Name: رواية في المختبر الجرح المقايسة الشفاء لتقييم الهجرة الخلية (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: اكتشف تقييم تأثير الببتيدات المعدلة للمناعة على هجرة الخلايا الظهارية القصبية باستخدام مقايسة الجرح المقايسة. توفر هذه الطريقة بيانات كمية سريعة وموثوقة لإغلاق الجرح.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

هذا العمل كانت مدعومة بتمويل من مؤسسة البحوث التليف الكيسي الإيطالية (مشروع تقصي الحقائق والتوفيق #11/2014 اعتمدته "الوفود تقصي الحقائق والتوفيق" من سيينا، فالتشيافينا سوندريو، سيارا إيل Sorriso دي جيني وبافيا) وجامعة سابينزا في روما. كما أيد جزءا من هذا العمل قبل فيلاس منحة سلطته فيلاس-رو-2014-1020.
ونحن ممتنون للدكتور لوريتا فيريرا (تم U.O.C. Medica، معهد جيانينا جاسليني، جنوا، إيطاليا) لتوفير الخلايا الظهارية الشعب الهوائية.

1-إعداد الخلية
<ol><li>البذور 2.5x106 خلايا في 10 مل من المتوسطة الأساسية الدنيا (MEM) تستكمل مع الجلوتامين 2 مم (ميمج)، بالإضافة إلى 10% مصل بقرى الجنين (FBS) والمضادات الحيوية (0.1 مغ/مل من البنسلين وستربتوميسين) بوروميسين (0.5 ميكروغرام/ملليلتر لاختيار وصيانة الخلية خط) في قارورة T75. احتضان قارورة على 37 درجة مئوية و 5% CO2 لمدة يومين. قبل البدء التجربة، تحقق التقاء الخلايا تحت مجهر مقلوب. ملاحظة: الخلايا المستخدمة للتجربة هي مخلدة الخلايا الظهارية الشعب الهوائية الإنسان عشر ترانسدوسيد مع ناقل لينتيفيرال منح المقاومة إلى بوروميسين. ستابلي يعربون عن14،CFTR فنية15.</li>
	<li>بمجرد التقاء الخلايا وصلت إلى 90-100%، نضح المتوسطة من قارورة وتخلص منه في زجاجة نفايات تحت فئة سلامة بيولوجية مجلس الوزراء ثانيا. تغسل الخلايا مع 6 مل فوسفات مخزنة المالحة دون الكالسيوم والمغنيسيوم (مركز المرأة والأسرة-برنامج تلفزيوني). بلطف روك قارورة يدوياً وتجاهل الأسرة-برنامج تلفزيوني. ملاحظة: كن حذراً لا للمس المونولاير الخلية مع الماصة.</li>
	<li>أضف 10 مل من مركز المرأة والأسرة-برنامج تلفزيوني واحتضان قارورة على 37 درجة مئوية و 5% CO2 لمدة 10 دقائق.</li>
	<li>نضح الأسرة-برنامج تلفزيوني وتجاهل ذلك. ثم أضف 2 مل من التربسين/أدتا إلى قارورة.</li>
	<li>روك بلطف قارورة، مما يتيح حل تماما معطف الخلايا، واحتضان قارورة على 37 درجة مئوية و 5% CO2 لمدة 10 دقائق حتى يتم فصل الخلايا مرئية تحت مجهر. ملاحظة: في نهاية فترة الحضانة، وينبغي أن تظهر الخلايا مدورة ولا تعلق على سطح البلاستيك. إذا كانت الخلايا غير منفصلة تماما، قد يلزم الانفعالات اليدوي.</li>
	<li>أضف 10 مل من ميمج بالإضافة إلى 10% FBS لإلغاء تنشيط التربسين وجمع الخلايا بغسل الجزء السفلي قارورة. تحويل وحدة التخزين إلى أنبوب مخروطي 50 مل.</li>
	<li>الطرد المركزي في أنبوب لمدة 5 دقائق في 80 x ز.</li>
	<li>نضح المادة طافية وتعليق إعادة الخلايا في 6 مل ميمج بالإضافة إلى 10% FBS. ماصة مرارا وتكرارا تفريق أي كتل.</li>
	<li>تأخذ 10 ميليلتر من تعليق خلية مع ميكروبيبيتي وحقن الحجم إطار الزجاج غطاء وضع سابقا أكثر من دائرة باركر أو نويباور.</li>
	<li>حساب عدد الخلايا.</li>
</ol>2-خلية البذر في الثقافة بإدراج
<ol><li>في كل من لوحة 12-جيدا جيدا، نقل إدراج الثقافة مع ملاقط معقمة (الشكل 1). استخدام الملقط للضغط على طول حواف إدراج بغية إصلاحها على سطح اللوحة. ملاحظة: قد يدرج الجانب السفلي لزجة تسمح الالتصاق.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56825/56825fig1.jpg"> الشكل 1 : التمثيل التخطيطي من إدراج ثقافة السيليكون، وضعت بشكل صحيح في آبار صفيحة 12-جيدا- <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56825/56825fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<ol start="2"><li>يضعف بشكل صحيح تعليق خلية في ميمج بالإضافة إلى 10% FBS. ملء كل حجرة من الإدراج مع 70 ميليلتر من تعليق خلية (حوالي 3.5x104 خلايا/الدائرة). ملاحظة: كثافة الخلايا التي تطبق في كل حجرة يعتمد على نوع الخلايا. من المستحسن استخدام كثافة خلايا يؤدي إلى إكمال التقاء خلال 24 ساعة.</li>
