حقن إينتراميوكارديال توجيه ضربات القلب التباين عن طريق الجلد وتسليم خلية في نموذج الإكلينيكية كبير

الهدف العام من هذا الإجراء هو توصيل كمية من الحقن بأمان ودقة في عضلة القلب البطين الأيسر لقلب الأرنب. وللقيام بذلك من خلال الاستفادة من إرشادات تخطيط صدى القلب عن طريق الجلد. يتم تحقيق ذلك عن طريق تخدير أولا ، ثم تحضير الصدر للإجراء.

بعد ذلك ، بعد وضع الأرنب على بطانية حرارية ، والتحقق من عرض إشارة تخطيط القلب بشكل صحيح ، استخدم نظام الموجات فوق الصوتية السريرية للحصول على نافذة صوتية مناسبة ، وتحسين الصورة في مجال رؤية واسع. بعد ذلك ، بعد تحميل المحقنة بخلايا ملحوظة ممزوجة بعامل تباين مناسب ، وتحت توجيه الموجات فوق الصوتية ، قم بمحاذاة الإبرة المقابلة لمحول الطاقة بعناية ووضعها بالقرب من جلد نصفي اليسار ، قبل إبطاء تقدم الإبرة إلى المنطقة المستهدفة من عضلة القلب. أخيرا ، يتم توصيل الحقن بأمان كما يتضح من فرط الصدى عبر الجدران في موقع الحقن في صورة تخطيط صدى القلب.

في النهاية ، يتضح التأكيد خارج الجسم الحي للتسليم الناجح للحقن من خلال وجود صبغة في عضلة القلب ، بينما يتم استخدام التحليل الكيميائي المناعي المقطعي لأقسام أنسجة عضلة القلب لإظهار التسليم الناجح لعلامة الخلية والصبغة في عضلة القلب المستهدفة. الغرض من هذا الفيديو هو توضيح كيفية أداء هذه التقنية بأمان ودقة ، من أجل إمكانيتنا ، على أرنب اليوم ، باستخدام نظام تخطيط صدى القلب الكليني. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في الطبيعة البسيطة والأساسية للآلة ، والقدرة على استخدام إرشادات تخطيط صدى القلب المتباينة للتصور الدقيق للمواقع المستهدفة للحقن ، وبالتالي تقليل مخاطر التوصيل العرضي بين الغرف إلى الحد الأدنى.

قبل الشروع في الحقن داخل القلب ، ابدأ بحقن مزيج من الكيتامين والميديتوميدين لتخدير. كما هو موضح ، يظل الأرنب هادئا عندما يكون الرأس مغطى ببطانية جراحية. بمجرد تخدير ، استخدم ماكينة قص الشعر لإزالة الشعر من جلد الصدر ، بدءا من أسفل الرقبة ، ثم الانتقال إلى المنطقة تحت الوحرة.

حلق مناطق إضافية من واحد إلى ثلاثة سنتيمترات من الوجه الداخلي للطرف الأمامي الأيمن بالإضافة إلى مناطق الظنبوب الإنسي لكل من الأطراف الخلفية اليمنى واليسرى. بعد ذلك ، ضع جل موصل مناسب على الأقطاب الكهربائية وضعها في المناطق المحلوقة من الأطراف. قم بتثبيت الأقطاب الكهربائية بشريط جراحي لمنع فقدان الاتصال أثناء تحريك أثناء العملية.

بعد ذلك ، ضع على بطانية حرارية ، وتحقق من عرض إشارة تخطيط القلب الصحيحة على شاشة النظام ، وحافظ على في وضع الاستلقاء واسمح للحيوان بالتنفس تلقائيا أثناء إعطاء الأكسجين بواسطة قناع الوجه طوال الإجراء. نظف وتطهير جلد الصدر المحلوق جيدا بمحلول يحتوي على الكلورهيكسيدين. للحفاظ على ملامسة جيدة للجلد مع محول الطاقة ، ولتقليل القطع الأثرية وتحسين جودة التصوير الشاملة ، ضع كمية كافية من هلام الموجات فوق الصوتية على محول الطاقة.

