Name: تقنيات التحقيق تشريح النظام المرئي النمل (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: استكشف تقنيات المجهر الضوئي والإلكتروني لدراسة تشريح عين النملة وتقدير معلمات الرؤية مثل الحساسية البصرية والحدة البصرية. هذه الطرق توفر نظرة شاملة على النظام البصري للحشرات.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

نحن ممتنون زيل يوخن وبول كوبر والبرقي [غرينر] لتبادل معارفهم في تشريح الحشرات وعلى ما أبدوه من العديد من التقنيات التي وصفناها هنا. نحن ممتنون للموظفين الموهوبين وداعمة في المركز للفحص المجهري متقدمة في انو والوحدة الفحص المجهري في مكو. وأيد هذا العمل على منحة الدراسات عليا للصحائف والمنح من "مجلس البحوث الأسترالي" (DE120100019، FT140100221، DP150101172).

<ol><li>Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+homing%3A+an+insect+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Visual homing: an insect perspective.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 22, 285-293 (2012).</li>
<li>Wehner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Desert+ant+navigation%3A+how+miniature+brains+solve+complex+tasks%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Desert ant navigation: how miniature brains solve complex tasks.</a> J. Comp. Physiol. A. 189, 579-588 (2003).</li>
<li>Fent, K., Wehner, R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17779641">Ocelli: a celestial compass in the desert ant Cataglyphis.</a> Science. 228, 192-194 (1985).</li>
<li>Warrant, E. J., Dacke, M. <a target="_blank" href="http://physiologyonline.physiology.org/content/31/3/182">Visual navigation in nocturnal Insects.</a> Physiology. 31, 182-192 (2016).</li>
<li>Taylor, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dual+function+of+Orchid+bee+ocelli+as+revealed+by+x-ray+microtomography%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">The dual function of Orchid bee ocelli as revealed by x-ray microtomography.</a> Curr. Biol. 26, 1-6 (2016).</li>
<li>Hölldobler, B., Wilson, E. O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aH%C3%B6lldobler%2C+B+%22The+Ants%22">The Ants</a>. , Springer-Verlag. Berlin Heidelberg. (1990).</li>
<li>Ali, T. M. M., Urbani, C. B., Billen, J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF01140185">Multiple jumping behaviors in the ant Harpegnathos saltator.</a> Naturwissen. 79, 374-376 (1992).</li>
<li>Weiser, M. D., Kaspari, M. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.0307-6946.2006.00759.x/abstract">Ecological morphospace of New World ants.</a> Ecol. Entomol. 31, 131-142 (2006).</li>
<li>Bulova, S., Purce, K., Khodak, P., Sulger, E., O'Donnell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Into+the+black+and+back%3A+the+ecology+of+brain+investment+in+Neotropical+army+ants+%28Formicidae%3A+Dorylinae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissen%22%5BJournal%5D)">Into the black and back: the ecology of brain investment in Neotropical army ants (Formicidae: Dorylinae).</a> Naturwissen. 103, 3-4 (2016).</li>
<li>Narendra, A., Reid, S. F., Hemmi, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+twilight+zone%3A+ambient+light+levels+trigger+activity+in+primitive+ants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">The twilight zone: ambient light levels trigger activity in primitive ants.</a> Proc. R. Soc. B. 277, 1531-1538 (2010).</li>
<li>Narendra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caste-specific+visual+adaptations+to+distinct+daily+activity+schedules+in+Australian+Myrmecia+ants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+R.+Soc.+B%22%5BJournal%5D)">Caste-specific visual adaptations to distinct daily activity schedules in Australian Myrmecia ants.</a> Proc. R. Soc. B. 278, 1141-1149 (2011).</li>
<li>Moser, J., et al. <a target="_blank" href="https://www.treesearch.fs.fed.us/pubs/9853">Eye size and behaviour of day-and night-flying leafcutting ant alates.</a> J. Zool. 264, 69-75 (2004).</li>
<li>Stöckl, A. L., Ribi, W. A., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptations+for+nocturnal+and+diurnal+vision+in+the+hawkmoth+lamina%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Adaptations for nocturnal and diurnal vision in the hawkmoth lamina.</a> J. Comp. Neurol. 524, 160-175 (2016).</li>
<li>Zeil, J. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF00605027">Sexual dimorphism in the visual system of flies: the compound eyes and neural superposition in Bibionidae (Diptera).</a> J. Comp. Physiol. A. 150, 379-393 (1983).</li>
<li>Dacke, M., Nordström, P., Scholtz, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twilight+orientation+to+polarised+light+in+the+crepuscular+dung+beetle+Scarabaeus+zambesianus%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Twilight orientation to polarised light in the crepuscular dung beetle Scarabaeus zambesianus.</a> J. Exp. Biol. 206, 1535-1543 (2003).</li>