	<li>تحت المجهر، تحقق من عدم حدوث أي تسرب من المقصورات إدراج الخلايا واحتضان لوحة 12-جيدا عن 24 ساعة عند 37 درجة مئوية و 5% أول أكسيد الكربون2.</li>
</ol>3-شبه تجرح المقايسة الشفاء
<ol><li>وبعد الحضانة، تصور الخلايا تحت المجهر المقلوب للتحقق من أنه تم تشكيل خلية المتلاقية مونولاييرس.</li>
	<li>تعليق إعادة المركبات الاختبار (مثلاً الامبير) في 1 مل ميمج. ملاحظة: يعد تخفيف الامبير جديدة بدءاً من حل الأسهم المخزنة في-20 درجة مئوية.</li>
	<li>إزالة بلطف إدراج بملاقط معقمة. أن يكون حريصا على عدم كسر مونولاييرس الخلية. نقل إدراج على ورقة ماصة. ملاحظة: لإعادة استخدام إدراج نفس، وبهدف لهم في الإيثانول 70% على الأقل من 3 ح. من المستحسن للتخلص منها بعد ذلك.</li>
	<li>لإزالة الخلايا غير ملتصقة، أضف 1 مل ميمج الواحدة وكذلك استخدام ميكروبيبيتي. إغلاق اللوحة والصخرة بلطف. ملاحظة: لا تقم بإضافة المتوسطة مباشرة على رأس الخلية مونولاييرس تفادي تعطل بهم.</li>
	<li>نضح على المديين المتوسط واستبدله مع 1 مل ميمج في البئر. إغلاق اللوحة وتصور الفجوات الخلية الحرة (الذي أنشأته إدراج) تحت المجهر المقلوب في 4 X التكبير، مجهزة بكاميرا فيديو. الحصول على الصور في وقت صفر (T0) وحفظها في تنسيق.jpg.</li>
	<li>إزالة المتوسطة من الآبار وغسلها مع 1 مل من برنامج تلفزيوني، وتجاهل ذلك.</li>
	<li>إضافة اختبار المركبات (أعدت في النقطة 3، 2) للآبار. لعينات مراقبة غير المعالجة، وإضافة 1 مل ميمج. احتضان اللوحة في 37 درجة مئوية و 5% CO2.</li>
	<li>بعد 15، 20، ومعاملة ح 24، مراقبة الهجرة الخلية تحت المجهر في 4 X التكبير والحصول على الصور. ملاحظة: خلال هذه الخطوة، في محاولة لالتقاط الصور في نفس المناطق وبالنسبة T0. اختيار الفترات الزمنية التي يتم التقاط الصور يعتمد على سرعة الهجرة الخلية.</li>
	<li>لدراسة تأثير بعض مثبطات انتقائية، أي AG1478، على الهجرة الخلية، نضح المتوسطة من كل حجرة إدراج قبل إزالة إدراجات.<ol>
<li>تغسل كل حجرة مع ميمج جديدة وملء مع 70 ميليلتر من ميمج وتستكمل مع AG1478.</li>
		<li>وبعد 30 دقيقة من الحضانة في 37 درجة مئوية و 5% CO2، المضي قدما كما هو موضح من 3.3 نقطة. ملاحظة: أثناء خطوة الغسيل والمعالجة المسبقة للخلية مونولاييرس مع مثبطات محددة، يكون حريصا على عدم إزالة تدرج.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. تحليل الصورة
<ol><li>عند الانتهاء من هذه التجربة، حدد صور العينات الأكثر تمثيلاً لمختلف المجموعات التجريبية، وإنشاء ملف مضغوط يحتوي على صور واحدة في ح T0، T15، T20، و T24. ملاحظة: تؤخذ صور واحدة في الفترات الزمنية المحددة لجميع العينات. قم بتشغيل تريبليكاتيس لكل تجربة، والذي يتكرر ثلاث مرات على الأقل. في النهاية، للمجموعات التجريبية كل شيء، الحد ني صور 3 ("أ"، "ب"، "ج"، إلخ، المستمدة من كل تجربة مستقلة) عند كل نقطة الوقت يتم تحليلها.</li>
	<li>تحميل ملف مضغوط إلى برمجيات تحليل الصورة التي تقدم عن طريق البريد الإلكتروني تلقائياً ملف ملخص جدول بيانات التي تحتوي على البيانات التجريبية للمناطق المغطاة بالخلية والصفر (كنسبة مئوية) عند نقطة زمنية محددة. ملاحظة: يستند الاعتراف بالحافة الأمامية ومنطقة الفجوة إلى حد كبير على طريقة الكشف عن حافة (الرامية إلى تحديد النقاط التي يتغير سطوع الصورة حادا).</li>
	<li>حفظ البيانات وجمعها. تطبيع جميع البيانات فيما يتعلق بقيمة متوسط الوقت صفر. حساب قيمة المتوسط للبيانات الموحدة لجميع replicates عند كل نقطة الوقت والخطأ القياسي النسبي (SEM). باستخدام تحليل التباين ثنائي الاتجاه (ANOVA)، إجراء تحليل إحصائي مع برامج الإحصائية مناسبة. تعتبر الاختلافات بين مجموعات معاملة الببتيد ومجموعات التحكم في فترات زمنية مختلفة لتكون إحصائيا signiﬁcant ف&lt; 0.05.</li>
	<li>رسم البيانات التي تم الحصول عليها في رسم بياني كالرسم بياني، الذي يبين النسبة المئوية للمنطقة المغطاة بخلية لكل عينة المجموعات مقابل الفواصل الزمنية المحددة.</li>
</ol>

