Name: النهج الخلفي نصف دائري قناة لإيصال الجينات الإذن الداخلية في الماوس الأطفال حديثي الولادة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 52 s
Description: تعلم طريقة النهج الخلفي نصف دائري القناة لإيصال الجينات إلى الأذن الداخلية في فئران حديثي الولادة. هذه التقنية الجراحية الموثوقة تتيح إيصال العلاج الجيني بكفاءة عالية للأذن الداخلية بالكامل.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذا العمل الأموال من نيدكد شعبة من داخلية البحوث/NIH (DC000082-02 إلى W.W.C.)، وكذلك DC000081 للتصوير الأساسية والمتقدمة. ونحن ممتنون لموظفي مرفق الحيوان نيدكد لرعاية الحيوانات لدينا.

وافق جميع الإجراءات الحيوان بالعناية بالحيوان واستخدام اللجنة في المعهد الوطني للصمم واضطرابات التواصل الأخرى NIDCD (ASP1378-15).
1-إجراءات الإعداد والتحضير
<ol><li>تعقيم جميع الصكوك بأكسيد الإيثيلين في بداية التجربة. بين الحيوانات، وتنظيف أدوات لاستخدام التعقيم حبة.</li>
	<li>تحميل الحل الذي يحتوي على العلاج الجيني الفيروسي في ميكروبيبيتي في مايكرو-الحاقن. النواقل الفيروسية المستخدمة في هذه الدراسة كان AAV2/8-ويرلين (1 × 1013 الجينوم نسخاً في المليلتر، انظر الجدول للمواد). ملاحظة: عادة، يتم تحميل 1.1 ميليلتر الحجم الإجمالي إلى ميكروبيبيتي.</li>
</ol>2-التخدير
ملاحظة: الضغط الماوس المستخدمة في هذه الدراسة هو الماوس مركزتين. طفرات متماثل (أي/أيمن Whrn) وليتيرماتيس متخالف (Whrn/+ أي) واستخدمت.
<ol><li>تضع الأم في قفص منفصل (منفصلة من القمامة).</li>
	<li>ضع القفص الصفحة الرئيسية التي تحتوي على القمامة (P0-الجراء P5) على لوح حرارة مغلق (مجموعة عند 37.5 درجة مئوية) الدفء في الفئران.</li>
	<li>قطع الجزء الإبهام من قفاز مطاط، ووضع جرو فيه.</li>
	<li>ضع ألجرو في الإبهام قفاز مطاط في دلو من الجليد ل ~ 2 دقيقة.</li>
	<li>ضع ألجرو أنيسثيتيزيد على حزمة تجميد بلاستيك ساحة تجارية كبيرة مع شاش 4 "4" بين ألجرو والسطح حزمة على.</li>
	<li>ملء قفاز مطاط ثقيلة مع الثلج المجروش، والقفازات الجليد حول ألجرو.</li>
	<li>تحقق لمعرفة إذا كان ألجرو هو تخديره على نحو كاف بغياب كامل لأي استجابة للمنبهات المختلفة (بما في ذلك قرصه إصبع ثابتة). اترك ألجرو في كيس من الثلج لمدة الجراحة (حوالي 5-10 دقيقة). ملاحظة: نوصي بترك الجراء في كيس من الثلج لمدة لا تزيد عن 15 دقيقة أثناء الجراحة.</li>
</ol>3-العمليات الجراحية نهج (الشكل 1)
<ol><li>تنظيف الجلد خلف الإذن بمسح اليود ويمسح الكحول مرة واحدة تم تخديره من الحيوان.</li>
	<li>شق بوستاوريكولار ~ 2 مم خلف الإذن باستخدام مقص الصغرى، وتقسيم العضلات الترقوية مع المقص الصغير.</li>
	<li>تحديد العصب الوجهي والفقاعة. الفقاعة عنقية وشبه شفافة في هذا العمر وهو يكذب الآنسي للعصب الوجهي. يمكن رؤية الشريان ستابيديال من خلال الفقاعة في هذا العصر، مما يشكل معلما مفيداً.</li>
	<li>اتبع العصب الوجهي ﻷسلحته وجيدة لتحديد موقع القناة نصف دائري الخلفي (المركز). إزالة ألياف العضلات والأنسجة اللينة التي تغمر القناة نصف دائري الخلفي باستخدام مقص الصغرى. ملاحظة: بحثتها عنقية في هذا العصر.</li>
	<li>اختراق بحثتها استخدام زجاج ميكروبيبيتي (~ 10 ميكرومتر في القطر) على مايكرو-الحاقن.</li>
	<li>حقن العلاج الجيني الفيروسي في الإذن الداخلية. ملاحظة: عادة، مجموعة حقن 20 من 49 nL العلاج الجيني يتم تسليمها إلى القناة نصف دائري الخلفي ما يزيد على 40 ~ s (إجمالي حجم ~ 1 ميليلتر). وكان عيار الفيروسية المستخدمة 1 × 1013 الجينوم نسخ كل مل.</li>
	<li>إغلاق شق الجلد باستخدام خياطة بوليجلاكتين 5-0.</li>
</ol>4-بعد العملية الجراحية الرعاية
<ol><li>ضع ألجرو على لوح الاحترار لاستعادة درجة حرارة جسم طبيعية أثناء الاسترداد من التخدير مع المستمر دليل التحفيز/المتداول مع القفاز الأصابع البشرية.</li>
	<li>مجرد ألجرو مستيقظا، وضعه مرة أخرى في قفصة المنزل.</li>
	<li>عناق كل ألجرو مع مسحه القطن التي تعرضت للفراش القفص المنزل. ملاحظة: الغرض من هذا هو أن الفئران رائحة كما فعلوا قبل الجراحة، مما يزيد من احتمال الأم إعادة قبول لها القمامة ما بعد الجراحة. إذا كان ذلك ممكناً، يمكن جمع البول من الأم ودعكهما الجراء استخدام مسحه القطن إلى مواصلة تخفيض احتمال الرفض.</li>
	<li>تطبيق الزيوت المعدنية للأنف الأم توعي لها8، ويعيد الأم في قفص المنزل.</li>
</ol>