<li>Greiner, B., Ribi, W. A., Warrant, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+optical+adaptations+for+nocturnal+vision+in+the+halictid+bee+Megalopta+genalis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and optical adaptations for nocturnal vision in the halictid bee Megalopta genalis.</a> Cell Tiss Res. 316, 377-390 (2004).</li>
<li>Warrant, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nocturnal+vision+and+landmark+orientation+in+a+tropical+halictid+bee%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Nocturnal vision and landmark orientation in a tropical halictid bee.</a> Curr. Biol. 14, 1309-1318 (2004).</li>
<li>Lattke, J. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLattke%2C+JE+%22Ants+Standard+Methods+for+Measuring+and+Monitoring+Biodiversity%22">Ants Standard Methods for Measuring and Monitoring Biodiversity</a>. , 155-171 (2000).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRibi%2C+WA+%22A+Handbook+in+Biological+Electron+Microscopy%22">A Handbook in Biological Electron Microscopy</a>. , 1-106 (1987).</li>
<li>Narendra, A., Ramirez-Esquivel, F., Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compound+eye+and+ocellar+structure+for+walking+and+flying+modes+of+locomotion+in+the+Australian+ant%2C+Camponotus+consobrinus%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Compound eye and ocellar structure for walking and flying modes of locomotion in the Australian ant, Camponotus consobrinus.</a> Sci. Rep. 6, 22331(2016).</li>
<li>Narendra, A., Greiner, B., Ribi, W. A., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+and+dark+adaptation+mechanisms+in+the+compound+eyes+of+Myrmecia+ants+that+occupy+discrete+temporal+niches%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Light and dark adaptation mechanisms in the compound eyes of Myrmecia ants that occupy discrete temporal niches.</a> J. Exp. Biol. 219, 2435-2442 (2016).</li>
<li>Ribi, W. A., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+visual+system+of+the+Australian+%26%2334%3BRedeye%26%2334%3B+cicada+%28Psaltoda+moerens%29%5BTitle%5D)+AND+%22Arthr.+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">The visual system of the Australian &#34;Redeye&#34; cicada (Psaltoda moerens).</a> Arthr. Struct. Dev. 44, 574-586 (2015).</li>
<li>Ribi, W. A., Warrant, E. J., Zeil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+organization+of+honeybee+ocelli%3A+regional+specializations+and+rhabdom+arrangements%5BTitle%5D)+AND+%22Arthr.+Struct.+Dev%22%5BJournal%5D)">The organization of honeybee ocelli: regional specializations and rhabdom arrangements.</a> Arthr. Struct. Dev. 40, 509-520 (2011).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colour+receptors+in+the+eye+of+the+digger+wasp%2C+Sphex+cognatus+Smith%3A+evaluation+by+selective+adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Colour receptors in the eye of the digger wasp, Sphex cognatus Smith: evaluation by selective adaptation.</a> Cell Tiss. Res. 195, 471-483 (1978).</li>
<li>Ribi, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+and+migration+of+screening+pigments+in+the+retina+of+Pieris+rapae+L.+%28Lepidoptera%2C+Pieridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tiss.+Res%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure and migration of screening pigments in the retina of Pieris rapae L. (Lepidoptera, Pieridae).</a> Cell Tiss. Res. 191, 57-73 (1978).</li>
<li>Lau, T., Gross, E., Meyer-Rochow, V. B. <a target="_blank" href="https://www.eje.cz/pdfs/eje/2007/03/14.pdf">Sexual dimorphism and light/dark adaptation in the compound eyes of male and female Acentria ephemerella (Lepidoptera: Pyraloidea: Crambidae).</a> Eur. J. Entomol. 104, 459-470 (2007).</li>
<li>Wipfler, B., Pohl, H., Yavorskaya, M. I., Beutel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+methods+for+analysing+insect+structures+-+the+role+of+morphology+in+the+age+of+phylogenomics%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">A review of methods for analysing insect structures - the role of morphology in the age of phylogenomics.</a> Curr. Opin. Insect Sci. 18, 60-68 (2016).</li>
<li>Streinzer, M., Brockmann, A., Nagaraja, N., Spaethe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+and+caste-specific+variation+in+compound+eye+morphology+of+five+honeybee+species%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Sex and caste-specific variation in compound eye morphology of five honeybee species.</a> PLoS ONE. 8, e57702(2013).</li>
<li>Somanathan, H., Warrant, E. J., Borges, R. M., Wallén, R., Kelber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolution+and+sensitivity+of+the+eyes+of+the+Asian+honeybees+Apis+florea%2C+Apis+cerana+and+Apis+dorsata%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Resolution and sensitivity of the eyes of the Asian honeybees Apis florea, Apis cerana and Apis dorsata.</a> J. Exp. Biol. 212, 2448-2453 (2009).</li>
</ol>

