Name: ا كاينورهابديتيس ايليجانس الوضع الغذائي القائم على النحاس النفور الفحص (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: اكتشف تقييم النفور من النحاس في Caenorhabditis elegans لعلم الأعصاب السلوكي باستخدام يرقات المرحلة الرابعة. تساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة التغيرات السلوكية أثناء الجوع.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذا العمل من قبل العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث من كندا ديسكفري منحة RGPIN36481-08 لويليام G. بندينا.

1. إعداد الكائنات التجريبية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختيار 10 L4 نظمت الديدان الخيطية لكل سلالة 24 ساعة قبل بدء الفحص للتأكد من أن الكائنات الحية هي الشباب عند اختبارها. لكل اختبار متحولة أو نيماتودا اختبار، واختيار 10 L4s (10 للسيطرة و 10 للمقايسة). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الكائنات الحية L4 باستخدام أساليب قياسية 26 ، 27 لمدة 24 ساعة على لوحات أجار القياسية المصنف مع OP50 الإشريكية القولونية . إذا فقدت الكائنات الحية خلال خطوات غسل لاحقة، تعويض عن طريق زيادة حجم العينة بدءا ( أي اختيار 20 الديدان بدلا من 10). ملاحظة: السلوك هو النمط الظاهري المتغير الفطري. تنفيذ الطريقة في ثلاث نسخ لكل سلالة على ثلاثة أيام منفصلة. وتشمل سلالات تحكم إضافية وشروط سلالات جديدة، كما هو مبين في قسم المناقشة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مباشرة قبل الفحص، ونقل أورغا التجريبيةنيسمز إلى لوحة أجار مع عدم وجود البكتيريا والسماح للديدان الخيطية على التحرك بحرية لمدة 1 دقيقة لإزالة البكتيريا الزائدة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا واجهت الكائنات التجريبية ظروف التلوث خلال 24 ساعة قبل الفحص، تجاهل لهم. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 1 مل من M9 على لوحة خالية من البكتيريا لغسل الديدان إلى أنبوب ميكروسنتريفوج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أجهزة الطرد المركزي في 3000 x ج لمدة 1 دقيقة. يجب أن تشكل الديدان بيليه في الجزء السفلي من الأنبوب. نضح M9 الحل دون تعطيل بيليه دودة. إضافة 1 مل من M9 إلى بيليه دودة، عكس أنبوب لخلط الديدان مع الحل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات 1.4 ثلاث مرات أخرى. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا تم نقل البكتيريا الزائدة في البداية مع الديدان، كرر ما مجموعه 5 مرات. لا ينبغي نقل البكتيريا إلى لوحات سباق الغذاء النحاس. إذا تم نقل الطعام إلى لوحة الفحص، وسوف تتداخل مع جمع البيانات دقيقة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد غسل النهائي، نضح طاف حتى 10081؛ L من M9 وبيليه دودة يبقى. الحذر: السلوكيات المجاعة ذات الصلة تصبح واضحة بعد 30 دقيقة. وبالتالي ينبغي نقل الديدان فورا من الحل بمجرد الانتهاء من خطوات الغسيل. </li></ol> 2. إعداد لوحات الفحص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد القياسية لوحات نغم أجار قبل يومين من الفحص. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا تم الاحتفاظ لوحات في بيئة رطبة، وجعل لوحات أجار 3 أيام قبل الفحص. بدلا من ذلك، إزالة غطاء لوحة لمدة 3-6 ح لضمان الجفاف السليم (إذا كان في بيئة معقمة). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع علامة دائمة سميكة، وجعل خط على الجانب السفلي من لوحة على طول الحافة الخارجية وآخر لتشكيل حاجز منتصف خط ( الشكل 1 ). يجب أن يكون حاجز خط الوسط متساوي البعد عن كل حافة اللوحة. استخدام مسطرة لضمان قياسات دقيقة. هذه الخطوط سوف تكون بمثابة دليل عند نقل البكتيريا ومحلول النحاس. بشرطيتم نقل E. القولونية قبل حل النحاس، وهذه الخطوط بمثابة مؤشرات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لوحة البذور مع 50 ميكرولتر من OP50 E. القولونية على جانب واحد فقط من حاجز النحاس لإنشاء حديقة موحدة ( الشكل 2 ). وينبغي أن يبقى تركيز البكتيريا متسقة عبر المقايسات. ومع ذلك، لوحظ القليل من التباين استجابة للفروق الخفيفة في التركيز. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام خطوط ملحوظ على الجانب السفلي من لوحة لضمان البكتيريا لا تتلامس مع حل النحاس. شريطة أن حل النحاس خطوط حافة لوحة ويشكل حاجز منتصف الخط، ونقل البكتيريا بحيث لن يكون حل النحاس في اتصال مع مصدر الغذاء. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> علامة مجموعة ثانية من لوحات ونقل أي OP50 E. القولونية لهم ( الشكل 2 ). هذه اللوحات سوف تعمل على تقييم السيطرة السلبية. وينبغي أن يكون لهذه اللوحات أيضاووضع علامة على نصف لوحة للدلالة على الأصل نقل الأولي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للبكتيريا لتجف ثم احتضان لوحات عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها. تأكد من أن البقع البكتيرية لا تنزعج عند نقلها إلى حاضنة أو غرفة 37 درجة مئوية. الاضطراب المفرط يمكن أن يغير موقع أو شكل التصحيح الغذائي. </li></ol> 3. فحص الكيميائي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الطازجة 0.5 M النحاس (إي) محلول كبريتات قبل الفحص وقت البدء. شريطة أن يتم استخدام 125 ميكرولتر من الحل لكل لوحة، توسيع نطاق هذا الحجم يعتمد على عدد لوحات الفحص المستخدمة (على سبيل المثال 5 لوحات الفحص، 625 ميكرولتر). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 100 ميكرولتر من النحاس (إي) محلول كبريتات على حافة أجار لإنشاء حاجز النحاس الخارجي. وينبغي أن يكون الجانب السفلي ملحوظ من لوحة بمثابة دليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 25 ميكرولتر من محلول النحاس (إي) كبريتات لإنشاء حاجز خط الوسط. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من أن النحاس (إي) محلول كبريتات القيام بهإس لا تتلامس مع التصحيح البكتيري. استخدام تقنية رصدت كما تسليط الضوء قد تؤثر على الحركة بسبب إندنتاتيونس / الخدوش على أجار. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح حل النحاس لتجف على لوحة. الفترة الزمنية يمكن أن تختلف اعتمادا على لوحة وظروف المختبر. تحقق بصريا لجفاف كل 5 دقائق بعد نقل. ملاحظة: الحل النحاس يعرض لون زرقاء ويمكن التعرف عليها بسهولة. استخدام الأنسجة المختبرية ل داب طفيفة الحل بالقرب من حافة لوحة لتمييز جفاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصة 20 ميكرولتر من بيليه دودة من الجزء السفلي من الأنبوب على نصف خالية من البكتيريا لوحة الفحص. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من أن 10 الديدان يتم نقلها إلى لوحة الفحص. إذا تم تضمين الديدان الزائدة عن طريق الخطأ، وإزالتها عن طريق التقاط مع زيت الهالوكربون لضمان عدم إضافة أي بكتيريا إلى لوحة. يجب أن يكون كل فحص عدد ثابت من الديدان الخيطية خلال الفحص. ملاحظة: إذا الديدان قليلة جدا هي ترانسفخلال الفحوص، فإن زيادة حجم العينة الأولي سوف يخفف من الخسائر المحتملة أثناء الغسل والتحويلات. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة M9 الزائد من لوحة مع الأنسجة المختبرية. M9 يجب أن لا تتلامس مع محلول النحاس (إي) كبريتات. تنبيه: تأكد من أن الديدان والسطح أجار لا تتأثر أثناء تنفيذ هذه الخطوة. إذا استخدمت قاسية جدا، يمكن أن الأنسجة المختبرية تخلق المسافة البادئة إلى سطح أجار لوحة ويمكن إزالة الديدان. يجب التخلص من الديدان عن طريق الخطأ عن طريق كيمويب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة وقد تم إزالة الحل M9 وجميع الديدان قد بدأت أنماط الحركية غير سائلة، بدء ساعة توقيت الفحص. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على النحو الأمثل، وإزالة الحل M9 في غضون دقيقة. المعلمة الأساسية هي تحديد الحركة الجيبية. الديدان تتحرك بشكل مختلف، على سبيل المثال سحق بدلا من جيبية، عندما تكون في السائل. بدء فحص مشاهدة الفحص مرة واحدة كل من الجهاز التجريبيإيسمس توقف عن سحق. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فحص لوحات فحص كل 30 دقيقة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لوحات فحص مع بقع البكتيرية، يسجل إيجابيا الكائنات إذا وصلت إلى التصحيح الغذاء على مدى فترة 4 ساعات. لوحات التحكم السلبية، يسجل إيجابيا الكائنات إذا كانوا قد عبروا الحاجز. </li></ol></li></ol>