<ol><li>Enyedi, B., Niethammer, P. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25813429">Mechanisms of epithelial wound detection.</a> Trends Cell Biol. 25, 398-407 (2015).</li>
<li>Kujath, P., Kujath, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complicated+skin%2C+skin+structure+and+soft+tissue+infections+-+are+we+threatened+by+multi-resistant+pathogens%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Med+Res%22%5BJournal%5D)">Complicated skin, skin structure and soft tissue infections - are we threatened by multi-resistant pathogens?</a> Eur J Med Res. 15, 544-553 (2010).</li>
<li>Moreau-Marquis, S., Stanton, B. A., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+formation+in+the+cystic+fibrosis+airway%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Pseudomonas aeruginosa biofilm formation in the cystic fibrosis airway.</a> Pulm Pharmacol Ther. 21, 595-599 (2008).</li>
<li>Chiappini, E., Taccetti, G., de Martino, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+lung+infections+in+cystic+fibrosis+patients%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Infect+Dis+J%22%5BJournal%5D)">Bacterial lung infections in cystic fibrosis patients: an update.</a> Pediatr Infect Dis J. 33, 653-654 (2014).</li>
<li>Mangoni, M. L., McDermott, A. M., Zasloff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+peptides+and+wound+healing%3A+biological+and+therapeutic+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial peptides and wound healing: biological and therapeutic considerations.</a> Exp Dermatol. 25, 167-173 (2016).</li>
<li>Lau, K., Paus, R., Tiede, S., Day, P., Bayat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+role+of+stem+cells+in+cutaneous+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Exploring the role of stem cells in cutaneous wound healing.</a> Exp Dermatol. 18, 921-933 (2009).</li>
<li>Hu, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+engineering+and+regenerative+repair+in+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Tissue engineering and regenerative repair in wound healing.</a> Ann Biomed Eng. 42, 1494-1507 (2014).</li>
<li>Ramot, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+PPARgamma-mediated+signalling+in+skin+biology+and+pathology%3A+new+targets+and+opportunities+for+clinical+dermatology%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">The role of PPARgamma-mediated signalling in skin biology and pathology: new targets and opportunities for clinical dermatology.</a> Exp Dermatol. 24, 245-251 (2015).</li>
<li>Lai, Y., Gallo, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AMPed+up+immunity%3A+how+antimicrobial+peptides+have+multiple+roles+in+immune+defense%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">AMPed up immunity: how antimicrobial peptides have multiple roles in immune defense.</a> Trends Immunol. 30, 131-141 (2009).</li>
<li>Zasloff, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+peptides+of+multicellular+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial peptides of multicellular organisms.</a> Nature. 415, 389-395 (2002).</li>
<li>Hulkower, K. I., Herber, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration+and+invasion+assays+as+tools+for+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Cell migration and invasion assays as tools for drug discovery.</a> Pharmaceutics. 3, 107-124 (2011).</li>
<li>Di Grazia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+frog+skin-derived+antimicrobial+peptide+esculentin-1a%281-21%29NH2+promotes+the+migration+of+human+HaCaT+keratinocytes+in+an+EGF+receptor-dependent+manner%3A+a+novel+promoter+of+human+skin+wound+healing%3F%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The frog skin-derived antimicrobial peptide esculentin-1a(1-21)NH2 promotes the migration of human HaCaT keratinocytes in an EGF receptor-dependent manner: a novel promoter of human skin wound healing?</a> PLoS One. 10, e0128663(2015).</li>
<li>Di Grazia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((D-Amino+acids+incorporation+in+the+frog+skin-derived+peptide+esculentin-1a%281-21%29NH2+is+beneficial+for+its+multiple+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Amino+Acids%22%5BJournal%5D)">D-Amino acids incorporation in the frog skin-derived peptide esculentin-1a(1-21)NH2 is beneficial for its multiple functions.</a> Amino Acids. 47, 2505-2519 (2015).</li>
<li>Cappiello, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Esculentin-1a-derived+peptides+promote+clearance+of+Pseudomonas+aeruginosa+internalized+in+bronchial+cells+of+cystic+fibrosis+patients+and+lung+cell+migration%3A+biochemical+properties+and+a+plausible+mode+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">Esculentin-1a-derived peptides promote clearance of Pseudomonas aeruginosa internalized in bronchial cells of cystic fibrosis patients and lung cell migration: biochemical properties and a plausible mode of action.</a> Antimicrob Agents Chemother. 60, 7252-7262 (2016).</li>
<li>Bebok, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+cAMP+agonists+to+activate+rescued+deltaF508+CFTR+in+CFBE41o-+airway+epithelial+monolayers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Failure of cAMP agonists to activate rescued deltaF508 CFTR in CFBE41o- airway epithelial monolayers.</a> J Physiol. 569, 601-615 (2005).</li>
<li>Trinh, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+of+defective+cystic+fibrosis+airway+epithelial+wound+repair+after+CFTR+rescue%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Improvement of defective cystic fibrosis airway epithelial wound repair after CFTR rescue.</a> Eur Respir J. 40, 1390-1400 (2012).</li>
<li>Gan, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidermal+growth+factor+receptor+%28EGFR%29+tyrosine+kinase+inhibitor+AG1478+increases+the+formation+of+inactive+untethered+EGFR+dimers.+Implications+for+combination+therapy+with+monoclonal+antibody+806%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitor AG1478 increases the formation of inactive untethered EGFR dimers. Implications for combination therapy with monoclonal antibody 806.</a> J Biol Chem. 282, 2840-2850 (2007).</li>
<li>Tokumaru, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+keratinocyte+migration+via+transactivation+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+by+the+antimicrobial+peptide+LL-37%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Induction of keratinocyte migration via transactivation of the epidermal growth factor receptor by the antimicrobial peptide LL-37.</a> J Immunol. 175, 4662-4668 (2005).</li>
<li>Tjabringa, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antimicrobial+peptide+LL-37+activates+innate+immunity+at+the+airway+epithelial+surface+by+transactivation+of+the+epidermal+growth+factor+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">The antimicrobial peptide LL-37 activates innate immunity at the airway epithelial surface by transactivation of the epidermal growth factor receptor.</a> J Immunol. 171, 6690-6696 (2003).</li>
<li>Di Grazia, A., Luca, V., Segev-Zarko, L. A., Shai, Y., Mangoni, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporins+A+and+B+stimulate+migration+of+HaCaT+keratinocytes+and+kill+intracellular+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">Temporins A and B stimulate migration of HaCaT keratinocytes and kill intracellular Staphylococcus aureus.</a> Antimicrob Agents Chemother. 58, 2520-2527 (2014).</li>
</ol>