الكتاب يعلن لا تضارب المصالح.

مجموعة الأساليب المذكورة أعلاه تسمح بالتحقيق فعال في النظام البصري للنمل والحشرات الأخرى. إبلاغ هذه التقنيات فهمنا للقرار أخذ العينات، والحساسية الضوئية والحساسية الاستقطاب المحتملة العين تجري دراستها. هذه المعرفة يوفر أساسا هاما للتحقيق الفسيولوجية والسلوكية في قدراتها البصرية. وعلاوة على ذلك، بينما ركزت أساليب مفصلة هنا في النظم البصرية النمل، هذه التقنيات يمكن استخدامها على الحشرات الأخرى، مع تعديلات طفيفة في البروتوكول (مثل، زيادة مدة التثبيت وتسلل في الأنسجة أكثر سمكا) . استخدمت بروتوكولات تعديل طفيف لتوصيف...

الرؤية وسيلة حسية هامة لمعظم الحيوانات. وتتمثل رؤية حاسمة خصوصا في سياق التنقل لتحديد الأهداف، وضع والتقيد بالتوجيهات، والحصول على معلومات البوصلة1،2. الحشرات كشف المعلومات المرئية باستخدام زوج من العيون المركبة، وفي بعض الحالات، استدعاء واحد إلى ثلاثة عيون بسيطة وضعها دورسالي عسيلي3،،من45.
عيون النمل تتسم بأهمية خاصة لأنه، بينما النمل رائعة متنوعة، المحافظة على بعض الخصائص الرئيسية عبر الأنواع. وعلى الرغم من تباين مثيرة في التشريح، والحجم، والإيكولوجيا، الغالبية العظمى من الأنواع هي eusocial وتعيش في مستعمرات؛ كنتيجة لذلك، الأنواع المختلفة تواجه تحديات بصرية مماثلة من حيث التنقل ذهابا وإيابا بين مكاناً مركزياً والموارد. عبر النمل بوبلان العين الأساسية نفسها يمكن ملاحظتها في الحيوانات تتراوح بين 0.5-26 مم في طول الجسم، من نهاري حصرا للأنواع دقة الليلي، ومن بطء يمشي تحت الأرض للقفز الحيوانات المفترسة البصرية6،7، 8،،من910. كل هذه الفوارق المذهلة في علم البيئة والسلوك تثير التباديل لا حصر لها نفس الهياكل الأساسية العين لتتناسب مع بيئات مختلفة وأنماط الحياة، وأحجام الجسم11،12. نتيجة لذلك، دراسة البيئة البصرية من النمل يوفر كنز حقيقي من إمكانيات للمحقق العزم.
فهم النظام المرئي للحشرات ضروري لاكتساب نظرة ثاقبة في قدراتهم السلوكية. وهذا يتضح من الدراسات التكاملية التي لطيف الجمع بين علم التشريح بعلم البيئة والسلوك بنجاح كبير في عدد قليل من مجموعات الحشرات (مثلالمراجع13،،من1415،16، 17)-القليل جداً على الرغم من أن مجال الملاحة النمل والنمل السلوك بشكل عام كانت ناجحة تماما، انصب على رؤية النمل خارج عدد قليل من الأنواع المحددة. هنا، نحن سوف تفاصيل بشأن التقنيات التي تشارك في التحقيق في تصميم العين من النمل. في حين أننا سنركز على النمل، هذه التقنيات يمكن تطبيقها، مع تعديلات طفيفة، للحشرات الأخرى، أيضا.

