Name: التصور للوحدات القشرية في الأرض كورتيسيس الثدييات (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-22T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: اكتشف طريقة تسطيح وتلوين القشرة الدماغية لدى الثدييات لرؤية الوحدات الخلوية في المناطق القشرية طبقة بطبقة. تتيح هذه التقنية مقارنة البنية القشرية عبر الأنواع المختلفة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

هذا العمل كان تدعمها "جامعة هومبولت" زو برلين، مركز "برلين علم الأعصاب الحسابية" بيرنشتاين، المركز الألماني لأمراض الأعصاب (دزني) والوزارة الألمانية الاتحادية للتعليم والبحوث (الألمانية، Förderkennzeichen 01GQ1001A)، نيوروكوري، وغوتفريد فيلهلم لايبنتز جائزة DFG. ونحن نشكر شيمبي ايشياما لتصميم الرسوم البيانية ممتازة وديديريتشس جولين للمساعدة التقنية الممتازة.

<ol><li>Brodmann, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBrodmann%2C+K+%22Vergleichende+Lokalisationslehre+der+Grosshirnrinde+in+ihren+Prinzipien+dargestellt+auf+Grund+des+Zellenbaues%22">Vergleichende Lokalisationslehre der Grosshirnrinde in ihren Prinzipien dargestellt auf Grund des Zellenbaues</a>. , Barth. (1909).</li>
<li>Naumann, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.cell.com/current-biology/fulltext/S0960-9822(15)00218-3">The reptilian brain.</a> Curr Biol. 25 (8), R317-R321 (2015).</li>
<li>Kaas, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+columns%2C+modules%2C+and+domains+in+the+neocortex+of+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Evolution of columns, modules, and domains in the neocortex of primates.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (Supplement 1), 10655-10660 (2012).</li>
<li>Woolsey, T. A., Van der Loos, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structural+organization+of+layer+IV+in+the+somatosensory+region+%28SI%29+of+mouse+cerebral+cortex%3A+the+description+of+a+cortical+field+composed+of+discrete+cytoarchitectonic+units%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The structural organization of layer IV in the somatosensory region (SI) of mouse cerebral cortex: the description of a cortical field composed of discrete cytoarchitectonic units.</a> Brain Res. 17 (2), 205-242 (1970).</li>
<li>Naumann, R. K., Ray, S., Prokop, S., Las, L., Heppner, F. L., Brecht, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conserved+size+and+periodicity+of+pyramidal+patches+in+layer+2+of+medial%2Fcaudal+entorhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Conserved size and periodicity of pyramidal patches in layer 2 of medial/caudal entorhinal cortex.</a> J Comp Neurol. 524 (4), 783-806 (2016).</li>
<li>Ray, S., Naumann, R., Burgalossi, A., Tang, Q., Schmidt, H., Brecht, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grid-layout+and+theta-modulation+of+layer+2+pyramidal+neurons+in+medial+entorhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Grid-layout and theta-modulation of layer 2 pyramidal neurons in medial entorhinal cortex.</a> Science. 343 (6173), 891-896 (2014).</li>
<li>Wong-Riley, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytochrome+oxidase%3A+an+endogenous+metabolic+marker+for+neuronal+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cytochrome oxidase: an endogenous metabolic marker for neuronal activity.</a> Trends Neurosci. 12 (3), 94-101 (1989).</li>
<li>Ray, S., Brecht, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+development+and+dorsoventral+maturation+of+the+medial+entorhinal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Structural development and dorsoventral maturation of the medial entorhinal cortex.</a> Elife. 5, e13343(2016).</li>
<li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> J Vis Exp. (65), (2012).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphate-buffered+saline+%28PBS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Phosphate-buffered saline (PBS).</a> Cold Spring Harb. Protoc. , (2006).</li>
<li>Olson, S. T., Chuang, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heparin+activates+antithrombin+anticoagulant+function+by+generating+new+interaction+sites+%28exosites%29+for+blood+clotting+proteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">Heparin activates antithrombin anticoagulant function by generating new interaction sites (exosites) for blood clotting proteinases.</a> Trends Cardiovasc Med. 12 (8), 331-338 (2002).</li>
<li><a target="_blank" href="http://cshprotocols.cshlp.org/content/2009/12/pdb.rec12044.full">Paraformaldehyde (PFA; 4%).</a> Cold Spring Harb. Protoc. , (2009).</li>
<li><a target="_blank" href="http://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.rec8303.full">Sodium phosphate (PB).</a> Cold Spring Harb. Protoc. , (2006).</li>
<li>Sincich, L. C., Adams, D. L., Horton, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complete+flatmounting+of+the+macaque+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Visual+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Complete flatmounting of the macaque cerebral cortex.</a> Visual Neurosci. 20 (6), 663-686 (2003).</li>
<li>Tootell, R. B., Silverman, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+methods+for+flat-mounting+cortical+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Two methods for flat-mounting cortical tissue.</a> J Neurosci Methods. 15 (3), 177-190 (1985).</li>
<li>Rosene, D. L., Roy, N. J., Davis, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cryoprotection+method+that+facilitates+cutting+frozen+sections+of+whole+monkey+brains+for+histological+and+histochemical+processing+without+freezing+artifact%5BTitle%5D)+AND+%22J+Histochem+Cytochem%22%5BJournal%5D)">A cryoprotection method that facilitates cutting frozen sections of whole monkey brains for histological and histochemical processing without freezing artifact.</a> J Histochem Cytochem. 34 (10), 1301-1315 (1986).</li>
<li>Wong-Riley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+the+visual+system+of+monocularly+sutured+or+enucleated+cats+demonstrable+with+cytochrome+oxidase+histochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Changes in the visual system of monocularly sutured or enucleated cats demonstrable with cytochrome oxidase histochemistry.</a> Brain Res. 171 (1), 11-28 (1979).</li>
