في فيفو تقييم الخصائص الميكانيكية و اللزجة من اللسان الجرذ

الهدف العام من هذا الإجراء هو تقييم قوة اللسان وخصائصه اللزجة المرنة في الفئران المخدرة. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال التنفس المضطرب أثناء النوم ، حول توقف التنفس أثناء النوم الانسدادي. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي البيانات الكمية للمجالات المتعلقة بأداء العضلات ومع التدريب المناسب ، يمكن إجراؤها بسهولة باستخدام قلم الرصيف الموجود عادة في معظم مختبرات ميكانيكا العضلات.

يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة لفسيولوجيا وميكانيكا لسان الفئران. يمكن أيضا تطبيقه على أنظمة أخرى بما في ذلك نماذج الماوس. خطرت لنا فكرة هذه المنهجية لأول مرة عندما كنا نقيم كيف يمكن لتراكم الدهون في قاعدة اللسان أن يغير الخصائص الميكانيكية لهذه العضلة.

بعد التأكد من المستوى المناسب من التخدير بسبب عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، استخدم مقصا تشغيليا لاستئصال منطقة بيضاوية من الجلد فوق عنق الجرذ وإزالة الجلد. تشريح حاد من خلال أي أنسجة دهنية ، والغدد تحت اللسان وتحت الفك العلوي وطبقة العضلات المحيطة بالقصبة الهوائية. باستخدام الكي الكهربائي ، قم باستئصال العضلة ثنائية المعدة القريبة من العظم اللامي في مواقع التلامس المحتملة حول العصب.

ثم أضف قطرة من الزيت المعدني على العصب لحمايته من الجفاف. استخدم زوجا من الملقط الدقيق لتشريح العصب تحت اللسان من اللحم المحيط. استخدام خطاف للتأكد من توفر ثلاثة ملليمترات على الأقل من العصب للاتصال بالقطب ثنائي القطب.

باستخدام ملقط دموي دقيق ، قم بسحق العصب تحت اللسان بعيدا عن العظم اللامي قدر الإمكان ، لتجنب الانتشار الرجعي للمحفز بخمس ثوان من الضغط اللطيف. عندما يمسك الدموي بالعصب ، يجب أن يكون هناك ارتعاش قصير في قاعدة اللسان مرئيا. ثم كرر تحديد الهوية واضطراب الأعصاب على الجانب الآخر.

لتنبيب القصبة الهوائية ، أولا ، قم أولا بتشريح العضلات الملساء المحيطة بالقصبة الهوائية برفق ، لكشف أنسجة القصبة الهوائية. بعد ذلك ، استخدم زوجا من ملقط ربط الخيط لرفع القصبة الهوائية بعناية وتمرير خياطة بأربعة صفر أسفل القصبة الهوائية ، بالقرب من الصدر. اربط عقدة أولية فضفاضة بين الحلقة السادسة والسابعة من الحنجرة وحرك جذع ماصة نقل مشحمة بالزيت المعدني أسفل القصبة الهوائية.

عندما تكون الماصة في مكانها ، قم بعمل شق صغير بين الحلقتين الرابعة والخامسة من الحنجرة. مع توصيل الكانيلا بالتخدير ، أدخل الكانيلا برفق في الشق لعمق خمس حلقات تقريبا. قم بتثبيت الكانيلا في الخيط لإنشاء ختم محكم واستخدم ملقط ربط الخياطة لإمساك اللسان بعناية.

بعد ذلك ، قم بتمرير PBS غارقة في الحرير الأسود بطول 20 سم مضفر ، وخمسة خياطة صفرية وسطيا من خلال طرف اللسان واربط حلقة بعرض أربعة سنتيمترات تقريبا في الخياطة. لتحديد القوة متساوية القياس والخصائص اللزجة المرنة للسان ، ضع في وضع ضعيف في الدرج الساخن لنظام اختبار عضلات incisu واستخدم ربطة عنق معدنية مطلية بالبلاستيك لتثبيت أنف بالدرج. أدخل دوار ثلاثي الاتجاهات مربوط بخط أحادي للنص يبلغ وزنه تسعة كيلوغرامات ، للحفاظ على الفم في الوضع المفتوح ، وتوصيل حلقة الخياطة ، بمحول القوة.

قم بربط الأطراف والبطن لشل حركة أثناء التحفيز وقم بتوصيل خطاف محفز مخصص بواسطة قطب قطبي بكل عصب تحت اللسان. استخدم عمود ربط مزدوج قابل للتكديس لتحويل طرفي الموز لكل قطب كهربائي إلى موصل BNC واحد. بعد ذلك ، استخدم مقسم BNC لتوصيل الأقطاب الكهربائية بوضع المحفز للجهاز.

بعد التأكد من محاذاة الرقبة واللسان مع ذراع محول القوة ، اضبط طول اللسان تدريجيا وقم بتطبيق محفزات الارتعاش حتى يتم الحصول على أقصى قوة. بمجرد الحصول على أقصى قوة ارتعاش ، استخدم الفرجار الورني لقياس طول اللسان من الإدخال في العظم اللامي إلى طرف اللسان. لقياس القوة متساوية القياس ، قم بتطبيق نشل ، واتبع بعد 20 ثانية من خلال تحفيز الكزاز ، وتسجيل الترشل الأقصى وقوى الكزاز.

لتحديد الخصائص اللزجة المرنة للسان ، دون تغيير موضع ، بعد ثلاث إلى خمس دقائق من تحديد القوة متساوية القياس ، قم بتطبيق دورات من الامتدادات السلبية مع زيادة الإزاحة من الطول الأمثل دون تحفيز الأعصاب تحت اللسان. هنا ، يتم عرض القيم المتوقعة لقوى الارتعاش والكزاز في فأر زوكر البالغ من العمر ثلاثة أشهر. يجب أن تبلغ قوة الكزاز التي تم تطويرها بعد التحفيز ذروتها بسرعة.

يليه انخفاض بطيء حتى يتوقف التحفيز. في هذا الرسم البياني ، يمكن ملاحظة الانقباضات غير الناجحة التي لم يصل فيها الجيل الرابع إلى مستوى الهضبة قبل نهاية التحفيز ، أو التي أدى فيها المنبه إلى تقلص عضلات الرقبة. تم الحصول على حلقات عمل Lissajous التمثيلية هذه من آثار الطول والقوة عن طريق تمديد اللسان من 5٪ إلى 50٪ من الطول الأمثل.

يمكن بعد ذلك دمج الحلقات لإنشاء آثار حلقة Lissajous نموذجية. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في غضون ساعة ونصف تقريبا إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية كشف وعزل الأعصاب تحت اللسان وكيفية تحديد الخصائص اللزجة المرنة الميكانيكية للسان.

شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.