<table><tbody><tr><td>Ant</td><td>Myrmecia midas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>مجهر مجسم</td><td>Leica M205 FA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sputter coater</td><td>Pro Sci Tech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>الإيثانول</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>طبق بتري</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>تشريح المجهر</td><td>Leica MZ6</td><td></td><td></td></tr><tr><td>دبوس</td> <td>الحشراتطلاء أظافر ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>عديم اللون</td><td>بدون علامة تجارية: من أي متجر</td><td></td><td></td>مستحضرات تجميل</tr><tr><td>شريحة زجاجية</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>شفرة حلاقة</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Foreceps</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>غطاء زلة</td><td>ProSciTech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>مجهر مركب</td><td>Leica DM5000 B</td><td></td><td></td></tr><tr><td>جلوتارالديهايد</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>بارافورماليدهيد</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>كلوريد البوتاسيوم (KCl)</td> <td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ثنائي الصوديوم فوسفات الهيدروجين (Na2HPO4)</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>البوتاسيوم ثنائي فوسفات الهيدروجين (KH2PO4)</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>الصوديوم كلوريد الصوديوم (كلوريد الصوديوم)</td> <td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>أوزميوم رباعي أكسيد</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>راتنجات الايبوكسي</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ماصة باستور</td><td>سيجما ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>تولويدي بلو</td><td>سيجما ألدريتش ألدريتش</td><td></td><td></td></tr><tr><td>هوت</td> بلايت <td>ريشرت هونج كونج 120</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

تقنيات التحقيق تشريح النظام المرئي النمل

Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

توضح هذه المقالة مجموعة من التقنيات في ضوء الفحص المجهري (LM) والمجهر الإلكتروني (م) التي يمكن استخدامها لدراسة تشريح العين الداخلي والخارجي للحشرات. وتشمل هذه التقنيات التقليدية النسيجي الأمثل للعمل في عيون النمل وتكييفها للعمل بالتضافر مع تقنيات أخرى مثل مجهر إلكتروني (TEM) والمسح الضوئي المجهر الإلكتروني (SEM). هذه التقنيات، على الرغم من المفيد إلى حد كبير، يمكن أن تكون صعبة ميكروسكوبيست مبتدئ، حيث انصب كبيرة في هذه المقالة حول استكشاف الأخطاء وإصلاحها والأمثل للعينات المختلفة. تقديم معلومات عن تقنيات التصوير للعينة كاملة (صور مجهرية ووزارة شؤون المرأة)، ومناقشة مزايا وعيوب. ونحن تسليط الضوء على الأسلوب المستخدم في تحديد أقطار العدسة للعين كامل ومناقشة تقنيات جديدة لتحسين. وأخيراً، ونحن نناقش التقنيات المستخدمة في إعداد العينات لل، ول م تمزيقها وتلطيخ، وتصوير هذه العينات. ونحن نناقش العقبات التي واحدة قد تأتي عبر عند إعداد عينات وأفضل طريقة للتنقل في جميع أنحاء لها.

تمكين الأساليب الموصوفة هنا دراسة مفصلة عن البسيطة والمركبة أعين النمل. التصوير الظهرية ويرى الرأس باستخدام تقنيات فوتوميكروجرافي Z-المكدس يسمح أحد للحصول على نظرة عامة لتخطيط النظام المرئي (الشكل 1). هذا هو الإعداد الجيد لتشريح وتحديد زاوية تقطيع المطلوبة. هذا الأسلوب مفيد أيضا لأخذ القياسات مثل عرض الرأس وطول العين، وأقطار العدسة أوسيلار. تصوير وزارة شؤون المرأة كما يعطي لمحة مفصلة الصور ولكن بالإضافة إلى ذلك تتيح الحصول على التكبير عالية وصور عالية الدقة. ...

توضح هذه المقالة مجموعة من تقنيات الضوء والمجهر الإلكتروني لدراسة تشريح العين الداخلي والخارجي للحشرات. وهذه تشمل العديد من التقنيات التقليدية الأمثل للعمل في عيون النمل، مفصلة واستكشاف الأخطاء وإصلاحها، واقتراحات للتحسين للعينات المختلفة والمناطق ذات الاهتمام.