الكتاب لا تمت بصلة إلى الكشف عن

الهجرة الخلية عملية أساسية في العديد من الأحداث الفسيولوجية والمرضية بما في ذلك التئام الجروح، التطور الجنيني، وسرطان خبيث. ويشمل الإجراء الأساسي لدراسة الخلية الهجرة في المختبر : (ط) إنشاء خلية أحادي الطبقة، (ثانيا) إنتاج الجرح الزائفة في الطبقة المتلاقية للخلايا، يتم التوصل إلى الإغلاق (الثالث) التقاط الصور في فترات زمنية مختلفة حتى الجرح ، و (رابعا) تحليل تسلسل الصور من أجل قياس سرعة الهجرة من الخلايا المختارة.
النتائج التي توصلنا إليها أظهرت أن تطبيق إدراج ثقافة موضوعية وموثوق بها...

ومن المعروف أنه إلى حد كبير أن التئام الجروح في الحيوانات عملية أساسية إعادة تأسيس سلامة ووظيفة طبيعية من طبقات الأنسجة بعد الإصابة1. وبالرغم من الأسطح الظهارية المعرضة للبيئة الخارجية (مثل الجلد، والجهاز التنفسي، والجهاز الهضمي المسالك) تشكل حاجزاً واقيا من الشتائم الفيزيائية والكيميائية، وتشكيل الجروح يمكن أن تحدث بسهولة، لا سيما بعد الجراحة أو العدوى الميكروبية2. على سبيل مثال، استعمار أنسجة الرئة بمسببات المرض البكتيري الانتهازية الزّنجاريّة Pseudomonas، خاصة في مرضى التليف الكيسي (CF)، يؤدي إلى الأضرار من ظهارة الخطوط الجوية مع ما يترتب عليه من فشل الجهاز التنفسي3، 4. التئام الجروح إليه إصلاح مضيف معقدة لاستعادة الهيكل العادي النسيج المصاب5. ويتميز بالتهاب الأولى، تليها فترة تجديد يشمل ابيثيلياليزيشن والأوعية والأنسجة يعيد البناء مع إنتاج الكولاجين والخلية التمايز6،7،8 . لضمان سلامة الظهارية والتحكم في انتشار الميكروبات، جميع الكائنات الحية تنتج جزيئات الدفاع، بما في ذلك مضادات الميكروبات الببتيدات (الامبير)9،10. الجرح الشفاء عملية من الصعب جداً لمحاكاة في المختبر بسبب الافتقار إلى الحطام الخلية والتفاعلات المعقدة بين أنواع مختلفة من الخلايا. ومع ذلك، في المختبر قدرة الببتيد لتسريع إغلاق الجرح الزائفة عن طريق حفز هجرة خلايا الظهارية يدل على قدرته على الشفاء من ظهارة الشبهة. وفي الواقع، الهجرة الخلية حدث الحد من معدل في التئام الجروح، ودراسة العوامل التي يمكن أن تؤثر الهجرة الخلية سيساعد على العلاجات المستهدفة لتحسين التئام الجروح.
هنا، يتم توفيرها تحليل تجريبي استنساخه بدرجة عالية استناداً إلى إدراج الثقافة السيليكون الخاص لتقييم الهجرة الخلايا في المختبر. ويستند على خلق فجوة ميكرومترات 500 (الجرح الزائفة) على أحادي الطبقة خلية المتلاقية. سوف تبدأ الخلايا عند حافة الحقل "الجرحى" الاصطناعي هاجروا إلى منطقة خالية من الخلية، وتشكيل خلية خلية اتصالات جديدة. ويمثل إدراج الثقافة أداة جديدة للجرح بسرعة شفاء التجارب. يتم توفير خزانان مفصولة بواسطة جدار 500 ميكرومتر، ويمكن وضعها بشكل صحيح في لوحة طبق 3 سم أو في بئر صفيحة 12-جيدا. ملء كل حجرة من الإدراج مع تعليق خلية يسمح للخلايا تنمو في كل مجال من المجالات المعينة حتى التقاء، بينما إزالة الإدراج سوف تولد فجوة نظيفة خالية من خلية من حوالي 500 ميكرومتر (بنفس عرض الجدار الفاصل). متوسطة ثقافة خلية الصحيحة وتستكمل مع مجمع لاختبار يمكن إضافتها فيما بعد إلى الطبق لوحة/جيدا. وبعد ذلك يمكن تصور إغلاق الفجوة في فترات زمنية مختلفة تحت مجهر مقلوب، يفضل واحدة مزودة بكاميرا فيديو للحصول على الصور. وأخيراً، سيسمح قياس التغيرات في المنطقة المغطاة بالخلية ببرنامج تحليل الصورة التلقائية المستندة إلى ويب التحديد الكمي لسرعة الهجرة خلية وإغلاق الجرح. وعموما، هذا الأسلوب خطوة إلى الأمام فيما يتعلق بالتحليل الكلاسيكية، حيث الصفر يدوياً بواسطة إينسيسينج مونولاييرس خلية المتلاقية مع إبرة معقمة أو ماصة نصيحة11. وفي الواقع، يمكن أن تدمر الإجراء الأخير أسفل الطبق البلاستيك لوحة/جيدا وطلاء السطح، خلق التجاعيد. وبالإضافة إلى ذلك، منطقة "الجرحى" لا يكون عرض المعالم على طول الفجوة، كهذا يعتمد إلى حد كبير على الضغوط التي مورست من الباحثين بالإبرة/التلميح. وعلاوة على ذلك، يمكن أن تشكل الخلايا المزاحة كتل من الخلايا الحية والميتة في حواف الصفر؛ وعلاوة على ذلك، انتشار الخلايا الحية في منطقة "الجرحى" يمكن أن تتداخل مع سرعة الهجرة الخلية، وتوليد نتائج غير قابل لإعادة الإنتاج12.
وبالإضافة إلى ذلك، وبفضل منصة تحليل صورة الصفر، يمكن للمستخدمين سرعة استلام (خلال دقائق) البيانات الكمية بشأن سلوك المهاجرة من الخلايا المحددة دون الحاجة إلى الحصول على برامج إضافية. هذا البرنامج قادر على تحليل التباين مرحلة الفحص المجهري الصور منخفض (~ 5 س)، والمتوسطة (~ 10 X)، والتكبير عالية (~ 20 X). بعد تحميل ملف مضغوط للصور (في *.jpg، *.jpeg، *.jp2، *.png، *.gif، تنسيق *.tiff) يجري التحليل تلقائياً لإنشاء ملف ملخص يبين النسبة المئوية للمناطق المغطاة بالخلية ومناطق الاحتكاك، وكذلك سرعة الخلية الهجرة، في فترات زمنية مختلفة.
في هذا العمل، باستخدام جلد الضفدع أمبير-مشتق، أي Esc(1-21) وفي دياستيريومير Esc(1-21)-1 ج13، وخط خلية الشعب الهوائية معربا عن وظيفية التليف الكيسي transmembrane الموصلية منظم (CFTR)14،15، ويرد مثال للهجرة الخلية الببتيد المستحثة بالمقارنة مع عينات غير المعالجة (التحكم). ملاحظة أن ظهارة مجرى الهواء و CFTR تلعب دوراً حاسما في الحفاظ على وظائف الرئة والجرح إصلاح16. وعلاوة على ذلك، عن طريق مثبطات انتقائية (مثلاً، AG1478)17 من مستقبلات عامل نمو البشرة (EGFR)، دليل على أن هجرة خلايا الشعب الهوائية الناجمة عن الببتيدات المشار إليها أعلاه ينطوي على تفعيل EGFR12، ويقال 18 .
وخلاصة القول، أن الهدف من هذا الإجراء لإظهار كيفية الاستخدام من هذا القبيل إدراج الثقافة سيليكون يمثل مقايسة سريعة ويمكن الوصول إليها بسهولة لدقة تحديد الهجرة ملتصقة الخلايا (مثل الخلايا الظهارية الشعب الهوائية) والجزيئية آليات التحكم في مثل هذه الأحداث.