<li>Divac, I., Mojsilovic-Petrovic, J., López-Figueroa, M. O., Petrovic-Minic, B., Møller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+contrast+in+histochemical+detection+of+cytochrome+oxidase%3A+metallic+ions+protocol%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Improved contrast in histochemical detection of cytochrome oxidase: metallic ions protocol.</a> J Neurosci Methods. 56 (2), 105-113 (1995).</li>
<li>Jiao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+and+sensitive+antigen+retrieval+method+for+free-floating+and+slide-mounted+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A simple and sensitive antigen retrieval method for free-floating and slide-mounted tissue sections.</a> J Neurosci Methods. 93 (2), 149-162 (1999).</li>
<li>Pileri, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigen+retrieval+techniques+in+immunohistochemistry%3A+comparison+of+different+methods%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Antigen retrieval techniques in immunohistochemistry: comparison of different methods.</a> J Pathol. 183 (1), 116-123 (1997).</li>
<li>Woolsey, T. A., Welker, C., Schwartz, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+anatomical+studies+of+the+SmL+face+cortex+with+special+reference+to+the+occurrence+of+%22barrels%22+in+layer+IV%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Comparative anatomical studies of the SmL face cortex with special reference to the occurrence of "barrels" in layer IV.</a> J Comp Neurol. 164 (1), 79-94 (1975).</li>
<li>Krubitzer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+organization+of+neocortex+in+mammals%3A+are+species+differences+really+so+different%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The organization of neocortex in mammals: are species differences really so different?</a> Trends Neurosci. 18 (9), 408-417 (1995).</li>
<li>Lauer, S. M., Lenschow, C., Brecht, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexually+selected+size+differences+and+conserved+sexual+monomorphism+of+genital+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sexually selected size differences and conserved sexual monomorphism of genital cortex.</a> J Comp Neurol. , (2017).</li>
<li>Fleischhauer, K., Petsche, H., Wittkowski, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical+bundles+of+dendrites+in+the+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Embryol%22%5BJournal%5D)">Vertical bundles of dendrites in the neocortex.</a> Anat Embryol. 136 (2), 213-223 (1972).</li>
<li>Bernardo, K. L., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+trajectories+between+mouse+somatosensory+thalamus+and+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Axonal trajectories between mouse somatosensory thalamus and cortex.</a> J Comp Neurol. 258 (4), 542-564 (1987).</li>
<li>Ray, S., Burgalossi, A., Brecht, M., Naumann, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complementary+Modular+Microcircuits+of+the+Rat+Medial+Entorhinal+Cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Syst+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Complementary Modular Microcircuits of the Rat Medial Entorhinal Cortex.</a> Front Syst Neurosci. 11, (2017).</li>
<li>Livingstone, M. S., Hubel, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thalamic+inputs+to+cytochrome+oxidase-rich+regions+in+monkey+visual+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Thalamic inputs to cytochrome oxidase-rich regions in monkey visual cortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 79 (19), 6098-6101 (1982).</li>
<li>Land, P. W., Simons, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytochrome+oxidase+staining+in+the+rat+SmI+barrel+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Cytochrome oxidase staining in the rat SmI barrel cortex.</a> J Comp Neurol. 238 (2), 225-235 (1985).</li>
<li>Welker, C., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+layer+IV+in+the+somatosensory+neocortex+of+the+rat%3A+description+and+comparison+with+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Structure of layer IV in the somatosensory neocortex of the rat: description and comparison with the mouse.</a> J Comp Neurol. 158 (4), 437-453 (1974).</li>
<li>Retzius, G. Die Cajal'schen zellen der grosshirnrinde beim menschen und bei säugetieren. Biol Unters. 5, 1-9 (1893).</li>
<li>Cajal, S. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCajal%2C+SR+%22Histologie+du+Systeme+Nerveux+de+l%27Homme+et+des+vert%C3%A9br%C3%A9s%22">Histologie du Systeme Nerveux de l'Homme et des vertébrés</a>. , Talleres Grafios. Montana, Madrid. (1911).</li>
<li>Chapin, J. K., Lin, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+body+representation+in+the+SI+cortex+of+anesthetized+and+awake+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mapping the body representation in the SI cortex of anesthetized and awake rats.</a> J Comp Neurol. 229 (2), 199-213 (1984).</li>
<li>Löwel, S., Freeman, B., Singer, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topographic+organization+of+the+orientation+column+system+in+large+flat-mounts+of+the+cat+visual+cortex%3A+A+2-deoxyglucose+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Topographic organization of the orientation column system in large flat-mounts of the cat visual cortex: A 2-deoxyglucose study.</a> J Comp Neurol. 255 (3), 401-415 (1987).</li>
<li>Tang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+architecture+of+the+rat+parasubiculum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Functional architecture of the rat parasubiculum.</a> J Neurosci. 36 (7), 2289-2301 (2016).</li>
<li>Snyder, J. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSnyder%2C+JP+%22Map+projections--A+working+manual+%28Vol.+1395%29%22">Map projections--A working manual (Vol. 1395)</a>. , US Government Printing Office. (1987).</li>
<li>Chung, K., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23722210">CLARITY for mapping the nervous system.</a> Nat Methods. 10 (6), 508-513 (2013).</li>
<li>Renier, N., Wu, Z., Simon, D. J., Yang, J., Ariel, P., Tessier-Lavigne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((iDISCO%3A+a+simple%2C+rapid+method+to+immunolabel+large+tissue+samples+for+volume+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">iDISCO: a simple, rapid method to immunolabel large tissue samples for volume imaging.</a> Cell. 159 (4), 896-910 (2014).</li>
</ol>