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

الهدف العام لهذه المجموعة من تقنيات الفحص المجهري هو الحصول على معلومات تشريحية مفصلة للنظام البصري للنمل. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في معالجة الأسئلة الرئيسية في مجال البيئة البصرية ، لتقدير المعلمات البصرية المختلفة ، مثل الحساسية البصرية ، حدة البصر ، وحجم المجال البصري. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تعطي نظرة عامة شاملة على نظام بصري معين.يمكن أيضا تكييفه للاستخدام مع العديد من الأنواع المختلفة. لعمل نسخ متماثلة من القرنية ، استخدم النمل المحفوظ في الإيثانول أو مركب على دبوس أو في البلاستيسين. إذا كان الرأس كبيرا نسبيا ، فيمكن إزالة أجزاء الجسم المتبقية.للبدء ، انشر طلاء الأظافر سريع الجفاف عديم اللون بسرعة على العين ، باستخدام عود أسنان ، دون خدش العين. دع الملمع يثبت في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، استخدم دبوس حشرات رفيع لرفع النسخة المتماثلة برفق من كبسولة الرأس المحيطة بالعين.وباستخدام الملقط ، أمسك بجزء النسخة المتماثلة الذي يغطي الرأس ، ولكن ليس العين. بعد ذلك ، ضع النسخة المتماثلة على شريحة زجاجية. هناك ، استخدم شفرة حلاقة لتقليم المواد الزائدة حول العين بعناية ، مع تأمين النسخة المتماثلة.قبل وضع زلة غطاء فوق النسخة المتماثلة ، قد يكون من الضروري عمل ثلاث إلى أربع شرائح شعاعية جزئية دقيقة للمساعدة في تسويتها. عند وضع شريحة الغطاء، قم بتوثيق اتجاه النسخة المتماثلة على الشريحة. بعد ذلك ، أغلق زلة الغطاء ، باستخدام لمسات صغيرة من طلاء الأظافر على الزوايا ، مع التأكد من أن السائل لا يلمس النسخة المتماثلة.ثم تكون الشريحة جاهزة للتصوير باستخدام مجهر مركب. للبدء ، قم بتخدير النملة ووضعها في طبق بتري. إذا كانت الصبغة بحاجة إلى التكيف مع الظروف الساطعة أو النقطية ، فيجب القيام بذلك لبضع ساعات قبل التشريح.إذا بدا أن ظروف النقطة قد تم الحفاظ عليها ، فيجب إجراء التشريح في الضوء الأحمر. أولا ، قم بإزالة الهوائيات باستخدام الملقط. ثم قم بإزالة أجزاء الفم باستخدام شفرة حلاقة حادة.في العينات الكبيرة ، قم بقطع الجزء الأمامي من العين. في عينة صغيرة ، قم بقص أقرب ما يمكن من العينين ، دون شد الدماغ ، لأن ذلك قد يؤدي إلى تمزيق شبكية العين. بعد ذلك ، قم بتوجيه الرأس وقم بعمل شق عرضي يزيل الجزء البطني من الرأس ، والذي قد يشمل جزءا من العين البطنية.بعد ذلك ، افصل كبسولة الرأس بشق إكليلي ، خلف العين المركبة. في هذا المثال ، يتم إجراء الشقوق المستعرضة والإكليلية في وقت واحد. أخيرا ، انقل كبسولة الرأس المقطوعة بالعيون المركبة إلى مثبت مثلج بارد.من المهم تنفيذ هذه الخطوات بسرعة ، لمنع الأنسجة من التدهور ، لذلك يجب أن يدخل النسيج في المثبت في غضون دقيقتين من الشق الأول. باتباع بروتوكول النص ، قم بإعداد العينة واستنزاف الراتنج الزائد. بعد ذلك ، ضع العينة على الكتلة في وضع رأسي ، وإذا لزم الأمر ، استخدم القليل من الراتنج الزائد لتثبيتها هناك.قم بتسمية الكتلة بملصقات ورقية مدمجة في الراتنج أو متصلة بالكتلة. ثم قم بمعالجة الراتنج في فرن 60 درجة مئوية لمدة 12 إلى 14 ساعة. بمجرد الشفاء ، قم بتحميل العينة في مظروف نظيف.بعد ذلك ، قم بتركيب الكتلة على ظرف ميكروتوم. قبل التقسيم ، تأكد أولا من أن اتجاه العينة مناسب لمستوى التقسيم. تحت مجهر تشريح ، قم بقص كتلة الراتنج باستخدام شفرة حلاقة.