بعد ذلك ، ضع محول الطاقة يدويا في المساحة الوربية الرابعة إلى السادسة على بعد سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات من الخط العظمي الأيمن ، وبزاوية حدوث شعاع الموجات فوق الصوتية تبلغ حوالي 90 درجة ، بالنسبة لجدار الصدر. تأكد من أن علامة اتجاه محول الطاقة متجهة للأمام لتسهيل محاذاتها مع الإبرة في الخطوات اللاحقة. يجب أن تحصل على عرض المحور القصير للقلب على مستوى العضلات الحليمية

ومن المهم أن يكون لديك مجال رؤية واسع من خلال زيادة العمق مع التحكم المناسب في النظام. إذا لزم الأمر ، اضبط موقع محول الطاقة بالنسبة للمساحة الوربية ، بالإضافة إلى الزاوية الأمامية الخلفية والظهرية البطنية لتحسين الصورة ، ثم حدد في هذا العرض البطين الأيمن ، RV ، البطين الأيسر ، LV ، الحاجز بين البطينين ، IVS ، الجدار الخلفي ، PW ، وكذلك العضلات الحليمية الأمامية والخلفية الإنسية. انتبه بشكل خاص للحصول على صورة متماثلة في هذا العرض ، بالإضافة إلى التمايز المناسب بين التواءات الشغاف والنقابية ، وإذا لزم الأمر ، اضبط من خلال عناصر التحكم في تحسين الصورة مثل التحكم في الكسب.

بمجرد الحصول على عرض تخطيط صدى القلب الصحيح ، حافظ على هذا الوضع طوال بقية الإجراء بينما يقوم عامل ثان بإجراء الحقن داخل عضلة القلب. لهذا الغرض ، استخدم حقنة محملة مسبقا مع إبرة متصلة والتي يجب وضعها بالقرب من جلد نصفي اليسار في وضع انعكاس متماثل فيما يتعلق ب transteureax. بعد ذلك ، قم بمحاذاة الإبرة يدويا مع علامة اتجاه محول الطاقة بزاوية 90 درجة تقريبا وقم بتحريك الإبرة ببطء عبر الجلد إلى تجويف الصدر.

يسمح إدخال الإبرة عن طريق الجلد في هذا الموضع والاتجاه بتصور الإبرة في مستوى شعاع الموجات فوق الصوتية ، مما يسمح بالمراقبة في الوقت الفعلي ، وعند الضرورة ، تعديل موقع الإبرة بالنسبة للمنطقة المستهدفة من عضلة القلب ، كما هو موضح هنا. لاحظ في هذه الصورة وجود الإبرة في غرفة البطين الأيسر ، كما هو موضح برؤوس الأسهم. يمكن بسهولة إعادة وضع هذا عن طريق سحب الإبرة برفق وإعادة وضعها إلى الموقع المطلوب.

مع وضع الطرف في الموقع المستهدف ، قم بتوصيل الحقن ببطء على مدى 20 إلى 30 ثانية ، مع سحب الإبرة ببطء ولطف لزيادة مدى عضلة القلب المعالجة. إجراء تغييرات طفيفة في زاوية حدوث الإبرة حسب الضرورة لإكمال الحقن في أربعة مواقع للحقن داخل القلب. واحد في الحاجز البطيني ، وثلاثة في جدار البطين الأيسر الحر ، ويوفر حجما قدره 250 ميكرولتر من الحقن لكل موقع حقن.

بعد الانتهاء من الإجراء ، استمر في مراقبة فحوصات تخطيط صدى القلب ثنائية السلسلة للأرنب ، بالإضافة إلى تتبع تخطيط القلب للتحقق من عدم وجود مضاعفات ثانوية للإجراء ، حتى يستيقظ تماما من التخدير. ينصح باستخدام مراقبة هولتر لتخطيط القلب على مدار 24 ساعة للمساعدة في تحديد آثار الحقن داخل القلب على إيقاع القلب. باستخدام البروتوكول الموصوف هنا ، بمجرد تأكيد وضع القلب الداخلي لطرف الإبرة عن طريق تخطيط صدى القلب ، وبدء الحقن ، لوحظ فرط الصدى أثناء تسليم حبر الهند إلى المنطقة المستهدفة في عرض المحور القصير هذا ، رؤوس الأسهم البيضاء.

شوهد فرط الصدى أيضا بعد فترة وجيزة من الحقن كما هو موضح في هذا المحور الطويل للقلب حيث يمكن رؤية صورة الصدى الساطعة بوضوح في رؤوس الأسهم البيضاء بين البطينين. عندما تبع الحقن داخل القلب مباشرة القتل الرحيم ، كانت رواسب الحبر الهندي مرئية بسهولة عند الفحص الخارجي للقلب ، كما هو موضح في هذه الصورة. رؤوس الأسهم السوداء.