<ol><li>White, J. G., Southgate, E., Thomson, J. N., Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+of+the+nervous+system+of+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Trans.+R.+Soc.+Lond.+B.+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">The structure of the nervous system of the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 314 (1165), 1-340 (1986).</li>
<li>Bargmann, C. I. Chemosensation in C. elegans (October 25, 2006). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBargmann%2C+CI+%22The+C.+elegans+Research+Community%2C+WormBook%22">The C. elegans Research Community, WormBook</a>. , wormbook.1.123.1, http://www.wormbook.org (2006).</li>
<li>Bargmann, C. I., Hartwieg, E., Horvitz, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant-selective+genes+and+neurons+mediate+olfaction+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Odorant-selective genes and neurons mediate olfaction in C. elegans.</a> Cell. 74 (3), 515-527 (1993).</li>
<li>Ward, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotaxis+by+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%3A+identification+of+attractants+and+analysis+of+the+response+by+use+of+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Chemotaxis by the nematode Caenorhabditis elegans: identification of attractants and analysis of the response by use of mutants.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 70 (3), 817-821 (1973).</li>
<li>Ramot, D., MacInnis, B. L., Goodman, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bidirectional+temperature-sensing+by+a+single+thermosensory+neuron+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Bidirectional temperature-sensing by a single thermosensory neuron in C. elegans.</a> Nat. Neurosci. 11 (8), 908-915 (2008).</li>
<li>Russell, J., Vidal-Gadea, A. G., Makay, A., Lanam, C., Pierce-Shimomura, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humidity+sensation+requires+both+mechanosensory+and+thermosensory+pathways+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Humidity sensation requires both mechanosensory and thermosensory pathways in Caenorhabditis elegans.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 111 (22), 8269-8274 (2014).</li>
<li>van Campen, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+modulation+disorders+in+childhood+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurodev.+Disord%22%5BJournal%5D)">Sensory modulation disorders in childhood epilepsy.</a> J. Neurodev. Disord. 7 (34), (2015).</li>
<li>Festa, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neocortical+disconnectivity+disrupts+sensory+integration+in+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsych%22%5BJournal%5D)">Neocortical disconnectivity disrupts sensory integration in Alzheimer's disease.</a> Neuropsych. 19 (6), 728-738 (2005).</li>
<li>Boecker, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+processing+in+Parkinson%27s+and+Huntington%27s+disease%3A+investigations+with+3D+H%282%29%2815%29O-PET%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Sensory processing in Parkinson's and Huntington's disease: investigations with 3D H(2)(15)O-PET.</a> Brain. 122 (9), 1651-1665 (1999).</li>
<li>Markaki, M., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21154667">Modeling human disease in Caenorhabditis elegans.</a> Biotechnol. J. 5 (12), 1261-1276 (2010).</li>
<li>O'Reilly, L. P., Luke, C. J., Perlmutter, D. H., Silverman, G. A., Pak, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C.+elegans+in+high-throughput+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Drug+Deliv.+Rev%22%5BJournal%5D)">C. elegans in high-throughput drug discovery.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 0, 247-253 (2014).</li>
<li>Thompson, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+million+mutation+project%3A+a+new+approach+to+genetics+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Res%22%5BJournal%5D)">The million mutation project: a new approach to genetics in Caenorhabditis elegans.</a> Genome Res. 23 (10), 1749-1762 (2013).</li>
<li>Chao, M. Y., Komatsu, H., Fukuto, H. S., Dionne, H. M., Hart, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+status+and+serotonin+rapidly+and+reversibly+modulate+a+Caenorhabditis+elegans+chemosensory+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Feeding status and serotonin rapidly and reversibly modulate a Caenorhabditis elegans chemosensory circuit.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 101 (43), 15512-15517 (2004).</li>
<li>Maricq, A. V., Peckol, E., Driscoll, M., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.nature.com/nature/journal/v378/n6552/abs/378078a0.html">Mechanosensory signaling in C. elegans mediated by the GLR-1 glutamate receptor.</a> Nat. 378 (6552), 78-81 (1995).</li>
<li>Chalasani, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+a+circuit+for+olfactory+behaviour+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Nat%22%5BJournal%5D)">Dissecting a circuit for olfactory behaviour in Caenorhabditis elegans.</a> Nat. 450 (7166), 63-70 (2007).</li>
<li>Hilliard, M. A., Bargmann, C. I., Bazzicalupo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C.+elegans+responds+to+chemical+repellents+by+integrating+sensory+inputs+from+the+head+and+the+tail%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">C. elegans responds to chemical repellents by integrating sensory inputs from the head and the tail.</a> Curr. Biol. 12 (9), 730-734 (2002).</li>
<li>Hart, A. C., Kass, J., Shapiro, J. E., Kaplan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+signaling+pathways+mediate+touch+and+osmosensory+responses+in+a+polymodal+sensory+neuron%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Distinct signaling pathways mediate touch and osmosensory responses in a polymodal sensory neuron.</a> J. Neurosci. 19 (6), 1952-1958 (1999).</li>