<ol><li>Chien, W. W., Monzack, E. L., McDougald, D. S., Cunningham, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+for+sensorineural+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Ear+Hear%22%5BJournal%5D)">Gene therapy for sensorineural hearing loss.</a> Ear Hear. 36, 1-7 (2015).</li>
<li>Askew, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tmc+gene+therapy+restores+auditory+function+in+deaf+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Tmc gene therapy restores auditory function in deaf mice.</a> Sci Transl Med. 7, 295(2015).</li>
<li>Akil, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+of+hearing+in+the+VGLUT3+knockout+mouse+using+virally+mediated+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Restoration of hearing in the VGLUT3 knockout mouse using virally mediated gene therapy.</a> Neuron. 75, 283-293 (2012).</li>
<li>Pan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+restores+auditory+and+vestibular+function+in+a+mouse+model+of+Usher+syndrome+type+1c%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Gene therapy restores auditory and vestibular function in a mouse model of Usher syndrome type 1c.</a> Nat Biotechnol. 35, 264-272 (2017).</li>
<li>Isgrig, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Therapy+Restores+Balance+and+Auditory+Functions+in+a+Mouse+Model+of+Usher+Syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene Therapy Restores Balance and Auditory Functions in a Mouse Model of Usher Syndrome.</a> Mol Ther. 25, 780-791 (2017).</li>
<li>Lentz, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescue+of+hearing+and+vestibular+function+by+antisense+oligonucleotides+in+a+mouse+model+of+human+deafness%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Rescue of hearing and vestibular function by antisense oligonucleotides in a mouse model of human deafness.</a> Nat Med. 19, 345-350 (2013).</li>
<li>Shibata, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+Interference+Prevents+Autosomal-Dominant+Hearing+Loss%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">RNA Interference Prevents Autosomal-Dominant Hearing Loss.</a> Am J Hum Genet. 98, 1101-1113 (2016).</li>
<li>Van Sluyters, R. C., Obernier, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+care+and+use+of+mammals+in+neuroscience+and+behavioral+research%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp+Top+Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the care and use of mammals in neuroscience and behavioral research.</a> Contemp Top Lab Anim. 43, 48(2004).</li>
<li>Chien, W. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Therapy+Restores+Hair+Cell+Stereocilia+Morphology+in+Inner+Ears+of+Deaf+Whirler+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Gene Therapy Restores Hair Cell Stereocilia Morphology in Inner Ears of Deaf Whirler Mice.</a> Mol Ther. 24, 17-25 (2016).</li>
<li>Hirose, K., Hartsock, J. J., Johnson, S., Santi, P., Salt, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+lipopolysaccharide+compromises+the+blood-labyrinth+barrier+and+increases+entry+of+serum+fluorescein+into+the+perilymph%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assoc+Res+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Systemic lipopolysaccharide compromises the blood-labyrinth barrier and increases entry of serum fluorescein into the perilymph.</a> J Assoc Res Otolaryngol. 15, 707-719 (2014).</li>
<li>Okada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+transfer+targeting+mouse+vestibule+using+adenovirus+and+adeno-associated+virus+vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Otol+Neurotol%22%5BJournal%5D)">Gene transfer targeting mouse vestibule using adenovirus and adeno-associated virus vectors.</a> Otol Neurotol. 33, 655-659 (2012).</li>
<li>Suzuki, J., Hashimoto, K., Xiao, R., Vandenberghe, L. H., Liberman, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+gene+therapy+with+ancestral+AAV+in+adult+mice%3A+complete+transduction+of+inner+hair+cells+without+cochlear+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Cochlear gene therapy with ancestral AAV in adult mice: complete transduction of inner hair cells without cochlear dysfunction.</a> Sci Rep. 7, 45524(2017).</li>
</ol>