وبالمثل ، كشفت أقسام أنسجة القلب على مستوى العضلات الحليمية عن رواسب عابرة للحبر الهندي في الجدار الحر للبطين الأيسر ، ورؤوس الأسهم السوداء ، مما يدل على توصيل فعال وفعال للحقن في عضلة القلب. في هذه الصورة نفسها ، كان هناك أيضا ترسيب من الحبر الهندي في الحاجز بين البطينين. سهم أبيض.

في حين أن الإجراء كان جيد التحمل بشكل عام ، كان من الشائع جدا ملاحظة تسارع أو تباطؤ عابر في معدل ضربات القلب ، المرتبط بالتقلصات البطينية المبكرة المعزولة ، PVC ، أثناء العملية وبعدها بفترة وجيزة. في الواقع ، كشفت المراقبة باستخدام مخطط كهربية القلب هولتر على مدار 24 ساعة في التي تلقت حقنة داخل القلب بالحبر الهندي أن عدم انتظام ضربات القلب كان شائعا جدا وأن تواترها النسبي يمكن أن يتأثر بالحالة الفسيولوجية الأساسية للحيوان. تظهر هذه الصورة مثالا على عدم انتظام ضربات القلب المعزول، وهو اضطراب النظم القلبي الأكثر ملاحظة، والذي تم اكتشافه أثناء مراقبة هولتر.

مقارنة بين مجموعة من الأرانب ذات النمط الظاهري الطبيعي ، ومجموعة من الأرانب التي تلقت دوكسوروبيسين عن طريق الوريد ، أو DOX ، وهو دواء سام للقلب والسرطان ، لمدة ثمانية أسابيع. قبل الحقن داخل القلب بالحبر الهندي ، أشار إلى أن PVCs المعزولة كانت أكثر تواترا بشكل ملحوظ في مجموعة DOX. كانت عدم انتظام ضربات القلب الأخرى التي تم اكتشافها بواسطة مراقبة هولتر لتخطيط القلب في كلتا المجموعتين هي مقاطع PVC ، وثلاثة توائم PVC ، وعدم انتظام دقات القلب البطيني غير المستمر.

بشكل ملحوظ ، في حين أن متوسط معدل ضربات القلب في المجموعات الطبيعية و DOX كان قابلا للمقارنة ، فإن الانحراف المعياري للطبيعي إلى الطبيعي ، وفترات R إلى R ، أو SDNN ، وهو مقياس للديناميكيات غير الخطية المتعلقة بحالة صحة القلب ، أظهر انخفاضا ملحوظا في المجموعة المعالجة بالدوكسوروبيسين. قبل الإجراء ، تم تأكيد التعدي الناجح لبروتين الفلورسنت الأخضر المعزز ، والخلايا المميزة الإيجابية eGFP ، عن طريق الفحص المجهري الفلوري أثناء ظروف زراعة الخلايا في المختبر. بعد ذلك ، عند الحقن داخل القلب ، والذي تبعه مباشرة القتل الرحيم ، تم إثبات التسليم الناجح للخلايا المميزة eGFP في عضلة القلب من خلال التحليل الكيميائي المناعي لأقسام أنسجة القلب.

وهكذا ، كما هو موضح في هذه الصورة ، كانت هناك خلايا ملحوظة وفيرة داخل عضلة القلب. رؤوس أسهم سوداء تتخللها رواسب حبر الهند. كانت رواسب الحبر الهندي والخلايا الإيجابية eGFP الوفيرة ، رؤوس الأسهم البيضاء ، لا تزال موجودة عندما تأخر القتل الرحيم لمدة 24 ساعة بعد الحقن داخل القلب.

وتجدر الإشارة إلى أنه لوحظت استجابة التهابية حادة في هذه المرحلة الزمنية ، حيث تتسلل العدلات إلى عضلة القلب ، والسهام الحمراء ، مما يشير إلى استجابة رفض خلوية حادة للخلايا الغريبة التي تم زرعها. لوحظ أيضا التهاب حاد بعد 24 ساعة من الحقن داخل القلب بالحبر الهندي وحده. ومع ذلك ، في هذه الحالة ، كانت الخلايا السائدة التي تتسلل إلى عضلة القلب هي البلاعم.

رؤوس الأسهم البيضاء. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء حقن داخل القلب عن طريق الجلد ، مسترشدا بتخطيط صدى القلب على النقيض في قلب الأرنب. بمجرد إتقانها ، يمكن تنفيذ هذه التقنية في غضون 25 دقيقة بعد الركود.