<table><tbody><tr><td>الحد الأدنى من الوسط الأساسي (MEM) &nbsp;</td><td>Euroclone</td><td>ECB2071L</td><td>دافئ في 37 درجة. C حمام مائي قبل الاستخدام</td></tr><tr><td>الجلوتامين</td><td>Euroclone</td><td>ECB3000D</td><td></td></tr><tr><td>مصل الأبقار الجنيني المعطل بالحرارة (FBS)</td> <td>Euroclone</td><td>ECS0180DH&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>البنسلين والستربتومايسين</td><td>Euroclone</td><td>ECB3001D</td><td></td></tr><tr><td>بوروميسين</td><td>سيجما-ألدريتش</td><td>P8833</td><td></td></tr><tr><td>التربسين / EDTA 1X في PBS</td><td>Euroclone</td><td>ECB3052D</td><td>يسخن في درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام</td></tr><tr><td>DPBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (CMF-PBS) سيجما</td> <td>ألدريتش</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>DPBS مع الكالسيوم والمغنيسيوم (PBS)</td> <td>سيجما ألدريتش</td><td>D8662</td><td></td></tr><tr><td>ثقافة أبيدي - إدراج 2 بئر</td><td>Ibidi &nbsp ؛</td><td>80209</td><td></td></tr><tr><td>Wimasis تحليل الصور</td><td>نفس المصدر &nbsp;</td><td>30002</td><td></td></tr><tr><td>برنامج PRISM&nbsp;</td><td>الإصدار 6.0</td><td></td> <td>من GraphPad</td></tr></tbody></table>

رواية في المختبر الجرح المقايسة الشفاء لتقييم الهجرة الخلية

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

والهدف من هذا العمل لإظهار طريقة جديدة لتقييم قدرة بعض الجزيئات إيمونومودولاتوري، مثل الببتيدات المضادة للميكروبات (الامبير)، حفز الهجرة الخلية. الأهم من ذلك الهجرة الخلية حدث الحد من معدل أثناء عملية التئام إعادة تأسيس سلامة ووظيفة طبيعية من طبقات الأنسجة بعد الإصابة. ميزة هذا الأسلوب على التحليل الكلاسيكي، الذي يستند إلى الصفر يدوياً صنع في أحادي الطبقة خلية، إدراج استخدام الثقافة السيليكون الخاصة توفير حجرات اثنين لإنشاء حقل تجرح شبه خالية من خلية مع عرض المعالم (500 ميكرومتر ). وبالإضافة إلى ذلك، من الممكن سبب منصة تحليل صورة الآلي، سرعة الحصول على البيانات الكمية على سرعة الهجرة خلية وإغلاق الجرح. أكثر دقة، سيظهر أثر اثنين جلد الضفدع الامبير على هجرة الخلايا الظهارية الشعب الهوائية. وعلاوة على ذلك، ستوفر المعالجة المسبقة لهذه الخلايا مع مثبطات محددة معلومات عن الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه الأحداث.