الكتاب قد لا الكشف عن البيانات ذات الصلة لجعل.

وقد وصف العديد من الطرق الجراحية الوصول إلى القوارض الداخلية الأذنين. كوتشليوستومي والنهج في إطار جولة هي الأكثر استخداماً للوصول إلى القوقعة، حين الخلفي نصف دائري القناة والنهج endolymphatic sac تستخدم عادة للوصول إلى أجهزة الدهليزية1. في دراسة أجريت مؤخرا، واظهرنا أن القناة نصف دائري الخلفي حقن العلاج بالجينات فيروسية أدت إلى كفاءة عالية لتوصيل خلية الشعر في أجهزة الدهليزية و القوقعة5. في الواقع، كان توصيل cochlear الشعر الخلية أعلى من خلال الحقن اللاحق نصف دائري القناة، ...

العلاج الجيني الإذن الداخلية حقل التطور السريع للتحقيق. أنه طبق في نماذج مختلفة من الحيوانات لمكافحة مؤقت والصدمة الضوضاء و فقدان السمع الوراثي1. أظهرت دراسات أجريت مؤخرا عدة الانتعاش وظيفية للسمع وتوازن وظائف في الفئران المسخ بعد الإذن الداخلية الجينات العلاج تسليم2،3،4،،من56، 7-من أهم العوامل في تحديد نجاح العلاج الجيني الإذن الداخلية هو النهج الجراحية المستخدمة للوصول إلى الإذن الداخلية. ومن الناحية المثالية، سيكون من السهل لتنفيذ النهج الجراحية والمعالم التشريحية التي ستكون متسقة وسهلة لتحديد وتوصيل الناتجة من أنواع الخلايا المستهدفة ستكون مرتفعة.
في دراسة أجريت مؤخرا، واظهرنا أن عندما تم حقن العلاج الجيني الفيروسي من خلال قناة نصف دائري الخلفي الماوس مركزتين المسخ (نموذج من فقدان السمع، واختلال وظيفي الدهليزية)، كفاءة توصيل لخلايا الشعر حسية كان ينظر إليه في الدهليزية الأجهزة، وكذلك كما هو الحال في القوقعة5. كفاءة عالية لتوصيل الحسية الشعر خلية أسفر عن تحسن الوظائف السمعية والدهليزيه في هذه الفئران المسخ.
في هذه المقالة، يصف لنا بالتفصيل النهج الخلفي نصف دائري قناة الوصول إلى الإذن الداخلية الماوس الولدان.