<li>Ishihara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HEN-1%2C+a+secretory+protein+with+an+LDL+receptor+motif%2C+regulates+sensory+integration+and+learning+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">HEN-1, a secretory protein with an LDL receptor motif, regulates sensory integration and learning in Caenorhabditis elegans.</a> Cell. 109 (5), 639-649 (2002).</li>
<li>Saeki, S., Yamamoto, M., Iino, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasticity+of+chemotaxis+revealed+by+paired+presentation+of+a+chemoattractant+and+starvation+in+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Plasticity of chemotaxis revealed by paired presentation of a chemoattractant and starvation in the nematode Caenorhabditis elegans.</a> J. Exp. Biol. 204 (10), 1757-1764 (2001).</li>
<li>Chao, M. Y., Komatsu, H., Fukuto, H. S., Dionne, H. M., Hart, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feeding+status+and+serotonin+rapidly+and+reversibly+modulate+a+Caenorhabditis+elegans+chemosensory+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Feeding status and serotonin rapidly and reversibly modulate a Caenorhabditis elegans chemosensory circuit.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101 (43), 15512-15517 (2004).</li>
<li>Campbell, J. C., Polan-Couillard, L. F., Chin-Sang, I. D., Bendena, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NPR-9%2C+a+Galanin-Like+G-Protein+Coupled+Receptor%2C+and+GLR-1+Regulate+Interneuronal+Circuitry+Underlying+Multisensory+Integration+of+Environmental+Cues+in+Caenorhabdities+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">NPR-9, a Galanin-Like G-Protein Coupled Receptor, and GLR-1 Regulate Interneuronal Circuitry Underlying Multisensory Integration of Environmental Cues in Caenorhabdities elegans.</a> PLoS Genet. 12 (5), (2016).</li>
<li>Harris, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three+distinct+amine+receptors+operating+at+different+levels+within+the+locomotory+circuit+are+each+essential+for+the+serotonergic+modulation+of+chemosensation+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Three distinct amine receptors operating at different levels within the locomotory circuit are each essential for the serotonergic modulation of chemosensation in Caenorhabditis elegans.</a> J. Neurosci. 29 (5), 1446-1456 (2009).</li>
<li>Harris, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+serotonergic+food+signal+stimulating+sensory-mediated+aversive+behavior+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Dissecting the serotonergic food signal stimulating sensory-mediated aversive behavior in C. elegans.</a> PLoS One. 6 (7), (2011).</li>
<li>Mitchell, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+differential+role+for+neuropeptides+in+acute+and+chronic+adaptive+responses+to+alcohol%3A+behavioural+and+genetic+analysis+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A differential role for neuropeptides in acute and chronic adaptive responses to alcohol: behavioural and genetic analysis in Caenorhabditis elegans.</a> PLoS One. 5 (5), (2010).</li>
<li>Colbert, H. A., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+signals+modulate+olfactory+acuity%2C+discrimination%2C+and+memory+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Environmental signals modulate olfactory acuity, discrimination, and memory in Caenorhabditis elegans.</a> Learn Mem. 4 (2), 179-191 (1997).</li>
<li>Brenner, S. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/4366476">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genet. 77 (1), 71-71 (1974).</li>
<li>Behavior (July 3, 2006). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22The+C.+elegans+Research+Community%2C+WormBook%22">The C. elegans Research Community, WormBook</a>. Hart, A. C. , wormbook.1.87.1, http://www.wormbook.org (2006).</li>
<li>Sambongi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensing+of+cadmium+and+copper+ions+by+externally+exposed+ADL%2C+ASE%2C+ASH+neurons+elicits+avoidance+response+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroReport%22%5BJournal%5D)">Sensing of cadmium and copper ions by externally exposed ADL, ASE, ASH neurons elicits avoidance response in Caenorhabditis elegans.</a> NeuroReport. 10 (4), 753-757 (1999).</li>
<li>Gray, J. M., Hill, J. J., Bargmann, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+circuit+for+navigation+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A circuit for navigation in Caenorhabditis elegans.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 102 (9), 3184-3191 (2004).</li>
<li>Rechavi, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Starvation-Induced+Transgenerational+Inheritance+of+Small+RNAs+in+C.+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Starvation-Induced Transgenerational Inheritance of Small RNAs in C. elegans.</a> Cell. 158 (2), 277-287 (2014).</li>
<li>Gloria-Soria, A., Azevedo, R. B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((npr-1+Regulates+Foraging+and+Dispersal+Strategies+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">npr-1 Regulates Foraging and Dispersal Strategies in Caenorhabditis elegans.</a> Cell. 18 (21), 1694-1699 (2008).</li>
<li>Beron, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+burrowing+behavior+of+the+nematode+Caenorhabditis+elegans%3A+A+new+assay+for+the+study+of+neuromuscular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">The burrowing behavior of the nematode Caenorhabditis elegans: A new assay for the study of neuromuscular disorders.</a> Genes Brain Behav. 14 (4), 357-368 (2015).</li>
<li>Wang, S. J., Wang, Z. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Track-A-Worm%2C+An+Open-Source+System+for+Quantitative+Assessment+of+C.+elegans+Locomotory+and+Bending+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Track-A-Worm, An Open-Source System for Quantitative Assessment of C. elegans Locomotory and Bending Behavior.</a> PLoS One. 8 (7), (2013).</li>
</ol>