الكتاب يعلن أنه أجرى البحث في غياب أي علاقات تجارية أو مالية يمكن أن يفسر تضارب المصالح محتملة.

تم التعرف على نمطية في قشرة الدماغ باستخدام مجموعة متنوعة من التقنيات. خلية الدراسات المحددة عادة أقرب الوحدات القشرية التي تصور أما المناطق كثيفة، أو عدم وجود ألياف1. وقد استخدمت أساليب اللاحقة وجود حزم الجذعية24، أفيرينتس من منطقة معينة25، أو إثراء العصبية26. هنا نظهر اثنين من التقنيات، هيستوتشيميستري السيتوكروم أوكسيديز (ط) و (ثانيا) المناعي تلطيخ.
تلوين السيتوكروم أوكسيديز كانت واحدة من الأساليب...

ويمكن ملاحظة بعض أهم التغييرات في بنية الدماغ عبر نسأله في قشرة الدماغ. وعلى الرغم من الاختلافات الكبيرة، قشرة الحيوانات يتبع نمط شائع ويمكن تقسيم بطريقتين متميزة، ب الطبقات والمجالات1. الطبقات القشرية تقع موازية لسطح الدماغ وتختلف في عدد من الطبقات 3 في كورتيسيس الزواحف2 إلى 6 طبقات في الثدييات كورتيسيس1. المناطق القشرية من ناحية أخرى مناطق متميزة من القشرة التي تتوافق إلى حد كبير مع وظائف متميزة، مثل، قشرة somatosensory تشارك في الإحساس باللمس أو القشرة البصرية في تجهيز مرئي المدخلات. هذه المناطق القشرية يمكن غالباً تقسيمها إلى بقع أو الوحدات النمطية3، الذي يتم بانتظام تكرار الهياكل التشريحية، وجدت أساسا موازيا للسطح بيل في الدماغ. الوحدات القشرية قد تقتصر على طبقة معينة4، أو تمتد عبر عدة طبقات5.
أساليب تقطيع القياسية للدماغ إشراك الأقسام العادية إلى السطح في الدماغ، مثل الاكليلية أو السهمي. وفي حين يمكن استخدام هذه الأساليب لتصور الوحدات القشرية، يمكن كشف العديد من الميزات للاهتمام عندما يتم تصور الوحدات القشرية عرضية، في طائرة موازية لسطح الدماغ. على سبيل المثال، وحدات سوماتوسينسوري في الدماغ القوارض تمثل شعيرات، تظهر كبرميل عند تصور العادي على سطح الدماغ، وهكذا تستمد المناطق القشرة البرميل اسم. ومع ذلك، في تصور برميل في اتجاه عرضية، أنها تكشف خارطة الخط الطولي، مع برميل يجري المنصوص عليها في اتجاه طبوغرافية النسخ المتطابق على التخطيط الدقيق لشعرات على سطح الجسم الخارجي. وفي بعض الحالات، حتى هرب ترتيب وحدات الكشف لفترات طويلة، عندما تصور بطريقة غير عرضية. قشرة انتورهينال الآنسي، المعروف لوجود خلايا الشبكة، الخلايا العصبية التي تطلق في نمط سداسية منتظمة عند حيوان هي تعبر بيئة. على الرغم من أنها منطقة يتم التحقيق بشكل كبير، حتى الآونة الأخيرة، وجود بقع أو وحدات من الخلايا الموجودة في قشرة entorhinal الآنسي، الذي ترد جسديا في نمط سداسية6، هرب الكشف. الوجود وترتيب هذه الوحدات، في الدماغ الفئران، تيسرت بصنع مقاطع عرضية من قشرة انتورهينال الآنسي والتحقيق في سيتوارتشيتيكتوري بطريقة لاييرويسي.
بعد تمزيقها، يمكن أيضا تحقيق جانب معين من التصور للوحدات القشرية بطرق متعددة. تقليديا، قد حددت الدراسات الوحدات النمطية استناداً إلى الخلية الكثافة أو الألياف تخطيط1. نهج شعبية آخر هو استخدام هيستوتشيميستري السيتوكروم أوكسيديز، الذي يكشف عن مجالات النشاط العالي8. وتشمل النهج الجديدة تبحث في أنواع الخلايا المحددة وراثيا، تميز على أساس هم البروتين التعبير ملامح6،8.
في هذه الدراسة، نسلط الضوء على الأساليب عزل القشرة من أدمغة الثدييات والحصول على مقاطع عرضية مسطح، وتصور الوحدات القشرية على أساس هيستوتشيميستري السيتوكروم أوكسيديز وإيمونوهيستوتشيميستري من البروتينات نوع من الخلايا المحددة.

