القابلية للذوبان في مجمعات الماء في المحلول باستخدام تركيبات من تجميع ذاتي الببتيد والأحماض الأمينية

الهدف العام من هذه الطريقة هو زيادة قابلية ذوبان المركبات الكارهة للماء في محلول مائي من أجل التسليم المحتمل في البيئات السريرية. تعالج هذه الطريقة قيدا رئيسيا في المجال الطبي وهو عدم استخدام المركبات الكارهة للماء في البيئات السريرية بسبب ضعف قابليتها للذوبان في الأنظمة المائية مثل الدم. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن إذابة المركبات الكارهة للماء في المحاليل المائية دون أي استخدام كبير للمذيبات المساعدة السامة.

أولا ، قم بتسمية أنبوبين من أنابيب الطرد المركزي المخروطية سعة 50 لترا لكل حمض أميني. تحضير قارورة كبيرة سعة لترين تحتوي على ماء نقي. بعد حساب كمية كل حمض أميني للتركيزات المطلوبة ، قم بوزن الكميات المناسبة من الأحماض الأمينية في أنابيب الطرد المركزي المعنية باستخدام ملعقة.

باستخدام ماصة سيريولوجية ، قم بإضافة 40 مل من الماء النقي إلى كل أنبوب طرد مركزي. بعد تغطية الأنابيب ، قم بتدوير العينات حتى تذوب. باستخدام ميزان تحليلي عالي الأداء، تزن ما يقرب من 0.2 ملليغرام زائد أو ناقص من الببتيد في قاع قارورة تلألؤ سعة 20 مل.

سجل الوزن الدقيق للببتيد على الغطاء وقم بلف الغطاء على القارورة. بعد ذلك ، قم بإدخال الحجم المناسب من محلول الأحماض الأمينية في كل قارورة من أجل الوصول إلى التركيز المطلوب من الببتيد ذاتي التجميع Sonicate العينات لمدة 10 دقائق في جهاز صوتي للحمام المائي في درجة حرارة الغرفة لضمان غمر المحاليل الموجودة في القارورة تماما في الحمام المائي. قم بإعداد محللين لمخزون الأدوية عن طريق الجمع بين مليغرام واحد من الدواء المطلوب مع الكمية المناسبة من DMSO ومليغرام آخر من الدواء مع الإيثانول.

ثم ، قم بدوامة كلا المحاللين لمدة 15 ثانية لإذابة الدواء تماما. بعد ذلك ، قم بتسمية أنابيب الطرد المركزي الدقيقة سعة 1.5 ملليلتر لكل تركيبة باستخدام الببتيد الذاتي التجميع والأحماض الأمينية والمذيبات المشتركة. أضف 10 ميكرولترات من محلول مخزون الدواء DMSO أو 20 ميكرولترا من محلول مخزون الإيثانول الدوائي إلى أنابيب الطرد المركزي الدقيقة المناسبة.

بعد ذلك ، أضف 990 ميكرولترا من محاليل الأحماض الأمينية الببتيد ذاتية التجميع إلى أنابيب الطرد المركزي الدقيقة التي تحتوي على محلول مخزون الدواء DMSO. أضف 980 ميكرولترا من محاليل الأحماض الأمينية الببتيد إلى أنابيب أجهزة الطرد المركزي الدقيقة التي تحتوي على محلول مخزون الإيثانول للدواء. دوامة جميع تركيبات الأدوية بقوة لمدة 30 ثانية.

بعد ذلك ، قم بتغطيتها بورق الألمنيوم واترك التركيبات لمدة 30 دقيقة قبل اختبار الذوبان. بعد 30 دقيقة ، قم بدوامة التركيبات بقوة لمدة 30 ثانية. ثم ، قم بالطرد المركزي للتركيبات عند 14 ، 220 مرة G لمدة دقيقة واحدة.

بعد الطرد المركزي ، قم بالفحص البصري لقاع أنابيب الطرد المركزي الدقيقة بحثا عن هطول الأمطار. من بين 40 تركيبة تم اختبارها في هذه الدراسة ، نجحت سبع تركيبات في إذابة الدواء الكارهة للماء ، الكركمين. تم تحديد اتجاهين رئيسيين من خلال تجميع الصيغ حسب المكونات.

يبدو أن الإيثانول مذيب مشارك أفضل لإذابة الكركمين ، ويبدو أن الأحماض الأمينية الموجبة الشحنة والليسين والأرجينين هي المكونات المثلى لإذابة الكركمين. من المثير للاهتمام ملاحظة تغير اللون للتركيبات التي تحتوي على الأرجينين والليسين والتي تكشف عن إذابة الكركمين في الحالة القلوية. بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء هذه التقنية في غضون ساعتين إلى ثلاث ساعات باستخدام المعدات المناسبة وإذا تم تحضير محاليل الأحماض الأمينية مسبقا.

بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء مزيد من الاختبار على تركيبات الأدوية القابلة للذوبان في المختبر وفي الجسم الحي من أجل تقييم ومقارنة الفعالية البيولوجية أو سلامة الدواء المذاب. بعد تطويرها ، مهدت طريقة الصياغة هذه الطريق لتوصيل مثبط مخزون كاره للماء يسمى PP@for الوقاية من إصابة الرئة الحادة. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تطبيق مزيج الببتيد والأحماض الأمينية ذاتية التجميع لإذابة أي دواء كاره للماء.