تحديد المواقع المناسبة وضبط النفس من أطرافهم هند الفئران لتصوير مركزة عالية الدقة للعظام باستخدام الهندسة المعمارية الدقيقة في فيفو المحسوبة الدقيقة التصوير المقطعي

هذه الورقة يرشد المستخدمين في فيفو الماسحات الضوئية الصغيرة المحسوبة التصوير المقطعي (µCT) كيفية تخدير، وموقف وتقييد أطرافهم هند من الفئران للحد الأدنى من الحركة أثناء التصوير عالي الدقة من الساق بشكل صحيح. والنتيجة هي صور عالية الجودة التي يمكن معالجتها بدقة تحديد مقدار العظام الصغيرة-الهندسة المعمارية.

الهدف العام من هذا الإجراء هو وضع الطرف الخلفي للفئران وتقييده بشكل صحيح للحصول على صور مركزة عالية الدقة للبنية الدقيقة للعظم في الظنبوب القريب وعظم الفخذ البعيد باستخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق In Vivo. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول الحصول على صور In Vivo بواسطة التصوير المقطعي المحوسب الصغير وتوفر إرشادات لتحديد المواقع المناسبة وضبط النفس للطرف الخلفي. الميزة الرئيسية لهذا الإجراء هي أنه يمكن الحصول على صور متسقة للغاية ثم استخدامها لقياس التغيرات الدقيقة في بنية العظام التي تحدث أثناء الدراسات الطولية.

ضع الجرذ في وضع ضعيف على سرير ماسح ضوئي من ألياف الكربون. بعد التأكد من المستوى المناسب من التخدير بسبب عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، ضع تزييت العين على عيون. قم بتقييد القدم في أنبوب رغوي مرن مع تمديد أصابع القدم من طرف واحد ، وقم بتطبيق شمع الأسنان لتثبيت القدم بإحكام داخل الرغوة ، مع الحرص على عدم امتداد الرغوة على المنطقة المعنية.

أغلق الأنبوب بإحكام بشريط وأدخل الرغوة في الأنبوب. تأكد من وجود ملاءمة محكمة بين الرغوة والأنبوب وحرك الأنبوب في سرير الماسح الضوئي للأشعة السينية. مد الطرف الخلفي حتى تصبح الساق مشدودة.

تأكيد عدم وجود فرط في التمدد عن طريق ملامسة وضع مفصل الركبة وسحب الطرف الخلفي المقابل والذيل باتجاه الجذع. مد الطرف الخلفي بعيدا عن الجذع حتى تصبح الساق مشدودة تأكد من أن الأشعة السينية ستمر عبر جميع مناطق العظم بنمط مماثل قدر الإمكان. بعد ذلك ، قم بمسح الجانب اللاصق لعدة قطع من الشريط اللاصق واستخدم الشريط المعدل لتأمين الطرف الخلفي والذيل غير الممتدين ، بحيث يظلان خارج مجال رؤية المسح.

بعد ذلك ، قم بتأمين مخروط الوركين والكتفين والرأس والأنف في سرير المسح. لف في غلاف بيطري للحد من فقدان الحرارة وتصوير عن طريق التصوير المقطعي المحوسب الدقيق باستخدام المعلمات التجريبية المناسبة وفقا للبروتوكولات القياسية. عندما يتم الحصول على جميع الصور ، اسمح للحيوان بالتعافي في قفص فردي ساخن جزئيا مع المراقبة حتى الاستلقاء الكامل.

الوضع الصحيح للطرف الخلفي للفئران تمديد الساق بالكامل وتقييد القدم والكاحل بالكامل بالرغوة ، مما ينتج عنه صورة مكتسبة ذات جودة كافية لتحليل الهندسة المعمارية الدقيقة التربيقية والقشرية. يمكن أن يؤدي عدم كفاية وضع الطرف الخلفي وتقييده إلى الحصول على صور بها قطع أثرية للحركة ، في حين أن الذيل الذي لم تتم إزالته بالكامل من مجال رؤية المسح سيتداخل مع توهين الأشعة السينية بواسطة عينات المسح ويغير قياسات كثافة نخاع العظام والأنسجة المعدنية. بمجرد إتقانه ، يمكن تنفيذ هذا الإجراء بشكل صحيح في 5-10 دقائق.

أثناء تنفيذ هذا الإجراء ، من المهم أن تكون دائما على دراية بمعدل التنفس ومستوى التخدير ومقدار تعرض الفئران للإشعاع. يمكن تغيير هذا الإجراء واستخدامه لتقييم مواقع الهيكل العظمي الأخرى ، مثل عظم الفخذ البعيد والفقرات الخشبية. علاوة على ذلك ، يمكن تعديل هذا الإجراء واستخدامه لأنواع القوارض الأخرى مثل الفئران.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية وضع الطرف الخلفي للفأر وتقييده بشكل صحيح ، من أجل التركيز والتصوير عالي الدقة المتسق للبنية الدقيقة للعظام القريبة.