<table><tbody><tr><td><قوي> تلطيخ أوكسيديز السيتوكروم< قوي></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>السيتوكروم ج من قلب الخيول</td><td>سيجما-ألدريتش</td><td>C2506</td><td></td></tr><tr><td>3،3'ديامينوبينزيدين رباعي هيدروكلوريد هيدرات</td><td>سيجما-ألدريتش</td><td>D5637</td><td></td></tr><tr><td>D (+) -ساكشاروز</td><td>كارل روث & nbsp ؛</td><td>4621.1</td><td></td></tr><tr><td>كبريتات الأمونيوم والنيكل (II) سداسي هيدرات</td><td>سيجما ألدريتش</td><td>A1827</td><td></td></tr><tr><td>هيبس</td><td>كارل روث & nbsp ؛</td><td>9105.4</td><td></td></tr><tr><td>name</td><td>Company</td><td> Catalog Number</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Antigen Retrieval</td><td></td><td></td><td></td></tr>Trisodium <tr><td>citrate dihydrate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S1804</td><td></td></tr><tr><td>حامض الستريك أحادي الهيدرات</td><td>سيجما ألدريتش</td><td>C1909</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td> Catalog Number</td><td>Comments</td></tr><tr><td> Phosphate Buffer / Fossil Buffered / prefix / PFA</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>فوسفات ثنائي هيدروجين البوتاسيوم</td><td>كارل</td><td>روث 3904.2</td><td></td></tr><tr><td>كلوريد الصوديوم</td><td>كارل روث</td><td>9265.1</td><td></td></tr> ثنائي <tr><td>الصوديوم فوسفات الهيدروجين ثنائي هيدرات</td><td>كارل روث</td><td>4984.3</td><td></td></tr><tr><td>بارافورمالدهيد</td><td>كارل روث</td><td>0335.3</td><td></td></tr><tr><td>تريتون-إكس 100</td><td>كارل روث</td><td>3051.3</td><td></td></tr><tr><td><قوي>الاسم</قوي></td><td><قوي>الشركة</td><td> رقم الكتالوج</قوي></td><td>تعليقات</td></tr><tr><td>Immunohistochemistry</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Calbindin D-28k مهروس من أمعاء الدجاج ، فأر أحادي</td> النسيلة <td>Swant</td><td>RRID: AB_10000347</td><td></td></tr><tr><td>Calbindin D-28k من كالبيندين الفئران المؤتلف D-28k ، أرنب متعدد</td><td>النسيلة Swant</td><td>RRID: AB_10000340</td><td></td></tr><tr><td>جزء الألبومين V ، خالي من البيوتين</td><td>كارل روث</td><td>0163.4</td><td></td></tr><tr><td><قوي>الاسم</قوي></td><td><قوي>الشركة</td><td> رقم الكتالوج</td><td>تعليقات</td></tr><tr><td>تركيب أو تجميد الوسائط</قوي></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount (تألق مناعي)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4680</td><td></td></tr><tr><td>Eukitt ( الكيمياء النسيجية)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>03989</td><td></td></tr><tr><td>وسط تجميد الأنسجة</td><td>Leica Biosystems</td><td>NC0696746<</td><td></td></tr><tr><td>strong>Name</td><td>Company</td><td>Catalog Number</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Alcohol dehydration</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>الإيثانول 100٪</td> <td>كارل روث</td><td>9065.3</td><td></td></tr><tr><td>الإيثانول 96٪</td> <td>كارل روث</td><td>P075.3</td><td></td></tr><tr><td>2-بروبانول</td><td>كارل روث</td><td>6752.4</td><td></td></tr><tr><td>بديل الزيلين</td><td>فلوكا</td><td>78475</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Catalog Number</td><td>Comments</ قوي ></td></tr> <tr><td>< قوي > الأجهزة / الأدوات < / قوي ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>ميكرومتر HM 650 فولت</td><td>الحرارة العلمي</td><td></td><td></td></tr><tr><td>جونغ RM2035</td><td>لايكا بيوأنظمة</td><td></td><td></td></tr><tr><td>دومون # 55 ملقط - أدوات العلوم الدقيقة إينوكس</td><td></td><td>11255-20</td><td></td></tr><tr><td>دومون # 5 ملقط - تلميح علم الأحياء إينوكس</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11252-30</td><td></td></tr><tr><td>ملقط دومون #5SF - أدوات العلوم الدقيقة من إينوكس فائقة الدقة</td><td></td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>مقصات العظام - 24 سم</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>16150-24</td><td></td></tr><tr><td>أدوات العلوم الدقيقة فريدمان رونجور</td><td></td><td>16000-14</td><td></td></tr><tr><td>مقص حاد</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>14000-18</td><td></td></tr><tr><td>مقص جراحي - حلقات كبيرة</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>14101-14</td><td></td></tr><tr><td>مقص جراحي -</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td> الحادة <td>الحادة 14001-13</td><td></td></tr><tr><td>مقص القزحية</td><td>الدقيقة أدوات العلوم الدقيقة</td><td>14094-11</td><td></td></tr></tbody></table>