هذا البروتوكول المستخدم لتحديد الجرح الشفاء أثر Esc(1-21) و Esc(1-21)-1 ج من حيث نشاط الهجرة الخلية التي يسببها في الخلايا الظهارية الشعب الهوائية معربا عن CFTR الوظيفية. ووضعت في هذا التحليل، إدراج الثقافة في آبار صفيحة 12-جيدا، وكل حجرة وكان المصنف مع خلايا 35,000 في ميمج وتستكمل مع 10% FBS. الخلايا التوصل إلى التقاء كاملة داخل 24 h. بعد ذلك، ولدت فجوة 500 ميكرومتر، وبعضها أيضا كانت مليئة ميمج التي تحتوي على الببتيد بتركيزات مختلفة. وتكررت هذه التجربة أربع مرات. وكما هو مبين في <strong ...

نقدم هنا، بروتوكولا لتقييم تأثير الببتيدات على هجرة الخلايا الظهارية الشعب الهوائية. يسمح هذا الأسلوب للحصول على بيانات كمية عن سرعة الإغلاق الهجرة والجرح خلية السريع واستنساخه بدرجة عالية.

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

الهدف من هذا الإجراء هو إظهار كيفية تقييم قدرة بعض الجزيئات المعدلة للمناعة ، مثل مضادات الببتيدات الدقيقة ، على تحفيز هجرة الخلايا ، وهو حدث يحد من المعدل أثناء عملية التئام الجروح. بشكل عام ، يتضمن الإجراء الأساسي لدراسة هجرة الخلايا في المختبر إنشاء طبقة أحادية للخلية ، وإنتاج الجرح الزائف ، والتقاط الصور على فترات زمنية مختلفة حتى الوصول إلى إغلاق الجرح ، وتحليل تسلسل الصورة لتحديد هجرة الخلايا. الآن ، ترجع ميزة هذه الطريقة على الفحص الكلاسيكي ، الذي يعتمد على خدش مصنوع يدويا ، إلى استخدام إدخالات ثقافة السيليكون الخاصة لإنشاء حقل الجرح الزائف ، وهو خال تماما من الخلايا وبعرض محدد جيدا ، 500 ميكرومتر.بالإضافة إلى ذلك ، بفضل برنامج تحليل الصور الآلي المستند إلى الويب ، من الممكن تلقي البيانات الكمية بسرعة في غضون دقائق حول سرعة إغلاق الجرح وهجرة الخلايا. بشكل عام ، هذه تقنية تجريبية موثوقة يمكن تطبيقها على أي نوع من الخلايا الملتصقة ذات قابلية عالية جدا للتكرار للبيانات. هنا ، يتم تقديمه ، على سبيل المثال ، تأثير مضادات الببتيد المضادة لجلد الضفدع على هجرة الخلايا الظهارية القصبية وكيف يمكن للمعالجة المسبقة لهذه الخلايا بمثبطات محددة أن تعطي معلومات عن الآلية الجزيئية الكامنة وراء مثل هذه الأحداث.بتعبير أدق ، سيظهر كيف تتضمن هجرة الخلايا التي يسببها الببتيد تنشيط مستقبلات عامل نمو البشرة. لبدء التجربة ، قم بإزالة القارورة المحتوية على الخلايا من حاضنة زراعة الخلايا ، وتحقق من المحيط على مجهر مقلوب مزود بنظام تلقائي للحصول على الصور. إذا تم الوصول إلى 90٪ من التقاء الكامل، فانتقل إلى غطاء السلامة الحيوية، واستنشق وسط الاستزراع بعناية باستخدام ماصة بلاستيكية سعة 10 ملليلتر في ظروف معقمة وتخلص من الوسط برفق في زجاجة النفايات.اغسل الخلايا بستة ملليلتر PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم ، أي CMF. هز القارورة يدويا برفق وتخلص من CMF. بعد ذلك ، أضف CMF آخر 10 ملليلتر لإزالة بقايا الخلايا والخلايا غير المرفقة.في هذه المرحلة ، أغلق القارورة ، وأعدها إلى حاضنة زراعة الخلايا لمدة 10 دقائق. أخرج القارورة ، وتخلص من CMF ، وأضف برفق ملليلترين من التربسين EDTA لفصل الخلايا عن السطح البلاستيكي. هز القارورة برفق يدويا ، مما يسمح للمحلول بتغطية الخلايا بالكامل ، واحتضان القارورة لمدة 10 دقائق إضافية.بعد ذلك ، قم بإزالة القارورة من الحاضنة ، وتحقق مما إذا كانت عملية إضافة التربسين قد اكتملت. إذا كانت هذه هي الحالة ، فستكون الخلايا معلقة وستظهر مستديرة تحت المجهر. لتعطيل التربسين ، أضف 10 ملليلتر من وسائط الاستزراع المكملة بمصل الأبقار المعطلة بالحرارة بنسبة 10٪ ، واغسل القارورة بعناية.اجمع تعليق الخلية ، وانقل هذا الحجم إلى أنبوب مخروطي سعة 50 مليلتر ، وقم بالطرد المركزي للعينة. بعد الطرد المركزي ، تحقق من تكوين الحبيبات ، وشفط المادة الطافية ، وأعد تعليق حبيبات الخلية في وسط ثقافة ستة مليلتر مكمل بالمصل. ماصة تعليق الخلية لأعلى ولأسفل لعدة مرات لتفتيت أي تكوين كتل.قد تستغرق هذه العملية بضع دقائق. بعد ذلك ، أخرج 10 ميكرولتر بطرف ماصة دقيقة ، وقم بحقن الحجم تحت زجاج الغطاء لغرفة Burker أو Neubauer واحسب رقم الخلية. في كل بئر من لوح 12 بئرا ، ضع إدراج الثقافة بمساعدة ملاقط معقمة.يتم توفير كل ملحق من جزأين مفصولين بجدار 500 ميكرومتر ، وهناك جانب سفلي لزج للسماح بالالتصاق. ومع ذلك ، عن طريق الملقط ، قم بالضغط على طول حواف الإدخال لتثبيتها على سطح اللوحة. املأ كل حجرة من الملحق ب 70 ميكرولتر من تعليق الخلية التي تحتوي على حوالي 3.5 × 10 إلى خلايا رابعة لكل حجرة.