سيميوتوماتيد طولية المستندة إلى التصوير المقطعي ميكروكومبوتيد التحليل الكمي لهيكلية نموذج كسر العمود الفقري المتصلة بمرض هشاشة العظام في الفئران عارية

الهدف العام من هذا النموذج الجراحي وطريقة تحليل الصور هو مراقبة تأثير علاجك على نموذج كسر ضغط العمود الفقري المرتبط بهشاشة العظام قبل السريرية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الطب التجديدي الدبقي مثل ما الذي يمكن أن يكون علاجا فعالا لكسور ضغط العمود الفقري المرتبطة بهشاشة العظام ، وكيف يمكن أن يساعد مثل هذا العلاج في تجديد العظام؟ الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تشمل الفئران العارية ، لذلك يمكن اختبار العلاجات الجديدة في الجسم الحي دون مخاوف من الرفض المناعي.

علاوة على ذلك ، فإن تجديد العظام يكمن وراء هذه الطريقة المعروضة هنا شبه آلية ، لذا فهي أكثر دقة وأقل اعتمادا على المستخدم مما تم نشره سابقا. ستظهر الإجراء الدكتورة وفاء توكلي ، عالمة أبحاث من مختبرنا. قم أولا بتحفيز التخدير في فأر مصاب بهشاشة العظام باستخدام 5٪ إيزوفلوران في 100٪ أكسجين ثم نقله إلى مخروط الأنف بنسبة اثنين إلى 3٪ من الأيزوفلوران للصيانة.

احلق منطقة البطن باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية. مسحة بمطهر اليود في غلوكونات الكلورهيكسيدين 0.5٪ متبوعا بالإيثانول 70٪. استخدم مرهم بيطري على العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير.

ضع حافزا لقرص إصبع القدم لضمان مستوى تخدير مناسب. إذا لم يتم ملاحظة أي استجابة، فابدأ الإجراء. ضع الجرذ المخدر في الاستلقاء الظهري على وسادة تسخين مضبوطة على 37 درجة مئوية وقم بتمديد الأطراف باستخدام نظام سحب المثبت المغناطيسي.

حقن الجرذ تحت الجلد بالكاربروفين قبل البدء في العملية الجراحية. بعد عمل شق من خمسة إلى ثمانية سنتيمترات في الجلد بدءا من سنتيمتر واحد تحت عملية الخنجري وعبر خط الوسط ، استخدم مقصا جراحيا لعمل شق في الشلل الدماغي من خلال الخط الصغير للوصول إلى تجويف البطن. كشف تجويف البطن باستخدام المخادات.

بتحويل الأمعاء إلى يمين الجرذ لكشف الشريان الأورطي البطني والكلية اليسرى. لتجنب الجفاف ، استخدم شاشات معقمة مبللة لتغليف الأعضاء الداخلية. استخدم ضاعفات إضافية حسب الضرورة لكشف الشريان الأورطي.

جس العمود الفقري القطني ثم المضي قدما في كشفه. استخدم الكي الحراري لفضح الجانب الأمامي للأجسام الفقرية القطنية L من أربعة إلى خمسة وعزلها عن النسيج الضام والعضلات المحيطة. استخدم قطعة قطن لإزالة الدم والأنسجة المتبقية من الفقرات الأربع L.

بعد ذلك ، استخدم مثقابا معقما بقطر سنتيمترين لحفر عيب عظمي بعمق خمسة ملليمترات في وسط الجانب الأمامي المكشوف من الجسم الفقري. استخدم الحد الأدنى من الضغط للحفر من خلال القشرة البطنية والعظام التربيقية الأساسية فقط. تجنب الحفر من خلال القشرة الظهرية.

ثم قم بحفر الفقرات الخمس L بنفس الطريقة لإحداث عيبين لكل فأر. عند اكتمال الحفر ، أعد الأمعاء إلى تجويف البطن وقم بإزالة الضاعات. بعد ذلك ، استخدم خياطة جراحية اصطناعية قابلة للامتصاص فيكريل بنمط مستمر لخياطة مرض السكتة الدماغية.

أغلق الجلد باستخدام خياطة نايلون أحادية الشعيرات غير قابلة للامتصاص 4-0 بنمط متقطع بسيط. ثم ضعي 100 ميكرولتر من لاصق الجلد الموضعي فوق خيوط الجلد وبينها لضمان الإغلاق الكامل للجلد. بعد حقن الجرذ بمحلول جرس مرضع بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمنع انخفاض حرارة الجسم والجفاف والبوبرينورفين لتخفيف الآلام بعد الجراحة ، اسمح للحيوان بالتعافي من التخدير على وسادة التدفئة.

في اليوم التالي للإجراء الجراحي ، قم بتحفيز التخدير باستخدام الأيزوفلوران كما كان من قبل. افحص الجرذ باستخدام ماسح ضوئي بالأشعة المقطعية الدقيقة في الجسم الحي. بعد المسح والتعافي من التخدير ، أعد الجرذ إلى قفص المنزل.

لفصل بيانات الفقرات لتحليلها ، انقر فوق برنامج تقييم التصوير المقطعي المحوسب الدقيق وحدد العينة من القائمة. ثم استخدم الماوس لتحديد الفقرات الفردية على شريحة. استخدم شريط Z للانتقال إلى الشريحة التالية وتحديد الفقرات الفردية بنفس الطريقة.

احفظ الفقرة المحيطة كملف منفصل بالنقر فوق ملف ، واحفظ GOBJ كل شريحتين. ثم بعد ضبط الفقرة المرجعية ، قم باستيرادها إلى بيئة التصوير المقطعي المحوسب الدقيقة. قم بتطبيق VOI المحدد للفقرة المرجعية على الفقرة المستهدفة المسجلة بالنقر فوق برنامج تقييم التصوير المقطعي المحوسب الصغير ، والملف ، وتحميل GOBJ وتحديد GOBJ الذي تم إنشاؤه مسبقا.

أخيرا ، أرسل VOI للتقييم باستخدام برنامج تقييم التصوير المقطعي المحوسب الدقيق. تظهر هذه الصورة ثلاثية الأبعاد الأمامية صورة عيب فقري تمثيلية بعد يوم واحد من توليد العيب. يشار إلى تكوين العظام في الفراغ باللون الأحمر.

هذه صورة سهمية ثنائية الأبعاد لنفس المنطقة ، وأخيرا صورة محورية ثنائية الأبعاد. كما هو موضح هنا يحدث تكوين العظام بمرور الوقت ويتم اكتشافه بالتصوير الطولي. تم حساب كثافة حجم العظام والكثافة الظاهرة ومقارنتها باستخدام مقاييس متكررة ثنائية الاتجاه ANOVA مع تصحيح Bonferroni لمقارنات متعددة.

كما هو موضح هنا ، تزداد كثافة حجم العظام وكثافتها الظاهرة بشكل كبير من أسبوعين بعد ظهور عيب فقري. باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل علم الأنسجة والكيمياء المناعية من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل الخلايا الموجودة والبروتينات التي يتم التعبير عنها في العيب. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إنشاء عيوب فقرية متعددة في الفئران العارية وتحليل تجديد العظام بمرور الوقت في هذه العيوب.