التصور للوحدات القشرية في الأرض كورتيسيس الثدييات

Visualization of Cortical Modules in Flattened Mammalian Cortices

قشرة أدمغة الثدييات بارسيلاتيد في هياكل فرعية منفصلة أو الوحدات النمطية. الوحدات القشرية عادة ما تقع موازية للورقة القشرية، ويمكن أن تحدد ببعض الأساليب histochemical والمناعي. في هذه الدراسة، نسلط الضوء على أسلوب لعزل القشرة من الثدييات العقول وتسطيح لهم الحصول على التوازي المقاطع إلى ورقة القشرية. ونحن كذلك تسليط الضوء على تحديد histochemical وأساليب المناعي تجهيز هذه الأرض مقاطع عرضية لتصور الوحدات القشرية. في قشرة somatosensory الثدييات المختلفة، نقوم هيستوتشيميستري السيتوكروم أوكسيديز للكشف عن خرائط الجسم أو الوحدات القشرية التي تمثل أجزاء مختلفة من جسم الحيوان. في قشرة entorhinal الآنسي، منطقة حيث يتم إنشاء خلايا الشبكة، فنحن نستخدم أساليب المناعي لتسليط الضوء على نماذج من الخلايا العصبية مصممة وراثيا التي يتم ترتيبها في نمط شبكة في ورقة القشرية عبر العديد من الأنواع. وعموما، نحن نقدم إطارا لعزل وإعداد لاييرويسي دكت أبواب القشرية، ووضع تصور للوحدات القشرية باستخدام histochemical وأساليب المناعي في مجموعة متنوعة واسعة من أدمغة الثدييات.

ونحن الحصول على الأرض الفروع القشرية لقشرة سوماتوسينسوري في مجموعة متنوعة من العقول، والمجهزة لهم السيتوكروم أوكسيديز هيستوتشيميستري لتصور وحدات سوماتوتوبيك تمثل أجزاء مختلفة من الجسم. ويسمح هذا النهج المقارن دراسة تطورية قوات هذا اللحاء الشكل، مثلاً، بعرض تمثيل يحافظ على درجة عالية من بيبرس ميستاسيال في القوارض وارنبيات كبرميل21 (الشكل 2). وفي المقابل، إظهار أجزاء أخرى من الجسم مثل الكفوف والأعضاء التناسلية حجم الاختلافات في ...

توضح هذه المقالة منهجية مفصلة الحصول على مقاطع عرضية مسطح من الثدييات كورتيسيس ووضع تصور للوحدات القشرية باستخدام histochemical وأساليب المناعي.

The cortex of mammalian brains is parcellated into distinct substructures or modules. Cortical modules typically lie parallel to the cortical sheet, and ...

