طريقة لتصنيف النصوص في الخلايا الفردية الإشريكيّة القولونية للأسفار جزيء واحد في الموقع تجارب التهجين

الهدف العام من هذا البروتوكول هو تسمية النصوص الفردية في الإشريكية القولونية لتحقيقات الحمض النووي المصنفة فلورسنت للتصور في تجارب FiSH أحادية الجزيء. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال بيولوجيا الأنظمة ، مثل توصيف النصوص من خلية إلى خلية قدرة مجال الاهتمام. بالإضافة إلى نصوص توطين جدار الخلية.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها توفر كمية من المعلومات حول إحصائيات عمليات النسخ. لبدء البروتوكول ، قم بزراعة الإشريكية القولونية MG1655 في وسط LB بين عشية وضحاها في شاكر مداري ، عند 260 دورة في الدقيقة و 37 درجة مئوية. في اليوم التالي ، قم بتخفيف الثقافة الليلية عند واحد إلى 100 في وسط جديد وقياس كثافتها البصرية في مقياس الطيف الضوئي ، حتى قيمة 0.2 إلى 0.4.