في فيفو تقييم التنمية دشبذ الكسر أثناء التئام العظام في الفئران باستخدام جهاز الصدمة المتوافقة مع التصوير بالرنين المغناطيسي لعظم الفخذ الماوس

الهدف العام من هذه التقنية هو استخدام التصوير بالرنين المغناطيسي ، أو التصوير بالرنين المغناطيسي ، للتقييم الطولي لتطور الكالس في كسر الفئران أثناء التئام العظام. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال التئام العظام مثل كيفية تطور مسامير الكسر بمرور الوقت في نماذج الفئران المختلفة. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في أنه يمكن مراقبة تطور الكالس في الجسم الحي في الوقت الفعلي وأن المثبت الخارجي المطبق يوفر نموذجا قياسيا للغاية لشفاء الكسور.

ستظهر إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي آن سوبجانج ، وهي فنية من منشأة Small Animal Imaging Core. قبل البدء في الإجراء ، تأكد من المستوى المناسب من التخدير بسبب عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم وحقن الفأر تحت الجلد بجرعة واحدة من المضادات الحيوية في مستودع سائل مرتين في 250 ميكرولتر من 0.9٪ كلوريد الصوديوم. ضع مرهما على عيون وضع الماوس على وسادة تسخين 37 درجة مئوية.

قم بإزالة الفراء من الطرف الخلفي الأيمن وافرك منطقة الجراحة بمطهر يحتوي على الكحول. ضع ستارة معقمة فوق مع ترك المنطقة الجراحية مكشوفة ، وقم بتغطية المخلب الخلفي الأيمن بقطعة صغيرة من قفاز معقم. افرك المنطقة الجراحية ثلاث مرات أخرى بمطهر.

بعد ذلك ، باستخدام مشرط معقم بالأوتوكلاف ، قم بعمل شق جلدي طولي بطول سنتيمتر واحد تقريبا على طول الجانب الداخلي من عظم الفخذ الأيمن واستخدم مقصا دقيقا وملقطا لفصل العضلة ذات الرأسين الفخذية والعضلات الجانبية الواسعة. قم بقص إدخال الوتر عند مدور عظم الفخذ للسماح بالوصول الحر إلى الجزء الأمامي الوحشي من العظم مع الحرص على الحفاظ على العصب الوركي ، ووضع المثبت الخارجي بالتوازي مع عظم الفخذ. باستخدام مثقاب 0.45 ملم ، قم بحفر ثقوب التجويف يدويا من خلال القشرة.

وبدءا من النهايات القريبة والبعيدة ، ضع دبابيس التثبيت الخزفية في الثقوب. عندما يتم وضع جميع المسامير ، قم بترطيب العظم بكمية صغيرة من المحلول الملحي المعقم واستخدم منشار سلكي جيجلي 0.4 ملم لإنشاء قطع عظم 0.4 ملم من خلال عظم الثقب بين الدبابيس الداخلية. اغسل فجوة قطع العظم بعناية باستخدام ملليلترين من المحلول الملحي المعقم لإزالة أي رقائق عظمية من بين القشرتين المكسورتين واستخدم خياطة مستمرة قابلة للامتصاص لتكييف العضلات متبوعة بتكيف الجلد باستخدام خيوط متقطعة غير قابلة للامتصاص.

ثم نظف المنطقة الجراحية بالمطهر وأعد الفأر إلى قفصه مع المراقبة حتى الشفاء التام. في وقت مبكر من ثلاثة أيام بعد الجراحة ، أدخل المثبت الخارجي بعناية في جهاز تثبيت مخصص وضع الماوس المخدر على مهد يتم التحكم في درجة حرارته لإدخاله في جهاز التصوير بالرنين المغناطيسي. قم بتوصيل المثبت الخارجي بشكل صارم بجهاز التثبيت الموجود على ملف الرأس المكون من أربعة عناصر ، واستخدم نظام التصوير بالرنين المغناطيسي المخصص للحيوانات الصغيرة عالية المجال يعمل عند 11.7 تسلا لتطبيق تسلسل صدى توربو متعدد الشرائح مثبط للدهون بكثافة البروتونات على الكسر.

عندما يتم الحصول على جميع الصور ، افتح البيانات في برنامج تحليل الصور المناسب وأدخل حجم فوكسل على أنه 0.05 × 0.05 × 0.35 ملم مكعب. لتقسيم الأنسجة المختلفة في مسمار الكسر مع عتبة شبه تلقائية بناء على شدتها، انقر أولا على حقل تحرير تسمية جديدة وانقر فوق إضافة مادة. أعد تسمية المادة إلى الكالس ، واستخدم أداة lasso لتمييز منطقة الكالس عن الأنسجة المحيطة بناء على إشارة نقص الشدة من السمحاق.

انقر على إضافة إلى المادة، ثم انقر على إضافة مادة وأعد تسمية المادة إلى الغضروف. باستخدام أداة العتبة ، قم بتقسيم الغضروف وحدد المادة الحالية فقط من الكالو. ثم انقر فوق الغضروف وإضافة إلى المادة.

عندما يتم تقسيم جميع الأنسجة، انقر فوق Generate surface، وقم بتطبيق None لنوع التنعيم وانقر فوق Surface View لإنشاء عمليات إعادة بناء ثلاثية الأبعاد لعظم الفخذ المكسور بناء على بيانات تجزئة الأنسجة. يمكن تأكيد الإجراء الجراحي الناجح عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي للكسر الذي يظهر جميع المسامير الأربعة في منتصف عمود الفخذ مع وجود فجوة في قطع العظم بين 0.3 و 0.5 ملم. في اليوم العاشر بعد الجراحة ، يكشف تقييم الفحوصات الطولية أثناء عملية التئام الكسر عن نسيج غضروفي في منتصف مسمار الكسر والأنسجة العظمية في محيط الكسر.

تزداد كل من الأنسجة الغضروفية والعظمية حتى اليوم 14. ثم ينخفض النسيج الغضروفي حتى اليوم 21 ، وعند هذه النقطة يمكن ملاحظة الجسر العظمي. بعد تجزئة الأنسجة المختلفة في مسمار الكسر كما هو موضح للتو ، يمكن إجراء فحص كامل لعظم الفخذ ثلاثي الأبعاد مع ظهور القشرة الناضجة باللون الرمادي ، ودبابيس السيراميك المميزة باللون الأصفر ، والأنسجة الرخوة الكالس باللون الأخضر ، والأنسجة الغضروفية باللون الأحمر والأنسجة العظمية الكالس المشار إليها باللون الأرجواني.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تطبيق مثبت خارجي على عظم الفخذ لإنشاء قطع عظم الفخذ وإدخال الماوس في جهاز التصوير بالرنين المغناطيسي لضمان وضع مسح موحد. بمجرد إتقان ، يمكن إكمال تطبيق المثبت الخارجي وتقنية قطع العظم في غضون 20 إلى 30 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.