الهدف العام لهذا الإجراء لتسطيح القشرة وتلطيخها هو تصور الوحدات الخلوية في المناطق القشرية بطريقة طبقية. يمكن لهذه الطريقة الإجابة على الأسئلة الرئيسية في علم الأعصاب ، مثل كيفية انتشار البنية القشرية في الدماغ ، وكيف يمكن أن ترتبط بالوظيفة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكنك مقارنة العمارة القشرية بطريقة رقائقية ، ومقارنة الجوانب المختلفة لها ، مثل كيفية الحفاظ على تطور الطبقة ، أو كيف تختلف في الوظيفة.سيوضح هذه التقنية سايمون لاور وأوندين شنويب ، وهو طالب وفني من مختبر البروفيسور ميشيل بلاك. للبدء ، قم بنشر عبر القلب للحصول على دماغ ثابت وخالي من الدم. بعد إزالة الدماغ ، اغمره في محلول فوسفات 0.1 مولار.إذا كانت الأقسام ذات المساحات القشرية الكبيرة مطلوبة ، فقم بتسطيح الدماغ قبل مزيد من التثبيت. ومع ذلك ، للحصول على أقسام من المناطق التي يصعب الوصول إليها ، مثل القشرة المخية الداخلية الإنسية ، قم بتثبيت الدماغ في 4٪ PFA لمدة 24 ساعة قبل التسطيح. استعد للحفاظ على رطوبة الدماغ مع المخزن المؤقت أثناء التشريح بأكمله.للبدء ، افصل نصفي الكرة الأرضية باستخدام مشرط. إذا لم يتم تثبيت الدماغ ، فكن حذرا عند التعامل معه. بعد ذلك ، أثناء تأمين الدماغ بواسطة المخيخ ، أدخل الملعقة برفق لفتح مستوى تشريح في الجسم الثفني.يجب أن يشير الطرف المستدير للملعقة بعيدا عن القشرة. ثم قم بمعالجة الملعقة لتقسيم المهاد والقشرة. بعد ذلك ، افصل الهياكل تحت القشرية باستخدام شفرة حلاقة.بعد ذلك ، افصل الهياكل تحت القشرية باستخدام مشرط أو حافة ملعقة. لتحسين التسطيح ، قم بعمل قطع نظيف من خلال المخطط ، والنواة المتكئة ، والقشرة الأمامية المدارية ، لأنها تزيد من سمك القشرة في المنطقة الجانبية. ثم أضف قطعا مخففا في قاعدة المنطقة الداخلية لقشرة الفص الجبهي.سيسمح ذلك بالكشف عن الأجزاء الإنسية من القشرة. الآن ، ضع قشرة نصف الكرة الأرضية لأسفل على شريحة زجاجية. ثم ضع أسطوانتين من الطين على جانبي الأنسجة.يجب أن يكون الطين أرق بنسبة 10 إلى 20٪ من أنسجة المخ ، حيث يحدد الطين مدى التسطيح. بعد ذلك ، ضع جانبا زجاجيا عرضيا على القشرة ، مع الاتصال بالجزء الجانبي أولا. ثم ضع وزنا على الزجاج ، مع توسيط الكتلة فوق الجزء الجانبي.الآن ، دع المجموعة تجلس لمدة ثلاث إلى خمس ساعات في مخزن الفوسفات عند أربع درجات مئوية. المفتاح الحقيقي لهذا التحضير هو جعل الدماغ مسطحا قدر الإمكان ، لأن هذا له أكبر تأثير على عرض الخريطة القشرية. أخيرا ، إذا لزم الأمر ، قم بإصلاح الدماغ.انقل نصف الكرة الأرضية المسطح إلى 1٪ PFA ، أو 2٪ PFA إذا لم يتم أخذه من منفوخ. ثم اتركه لمدة 24 ساعة عند 4 درجات مئوية ، مع تحريك لطيف. أولا ، اغسل نصف الكرة الأرضية المسطح في عازلة الفوسفات لمدة 15 دقيقة.ثم قم بتقطيع نصف الكرة الأرضية بشكل عرضي على الاهتزاز. ثبت الأنسجة في موضعها باستخدام كمية صغيرة من السيانواكريلات والضغط اللطيف. كن حذرا ، لأن الكثير من الغراء يمكن أن يؤدي إلى قطع القطع الأثرية.الآن ، قم بقص نصف الكرة الأرضية من الطرف الأكثر سمكا والأكثر استقرارا باتجاه الطرف الرقيق بالسمك المطلوب. إذا تم استخدام تركيزات مثبتة منخفضة ، فقم بقطع الأنسجة ببطء بسعة عالية. بعد ذلك ، اغسل الأنسجة المقطعة في عازلة هيبس لمدة 15 دقيقة بتحريض لطيف.أثناء الغسيل ، قم بإعداد محلول تلطيخ سيتوكروم أوكسيديز الطازج. وأضف مكون DAB قبل استخدامه مباشرة. الآن ، احتضن الأقسام في محلول التلوين الطازج في درجة حرارة الغرفة باستخدام شاكر وراقب.اعتمادا على مقدار التثبيت ، يمكن ملاحظة التلوين في غضون 10 دقائق أو يستغرق الأمر عدة ساعات. إذا كان التفاعل يسير ببطء شديد ، فقم بزيادة درجة الحرارة إلى 37 درجة مئوية. لإيقاف رد الفعل ، انقل الأقسام إلى حمام بنسبة 4٪ PFA واتركها تحتضن لمدة 15 دقيقة مع تحريك لطيف.ثم اغسل الأقسام ثلاث مرات باستخدام عازلة الهيبيس لمدة 10 دقائق لكل غسلة. الآن ، قم بتركيب وتجفيف الأقسام على شرائح زجاجية. وقم بتجفيفها باستخدام حمامات الإيثانول الأقوى تدريجيا.بعد ذلك ، اغسل الشرائح في الأيزوبروبانول لمدة خمس دقائق ، متبوعا بالزيلين لمدة خمس دقائق. بعد حمام الزيلين ، أضف على الفور وسيط تثبيت سريع التصلب وغير قائم على الماء. الوسائط المائية سوف تحلل البقعة.بعد إضافة قسيمة الغطاء ، قم بتخزين الشرائح عند أربع درجات مئوية حتى يتم تصويرها. تمت معالجة الأجزاء القشرية من القشرة الحسية الجسدية في مجموعة متنوعة من الدماغ ، باستخدام الإجراءات الموصوفة. يسمح هذا النهج المقارن بدراسة القوى التطورية التي تشكل القشرة ، مثل التمثيل المحفوظ للغاية للاهتزاز المتمزق في القوارض و lagomorpha كبراميل.لوحظت بنية القشرة المخية الداخلية الإنسية أقساما موازية لسطح التقشير ، باستخدام التقسيم العرضي للقشرة الداخلية الطبية في الفئران والجرذان وخفافيش الفاكهة المصرية. بالإضافة إلى ذلك ، تمت معالجة الأدمغة البشرية باستخدام تسطيح لطيف للقشرة والشرائح العرضية. تم حفظ جميع الأدمغة بالتبريد ، وتم تقسيمها على ناظم البرد عند 60 ميكرون.تم استخدام التلوين المناعي لتسمية وحدات الخلايا المجاورة للأوعية بالكالبيندين. في القشرة الداخلية ، تظهر وحدات الكالبيندين دورية ملحوظة في كل نوع ، وتختلف في الحجم بمعامل 10 فقط ، عبر تباين 20،000 ضعف في حجم الدماغ. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الحصول على أقسام عرضية للتحليل.بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في غضون ساعتين. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر تسطيح الدماغ بشكل صحيح ، بدلا من الحجم أو الجودة أو النتائج النهائية. لا تنس أن العمل مع وكلاء مثل PFA و DAB يمكن أن يكون خطيرا للغاية ، ويجب عليك دائما ارتداء ملابس واقية والعمل تحت ضوء الميدان.