ثم أعد تركيب الظرف على ذراع الميكروتوم ، وقم بزاوية العينة. بعد ذلك ، املأ قارب السكين بالماء المقطر باستخدام حقنة بفلتر 0.45 ميكرون. قم بتحميل الماء حتى حافة السكين.في بعض الأماكن قد يكون الغضروف المفصلي محدبا. بعد ذلك ، صفي القارب حتى يصبح الغضروف المفصلي مقعرا قليلا ، لكنه لا يزال يصل إلى حافة السكين. الآن ، أحضر السكين ببطء وحذر نحو العينة ، وقم بمحاذاة الكتلة مع السكين.قم بإجراء فحوصات متكررة عبر العين. عندما تكون السكين قريبة ولكن لم تقطع العينة بعد ، ابدأ في تحريك عجلة الميكروتوم لإكمال النهج. بعد ذلك ، عند الاقتراب من منطقة الاهتمام في الكتلة ، اضبط سمك تجميع القسم.في هذه الحالة ، يتم استخدام سكين الماس لعمل أقسام ميكرون واحد. ثم ، من المحقنة المجهزة بالفلتر ، ضع سلسلة من قطرات صغيرة من الماء المقطر على شريحة. لجمع قسم من الاهتمام ، التقطه باستخدام أداة رمش العين.وبعناية ، قم بتعويم القسم الذي تم جمعه على قطرة ماء. استمر في تحميل أكبر عدد ممكن من الأقسام على كل شريحة. عندما يتم تحميل الشريحة بالكامل ، قم بنقلها إلى لوح ساخن عند 60 درجة مئوية لتبخر الماء ، ولصق الأقسام بالشريحة.يستغرق هذا حوالي 15 إلى 20 دقيقة. بعد ذلك ، استخدم حقنة أخرى مجهزة بمرشح لإيداع قطرة من صبغة التولودين الزرقاء على الشريحة. ضع القطرة على أحد طرفي الشريحة وانشرها باستخدام حافة الإبرة دون لمس الأقسام أو كشطها.ثم ضع الشريحة على اللوحة الساخنة لمدة 20 إلى 60 ثانية. بعد ذلك ، رش الشريحة بالماء المقطر من زجاجة الغسيل ، واستخدم اللوح الساخن لتجفيفها. في وقت لاحق ، تحقق من الشرائح الموجودة أسفل المجهر المركب ثم قم بتصويرها.تتيح التقنيات الموصوفة دراسة مفصلة لعيون النمل البسيطة والمعقدة. يوفر تصوير المنظر الظهري للرأس باستخدام التصوير المجهري Z-Stack نظرة عامة على تخطيط النظام المرئي المفيد لإجراء القياسات الإجمالية. يوفر تصوير الترجمة عبر محرك البحث (SEM) التفاصيل اللازمة لحل العيون الصغيرة والتفاصيل اللازمة لتحديد شكل كل عدسة.تظهر المقاطع شبه الرفيعة التي تم تصويرها باستخدام الفحص المجهري الضوئي التشريح الداخلي للعين. يمكن قياس أبعاد العدسة والمخروط البلوري والمخططات هذه الدقة والتكبير. يمكن أيضا دراسة الخلايا الصبغية ووجود المسالك المخروطية وتوزيعات شكل الربدومير.توفر الأقسام الرقيقة للغاية التي تم تصويرها بواسطة TEM معلومات البنية الفائقة ، مثل اتجاه microvillar ، وعلى سبيل المثال ، عرض المسالك المخروطية البلورية الضيقة. أثناء تجربة هذه التقنية ، من المهم حقا التحلي بالصبر ، واستخدام الأدوات النظيفة ، واستخدام المحاليل الحديثة. بعد هذه التجارب ، يمكن بعد ذلك إجراء تجارب سلوكية أو فسيولوجية إضافية.ستخبرنا هذه التجارب بالقدرات البصرية الوظيفية للحيوان ، بالنسبة لتشريح العين. يتيح لنا استخدام هذه التقنيات استكشاف تنوع الأنظمة البصرية ، وكيف تطورت لتناسب أنماط الحياة المختلفة والبيئات المختلفة ، في أنواع مختلفة من النمل. على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة للنظام البصري للنمل ، إلا أنه يمكن استخدامها أيضا لدراسة الجهاز البصري للحشرات الأخرى ، وكذلك الأنسجة العصبية الأخرى.لا تنس أن العمل مع المثبتات والراتنجات أمر خطير للغاية ويجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل العمل في غطاء الدخان وارتداء قفازات النتريل.

