تقنية من كسبها انقباض الابهري عرضية في الفئران لتحريض تضخم البطين الأيسر

الهدف العام من هذا البروتوكول هو إنشاء انقباض الأبهر المستعرض طفيف التوغل في الفئران. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول تنفيذ انقباض الأبهر المستعرض في الفئران، مثل كيفية إنشاء ممر تحت قوس الأبهر. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في أنها بسيطة وسهلة الاستخدام ، وأنها تلغي الحاجة إلى تنبيب الفئران وتهويتها.

سأعرض الإجراء مع باحثة ما بعد الدكتوراه سيمونا نيمسكا التي ستقوم بإجراء خطوات إعداد قبل الجراحة ومراقبة ما بعد الجراحة. في يوم الإجراء ، احلق رقبة وصدر الفأر المخدر وقم بتطهير الجلد المكشوف بنسبة 70٪ من الإيثانول. بعد التأكد من المستوى المناسب من التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم ، قم بتأمين في وضع ضعيف على وسادة عمل نظيفة من الفلين.

بعد ذلك ، استخدم شفرة سكين رقم 11 لعمل شق عنق الرحم في خط الوسط الطولي 10 ملم من الشق فوق القص إلى منتصف الصدر لفضح القص. باستخدام حامل إبرة Crile-Wood ، قم بتمرير خياطة بقاء البولي بروبيلين أحادية 4-0 لسحب الغدة الدرقية. وقم بلصق الخيط على وسادة العمل.

ثم حرك وسادة العمل تحت المجهر الجراحي واستخدم ملقط جراحي مجهري لفصل عضلات ما قبل القصبة الهوائية بشكل صريح للكشف عن القصبة الهوائية. حرك الأطراف المغلقة لزوج من الملقط الجراحي المجهري المنحني برفق فوق القصبة الهوائية وخلف القص وافتح الملقط المنحني وأغلقه بعناية لتشريح غشاء الجنب بصراحة. استخدم ملقط الجراحة المجهرية المستقيمة لإمساك العضلات فوق الترقوة اليمنى وسحب الصدر برفق.

قم بتحريك الطرف السفلي من القص العظمي تحت القص ، وقم بإجراء بضع القص الجزئي العلوي من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات ، مع توجيه الجزء السفلي من بضع القص المصغر قليلا نحو اليسار. باستخدام حامل إبرة جراحية مجهرية ، قم بتمرير خياطة بقاء البولي بروبيلين أحادية الشعيرات 7-0 من الداخل إلى الخارج للمساحة الوربية الثانية على كل جانب من قطع القص المصغر. استخدم خيوط بقاء البولي بروبيلين أحادية الشعيرات 7-0 لنشر الحواف القصية على كل جانب.

واستخدم الملقط المنحني لتحريك عضلات ما قبل القصبة الهوائية والدهون المنصفية والغدة الصعترية جانبا لتصور قوس الأبهر تحت تكبير منخفض الطاقة. لفضح الأنسجة الرخوة تحت قوس الأبهر ، أدخل ملقط الربط أسفل القوس مع إغلاق الأطراف وافتح الملقط برفق. استخدم ملقط ربط ثان لعمل نفق في الأنسجة الرخوة أسفل قوس الأبهر عن طريق فتح وإغلاق الملقط في الأنسجة الرخوة برفق.

ثم مرر قطعة من 6-0 رباط حريري مترابطة عبر عين مساعد ربط تحت قوس الأبهر ، باستخدام ملقط ربط لاسترداد الخيط من بين أصل الشرايين السباتية اليمنى واليسرى المشتركة. أصعب خطوة في الإجراء هي إدخال الخيط تحت قوس الأبهر. إن العناية الكافية أثناء إنشاء النفق تحت القوس سيجعل وضع الخيط اللاحق أسهل.

استخدم الآن الملقط المستقيم لوضع إبرة ضعيفة عيار 27 بجوار قوس الأبهر واستخدم ملقطي الربط لربط الخيط بإحكام حول الإبرة والشريان الأورطي بين الشرايين السباتية اليمنى وغير اليسرى المشتركة. عندما يتم تأمين الخيط ، قم بإزالة الإبرة بسرعة ولكن برفق لتحقيق تضييق قطره 0.4 ملم وانقباض الأبهر عرضي قابل للتكرار من 65 إلى 70٪. بعد التأكد من الإرقاء ، قم بإزالة خيوط بقاء البولي بروبيلين الأحادية 7-0 المستخدمة لنشر الحواف القصية.

استخدم حامل إبرة جراحية مجهرية لتمرير خياطة بسيطة من مادة البولي بروبيلين أحادية الشعيرات 6-0 من الخارج إلى داخل المساحة الوربية الثانية اليسرى ومن الداخل إلى الخارج من المساحة الوربية الثانية اليمنى. استخدم حامل الإبرة Crile-Wood لجمع الحواف القصية مع خياطة البولي بروبيلين أحادية الشعيرات 6-0. وأغلق الجلد بخياطة تشغيل البولي بروبيلين أحادية الشعيرات 5-0 في طبقة واحدة باستخدام حامل إبرة Crile-Wood.

ثم ضع مرة أخرى في قفصه في وضع الانبطاح تحت الاحترار مع المراقبة حتى الشفاء التام. يمكن التحقق من فعالية تحريض تضخم البطين الأيسر من خلال مقارنة نسب وزن القلب إلى وزن الجسم للحيوانات الوهمية بحيوانات التجارب في الأيام الثالثة والسابعة و14 و28 بعد الجراحة. تزداد النسبة بشكل كبير في ذات النطاقات مقارنة بالمجموعات الوهمية من اليوم السابع بعد الجراحة ، وظلت أعلى بكثير في الضيقة حتى اليوم 28 بعد الجراحة.

ترجع الزيادة الملحوظة في نسب وزن القلب إلى الجسم فقط إلى ارتفاع نسبة وزن جسم البطين الأيسر حيث تظل نسبة وزن جسم البطين الأيمن قابلة للمقارنة بين انقباض الأبهر المستعرض التي يتم تشغيلها بشكل وهمي خلال فترة المراقبة بأكملها. بالإضافة إلى ذلك ، فإن تعبير mRNA للببتيد الصوديوم في الدماغ ، وهو تحكم إيجابي في تضخم القلب في البطينين الأيسر ، أعلى بكثير في ذات النطاقات الأبهرية مقارنة بالحيوانات التي يتم تشغيلها في اليوم 14 ، مما يزيد من صحة كفاءة التقنية. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في 20 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم استخدام مساعد ربط وربط ملقط مشابه لتلك المستخدمة في بروتوكولنا. بعد تطويرها ، قدمت هذه التقنية نموذجا موثوقا ومبسطا لاستكشاف الآليات التي ينطوي عليها نشأة تضخم البطين الأيسر الناجم عن الحمل الزائد للضغط. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء انقباض الأبهر المستعرض طفيف التوغل في الفئران مع التركيز بشكل خاص على المرور تحت قوس الأبهر.

لا تنس أن إنشاء الممر تحت قوس الأبهر هو الخطوة الأكثر أهمية في الإجراء ، كما أن استخدام مساعد الربط وربط الملقط يقلل بشكل كبير من خطر إصابة القوس.