ليس لدينا ما نكشف عنه.

هذا التصميم مقايسة تعديل سباق سباق الغذاء 24 لتشمل حل النحاس لخلق حاجز خط الوسط نافيريزيف وحول حافة لوحة لمنع فقدان الديدان الخيطية. يتم اختبار الكائنات الحية لقدرتها على عبور حاجز منعش والوصول إلى التصحيح الغذاء على مدى فترة 4 ساعات. في سياق نبر-9 (غف) ، لقد استخدمنا هذا الفحص لتقييم كيف يمكن أن تؤثر الظروف المجاعة على ردود نادرة وكشف عن الطعام. شريطة أن كنا قد وصفت في وقت سابق نبر-9 (غف) كما عيب للاستجابة إلى المواد الغذائية و إيفرزيف ال...

وقد استخدمت كاينورهابديتيس ايليجانس كنموذج لدراسة علم الأعصاب لعقود بسبب السهولة النسبية في تحليل الدوائر من الجهاز العصبي تتألف فقط من 302 الخلايا العصبية 1 . شريطة أن يكون الكائن يعتمد على الاستجابة للإشارات البيئية، وكثير من الجهاز العصبي مكرس لتنظيم دمج الإشارات البيئية 2 . على الرغم من بساطة الجهاز العصبي، C. ايليجانس يمكن الكشف عن والرد على إشارات بيئية متنوعة بما في ذلك طارد 3 ، وجذابات 4 ، ودرجة الحرارة 5 ، وحتى الرطوبة 6 . وقد تم ربط الفشل في دمج صحيح إشارات بيئية لعدد من الاضطرابات السلوكية والشروط الاعصاب في النظم نموذج الثدييات 7- 9. مع مجموعة من نماذج الأمراض العصبية المتاحة<html> 10 في C. ايليجانس وتطوير شاشات الأدوية النيماتودا 11 ، وقد أثبت هذا الكائن ليكون نظاما مفيدا لدراسة علم الأعصاب. وبالنظر إلى توافر نيماتودا خريطة الاتصال 1 والطفرات إلى كل جين تقريبا في الجينوم الديدان الخيطية 12 ، فهمنا للجهاز العصبي النيماتودا، وبتوسيع منطقتنا، ويقتصر جزئيا من خلال تصميم المقايسات المناسبة خلاق. وقد تم تطوير عدد من فحوصات الكيميائي على مدى السنوات ال 40 الماضية لتقييم استجابة الديدان الخيطية إلى المحفزات عديمة التنوع 3 ، 4 ، 13 ، 14 ، 15 . وشملت التجارب الأولية إدخال التحفيز البيئي الحاد في حين دودة واحدة تجول على لوحة أجار= &quot;كريف&quot;&gt; 3 ، 14 ، 16 . وسجلت تغييرات فورية على الاستجابات الحركية. على سبيل المثال، يمكن تطبيق الأوكتانول الرائحة متقلبة إلى الشعر وفاحت أمام أنف الخيطية لتحفيز بدء الحركة إلى الوراء في نوع الديدان البرية 17. كما تم تطوير مقايسات أكثر تعقيدا لدمج متغيرات متعددة كوسيلة لتقييم الخيار السلوكي 18 . الاختلاف من هذا الفحص ينطوي على استخدام حل النحاس لخلق حاجز خط الوسط نافيريزيف 4 . وقد وضعت جاذبة، وهي الدياستيل، على جانب واحد من الحاجز الكيميائي مع نقل الديدان بعيدا عن مصدر الدياستيل. وعبرت الديدان المعيبة لاستجابات النحاسية النحاسية على الفور الحاجز للوصول إلى الدياستيل، في حين أن الديدان ذات النوع البري قد صدت في البداية بواسطة الحاجز. وسجلت الردود عندما اقتربت الديدان أولا حاجز النحاسدون ملاحظات طويلة الأجل. عندما يتم تقييم الديدان بعد خضوعها لظروف المجاعة، تنخفض حساسيتها للمؤثرات البيئية 19 . عندما يطفو الأوكتانول الكيميائي الأستراني أمام الأنف الديدان الخيطية، الكائنات الحية البرية تحفز الحركة إلى الوراء في غضون 3-5 سنوات عندما على الغذاء. بعد إزالة هذه الكائنات من الطعام لمدة 10 دقيقة، فإنها تظهر استجابة متأخرة من 8-10 ثانية 20 . وهكذا، مع زيادة المجاعة، تظهر الديدان الخيطية استجابة ناقصة منخفضة للإشارات البيئية الضارة حيث أن البحث عن الغذاء يصبح أكثر أهمية للبقاء على قيد الحياة. على العكس من ذلك، الديدان الخيطية التي تزيد من التعبير عن مستقبلات نيوروببتيد 9 ( نبر-9) ، لا تستجيب للأوكتانول على أو خارج الطعام وتعرض عدم القدرة على الاستجابة لعدد من المحفزات تافهة 21 . هذه الكائنات نبر-9 (غف) أيضا لا تعدل تردد عكسها في وجود الطعام، ولكن يمكنعكس ردا على التحفيز لمسة قاسية تشير إلى أنها قادرة على التحرك إلى الوراء 21 . كما قمنا بتقييم نبر-9 (لف) المسوخ نظرا لأنها تظهر بشكل غير طبيعي انخفاض تردد عكس من الطعام بعد يمكن تعديل سلوكهم في وجود الغذاء 21 . وقد ساعدت اقتران الحالة الغذائية للدودة مع إدخال المحفزات الخارجية الحادة في توضيح الآليات التي من خلالها مسار ذات الصلة الغذائية يمكن أن تعدل على نطاق واسع مسارات الإشارات الحسية 22 ، 23 . كما تم استخدام الغذاء في بيئة الديدان الخيطية لتقييم ردود الانسحاب من الإيثانول 24 . في هذه التجربة، تم تحضين الديدان في تركيزات مختلفة من الإيثانول ثم وضعت على لوحة أجار مع رقعة من المواد الغذائية المعروفة باسم &quot;مقايسة سباق الغذاء&quot;. تم وضع التصحيح الغذائي على حافة واحدة من لوحة بينما الديدان الخيطية ثتوضع بعيدا عن مصدر الغذاء. تم تقييم الانسحاب الإيثانول عن طريق قياس مدة الوقت اللازم للديدان للوصول إلى التصحيح من المواد الغذائية. هذا الاختبار القائم على التغذية النفور النحاس يبني على مقايسة سباق الغذاء لدمج المتغيرات البيئية إضافية، وهي الغذاء والنحاس، في حين أن تقييم التغيرات السلوكية مع مرور الوقت. هذا هو التكيف من استخدام بروتوكول شائع في جميع أنحاء C. ايليجانس المجتمع 4 . وقد استخدم هذا البروتوكول لتقييم ردود نافيريزيف والكشف عن الطعام على مدى فترة أربع ساعات 21 . وبما أن سلوك دودة معرض الجوع بعد 30 دقيقة من الحرمان الغذائي 25 ، ونحن أيضا قادرون على تقييم كيف يمكن للتغيرات في الوضع التغذوي أن تؤثر على الاستجابات البيئية. شروط هذا المقياس قياس كيف الكائنات التجريبية تغيير الاستجابة للمؤثرات تافهة مع مرور الوقت، وبالتالي هذا يقيم التغيرات السلوكية كماتقدم الكائنات الحية نحو حالة جائعة (والقياسات المستمرة للمجاعة لفترات طويلة). منذ الحيوانات NPR-9 (GF) لا تغير سلوكهم في الاستجابة للطعام أو العديد من الإشارات مكره، سعينا إلى تحديد ما إذا كانت هذه العجز السلوكية سيستمر في سياق الموت جوعا. في نهاية المطاف، وقد وضعت هذا التصميم مقايسة على وجه التحديد لتقييم المسوخ نبر-9 (غف) ولكن يمكن أن تتكيف كذلك لتوصيف أيضا سلالات الرواية.

