أغسطس 30, 2017
ويدخل هذا الدراسة تقنية جديدة لقياس وتحليل للتناوب بسرعة دوران الأوعية الدقيقة الدم في تجربة واحدة تصوير تباين البقع واللطخ ليزر باستخدام.
الهدف العام من هذه التجربة هو تقديم نهج للتغلب على القطع الأثرية للحركة عند استخدام نظام تصوير تباين البقع بالليزر لسرعات متناوبة للدوران الدقيق في الدم. يمكن أن تساعد هذه الطريقة الباحثين في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الاستجابات الديناميكية للدم ، على وجه الخصوص ، عند السعي للتأكد من تأثير تبديل سرعات دوران الأوعية الدقيقة في الدم في تجربة واحدة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تتغلب على عيب كبير في LSCI ، وهو حساسية عالية لحركة القطع الأثرية.
سمحت لناالآثار المترتبة على هذه التقنية بتقييم الأنماط المختلفة لتحفيز الدورة الدموية. هذا مهم سريريا ، حيث توجد علاقة مقترحة بين زيادة دوران الأوعية الدقيقة وتقليل الوذمة في مجموعات ما بعد الجراحة ، مثل مرضى استبدال مفصل الورك بالكامل. يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة لديناميكيات دوران الأوعية الدقيقة ، وبالتالي يمكن تطبيقها أيضا على تجارب أخرى ، مثل تلك التي تبحث في أجهزة المراقبة التي تعزز التئام الجروح.
بشكل عام ، سيكافح الأفراد غير المألوفين بهذه الطريقة لأن LSCI حساس جدا لحركة القطع الأثرية ، وبالتالي لن يكون الكشف عن تغيرات الدورة الدموية الدقيقة ممكنا ما لم يتم تثبيت جزء الجسم تماما. احتجنا أولا إلى تطوير هذه الطريقة عندما نظرنا إلى تأثير التحفيز الكهربائي العصبي العضلي للساق والضغط الهوائي المتقطع على دوران الأوعية الدقيقة في الفخذ. وجدنا أن هناك حركة في الساق.
يعدالعرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية ، حيث قد يكون من الصعب تصور البروتوكول التجريبي ، وبالتالي يصعب تكراره. للبدء ، قم بتوصيل مصدر الطاقة و USB وواجهة FireWire باللوحة الخلفية ل moorFLPI LSCI. بعد ذلك ، قم بتجميع ذراع دعم سطح المكتب باستخدام أربعة براغي مع قلب moorFLPI LSCI رأسا على عقب ومثبتا على ذراع الدعم.
بمجرد توصيله ، قم بتدوير كتيفة التثبيت للتصوير لأسفل. اطلب من المشارك الجلوس في غرفة يتم التحكم في درجة حرارتها لمدة 10 دقائق قبل أي اختبار حتى يتكيف مع درجة حرارة الغرفة. تأكد من عدم وجود مصادر قوية للضوء الاصطناعي أو ضوء الشمس الساطع على المشارك ، حيث يمكن أن يؤثر الضوء المحيط على moorFLPI بالقرب من مصدر ليزر الأشعة تحت الحمراء ، والذي يعمل بسرعة 780 نانومتر.
اختبر مقبولية ضوء الغرفة عن طريق فتح نافذة إعداد التصوير وإعاقة الليزر. إذا كانت الصورة سوداء بالكامل تقريبا ، فلا داعي لاتخاذ خطوات أخرى. خلاف ذلك ، قم بتقليل الإضاءة المحيطة.
تأكد من استرخاء المشارك طوال فترة التقييم. اطلب منهم وضع أقدامهم بشكل مسطح على الأرض وتجنب أي محادثات أثناء الاختبار. الآن ، ضع ثمانية سنتيمترات مربعة من رقعة لاصقة غير شفافة على منطقة الجلد لإخفاء تدفق الدم ، ولحساب عيب حركة القطع الأثرية.
افتح برنامج التصوير وحدد المعالجة المكانية ل 25 إطارا في الثانية من الالتقاط بدقة 152 × 113 بكسل. ثم حدد قياس الصورة الحية. اضبط موضع المصور بحيث يكون على بعد 20 سم من المشارك.
أيضا ، اضبط التكبير/التصغير والتركيز والمستقطب للحصول على الحد الأدنى من الانعكاس المرآوي. يجب أن تظهر الصورة مسطحة تماما وخالية من الميزات. اضبط وقت التعرض لمدة 20 مللي ثانية للحساسية العالية للتغييرات الصغيرة والتدفق المنخفض.