<table><tbody><tr><td>مجهر التشغيل</td><td>Zeiss</td><td></td><td>OPMI بيكو مجهر الأنف والأذن والحنجرة. ستعمل أيضا مجاهر التشريح الأخرى.</td></tr>أدوات <tr><td>العلوم</td><td>الدقيقة</td><td>الدقيقة 11251-10 و 11295-51</td> <td># 5 و # 55 Dumont</td></tr><tr><td>Micro-Scissors</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>15002-08</td><td></td></tr><tr><td>Nanoliter2000 microinjector</td><td>World Precision</td> Instruments <td></td><td></td></tr><tr><td>وسادة تسخين</td><td>Mastex</td><td>موديل 500/600</td><td></td></tr><tr><td>5-0 خيوط فيكريل</td><td>Ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AAV8-whirlin</td><td>ناقلات Biolabs</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ماصة زجاجية</td><td>أدوات Sutter</td><td>B100-75-10</td><td>زجاج البورسليكات</td></tr></tbody></table>

النهج الخلفي نصف دائري قناة لإيصال الجينات الإذن الداخلية في الماوس الأطفال حديثي الولادة

Posterior Semicircular Canal Approach for Inner Ear Gene Delivery in Neonatal Mouse

ويوفر العلاج الجيني الإذن الداخلية وعدا كبيرا كعلاج محتمل لفقدان السمع، والدوخة. واحدة من العوامل الحاسمة في نجاح العلاج الجيني الإذن الداخلية هو إيجاد طريقة تسليم التي تؤدي إلى الكفاءة توصيل متسقة من أنواع الخلايا المستهدفة مع التقليل من فقدان السمع. أننا في هذه الدراسة، وصف النهج الخلفي نصف دائري قناة كوسيلة فعالة لإيصال الجينات الإذن الداخلية في الفئران حديثي الولادة. ونحن تبين أن إيصال الجينات عبر قناة نصف دائري الخلفي قادرة على نتخلل الإذن الداخلية كاملة. تحديد القناة نصف دائري الخلفي التشريحية سهلة، فضلا عن التلاعب بالحد الأدنى من العظم الصدغي المطلوبة، نهج جعل هذه الجراحة خياراً جذاباً لإيصال الجينات الإذن الداخلية.

أدى حقن العلاج الجيني ويرلين AAV8 في الفئران مركزتين الأطفال حديثي الولادة من خلال القناة نصف دائري الخلفي ويرلين التعبير (الأخضر) في خلايا الشعر أوتريكولار (الشكل 2)، مع كفاءة الإصابة عموما 53.1 في المائة (SD 38.1، n = 28)5 . كان ممدود ترانسدوسيد الشعر الخلايا ستيريوسيليا (أحمر) مقارنة بخلايا الشعر من آذان غير حقن كونترالاتيرال (5.35 ميكرومتر ± 2.11 مقابل 3.20 ± 0.34 ميكرومتر، على التوالي)5.
<p class="jove_...

في هذه الدراسة، يصف لنا النهج الخلفي نصف دائري القناة كوسيلة موثوق بها لإيصال الجينات الإذن الداخلية في الفئران حديثي الولادة. ونحن تبين أن إيصال الجينات عبر قناة نصف دائري الخلفي قادرة على نتخلل الإذن الداخلية كاملة.