visualization-of-cortical-modules-in-flattened-mammalian-cortices

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

الحق الزاوية microprisms إدراجها في القشرة المخية الحديثة الماوس يسمح للتصوير عميق للطبقات قشرية متعددة مع وجهة النظر التي توجد عادة في شريحة. واحد ملليمتر microprisms العرض حقل من رأي واسعة (900 ميكرون ~) والقرارات المكانية كافية لحل شجيري العمود الفقري. نظهر طبقة V التصوير العصبية والأوعية الدموية التصوير باستخدام microprisms القشرة المخية الحديثة.

في التصوير المجراة من الطبقات العميقة القشرية باستخدام Microprism

في هذا الفيديو والمواد التكميلية ، وتبين لنا بروتوكول...

مزمنة التصوير ماوس القشرة البصرية باستخدام إعداد ضعفت - الجمجمة

يوضح الفيديو تحضير شرائح الدماغ القولونية المهادية القشرية من أدمغة جرو الفأر. يتم محاذاة الدماغ المعزول على شريحة ملحوظة ويتم قصها بزاوية لمحاذاة الدماغ المتوسط السمعي والدماغ الأمامي في نفس المستوى. ثم يتم تقطيع الدماغ باستخدام اهتزاز ، ويتم نقل الشرائح التي تحتوي على هياكل الدماغ المتوسط السمعي الرئيسية والدماغ الأمامي إلى غرفة احتجاز للحفظ.

تحضير شرائح القولون والثلاموقر من دماغ جرو الفأر

Source: &lt; نمط الامتداد = '-webkit-text-decoration-skip: none ؛ font-family: Arial ، sans-serif ؛ حجم الخط: 12pt ؛ نمط الخط: عادي ؛ متغير الخط: عادي ؛ وزن الخط: 400 ؛ زخرفة النص - تخطي الحبر: لا شيء ؛ المحاذاة الرأسية: خط الأساس ؛ المساحة البيضاء: التفاف مسبق ؛ &gt;Lauer ، S. M. ، et al.  Visualization of Cortical Modules in Flattened Mammalian Cortices. (2018) يوضح هذا الفيديو طريقة لتصور الوحدات القشرية في أقسام الدماغ المسطحة باستخدام التلوين الكيميائي النسيجي. يتم التعامل مع الأقسام...