استخدم معدل عرض يبلغ 25 هرتز وثابت زمني يبلغ 0.3 ثانية لحساب التغيرات السريعة في تدفق الدم وتحقيق التباين الأمثل من خلال تقليل تشويش الصورة. بعد ذلك ، قم بإنشاء منطقتين متساويتين في الحجم من الاهتمام تسمى ROI 1 و ROI 2. قم بمحاذاة عائد الاستثمار 2 بحيث يكون ضمن ثمانية سنتيمترات مربعة من الرقعة غير الشفافة على جلد الهدف.
احرص على عدم تغيير عائد الاستثمار ، ولكن احتفظ بها قريبة ، في غضون سنتيمترين إلى أربعة سنتيمترات لتقليل الحاجة إلى إعادة السحب في حالة عدم وجود أي حركة ميكانيكية في عدم وجود عائد الاستثمار 2 في المنطقة المعتمة. أخيرا ، اضبط قيمة الكسب على ما بين 70 و 80. سيؤدي ذلك إلى تقليل الدقة المفقودة في المناطق منخفضة وعالية الكثافة.
سجل قياس تدفق الدم بتنسيق فيديو واحفظه للتحليل دون اتصال باستخدام وحدة مراجعة الصور. بمجرد التسجيل ، افتح برنامج مراجعة الصور moorFLPI وقم بتحميل الفيديو للتحليل. احسب متوسط التدفق داخل عائد الاستثمار بعد سلسلة من تسجيلات متوسط تدفق الدم.
عائد الاستثمار 1 هو المقياس الحقيقي لتدفق الدم في الجلد ، وعائد الاستثمار 2 هو إشارة جلد بقع الليزر المتناثرة من الرقعة المعتمة. عندما لا يتم تكوينها بشكل صحيح ، تؤدي صور التدفق والبقع الأولية إلى زيادة الرؤية مع ضعف الرؤية ، مما سيؤدي إلى قياس تدفق الدم بشكل أقل دقة. إذا تم تكوينها بشكل صحيح، كما هو موضح في هذا البروتوكول، فإن الصور الناتجة تتمتع بأقصى قدر من الرؤية للحصول على نتيجة موثوقة.
تؤدي الصور المكونة بشكل صحيح إلى تحديد واضح بين تدفق الدم البطيء وتدفق الدم السريع. تم تحقيق ذلك من خلال تسجيل بيانات مستمر لتدفق متناوب. بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في 20 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.
أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر أن قياسات التدفق تتم بالنسبة إلى خط الأساس المرجعي. وفي حالة هذه المنهجية، تقدم مرحلة الراحة كخط أساس مرجعي. لذلك ، يتم التعبير عن تدفق الدم السريع والبطيء كنسبة مئوية من التغيير من خط الأساس أو مرحلة الراحة.
بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال تحليل الدورة الدموية الدقيقة لاستكشاف فعالية أنواع مختلفة من الأجهزة التي تهدف إلى زيادة تدفق الدورة الدموية الدقيقة. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية قياس السرعات المتناوبة لدوران الأوعية الدقيقة في الدم باستخدام LSCI ، وكيفية التغلب على أي قطعة أثرية للحركة قد تؤثر على النتيجة إذا لم يتم أخذها في الحسبان بشكل صحيح.
تقدم هذه الدراسة تقنية جديدة لقياس وتحليل السرعات المتناوبة للدورة الدموية الدقيقة باستخدام مصور تباين البقع الليزرية. وتعالج هذه الطريقة الشوائب الحركية التي قد تؤثر على النتائج، مما يوفر منهجاً موثوقاً للباحثين.
يُعد تصوير تباين بقع الليزر (LSCI) أداة غير جراحية لتقييم تدفق الدم في الدورة الدموية الدقيقة، إلا أن حساسيتها العالية للتداخلات الناتجة عن الحركة تحد من فائدتها في الدراسات الفسيولوجية الديناميكية. يقدم هذا البروتوكول طريقة الرقعة المعتمة اللاصقة (AOP) لطرح إشارة الخلفية وتمكين القياس الموثوق لتدفق الدم البطيء والسريع بالتناوب في تجربة واحدة. ومن خلال التعبير عن التدفق كنسبة مئوية للتغير عن مرحلة الراحة المرجعية، يدعم هذا النهج تقليل المخاطر الميكانيكية في النماذج قبل السريرية للاستجابة الوعائية والتئام الجروح.
تندرج هذه الطريقة ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف إلى المرحلة قبل السريرية، حيث تدعم التحقق المبكر من الأهداف من خلال التنميط الظاهري للديناميكا الدموية، وتساهم في تحديد المركبات الرائدة عبر مواءمة المؤشرات الحيوية القائمة على التدفق.