تقييم لاستجابة ديسكويديوم ديكتيوستيليوم "تحفيز الميكانيكية الحادة"

الهدف العام من هذا الإجراء هو فحص نشاط المكونات المختلفة لشبكة نقل الإشارات داخل الخلايا بعد اضطراب ميكانيكي قصير. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال هجرة الخلايا مثل كيفية استشعار الخلايا وتهاجرها اتجاهيا نحو الإشارات البيئية المتنوعة بما في ذلك المحفزات الميكانيكية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بفحص الاستجابة الأولية للتحفيز الميكانيكي دون المساهمة المربكة للحركة أو القطبية في الاستجابة.

خطرت لنا فكرة هذه الطريقة لأول مرة عندما اختبرنا استجابة الخلايا الملتصقة للجاذب الكيميائي الذي تم تسليمه بتحريض طفيف ولاحظنا استجابة قوية للخلايا المحفزة بالتحكم في السيارة. للبدء ، قم بإعداد Klebsiella aerogenes عن طريق تلقيح عدد صغير من الخلايا من المخزون المجمد في وسط HL5 بدون مضادات حيوية واحتضان الثقافة طوال الليل. سيؤدي نمو Dictyostelium في وجود بكتيريا Klebsiella aerogenes إلى تقليل عدد الماكروبينوسومات التي من شأنها تحسين استجابة الخلية للمنبهات الخارجية.