يونيو 1, 2017
التقليدية البلازما هلام (سغي) التجارب تتطلب جهاز معقد والاستهلاك الكيميائي عالية. يعرض هذا العمل بروتوكولا يصف طريقة منخفضة التكلفة لفصل شظايا الحمض النووي ضمن إطار زمني قصير.
المقطع نظاما جديدا حول الرحلان الكهربائي للهلام SNAP. لا يمكن لهذا النظام أن يقلل بشكل كبير من وقت تجربة الحمل الكيميائي فحسب ، بل يمكنه أيضا تحقيق التتبع في الوقت الفعلي في فصل هلام الاغاروز عن طريق الهاتف الذكي. تمثل هذه الصور الثلاث نتيجة نموذجية بعد الرحلان الكهربائي الهلامي ل 50 و 100 و 1000 زوج أساسي في سلم.
تم فصل كل جزء من الحمض النووي بشكل جيد. الرحلان الكهربائي للهلام SNAP هو الطريقة الأكثر ابتكارا لفصل شظايا الحمض النووي ، وبالتالي ، فإنه يعتبر معلما للوعاء في التحليل الكيميائي الحيوي والبيولوجي. هذه المرة سأريكم طريقة جديدة حول تجربة الرحلان الكهربائي للهلام SNAP.
حسنا ، لنبدأ. أولا ، نزن 0.1 جرام من هلام الاغاروز ونضعه في قارورة ، وهو مخزن مؤقت TPE في القارورة. يجب ألا يزيد حجم المحلول المحضر عن ثلث سعة القارورة.
أغلق القارورة بأدخرة حافظة ، ثم تم تسخين خليط عازلة الاغاروز بواسطة الميكروويف. قبل وضع القارورة في الميكروويف ، نقوم بعمل بعض الثقوب في الدخان الحافظ في حالة الانفجار. أمسك محلول الاغاروز المركب في القنوات الموجودة في أنبوب الرحلان الكهربائي للهلام SNAP.
ضع المشط في المحلول. سوف يبرد المحلول المركب ويصبح حالة هلام في درجة حرارة الغرفة بعد بضع دقائق. أخرجه من المشط لإنشاء آبار وأضف TBE Buffer إليه.
لقد أنشأنا نظاما بسيطا لتتبع شظايا الحمض النووي في الوقت الفعلي لمراقبة حالة حركة شظايا الحمض النووي بواسطة الهاتف الذكي. قم أولا بخلط سلم الحمض النووي مع SYBR Green One بواسطة جهاز الطرد المركزي. قم بتحميل الخليط في البئر في جل الاغاروز.
ثانيا ، قم بتشغيل مصدر ضوء LED وضع مرشح تمرير النطاق فوق مؤشر LED ثم ضع القطب الكهربائي في مساري الشريحة. بعد ذلك ، ضع مرشح تمرير النطاق الآخر فوقه. انتظر مصدر الطاقة.
اضبط القوة الكهربائية الكهربائية على 180 واط. قم بتشغيل الهاتف الذكي لتسجيل عملية فصل جزء الحمض النووي. على سبيل المثال ، نستخدم الهاتف الذكي لتتبع فصل 50 زوجا أساسيا من سلم الحمض النووي.
الرحلان الكهربائي للهلام SNAP هو الطريقة الأكثر فعالية لفصل شظايا الحمض النووي. ومع ذلك ، تشير التجارب المهجورة إلى أن الرحلان الكهربائي للهلام SNAP كان مقيدا بالطول الكامل للمشاكل. أولا: تستغرق عمليات الفصل ساعات عديدة وحتى أياما.
ثانيا: الإدراك الكيميائي مرتفع جدا. ثلاثة: لأنها تتطلب الكثير من الأجهزة. أربعة: يمكن لنظام التصوير الهلامي مراقبة شظايا الحمض النووي المنفصلة فقط عند الانتهاء من التجربة.
علاوة على ذلك ، فإن الإيريديوم والبروم اللذين يشيع استخدامهما في الرحلان الكهربائي للهلام SNAP مطفرات وسرطانية. بعد التجربة ، تم فصل كل جزء من الحمض النووي بشكل جيد. علاوة على ذلك ، قمنا بفصل نفس العينات في القنوات الأربع لشريحة الرحلان الكهربائي للهلام SNAP ، وتحركت مشكلة أن شظايا الحمض النووي كانت بنفس الحجم نفس المسافة في كل تجربة.
من الصورة ، تم فصل شظايا الحمض النووي جيدا على الرغم من وجود شك في أن شظايا الحمض النووي تبدو بيضاء في الشكل B.It يمكن تحسينها من خلال تحسين معلمات الرقاقة وتركيز هلام الاغاروز. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن ترى رسالتنا الجديدة حول الرحلان الكهربائي للهلام SNAP. كما أن شظايا الحمض النووي الناتجة تبدو بيضاء.
يمكن تحسين ذلك عن طريق تحسين معلمات رقاقة الرحلان الكهربائي للهلام SNAP وتركيز جل الاغاروز. ما هي النقطة المهمة ، أنه يجب أن تكون حذرا جدا أثناء المآخذ ذات الأهمية القصوى لأنها تحتاج إلى جهد عال ويمكن أن تصبح كاشفا.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه المقالة كهربائية الصبغ SNAP، وهي طريقة جديدة لفصل أجزاء الحمض النووي تقلل بشكل كبير من استهلاك المواد الكيميائية ووقت التجربة. يسمح النظام بتتبع فصل الحمض النووي في الوقت الحقيقي باستخدام الهاتف الذكي.
Real-time DNA fragment separation using smartphone-enabled SNAP gel electrophoresis reduces chemical consumption and assay time, supporting rapid hypothesis testing in early discovery. This approach enhances predictive confidence by providing quantitative, reproducible readouts for target validation workflows. It addresses discovery-stage inefficiencies in nucleic acid analysis, enabling faster go/no-go decisions in lead identification pipelines.
Positioned between early discovery and lead identification, this method supports hypothesis testing and assay readiness in nucleic acid-focused research.