techniques-for-investigating-the-anatomy-of-the-ant-visual-system

Research

JoVE Journal

Environment

البيئة

الرئيسيات غير البشرية هي الأنواع الهامة متعدية لفهمنا للتنمية ، والشيخوخة. يجوز للمنظمة التشريحي للشبكية الرئيسيات توفير معلومات هامة في الظروف العادية والمرضية لدى البشر.

عبارة في الدماغ : تشريح العين الرئيسيات

إعداد وتطوير الكبار ذبابة الفاكهة الأمخاخ والشبكية للتصوير لايف

تقنيات لتصور التهندس الخلوي الشبكية المجاورة مباشرة لأقطاب الفردية داخل مشجعا في شبكية العين.

تقنيات لمعالجة العيون تزرع لهم تعويضات الشبكية لتحليل المرضية المترجمة

نحن هنا تظهر كيفية تحديد عدد والتوزيع المكاني للمناطق نشطة متشابك في المستقبلات الضوئية البطن ذبابة الفاكهة، سلط الضوء مع الواسمات الجزيئية المشفرة وراثيا، وتعديل على بعد التعرض لفترات طويلة للضوء.

تحليل متشابك التحوير من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; خلايا مستقبلة للضوء بعد التعرض للضوء لفترات طويلة

نقدم بروتوكول الاشراط الكلاسيكي للنمل تسخر تسمح للباحثين بدراسة تشكيل التعلم والذاكرة البصرية على مستوى تحليل غير ممكن مع الانتقال بحرية الأفراد.

الاشراط الكلاسيكي البصرية في الخشب النمل

يصف هذا البروتوكول ثلاث خطوات لإعداد الفصوص البصرية لليرقات وذبابة الفاكهة البالغة للتصوير: 1) تشريح الدماغ ، 2) الكيمياء الهيستولوجية المناعية و 3) التركيب. يتم التركيز على الخطوة 3 ، حيث يلزم وجود اتجاهات تركيب مميزة لتصور هياكل الفص البصري المحددة.

تشريح وكيمياء الهيستولوجية المناعية وتركيب أدمغة ذبابة الفاكهة اليرقية والبالغة لتصور الفص البصري

يوضح البروتوكول الحالي طريقة بسيطة لتتبع إسقاطات الغلوتامات للمنطقة البطنية (VTA) إلى قرن آمون. تم الجمع بين التحفيز الضوئي للخلايا العصبية الغلوتامات VTA مع تسجيل CA1 لإظهار كيفية محطات الغلوتامات VTA تعدل CA1 معدل إطلاق الهرمي المفترض في الجسم الحي.

مجتمعة في فيفو التشريحية والوظيفية تتبع من محطات الغلوتامات منطقة البطن في قرن آمون

يصف هذا البروتوكول إجراء التشريح وحالة الزرع والتصوير الحي لنظام إكسبلانت الهوائيات والدماغ لدراسة تجميع الدائرة الحامية الشمية.

نظام Explant لدراسات التصوير بالفاصل الزمني لتجميع الدوائر الشمية في ذبابة الفاكهة

يصف البروتوكول هنا قياس التنظيم المكاني للمحاور البصرية لعيون الذبابة المنزلية ، التي تم تعيينها بواسطة جهاز أوتوماتيكي ، باستخدام ظاهرة التلميذ الزائف وآلية التلميذ لخلايا المستقبلات الضوئية.

الرسم الآلي للفضاء البصري للعيون المركبة الذبابة المنزلية

نصف هنا طرقا لتحفيز وتحليل إعادة تشكيل الخبرة الشمية المعتمدة على الكبيبات المشبكية لفص الهوائي في دماغ ذبابة الفاكهة اليافعة.

إعادة تشكيل تعتمد على الخبرة للاتصال العصبي الحسي الشمي للدماغ اليافع في فترة حرجة مبكرة من الحياة

استكشف تقنيات المجهر الضوئي والإلكتروني لدراسة تشريح عين النملة وتقدير معلمات الرؤية مثل الحساسية البصرية والحدة البصرية. هذه الطرق توفر نظرة شاملة على النظام البصري للحشرات.

تقنيات التحقيق تشريح النظام المرئي النمل

استكشف المزيد من الفيديوهات