يناير 5, 2018
ويصف هذا البروتوكول استخدام تمازي المعدلة لتقييم التعلم/الذاكرة الفنية في الاختناق الناجم عن السكتة القلبية الاسكيمية الدماغي.
الهدف العام من متاهة T المعدلة هو تقييم التعلم الوظيفي والذاكرة بعد نقص التروية الدماغي الناجم عن السكتة القلبية. يمكن أن يساعد زملاء الفريق المعدلون في الاستجابة لوظيفة الحصين في الأمراض التي تسبب عجزا في الذاكرة على المدى القصير ، مثل السكتة القلبية. الميزة الرئيسية لمتاهة T المعدلة هي تصميمها البسيط نسبيا.
هذا قوي بما يكفي لقياس ذاكرة التعلم الوظيفية بعد نقص التروية. بالإضافة إلى ذلك ، فإن تحليل البيانات بسيط ومباشر. نظرا لأن السكتة القلبية الخانقة تؤدي بشكل أساسي إلى عجز في الذاكرة قصيرة المدى ، يمكن أيضا تطبيق متاهة T المعدلة على أمراض الجهاز العصبي المركزي الأخرى ، والتي تسبب عجزا في الذاكرة على المدى القصير.
مثل مرض الزهايمر ومرض باركنسون والنوبة الإقفارية العابرة. بعد القسطرة الفخذية والشريانية والوريدية ، اضبط المعلمات الفسيولوجية حسب الحاجة عن طريق تعديل حجم السكتة الدماغية أو الأكسجين أو مستويات أكسيد النيتروز. ثم استخدم حقنة سعة مليلتر واحد متصلة بمحول كعب إغراء قياس 23 ، لإدارة بروميد الفيكورونيوم عبر الوريد الفخذي وانتظر لمدة دقيقتين.
تأكد من أن ضغط الدم عند أو حوالي 100 ملليمتر من الزئبق. إحداث انقطاع النفس لمدة ست دقائق عن طريق فصل الأنبوب الرغامي عن جهاز التنفس الصناعي. مزيد من منع أنبوب القصبة الهوائية بواسطة حقنة ملليلتر واحد لضمان انقطاع النفس الكامل.
خلال الدقيقة الأخيرة من انقطاع النفس ، اضبط معدل التنفس الصناعي على 80 نفسا في الدقيقة وقم بزيادة الأكسجين إلى لترين في الدقيقة مع أكسيد النيتروز بنسبة صفر بالمائة لتفجير أي متبقي من الأيزوفلوران أو أكسيد النيتروز المتبقي في جهاز التنفس الصناعي. بعد ست دقائق من انقطاع النفس ، قم بإزالة حقنة المليلتر الواحد من الأنبوب الرغامي. أعد توصيل أنبوب القصبة الهوائية بجهاز التنفس الصناعي.
بعد ذلك ، استخدم حقنة سعة مليلتر واحد متصلة بمحول كعب إغراء قياس 23 لإدارة الأدرينالين عبر الوريد الفخذي. قم بإجراء ضغطات يدوية على الصدر عن طريق الإبهام والسبابة والإصبع الأوسط على صدر ، بحركة دائرية خفيفة على المحورين X و Z ، حتى عودة الدورة الدموية التلقائية. ثم استخدم حقنة أخرى من حجم المليلتر متصلة بمحول كعب إغراء قياس 23 لإدارة بيكربونات الصوديوم عبر الوريد الفخذي ، مباشرة بعد العودة إلى الدورة الدموية التلقائية ، للتخفيف من الحماض التنفسي.
بعد 10 دقائق من الإنعاش ، قم بقياس غازات الدم مرة أخرى لتحديد حالة القاعدة الحمضية. استخدم الإرقاء لتثبيت الشريان الفخذي والوريد. قم بإزالة القسطرة الشريانية والوريدية ببطء ورفق باستخدام ملقط غير حاد.
ثم شريان الفخذ والوريد بخياطة حريرية 5 O لمنع النزيف. أغلق الجلد المغطى بموقع الجراحة بخياطة حريرية 3 O باستخدام تقنية الخياطة المتقطعة ، لتقليل فرصة إعادة فتح الجرح. بعد أن يبدأ الجرذ في التنفس من تلقاء نفسه ، بعد 30 إلى 60 دقيقة من الإنعاش ، افصل عن جهاز التنفس الصناعي وقم بإزالة الأنبوب الرغامي برفق.