التصوير الكيميائي النسيجي للوحدات القشرية في أقسام الدماغ المسطحة

يوصف أسلوب لوصفها الخلايا العصبية مع الأصباغ الفلورية في المجالات المحددة سلفا الصغيرة وظيفية من القشرة المخية الحديثة. أولا، يتم استخدام التصوير الجوهرية الإشارات الضوئية للحصول على خريطة وظيفية. ثم يتم استخدام اثنين من الفوتون المجهري لتسمية الخلايا العصبية والصورة ضمن مجال الصغيرة من على الخريطة.

استهدفت وصفها من الخلايا العصبية في المجال الوظيفي محددة من القشرة المخية الحديثة مايكرو من خلال الجمع بين الإشارات الجوهرية والتصوير ثنائي الفوتون

باستخدام زوايا متعددة لقطع دماغ الفأر الجرو، نحسن على شريحة الدماغ الحادة التي سبق وصفها، الذي يجسد الروابط بين أكثر من المخ الأوسط والدماغ الأمامي الهياكل السمعية الكبرى.

تعديل لColliculo-مهادية قشرية ماوس الدماغ شريحة، دمج الطباعة 3-D من مكونات الغرفة ومتعدد المقاييس التصوير الضوئي

هنا، نقدم إجراء لأداء على نطاق واسع كا 2 + التصوير مع الخلوية القرار عبر طبقات القشرية متعددة في الفئران تتحرك بحرية. ويمكن ملاحظة مئات من الخلايا النشطة في وقت واحد باستخدام مصغرة، المجهر محمولة على الرأس إلى جانب مسبار المنشور زرع.

متعدد الطبقات الكالسيوم الكالسيوم<sup&gt; 2+</sup&gt; التصوير في الفئران تتحرك بحرية مع تحقيقات بريزم والمصور المجهري مضان

ويصف هذا البروتوكول طريقة لتصوير المتزامن ثالاموكورتيكال إكسون المتفرعة والمشبك تكوين في كوكولتوريس أورجانوتيبيك المهاد وقشرة الدماغ. محاور عصبية ثالاموكورتيكال الفردية وعلى محطات presynaptic هي تصور بتقنية انهانسر خلية مفردة مع دسريد وسينابتوفيسين معلم التجارة والنقل.

التصور إكسون ثالاموكورتيكال المتفرعة والمشبك تشكيل في كوكولتوريس أورجانوتيبيك

هنا يصف لنا إجراء لإزالة الأنسجة ووسم الفلورسنت والتصوير على نطاق واسع لانسجة المخ الماوس الذي، وبالتالي يمكن تصور منظمة ثلاثية الأبعاد لأنواع الخلايا في اللحاء الجديد.

تصوير ثلاثي الأبعاد على نطاق واسع من المنظمة الخلوية في اللحاء الجديد الماوس

نحن نقدم بروتوكولات مفصلة لتوليد وتوصيف 2D و 3D المستحثة بالإنسان الخلايا الجذعية متعددة القدرات (hIPSC) القائمة على تطوير القشرة المخية الحديثة بالإضافة إلى منهجيات تكميلية تمكن من التحليل النوعي والكمي للنشأة الحيوية الأولية (PC) ووظيفتها.

2D و 3D المستحثة من قبل الإنسان نماذج الخلايا الجذعية متعددة القدرات القائمة على تشريح تورط سيليوم الأولية أثناء تطور القشرة المخية الجديدة

هنا ، نقدم بروتوكولين لتسجيل القشرة الكهربائية الدقيقة عالية الكثافة (μEcoG) في الفئران والفئران ، بما في ذلك طرق الجراحة والزرع والتسجيل. يتم إجراء تسجيلات μECoG بالاشتراك مع تسجيل polytrode الرقائقي في القشرة السمعية للفئران أو مع التلاعب البصري الوراثي للنشاط العصبي في القشرة الحسية الجسدية للفأر.

تحقيقات متعددة النطاقات للمعالجة القشرية من خلال دمج البوليترودات الصفيحية وعلم البصريات مع القشرة الكهربائية الدقيقة في القوارض

اكتشف طريقة تسطيح وتلوين القشرة الدماغية لدى الثدييات لرؤية الوحدات الخلوية في المناطق القشرية طبقة بطبقة. تتيح هذه التقنية مقارنة البنية القشرية عبر الأنواع المختلفة.

التصور للوحدات القشرية في الأرض كورتيسيس الثدييات

استكشف المزيد من الفيديوهات