<table><tbody><tr><td>محلول M9 [3 غرام KH2PO4، 6 غرام Na2HPO4، 5 غرام NaCl، 1 مل 1 M MgSO4، H2O إلى 1 لتر. تعقيم بالمبخرة قبل الاستخدام.]</td><td></td><td></td><td>منتوج في المختبر</td></tr><tr><td>كبريتات النحاس</td><td>سيجما</td><td>C-1297</td><td>استخدم الماء لتعليق بشكل مناسب لتركيز 0.5M</td></tr></tbody></table>

ا<em&gt; كاينورهابديتيس ايليجانس</em&gt; الوضع الغذائي القائم على النحاس النفور الفحص

A Caenorhabditis elegans Nutritional-status Based Copper Aversion Assay

ولضمان البقاء، يجب أن تكون الكائنات الحية قادرة على تجنب الموائل غير المواتية مع ضمان مصدر غذائي متسق. كاينورهابديتيس إليغانز يغير أنماطها الحركية عند الكشف عن المحفزات البيئية المتنوعة ويمكن تعديل مجموعة من الاستجابات السلوكية استجابة لظروف المجاعة. الديدان الخيطية عادة ما تظهر استجابة أفرسيف انخفاض عند إزالتها من مصدر الغذاء لأكثر من 30 دقيقة. إن مراقبة التغيرات السلوكية استجابة لحالة تغذوية متغيرة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة للآليات التي تنظم الانتقال من حالة تغذى جيدا إلى حالة جوع. لقد طورنا مقايسة تقيس قدرة النيماتودا على عبور حاجز منعكس ( أي النحاس) ثم تصل إلى مصدر غذائي على مدى فترة طويلة من الزمن. ويستند هذا البروتوكول على العمل السابق من خلال دمج متغيرات متعددة في الطريقة التي تسمح لجمع البيانات المستمر مع تحول الكائنات نحو أن حالة جوعا على نحو متزايد. وعلاوة على ذلك، يسمح هذا الفحص زيادة حجم العينة بحيث يمكن تقييم أكبر عدد من الديدان الخيطية في وقت واحد. الكائنات الحية المعيبة من أجل القدرة على كشف أو الاستجابة للنحاس عبور الحاجز الكيميائي على الفور، في حين أن النيماتودا البرية نوع صدت في البداية. كما الديدان نوع البرية جوعا على نحو متزايد، فإنها تبدأ في عبور الحاجز والوصول إلى مصدر الغذاء. قمنا بتصميم هذا الفحص لتقييم متحولة التي هي غير قادرة على الاستجابة إلى الإشارات البيئية المتنوعة، بما في ذلك الإحساس الغذاء أو الكشف عن المواد الكيميائية نافر. عند تقييمها عبر هذا البروتوكول، عبرت الكائنات المعيبة على الفور الحاجز، ولكن أيضا غير قادرة على الكشف عن مصدر الغذاء. ومن ثم، فإن هذه المسوخ تعبر مرارا الحاجز الكيميائي على الرغم من الوصول مؤقتا إلى مصدر غذائي. هذا الاختبار يمكن اختبار مجموعات من الديدان بشكل مباشر لتقييم العيوب المسار المحتملة المتعلقة النفور والمجاعة.

استخدمنا النوع البري (N2)، نبر-9 (tm1652)، وسلالة نفر-9 أوفيركسريسيون، أي نير-9 (غف) (IC836 - نير-9 :: نبر -9؛ سور-5 :: غفب؛ أودر -1 :: رفب)، لتقييم الردود على المجاعة والنفور النحاس. الكائنات الحية البرية قادرة على الكشف والاستجابة للحاجز النحاسي النحيف ، في حين أن نبر-9 (غف) المسوخ لا تبدأ استجابة نافذة للنحاس على مدى 4 h فحص 21 . بعد 30 دقيقة من المجا...

هنا، نقدم كاينورهابديتيس ايليجانس مقايسة محددة تهدف إلى تقييم التغيرات في السلوك النفور النحاس والقدرة على تحديد مصدر الغذاء المشترك، كما تقدم الكائن الحي من تغذية جيدة إلى حالة غذائية جوعا.

To ensure survival, organisms must be capable of avoiding unfavorable habitats while ensuring a consistent food source. Caenorhabditis elegans alter their ...