الأهم من ذلك ، أن تركيز الخلايا المطبقة في كل حجرة يعتمد على نوع الخلايا. يوصى باستخدام كثافة الخلايا التي تؤدي إلى التقاء كامل في غضون 24 ساعة. تحت المجهر بتكبير أربعة أضعاف ، تحقق من عدم تسرب الخلايا من حجرات الإدخال ، ثم احتضان اللوحة لمدة 24 ساعة.بعد الحضانة ، قم بإزالة الحشوات برفق باستخدام ملاقط معقمة دون كسر الطبقات الأحادية للخلية ، وانقل الملحق على ورق ماص. اغسل الخلايا بإضافة مليلتر واحد من الوسط لكل بئر. احرص على عدم إضافة الوسيط مباشرة فوق طبقات الخلية الأحادية لتجنب تعطيلها.أغلق اللوحة ، وهزها برفق يدويا. استنشق الوسط واستبدله بمليلتر واحد من الوسط الطازج لكل بئر. تصور الفجوات الخالية من الخلايا تحت المجهر ، واحصل على الصور في الوقت الصفر.اسحب الوسائط من الآبار ، وأضف PBS المكملة بالكالسيوم والمغنيسيوم. رج اللوحة ، وقم بإزالة PBS ، وأخيرا أضف مركبات الاختبار إلى الآبار. بالنسبة لعينات التحكم غير المعالجة ، يتم استخدام وسط مليمتر واحد.احتضان اللوحة. لكل عينة ، راقب هجرة الخلايا تحت المجهر بتكبير أربعة أضعاف ، واحصل على صور بعد 15 و 20 و 24 ساعة من الحضانة. خلال هذه الخطوة ، حاول التقاط الصور في نفس المناطق مثل الوقت صفر.يعتمد اختيار الفترات الزمنية التي يتم فيها التقاط الصور على سرعة ترحيل الخلايا المحددة. عند الانتهاء من التجربة، حدد صورا لكل عينة في فترات زمنية مختلفة، وأنشئ ملفا مضغوطا. من المهم أن يكون لديك ثلاث نسخ مكررة على الأقل لكل عينة في كل فترة زمنية.افتح برنامج Wimasis لتحليل الصور الآلي، وقم بتحميل الملف المضغوط باستخدام أقل تكبير. سيوفر البرنامج تلقائيا عبر البريد الإلكتروني ملفا ملخصا يحتوي على البيانات التجريبية للمنطقة المغطاة بالخلايا ومناطق الخدش كنسب مئوية لكل عينة ، على سبيل المثال ، العينات 1 أ و 2 أ ، في النقاط الزمنية المحددة. احسب متوسط قيمة جميع العينات في الوقت صفر.تطبيع جميع البيانات فيما يتعلق بالقيمة المتوسطة في الوقت صفر. احسب متوسط قيمة جميع العينات في كل نقطة زمنية والخطأ المعياري النسبي. باستخدام اختبار ANOVA ثنائي الاتجاه ، قم بإجراء التحليل الإحصائي.يمكن رسم البيانات التي تم الحصول عليها في رسم بياني كرسم بياني يوضح النسبة المئوية للمساحة المغطاة بالخلايا في نقاط زمنية مختلفة لمجموعات عينات مختلفة. تظهر هذه الرسوم البيانية إغلاق الجرح الذي تم الحصول عليه بعد 15 و 20 و 24 ساعة من علاج خلايا الشعب الهوائية بتركيزات مختلفة من مضادات الببتيد esculentin 1-21-1c أو esculentin 1-21 مقارنة بالسيطرة. كما هو موضح في الرسوم البيانية وبعض الصور المجهرية التمثيلية ، فإن esculentin 1-21-1c أكثر كفاءة في تعزيز إعادة الظهارة للجرح الزائف في الخلايا القصبية المستحثة في الإغلاق شبه الكامل لحقل الجرح في غضون 20 ساعة تقريبا عند ميكرومولار واحد ، في حين أن هناك حاجة إلى تركيز أعلى ل esculentin 1-21 ، أي 10 ميكرومولار.لدراسة دور بعض المستقبلات ، مثل مستقبلات عامل نمو البشرة ، في هجرة الخلايا ، قم بمعالجة الطبقات الأحادية للخلية بمثبط معين ، على سبيل المثال ، المركب AG1478. لهذا الغرض ، قبل إزالة الملحق ، قم بشفط الوسيط في كل حجرة ، واغسله مرة واحدة ، وأضف 70 ميكرولتر من الوسائط المكملة بخمسة ميكرومولار AG1478. احتضن الطبق لمدة 30 دقيقة.ثم قم بإزالة الملحق بالملاقط ، واستمر كما هو موضح سابقا. هذه هي البيانات النهائية التي توضح أن هجرة الخلايا التي يسببها الببتيد تنطوي على تنشيط مستقبلات عامل نمو البشرة. في الواقع ، بعد المعالجة المسبقة بمثبط AG1478 ، تنخفض النسبة المئوية للمنطقة المغطاة بالخلايا بشكل كبير في جميع الفترات الزمنية مقارنة بالنتائج التي تم العثور عليها عندما لا يتم تحضين الخلايا مسبقا باستخدام AG1478 قبل إضافة الببتيد.في الختام ، تتمتع الطريقة الموصوفة بإمكانات عالية لتحسين فهم ميزة الهجرة لأنواع مختلفة من الخلايا بشكل كبير ، وكذلك على اختيار المحفزات و / أو المثبطات الواعدة لالتئام الجروح ، في غضون وقت قصير وبدقة عالية.

a-novel-in-vitro-wound-healing-assay-to-evaluate-cell-migration

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

علم المناعة والعدوى

يصف هذا الفيديو مقايسة التئام الجروح ذات الزراعة المشتركة غير الملامسة لتقييم القدرة على هجرة الأرومات العضلية الفئرانية. يساعد هذا على فهم مكونات إرسال الإشارات واستقبال الإشارات لتفاعلات إشارات Wnt غير الكنسية paracrine في المختبر.