Inner ear gene therapy offers great promise as a potential treatment for hearing loss and dizziness. One of the critical determinants of the success of ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو الوصول إلى الأذن الداخلية للفأر لتوصيل الجينات. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في توصيل العلاج الجيني إلى الأذن الداخلية للفأر بطريقة فعالة. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في أنها موثوقة وسهلة التعلم.بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة بسبب صغر حجم الأذن الداخلية للفأر. ومع ذلك ، مع الممارسة ، يمكن لمعظم الناس إكمال التشريح الجراحي في غضون عشر دقائق. ابدأ الإجراء بأدوات معقمة وقم بتشغيل معقم الخرز لتنظيف الأدوات بين.قم بتحميل الفيروس العلاجي في ماصة دقيقة قطرها عشرة ميكرون متصلة بحاقن صغير. الناقل الفيروسي المستخدم في تجاربنا هو AAV28-whirlin مع عيار واحد في عشرة إلى 13 نسخة جينوم لكل مليلتر. في هذا الفيديو ، تم استخدام صبغة الميثيلين الزرقاء لسهولة التصور.نظف الجلد خلف الأذن بثلاثة مقشرات من البيتادين متبوعة بمسح الكحول. بعد ذلك ، استخدم مقصا دقيقا لعمل ما بعد الأذن حوالي ملليمترين خلف الأذن وتقسيم الأنسجة الرخوة الأساسية. تحديد العصب الوجهي والفقاعة.تقع العضلة القصية الترقوية الخشائية بشكل عمودي على العصب الوجهي. يمكن رؤية الشريان الثابت من خلال الفقاع التي تعد معلما مفيدا. اتبع العصب الوجهي بشكل متفوق وخلفي لتحديد موقع القناة الخلفية نصف الدائرية.استخدم المقص الصغير لإزالة ألياف العضلات والأنسجة الرخوة التي تغطي القناة الخلفية نصف الدائرية. بعد ذلك ، اخترق القناة الخلفية نصف الدائرية باستخدام الماصة الدقيقة الزجاجية المحملة على الحاقن الصغير وحقن الصبغة في الأذن الداخلية. عادة ، يتم تسليم ما مجموعه 20 حقنة من 49 لتر نانو في القناة الخلفية نصف الدائرية على مدى 40 ثانية لحجم إجمالي يبلغ حوالي ميكرولتر واحد.اسحب الماصة فور إعطاء المجلد الأخير. ثم أغلق شق الجلد باستخدام خياطة بولي جلاكتين 5-0. أدى حقن AAV8-whirlin في الفئران الدوامة حديثي الولادة كما هو موضح في هذا الفيديو إلى تعبير الدوامة الموضح باللون الأخضر في خلايا الشعر العصي.تحتوي خلايا الشعر المنقولة على أهداب مجسمة ممدودة تظهر باللون الأحمر مقارنة بخلايا الشعر من الأذنين المقابلة غير المحقونة. أدى حقن القناة شبه الدائرية الخلفية ل AAV8-whirlin أيضا إلى نقل خلايا شعر القوقعة الصناعية في الفئران الدوامة. عبرت خلايا الشعر المنقولة عن الدوامة عند أطراف الأهداب المجسمة ولديها أهداب مجسمة ممدودة مقارنة بخلايا الشعر من الأذنين المقابلة غير المحقونة.باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل ABI واختبار الاستريو من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل ما إذا كان توصيل جين الأذن الداخلية له تأثير على الوظائف السمعية والدهليزية. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال توصيل جين الأذن الداخلية لاستكشاف عيوب توصيل الجينات في الأذن الداخلية للفأر.

posterior-semicircular-canal-approach-for-inner-ear-gene-delivery

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

الأذن الداخلية الماوس هي جهاز اللوحاء المستمدة من الحواس التي التنموية البرنامج وضعت خلال فترة الحمل. نحن...

نقل الجينات إلى الأذن الداخلية عن طريق تطوير ماوس<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; Electroporation

المصدر: Kozin، E.D.، et.al. التصور المباشر لنواة القوقعة الظهرية للفأرة للتحفيز البصري الوراثي للمسار السمعي. J. Vis. Exp. (2015)يوضح هذا الفيديو نقل الجينات بوساطة الفيروسات إلى نواة القوقعة الظهرية للفأر (DCN) لتمكين التحفيز السمعي الناجم عن الضوء. يتم حقن ناقل فيروسي يشفر opsin ، وهو قناة أيونية حساسة للضوء ، في DCN بعد بضع القحف والشفط المخيخي للوصول المباشر. تسمح opsins المعبر عنها بتنشيط الخلايا العصبية بالضوء ، مما يوفر نموذجا لدراسة استجابات المسار السمعي باستخدام علم البصريات الوراثي.

نقل الجينات بوساطة الفيروس إلى نواة القوقعة الظهرية للفأر للتحفيز السمعي الناجم عن الضوء

يعرض هذا الفيديو فغر القناة، وهو إجراء يسمح بتوصيل الدواء الموضعي إلى الأذن الداخلية للفأر عبر القناة نصف الدائرية مع الحد الأدنى من الضرر الذي يلحق بالسمع والوظيفة الدهليزية. تتيح هذه الطريقة تلقيح النواقل الفيروسية والمستحضرات الصيدلانية والجزيئات الصغيرة في الأذن الداخلية للفأر.

فغر القنال لتوصيل المخدرات المحلية إلى الأذن الداخلية للفأر البالغ

المصدر: Akil، O.، et al.، الطريقة الجراحية لتوصيل الجينات بوساطة فيروسى إلى الأذن الداخلية للفأر من خلال غشاء النافذة المستديرة. J. Vis. Exp. (2015)يوضح هذا الفيديو إجراء توصيل جين علاجي إلى الأذن الداخلية لجرو فأر مصاب بفقدان السمع المستحث وراثيا. باستخدام ناقل فيروسي مرتبط بالغدة (AAV) ، يتم حقن الجين من خلال غشاء النافذة المستدير ، مما يسمح للجزيئات الفيروسية بدخول خلايا الشعر ، واستعادة إنتاج ناقل الغلوتامات ، وإعادة إنشاء الإشارات الصوتية إلى الدماغ.

