وضع بروتوكول فعال وقابل لإعادة الإنتاج لالهاء تكون العظم في نموذج الفئران مما أدى إلى عظم الفخذ المجددة الوظيفية

الهدف العام من هذا البروتوكول هو تحفيز تكوين العظم في تشتيت الفخذ بشكل متكرر وفعال في نموذج الفئران لتقييم تجديد العظام الوظيفي. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال طب تكوين العظم حول تحديد وتقصير فترة التوحيد أو حول تحديد آلية إصلاح العظام. الميزة الرئيسية لهذه التقنية حيوية لمن صنع المثبت الخارجي ولتوجيه من يقوم بالجراحة ، وتوفير بيئة مستقرة لتجديد العظام الأمثل.

تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى جميع عمليات إطالة الأطراف العلوية والسفلية العلاجية أو عيوب العظام التي تحدث بعد جراحة استئصال ورم العظام. يتم عرض الإجراء من قبل إدوارد لامي ، محاضر الصيدلة من مختبري. ابدأ بوضع فأر Sprague Dawley مخدر يبلغ من العمر 12 أسبوعا في الوضع الجانبي الأيسر وإزالة الشعر من الطرف الخلفي الأيمن.

بعد وضع مرهم العين ، قم بتطهير المنطقة الجراحية بمحلول بوفيدون اليود وضع في وضع ضعيف. مع وضع المثبت الخارجي على طول المحور الوسطي الجانبي ، استخدم علامة لعمل نقطة واحدة في الركبة ونقطة ثانية في الورك على طول الخط الإنسي للمستوى السهمي. قم بتوصيل النقطتين واستخدم مشرطا لعمل شق جلدي على طول الخط ، وقطع بين العضلة ذات الرأسين الفخذية والوحشية الواسعة حتى ينكشف عظم الفخذ بالكامل.

ارفع السمحاق واستخدم الروجين لفصل الأنسجة الرخوة عن العظام. أدخل المسامير في الثقوب القريبة والبعيدة من المثبت الخارجي. إذا كان من الممكن تثبيت كلا الدبابيس ، فاستخدم اثنين من ضاغطات Senn لفتح العضلات وتشديد مشبك دليل الحفر في منتصف عظم الفخذ ، بدءا من الثقوب القريبة والبعيدة ، والانتهاء من الفتحتين الوسطى ، قم بتمرير مثقاب معدني 0.6 ملم عبر العظم لإنشاء أربعة فتحات توجيه.

باستخدام دبوس نصف خيوط 0.8 ملم ، قم بعمل الدبوس ذهابا وإيابا لتكبير الثقوب الأربعة المسبقة ، مع الحرص على البقاء عموديا على عظم الفخذ. لزرع المسامير ، استخدم حامل إبرة للإمساك برأس كل دبوس نصف خيط 1 ملم وغرق المسامير بشكل فردي لتكبير فتحات التوجيه. استخدم ضام Senn للتأكد من أن المسامير تخترق كلا القشرة دون أن تبرز أكثر من 1 ملليمتر.

عندما تكون المسامير في مكانها ، قم بتوصيل المثبت الخارجي بالدبابيس نصف الملولبة ، مع التأكد من أن الإزاحة حوالي 6 ملليمترات للسماح بسهولة الخياطة والصلابة الجيدة. ثم قم بتثبيت براغي القفل الأربعة بحيث يتم قفل المثبت الخارجي بالمسامير. باستخدام Piezotome ، قم بإجراء قطع العظم بين الدبابيس المركزية.

ثم استخدم حامل إبرة Mayo-Hegar وخيط خياطة قابل للامتصاص 5-0 وغرزة مستمرة لإغلاق الجرح. مباشرة بعد الجراحة ، قم بتصوير بالأشعة السينية للتحقق من عمق المسامير ومحاذاة الأطراف العظمية على طول المحور الطويل. ثم اسمح للفئران بالتعافي تماما مع المراقبة.