ضع الجرذ في حاضنة الأطفال طوال الليل. أخيرا ، انقل الفئران إلى القفص الفردي وأعد الجرذ إلى منشأة بالطعام والماء العاديين. في اليوم السابق للجراحة ، تعامل مع كل فأر لمدة خمس دقائق ولا ترفع الجرذ من القفص عند التعامل معه.
ثم التقطها برفق من ذيلها بيد واحدة ، بينما تدعم اليد الأخرى ساقيها ، واتركها تقفز من اليد إلى القفص خمس مرات. افصل كل فأر إلى أقفاص فردية حتى لا تهيمن على الطعام و / أو القتال. ثم بعد ثلاثة أيام من الجراحة الوهمية أو ACA ، انقل الجرذ مع القفص إلى غرفة هادئة ومظلمة قبل بدء الجولة الأولى.
قمفقط بتشغيل مصباح مكتبي منخفض الطاقة ، وضعه في زاوية غرفة الاختبار للحفاظ على الحد الأدنى من الإضاءة. اسمح للفأر بالتكيف مع الظلام لمدة 10 دقائق. بعد ذلك ، انشر طبقة رقيقة من الفراش لتغطية أرضية المتاهة بالكامل ووضع الجرذ في ذراع البداية.
اترك كل فأر ثلاث دقائق لاستكشاف ذراع المرمى الأيمن أو الأيسر. بعد أن يلتزم الجرذ بأحد أذرع المرمى ، عندما تدخل جميع الكفوف الأربعة للفأر إلى ذراع المرمى ، قم بقفل تقاطع T بين ذراع البداية وذراع المرمى المقابل لمنع الجرذ من دخول ذراع المرمى المقابل. اترك الجرذ في المتاهة لمدة 30 ثانية.
ثم التقط الجرذ وضعه مرة أخرى في قفصه لمدة 30 ثانية تقريبا. ثم قم بإزالة كتلة التوصيل T من متاهة T. ضع الجرذ في ذراع البداية مرة أخرى وكرر الاختبار لتحديد التناوب التلقائي.
اطلب من الفئران أداء أربعة أشواط يوميا مع استراحة لمدة 10 دقائق بعد أول جولتين. أخيرا ، قم بتغيير الفراش خلال استراحة 10 دقائق وبين للتخلص من تحيز الرائحة. نظف متاهة T بنسبة 75٪ من الإيثانول متبوعا بالماء المقطر في نهاية كل يوم تجريبي.
تشير نتائج اختبار التناوب التلقائي إلى أن معدل التناوب من ثلاثة أيام متتالية في مجموعة ACA كان أقل بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة الضابطة. هذا يرجع إلى حقيقة أن الفئران المعرضة ل ACA طورت زيادة في التفضيل الجانبي مقارنة بالضوابط. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية استخدام متاهة T المعدلة هذه لتقييم عجز الذاكرة قصير المدى بعد نقص التروية الدماغية في القوارض.
أثناء محاولة هذه المتاهة T المعدلة ، من المهم سد الذراع المعاكسة برفق بعد دخول الجرذ إلى أحد أذرع الهدف. بالإضافة إلى ذلك ، يجب إجراء متاهة T في غرفة مظلمة مع الحد الأدنى من الإضاءة ، مما يقلل من قلق الفئران.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يصف هذا البروتوكول استخدام متاهة T المعدلة لتقييم التعلم والذاكرة الوظيفية بعد نقص التروية الدماغية الناجم عن التوقف القلبي. يتميز تصميم متاهة T المعدلة بالبساطة والفعالية في قياس قصور الذاكرة المرتبط بنقص التروية.
يدعم تقييم قصور الذاكرة قصيرة المدى في النماذج قبل السريرية لتوقف القلب التحقق من صحة الأهداف للعلاجات الواقية للأعصاب. توفر متاهة T المعدلة طريقة قابلة للتكرار ومنخفضة الإجهاد لقياس الذاكرة العاملة المعتمدة على الحصين، مما يتيح تقليل المخاطر الميكانيكية في مراحل الاكتشاف المبكرة. ويعزز هذا النهج الثقة التنبؤية عند تقييم المركبات المخصصة للاستعادة المعرفية بعد نقص التروية.
تتناسب متاهة T المعدلة ضمن سلسلة الاكتشافات بدءاً من التحقق من الهدف وصولاً إلى تحسين المركبات الرائدة، لاسيما في برامج الجهاز العصبي المركزي التي تعالج المؤشرات الإقفارية أو التنكسية العصبية.