فحص الجرح لتقييم القدرة المهاجرة للأرومات العضلية الفئرانية في الزراعة المشتركة

تستخدم عادة، يتم وصف طرق للوصول للغاية لدراسة الهجرة الخلية والغزو في المختبر. الأسلوب الأول هو الجرح خلية إغلاق الفحص الذي يقيس حركية الخلية. الأسلوب الثاني هو transwell الهجرة والغزو الفحص أن يقيم الكيميائي والقدرة الغازية من الخلايا.

في المختبر الهجرة الخليوي والغزو فحوصات

الهجرة الخلية هي ظاهرة البيولوجية التي تشارك في عدد كبير من الفسيولوجية، مثل التئام الجروح والاستجابات المناعية، والعمليات الفيزيولوجية المرضية، مثل السرطان. فحص الهجرة مصفوفة 3D الكولاجين هو أداة مرنة لتحليل خصائص المهاجرة من أنواع مختلفة من الخلايا داخل في مثل الفسيولوجية للبيئة 3D.

تحليل الهجرة خلية داخل الكولاجين مصفوفة ثلاثية الأبعاد

هنا ، نقدم بروتوكولا لإجراء اختبار هجرة الخلايا شبه الإنتاجية على لوحة زراعة الخلايا المكونة من 96 بئرا. هذا البروتوكول هو طريقة سريعة وبسيطة واقتصادية لإنشاء جروح خدش متسقة على طبقة أحادية الخلية.

جهاز لأداء الهجرة خلية / شفاء الجروح في لوحة 96-حسنا

والهدف من هذا البروتوكول تقييم أثر العوامل برو ومكافحة ميجراتوري على الهجرة الخلية داخل مصفوفة فيبرينوجين ثلاثي الأبعاد.

وصف الهجرة الخلية في إطار ثلاثي الأبعاد في المختبر الجرح البيئات

تفيد هذه الدراسة أسلوبين مختلفين لتحليل الخلية الغزو والهجرة: مقايسة الدائرة Boyden و في المختبر الفيديو المستندة إلى مجهر التئام المقايسة. وصف بروتوكولات لهذه التجارب اثنين، وتتم مقارنة مزايا وعيوب.

تقييم عملية الهجرة وغزو الخلية: مقارنة من الصفر فيديو المستندة إلى مجهر الجرح المقايسة والمقايسة الدائرة Boyden

هذه المخطوطة يصف كيف شق مثل الآفات على الخلايا الظهارية مثقف مونولاييرس مريح نموذج الجرح الشفاء في المختبر، مما يسمح للتصوير بواسطة [كنفوكل] أو الفحص المجهري بالليزر، والتي يمكن أن توفر جودة عالية البيانات الكمية والنوعية لدراسة سلوك الخلية والآليات المعنية بالهجرة.

مجهرية على أساس أساليب التقييم للهجرة الخلية الظهارية أثناء التئام الجرح في المختبر

هنا يصف لنا إجراء اختبار في الخلية الهجرة في المختبر مع مجهر كاميرا بصرية الآلي. والرزن الصفر قد استخدمت على نطاق واسع حيث يتبع إقفال نقطة الصفر لفترة زمنية محددة. المجهر الضوئي تمكن من كشف خلية الهجرة رخيصة ويمكن الاعتماد عليها.

محسن المقايسة الصفر للاختبار في المختبر للهجرة الخلية مع كاميرا بصرية الآلي

وتركز هذه الدراسة على نموذج في المختبر للجرح شفاء (الصفر المقايسة) كآلية لتحديد الملوثات البيئية كيف مثل الزرنيخ تأثير الهجرة الخلوية. وتبين النتائج أن هذا التحليل في المختبر يوفر مؤشرات السريع والمبكر للتغييرات للهجرة الخلوية قبل التجريب في فيفو .

في المختبر الصفر المقايسة لإثبات آثار الزرنيخ على هجرة خلايا الجلد

هنا، نقدم بروتوكول احتساء الصفر في المختبر باستخدام الخلايا الليفية الأولية ولإجراء اختبار التئام الجروح في الجلد في الجسم الحي في الفئران. كلا الاختبارين هما طريقتان مباشرتان لتقييم الجروح في المختبر وفي الجسم الحي.

فحص الهجرة الصفر وغرفة الجلد السمرة لتحليل في المختبر وفي الجسم الحي للشفاء الجروح

يحدد هذا البروتوكول تجربة الهجرة في المختبر المناسبة للتحليل الوظيفي للجزيئات المشاركة في الهجرة في الجسم الحي لخلايا القمة العصبية إلى المصفوفة خارج الخلية الغنية بالهيالورونان.

في المختبر التحقيق في آثار المصفوفة خارج الخلية الغنية بالهيالورونان على هجرة خلايا القمة العصبية

اكتشف تقييم تأثير الببتيدات المعدلة للمناعة على هجرة الخلايا الظهارية القصبية باستخدام مقايسة الجرح المقايسة. توفر هذه الطريقة بيانات كمية سريعة وموثوقة لإغلاق الجرح.

رواية في المختبر الجرح المقايسة الشفاء لتقييم الهجرة الخلية

استكشف المزيد من الفيديوهات