العلاج الجيني القائم على النواقل الفيروسية لاستعادة السمع في نموذج الفأر

يسمح النهج الجراحي التالي للأذن الموصوف بالتوصيل السريع والمباشر إلى قوقعة الأذن للفأر مع تقليل فقدان الدم ووفيات. يمكن استخدام هذه الطريقة للعلاج بالوقوقعة الصناعية باستخدام التوصيل الجزيئي والدوائي والفيروسي إلى فئران ما بعد الولادة من خلال غشاء النافذة المستديرة.

الطريقة الجراحية لفيروسي وساطة جين التسليم إلى الأذن الداخلية الماوس من خلال جولة النافذة غشاء

نقدم طريقة تصف عزل واستزراع استنخاذ القوقعة الصناعية من الأذن الداخلية للفأر الجنينية.  نوضح أيضا طريقة لنقل الجينات إلى مستخلصات القوقعة الصناعية عبر التثقيب الكهربائي ذو الموجة المربعة. تمكن ثقافة الزرع في المختبر إلى جانب تقنية نقل الجينات الباحثين من دراسة تأثيرات تغيير التعبير الجيني أثناء التطوير.

ثقافة الجنينية الماوس القوقعة إإكسبلنتس وجين نقل من قبل Electroporation لل

الهدف من هذا البروتوكول هو تحديد نهج جراحي لتوفير الوصول المباشر إلى نواة القوقعة الظهرية في نموذج الفئران.

التصور المباشر من الفئران الظهرية القوقعة نواة لOptogenetic تحفيز من المسار السمعي

تم وصف نهجين للجراحة المجهرية لتوصيل الدواء الموضعي إلى الأذن الداخلية هنا ومقارنتين من حيث التأثير على معلمات السمع والبنية الخلوية للقوقعة والتعبير عن علامات الالتهاب.

دراسة مقارنة بين المخدرات طرق التسليم المستهدفة إلى الأذن ماوس الداخلية: Bullostomy مقابل بطريق غشاء الطبل حقن

والهدف من هذا البروتوكول هو للتدليل على إعداد والثقافة والعلاج، والمناعية من إكسبلانتس القوقعة الفئران حديثي الولادة. ويمكن استخدام هذه التقنية كأداة في المختبر الفحص في سماع البحوث.

حديثي الولادة الفئران كوكلار تقنية إكسبلانت باعتبارها<em&gt; في المختبر</em&gt; أداة الفحص في أبحاث السمع

نحن تقرير طريقة جراحية لإدارة المخدرات بالإذن الداخلية من الرئيسيات غير البشرية، مرموز المشتركة (جاكتشوس كاليثريكس)، عبر غشاء النافذة جولة.

إجراء العمليات الجراحية "إدارة المخدرات" بالإذن الداخلية في الإنسان عدم "المهيمنة مرموز المشتركة" (جاكتشوس كاليثريكس)

هنا يمكننا وصف الإجراء كانالوستومي الذي يتيح إيصال الأدوية المحلية إلى آذان الفئران الكبار والأطفال حديثي الولادة من خلال القناة نصف دائري مع الحد الأدنى من الأضرار الداخلية للوظيفة السمعية والدهليزيه. يمكن استخدام هذا الأسلوب لتطعيم النواقل الفيروسية، والمستحضرات الصيدلانية، والجزيئات الصغيرة في الإذن الداخلية الماوس.

كانالوستومي كنهج العمليات جراحية لإيصال الأدوية المحلية إلى آذان الداخلية من الفئران الكبار والأطفال حديثي الولادة

تعلم طريقة النهج الخلفي نصف دائري القناة لإيصال الجينات إلى الأذن الداخلية في فئران حديثي الولادة. هذه التقنية الجراحية الموثوقة تتيح إيصال العلاج الجيني بكفاءة عالية للأذن الداخلية بالكامل.

النهج الخلفي نصف دائري قناة لإيصال الجينات الإذن الداخلية في الماوس الأطفال حديثي الولادة

استكشف المزيد من الفيديوهات