بعد أسبوع واحد ، قم بتصوير الطرف بالأشعة السينية لإعادة التحقق من وضع المسامير ومحاذاة أجزاء العظام. لإجراء الإلهاء ، قم بتدوير الجوز المربع يدويا بنصف دورة في اتجاه عقارب الساعة كل 12 ساعة لمدة 10 أيام. قم بتصوير الطرف بالأشعة السينية في منتصف عملية الإلهاء وفي نهايتها لمراقبة موضع المسامير ومحاذاة أجزاء العظام.

في نهاية الإلهاء ، قم بإجراء أشعة سينية للطرف أسبوعيا ، وإزالة المثبت الخارجي في اليوم 64. في اليوم 66 ، استخدم مشرطا لعمل شق جلدي من خلال ندبة الجراحة من أعلى الورك إلى مقدمة الركبة. قطع بين العضلة ذات الرأسين الفخذية والواسع الوحشي حتى ينكشف عظم الفخذ بالكامل ، وفصل العضلة عن العظم قدر الإمكان.

قطع جميع أربطة الركبة ، وتفكيك المفصل ، وقطع كبسولة مفصل الورك. نظف العظم جيدا دون إزالة المسامير باستخدام مشرط لإزالة كل الأنسجة الرخوة. عندما يتم تنظيف عظم الفخذ المقابل ، قم بتصوير كل من عظم الفخذ بالأشعة السينية.

قم بإزالة المسامير وتخزين عظم الفخذ عند درجة حرارة 20 درجة مئوية تحت الصفر لتحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق. في هذه التجربة التمثيلية ، كشف التصوير بالأشعة السينية من مباشرة بعد الجراحة وحتى نهاية التوحيد ، أن المسامير نصف الخيوط داخل دبابيس عظم الفخذ ظلت متوازية ، ومحفوظة جيدا ، وغير مفكوكة طوال العملية ، مما يدل على وجود مرسى مستقر. علاوة على ذلك ، من الواضح أن الأطراف العظمية قد تم محاذاتها بشكل جيد على طول المحور الطولي للعظم أثناء عملية تكوين العظم للإلهاء.

في نهاية فترة الكمون ، لم تكن هناك مناطق متكلسة مرئية بالقرب من الأطراف العظمية. في نهاية فترة الإلهاء ، كانت هناك بعض المناطق المتكلسة مرئية بالقرب من القشرة الموجودة مسبقا. بعد 28 يوما من التوحيد ، كانت المنطقة غير المتكلسة من الفجوة بين الأطراف العظمية أصغر ، ويمكن ملاحظة الكالس السمحاق بالقرب من مستوى الفجوة مع المسامير.

بعد 47 يوما من التوحيد ، تم سد الكالس المتجدد تماما. بعد إزالة المثبت الخارجي ويومين من حمل الوزن الفسيولوجي ، أظهرت مشية فسيولوجية ولم يلاحظ أي دليل على الكسر. أظهر تحليل التصوير المقطعي المحوسب الدقيق ثلاثي الأبعاد للأقسام الطولية التسلسلية للمسمار المتجدد أن الجسر المتكلس كان موجودا دائما مع قشرية خارجية مستمرة لوحظت في محيط الكالس المتجدد.

بعد 49 يوما من التوحيد ، لم يلاحظ أي كسر على الرغم من استمرار منطقة أقل تمعدنا في مركز الكالس المتجدد. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية الجراحية في 45 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر الحفاظ على بيئة معقمة أثناء الجراحة ومراقبة بدقة بعد الجراحة.

بعد تطويرها ، تمهد هذه التقنية الطريق للباحث في مجال الطب لتحسين تقنية تكوين العظم ، خاصة لتقصير فترة التوحيد في الممارسة السريرية. بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل إضافة عوامل النمو أو مواد البناء للإجابة على أسئلة إضافية مثل ، هل يمكن تحسين توحيد العظام. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء إطالة الفخذ في نموذج الفئران باستخدام هذه التقنيات كدليل لضمان التوازي بين المسامير.