) متبوعا بإعادة البناء ثلاثي الأبعاد (3D).

خط أنابيب لتوصيف عيوب القلب الهيكلية في الفأر الجنيني

اكتشف تقنية تصوير القلب بالموجات فوق الصوتية المدمجة مع التحليل النسيجي لتقييم وظيفة القلب ومورفولوجيا الفئران المعدلة وراثياً. هذه الطريقة توفر بديلاً اقتصادياً للأجهزة عالية التكلفة.

دراسة مورفولوجيا القلب مشخصين وغذائها في الماوس

استكشف المزيد من الفيديوهات