A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice

Daniel Villarreal; Geetali Pradhan; Chia-Shan Wu; Clinton D Allred; Shaodong Guo; Yuxiang Sun

doi:10.3791/57048

بروتوكول بسيط عالي الكفاءة لعزل الجزيرة البنكرياسية عن الفئران

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

A Simple High Efficiency Protocol for Pancreatic Islet Isolation from Mice

بروتوكول بسيط عالي الكفاءة لعزل الجزيرة البنكرياسية عن الفئران

Full Text

32,933 Views

06:56 min

August 30, 2019

DOI: 10.3791/57048-v

Daniel Villarreal¹, Geetali Pradhan², Chia-Shan Wu^1,2, Clinton D Allred¹, Shaodong Guo¹, Yuxiang Sun^1,2

¹Department of Nutrition and Food Science,Texas A&M University, ²Children's Nutrition Research Center,Baylor College of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

وصف بروتوكول عزل الجزيرة هذا مسارًا جديدًا لحقن الكولاجين لهضم الأنسجة الخارجية وإجراء تدرج مبسط لتنقية الجزر من الفئران. وهو ينطوي على الهضم الأنزيمي، فصل التدرج / تنقية، ومجموعة انتقاء اليد. يمكن أن ينتج عن العزل الناجح 250-350 جزيرة عالية الجودة وكاملة التشغيل لكل ماوس.

ويتطلب هذا البروتوكول استخدام تدرج كثافة واحد مما يجعله أقل كثافة عمالة بكثير وأكثر فعالية من حيث التكلفة مقارنة بأساليب عزل الجزر التقليدية الأكثر تعقيداً. والميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هو أن يتم تسليم الانزيم مباشرة إلى البنكرياس مما يؤدي إلى تحسين هضم الأنسجة وزيادة العائد الجزير. تبدأ عن طريق تسجيل أطراف الماوس في موقف سوبين ورش الجسم مع 70٪ الإيثانول.

باستخدام ملقط غطاء ومقص جراحي منحني، وجعل ما يقرب من ثلاثة سنتيمترات شق الجلد البطن الأفقي وسحب فتح الجلد لفضح جدار البطن. إجراء شق عمودي من ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات على الصفاق البطني لفضح البنكرياس بشكل كامل ووضع الماوس تحت مجهر تشريح. دفع الفص الكبدي بتفوق لفضح القناة الصفراوية التي تظهر على أنها أنبوب وردي شاحب وتحريك الأمعاء بلطف من المنطقة اليمنى من أسفل الظهر والخفيف إلى يمين تجويف البطن لفضح القناة الصفراوية والشريان الكبدي.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos