الأسفار بوساطة التصوير المقطعي للكشف والتحديد الكمي لالتهاب الأمعاء مورين المتصلة بلعم

العام من هذا النهج التصويري في الجسم الحي الخاص بالهدف هو تصور العلامات الجزيئية لنشاط المرض في مرض التهاب الأمعاء. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال مرض التهاب الأمعاء ، والأبحاث العلاجية ذات الصلة حول تأثير العلاجات التجريبية أو الأحداث الخلوية المحددة على الالتهاب. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن مراقبة نشاط المرض طوليا وغير جراحي.

على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة للاضطرابات الالتهابية ، إلا أنه يمكن تطبيقها أيضا لدراسة أمراض أخرى ، مثل السرطان أو الأمراض المرتبطة بالمناعة. للحث على التهاب القولون ، املأ إمدادات الشرب من الفئران التجريبية بجرامين من كبريتات الصوديوم ديكستران ، أو DSS ، المذابة في 100 مل من مياه الشرب المعقمة ، مع تقدير خمسة ملليلتر من الماء لكل فأر يوميا. قبل 24 ساعة من المسح ، قم بتحميل كوكتيل الأجسام المضادة ذات الأهمية في حقنة معقمة محمية من الضوء وحقن الأجسام المضادة عن طريق الوريد في أوردة الذيل لحيوانات التجارب.

في يوم التجربة ، استخدم ماكينة حلاقة كهربائية لحلاقة الفراء في منطقة البطن لحيوانات التجربة لتقليل انعكاس الضوء وامتصاصه. باستخدام شبح يحاكي الأنسجة بسمك محدد وخصائص امتصاص ، املأ الشبح بحجم معين من محلول الجسم المضاد محل الاهتمام وقم بقياس التألق على جهاز FMT. بعد ذلك ، على التصوير المقطعي البيطري بوساطة التألق ، أو جهاز FMT للحيوانات الصغيرة ، انقر فوق دراسة جديدة وقم بتضمين أدوات التتبع ذات الصلة في وصف الدراسة ، بما في ذلك معلمات التصوير وجرعاته.

إنشاء مجموعات دراسة وفقا للتصميم التجريبي ، وتجهيز كل مجموعة بالعدد المناسب من. عندما تتم معايرة النظام لتركيبات التتبع ، ضع أول فأر مخدر في وضع ضعيف في كاسيت فحص قابل للتسخين بدرجة حرارة 42 درجة مئوية. أدخل الكاسيت في نظام التصوير وحدد العينة المناسبة من لجنة الدراسة المقابلة.

حدد أداة التتبع التي تم إدارتها للتأكد من حساب قيم تركيز التتبع بشكل صحيح، والحصول على صورة انعكاس التألق بالطول الموجي المناسب للفحص. انقر فوق الحصول على صورة لتحديد حقل المسح والتأكد من ظهور حقل المسح الضوئي كتراكب على صورة انعكاس التألق. اضبط حقل المسح الضوئي حتى يحيط بالمنطقة محل الاهتمام ، مع الحرص على تجنب الخطأ أو مناطق الفراء المتبقية.

بناء على هدف الصورة، حدد دقة حقل مسح ضوئي لتعيين عدد نقاط بيانات الصورة داخل حقل المسح. ثم انقر فوق مسح ضوئي لبدء الحصول على الصورة بالطول الموجي المحدد. في نهاية الفحص ، قم بإزالة من الكاسيت للسماح للحيوان بالتعافي تماما مع المراقبة قبل العودة إلى قفصه.

يمكن بعد ذلك تكرار FMT في نقاط زمنية مختلفة حسب الاقتضاء تجريبيا. لتحليل الصور المكتسبة ، افتح برنامج تحليل التصوير المناسب وحدد البيانات الأولية للفحص الأول. باستخدام أداة إعادة البناء ، قم بإنشاء خرائط ثلاثية الأبعاد لتوزيع التألق.

عند إضافة جميع عمليات المسح إلى مجموعة بيانات إعادة البناء المناسبة ، افتح مجموعة البيانات الأولى ذات الاهتمام. سيتم عرض جميع الفحوصات التي تم إجراؤها لحيوان التجربة الفردي المختار. حدد الفحص المناسب وانقر فوق تحميل.

ستظهر إعادة بناء ثلاثية الأبعاد لتوزيع التتبع كتراكب لصورة انعكاس التألق المكتسبة في البداية. بعد ذلك ، حدد بؤر تراكم الملصقات غير المحددة على الخرائط ثلاثية الأبعاد المعاد بناؤها واستخدم أداة القياس لتحديد منطقة الاهتمام. سيقوم البرنامج بعد ذلك بإنشاء شدة مضان للمنطقة ذات الاهتمام ، بالإضافة إلى قياسات كمية بيكومولر للمتتبع الذي تمت معايرة المسح الضوئي له.

في هذه التجربة ، تم استخدام جسم مضاد مترافق مضان ضد الفئران F4 / 80 لتصور البلاعم المنشطة مباشرة. تم قياس تراكم مرتفع بشكل ملحوظ لتتبع الفلورسنت بواسطة التصوير المقطعي بوساطة التألق في القولون من الفئران المصابة بالقولون مقارنة بحيوانات التحكم غير القولونية ، مما يشير إلى زيادة في تسلل الخلايا الوحيدة والتمايز إلى البلاعم النشطة في القولونية. على العكس من ذلك ، فإن تطبيق جسم مضاد IgG مترافق غير محدد غير محدد لم يحظر استجابة مضان يمكن اكتشافها في البطن أو الأمعاء في أي من المجموعة الضابطة القولونية أو غير القولونية ، مما يدل على خصوصية التفاعل بين المسبار والهدف للجسم المضاد F4 / 80.

تتحقق قياسات خارج الجسم الحي لتراكم التتبع الموجه F4 / 80 في القولون المزروع بشكل أكبر من الأصل القولوني لتراكم إشارة التتبع F4 / 80 المكتشف في الجسم الحي. في الواقع ، ترتبط الكميات المحسوبة من الأجسام المضادة المرتبطة ارتباطا جيدا بالأعداد المحددة نسيجيا من الضامة المتسللة ، مما يؤكد أن التصوير في الجسم الحي باستخدام متتبعات محددة يمكن أن يكون مؤشرا على نشاط المرض الموضعي. بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء ذلك وتحليله في غضون دقيقتين إذا تم إجراؤه بشكل صحيح.

ما تستغرق خطوات التحضير ، بما في ذلك إنتاج متتبعات محددة قائمة على الأجسام المضادة ، من يومين إلى ثلاثة أيام. عند التخطيط لإجراء تجريبي مثل هذا ، من المهم تضمين عناصر تحكم مناسبة وموثوقة ، لكل من الجسم المضاد ونموذج الأمراض الحيوانية. باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى ، مثل تنظير القولون ، أو قياس التدفق الخلوي للإجابة على أسئلة إضافية والتحقق من صحة البيانات وتحديدها كميا.