الهدف العام من هذا الفحص لتجنب النحاس على أساس الحالة الغذائية هو تقييم النيماتودا المستجيبة لمواد كيميائية طاردة ومصدر غذاء على مدار أربع ساعات. هذا يسمح بالتقييم المتزامن للحالة الغذائية. يمكن لهذه الطريقة أن تساعد مجال علم الأعصاب السلوكي من خلال تحديد المتحولات التي لا تستطيع تعديل الأنماط الحركية والاستجابة لمادة كيميائية طاردة على الرغم من ظروف الجوع.الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن إجراؤها على مدى فترة زمنية طويلة، مما يسمح بتحليل الحالة الغذائية حيث تصبح الديدان أكثر جوعًا بشكل تدريجي على مدار أربع ساعات. لتحضير الكائنات التجريبية للفحص، اختر 10 ديدان في مرحلة L4 لكل تيار، قبل 24 ساعة من بدء الفحص، للتأكد من أن الكائنات هي بالغين صغار عند اختبارهم. لكل متحول أو دودة تحكم تم اختبارها، اختر 10 L4s.احتفظ بالكائنات L4، باستخدام الطرق القياسية لمدة 24 ساعة على ألواح أجار قياسية مزروعة بـ OP50 E.Coli. قبل 24 ساعة من الفحص، استخدم مسطرة وعلامة دائمة سميكة لرسم خط على الجانب السفلي من وسيط نمو النيماتودا المحضر مسبقًا أو لوحة NGM على طول الحافة الخارجية. قم بوضع علامة على حاجز منتصف الخط على مسافة متساوية من كل حافة من لوحات.زرع اللوحة بـ 50 ميكرولتر من OP50 E.Coli على جانب واحد فقط من حاجز النحاس لإنشاء طبقة متساوية. استخدم الخطوط المحددة على الجانب السفلي من اللوحة لضمان عدم ملامسة البكتيريا لمحلول النحاس. تأكد من أن محلول النحاس سيحدد حافة اللوحة ويشكل حاجز منتصف الخط ونقل البكتيريا بحيث لن يلام محلول النحاس بمصدر الغذاء.ضع علامة على مجموعة ثانية من اللوحات بدون OP50 E.Coli، لتكون بمثابة التحكم السلبي. اترك البكتيريا تجف، ثم قم بحضانة اللوحات عند 37 درجة مئوية طوال الليل. تأكد من عدم إزعاج بقع البكتيريا عند نقل الديدان إلى حاضنة عند 37 درجة مئوية.قد يؤدي الاضطراب المفرط إلى تغيير موقع أو شكل بقعة الغذاء. بعد الحضانة الليلية، قم بإزالة اللوحات من الحاضنة واستخدم الجانب السفلي المحدد من اللوحة كدليل، قم بعزل 100 ميكرولتر من محلول كبريتات النحاس (II) 0.5 مولار معد حديثًا على حافة الأجار، لإنشاء حاجز نحاس خارجي. قم بعزل 25 ميكرولتر من محلول كبريتات النحاس (II) لإنشاء حاجز منتصف الخط.تأكد من أن محلول كبريتات النحاس (II) لا يلاممس بقعة البكتيريا واترك محلول النحاس ليجف على اللوحة. تحقق من الجفاف كل خمس دقائق بعد النقل، باستخدام منديل مختبري بمسح الخفيف للمحلول بالقرب من حافة اللوحة للتمييز. قبل الفحص مباشرة، قم بنقل الكائنات التجريبية إلى لوحة أجار خالية من البكتيريا واترك الديدان تتحرك بحرية لمدة دقيقة واحدة لإزالة البكتيريا الزائدة.بعد ذلك، قم بعزل ملليلتر واحد من M9 على اللوحة مع البالغين الصغار، التي تم نقلها قبل 24 ساعة لنقل الديدان إلى أنبوب طرد مركزي صغير. قم بفصل الديدان عند 3000 × G لمدة دقيقة واحدة. يجب أن تشكل الديدان كريات في قاع الأنبوب.استخرج محلول M9 دون تعطيل كريات الديدان. أضف ملليلتر واحد من محلول M9 إلى كريات الديدان. قم بقلب الأنبوب لخلط الديدان بالمحلول.إذا تم نقل بكتيريا زائدة في البداية مع الديدان، كرر الأمر لمدة خمس مرات إجمالاً. بعد الغسل النهائي، قم بعزل المحلول الفائق حتى يتبقى 100 ميكرولتر من محلول M9 وكريات الديدان. قم فورًا بنقل الديدان من المحلول بعد اكتمال عمليات الاستخلاص.قم بعزل 20 ميكرولتر من كريات الديدان من أسفل الأنبوب على النصف الخالي من البكتيريا من لوحة الفحص، تأكد من نقل 10 ديدان إلى لوحة الفحص وأنه لا يوجد طعام ملوث. لا ينبغي نقل البكتيريا إلى لوحات سباق الغذاء النحاسي. قم بإزالة محلول M9 الزائد من الديدان باستخدام منديل مختبري خلال دقيقة واحدة.تأكد من أن محلول M9 لا يلاممس محلول كبريتات النحاس (II) وأن الديدان وسطح الأجار لا يزالان سليمين. قم بالتخلص من الديدان التي تم إزالتها عن طريق الخطأ باستخدام منديل المختبر. بمجرد إزالة محلول M9، وبدء جميع الديدان في أنماط حركية غير سائلة، أي عندما يتوقفون عن الرجوع.ابدأ توقيت الفحص، إذا تم تضمين ديدان إضافية عن طريق الخطأ، قم بإزالتها عن طريق الاختيار باستخدام زيت الهالوجينات للتأكد من عدم إضافة أي بكتيريا إلى اللوحة. تحقق من لوحات الفحص كل 30 دقيقة. بالنسبة للوحات الفحص التي تحتوي على بقع بكتيريا، قم بتسجيل الكائنات بشكل إيجابي إذا وصلت إلى بقعة الغذاء على مدار أربع ساعات.بالنسبة للوحات التحكم السلبية، قم بتسجيل الكائنات بشكل إيجابي إذا عبرت الحاجز. استخدمنا متحول N2 وفقدان وظيفة npr-9 ومتحول npr-9 للإفراط في التعبير، المشار إليه باسم npr-9 لكسب وظيفة، لتقييم الاستجابات للجوع وتجنب النحاس. في نهاية الفحص، أعاد 100٪ من الكائنات من النوع البري الانتقال إلى مصدر الغذاء، بينما لم تعدل كائنات npr-9 للإفراط في التعبير الأنماط الحركية استجابةً للغذاء واستمرت في عبور الحاجز الطارد حتى بعد ملامسة مصدر الغذاء.على لوحة خالية من الغذاء، نادرًا ما عبرت كائنات n2 أو npr9 لفقدان الوظيفة حاجز النحاس بينما عبرت الديدان npr-9 للإفراط في التعبير الحاجز بشكل متكرر إلى الأمام والخلف. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم تذكر تجنب تعطيل حاجز النحاس عند نقل الديدان و M9 وكذلك الحفاظ على ظروف ثابتة لكل سلالة لتجنب العوامل المربكة.

a-caenorhabditis-elegans-nutritional-status-based-copper-aversion

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

هنا نطرح على بروتوكول لتنفيذ لوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية...

اللوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في انواع معينة ايليجانس</em

يقدم هذا الفيديو مقايسة البقاء على قيد الحياة قصيرة المدى التي تختبر علاجا للسمية الحادة أو تختبر سلالة وراثية لمقاومة حالة سامة. يوضح بروتوكول المثال مثالا لاختبار البقاء على قيد الحياة حيث يتم اختبار الديدان لقدرتها على مقاومة الإجهاد التأكسدي الناجم عن الباراكوات (PQ).

ج. ايليجانس اختبار البقاء على قيد الحياة: اختبار سمية قصير المدى

يقدم هذا الفيديو الانجذاب الكيميائي في الديدان الخيطية C. ايليجانس ويظهر عينة من بروتوكول يختبر النفور الكيميائي من كبريتات النحاس.

ج. ايليجانس فحص الانجذاب الكيميائي: طريقة لاختبار التحسس الكيميائي في الديدان

لدراسة العلاقة بين توازن البروتين والإجهاد والشيخوخة ، راقبنا التغيرات في طي البروتين باتباع خلل البروتين ، وتوطين البروتين في الخلية واستقرار البروتين على مستويات الكائنات الحية والخلوية والبروتين ، باستخدام metazoan Caenorhabditis elegans القابل للتتبع وراثيا كنظام نموذجي.

استخدام Caenorhabditis elegans كنظام نموذجي لدراسة توازن البروتين في كائن حي متعدد الخلايا

C. elegans هو نموذج مفيد لدراسة تأثيرات الإيثانول على السلوك. نقدم اختبارًا سلوكيًا يقيس تأثيرات الإيثانول على سرعة الحركة من الديدان الزاحفة؛ يمكن قياس كل من الحساسية الأولية وتطور التسامح الوظيفي الحاد للإيثانول مع هذا الاختبار.

على الفحص لقياس آثار الإيثانول على سرعة تحرك من<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em

C. elegans هو كائن حي نموذجي جذاب لدراسة مسارات نقل الإشارة المشاركة في مقاومة الإجهاد التأكسدي. نقدم هنا بروتوكولا لقياس مقاومة الإجهاد التأكسدي ل C. ايليجانس في الطور السائل ، باستخدام العديد من العوامل المؤكسدة في 96 لوحة بئر.

قياس مقاومة الاكسدة من<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em&gt; في 96-جيدا لوحات عيار مكروي

نقدم إعداد تسجيل السلوك والبروتوكول الذي يتيح التحليل الآلي من الديدان الخيطية، تفضيل كاينورهابديتيس ايليجانس "للمركبات القابلة للذوبان في مقايسة سكانية. توضح هذه المقالة بناء غرفة السلوك، بروتوكول الفحص السلوكي، واستخدام برامج تحليل الفيديو.

التحليل الآلي من النيماتودا القائم على السكان الحسية الكيميائية تفضيل التفضيل

وقد وضعت أسلوب كمي لتحديد وتوقع السمية الحادة للمواد الكيميائية من خلال تحليل تلقائياً تحديد سمات المظهرية ايليجانس كاينورهابديتيس. ويصف هذا البروتوكول كيفية علاج الديدان مع المواد الكيميائية في صفيحة 384-جيدا، والتقاط الفيديو، والتحديد الكمي للسمية ذات الصلة تعمل.

مقايسة الفائق "التنبؤ بالسمية الكيميائية" "الآلي التنميط المظهرية" من ايليجانس كاينورهابديتيس

هنا ، نحن نميز استجابات الإجهاد البرودوسلي الخلوي في النيماتودا C. elegans من خلال قياس تنشيط المراسلين النسخ الفلوريو وحساسية الإجهاد الفسيولوجي.

قياسات استجابات الإجهاد الفسيولوجي في C. Elegans

هنا ، نقدم بروتوكولا لزرع الديدان الخيطية الفردية المعزولة على وسائط صلبة لتتبع المعلمات الفسيولوجية مدى الحياة والقياس الكمي الفلوري. يتضمن نظام الاستزراع هذا حاجزا من حمض النخيل حول آبار دودة واحدة لمنع الحيوانات من الفرار ، مما يسمح باستخدام التدخلات المكروهة ، بما في ذلك البكتيريا المسببة للأمراض والضغوطات الكيميائية.

الثقافة طويلة الأجل لالتهاب Caenorhabditis elegans الفردي على الوسائط الصلبة لمراقبة التألق الطولي والتدخلات البعيدة

يصف هذا البروتوكول مقايسة لتحديد معدل تغذية Caenorhabditis elegans بناء على قياس إزالة البكتيريا في الثقافة السائلة.

قياس كمية الطعام في Caenorhabditis elegans عن طريق قياس التخليص البكتيري

اكتشف تقييم النفور من النحاس في Caenorhabditis elegans لعلم الأعصاب السلوكي باستخدام يرقات المرحلة الرابعة. تساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة التغيرات السلوكية أثناء الجوع.

ا

استكشف المزيد من الفيديوهات