أثر تطبيق النفط الزعتر على الحمولة الميكروبية أثناء تجفيف اللحوم

الهدف العام من هذه التجربة هو تقييم ما إذا كان زيت الزعتر العطري ، المطبق في مرحلة البخار ، يمكن أن يكون بمثابة مادة حافظة فعالة أثناء عملية تجفيف اللحوم. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة في مجال تجهيز الأغذية وسلامتها ، مثل كيفية استخدام المواد الحافظة الطبيعية بشكل فعال بدلا من المواد الاصطناعية. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في أنها تتيح التوزيع السريع والمتساوي لزيت الزعتر العطري أثناء جفاف اللحم وأنه يمكن استخدام كل البخار بكميات أقل مما هو عليه في حالة استخدام الزيت السائل.

يمكن أن يوفر استخدام هذه الطريقة نظرة ثاقبة لتحسين سلامة وجودة اللحوم المجففة ويمكن أيضا تطبيقها لمعالجة المنتجات الغذائية الأخرى ضد الكائنات الحية الدقيقة الأخرى غير المواتية. بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لأن طرق لوحة الإسقاط المستخدمة لحساب عدد البكتيريا تتطلب لوحات وممارسة معدة بشكل صحيح. احصل على خاصرة قصيرة من اللحم البقري من جزارة محلية ، وانقلها إلى المختبر في كيس محكم الغلق في درجات الحرارة المحيطة في غضون 20 دقيقة من الشراء.

في خزانة الأمان الصفيحية ، قم بتعقيم السطح الخارجي لعضلة اللحم البقري باستخدام تطبيق لمدة 10 ثوان من 70٪ من الإيثانول ، يتم رشه من زجاجة ضغط. ثم ، باستخدام تقنية معقمة ، قم بقطع السطح الخارجي للعضلة حتى لا يبقى الإيثانول على المستحضر. ثم قم بتعبئة العضلات في كيس محكم الغلق ، وقم بتجميدها ليوم واحد عند سالب 18 درجة مئوية.

في اليوم التالي ، قم بإذابة العضلات المتجمدة عند أربع درجات مئوية خلال ست ساعات. ثم ، في خزانة أمان رقائقية ، استخدم قطاعة اللحم لعمل شرائح بسمك 0.5 سم. وتقليل حجم الشرائح إلى عينات مستطيلة 5 × 2.5 سم مربع.

للتخزين ، قم بتعبئة العينات في أكياس بلاستيكية واحتفظ بها في الفريزر. في خزانة أمان رقائقية ، قم بإعداد لقاح موحد من الإشريكية القولونية ATCC 25922 لتلقيح عينات اللحوم. للتلقيح ، رتب أربع عينات على الأقل على لوح من رقائق الألومنيوم.

ثم قم بتحميل نفس العدد من العينات على ورقة رقائق ثانية لتكون بمثابة أدوات تحكم غير متلقية. بعد ذلك ، قم بتلقيح كل عينة عن طريق وضع 400 ميكرولتر من اللقاح على جانب واحد ونشرها برفق على السطح باستخدام موزع خلية معقم. ثم اترك العينات تجف لمدة 10 دقائق.

بعد ذلك ، اقلب العينات بالملاقط ، وكرر الإجراء ليصبح المجموع 800 ميكرولتر من اللقاح لكل عينة. بعد ذلك ، تحقق من كفاءة التلقيح لعينتين من العينات الخام الملقحة واثنين من الضوابط غير الملقحة. وبقية العينات ، لفها بورق احباط.

اغسل العينات النيئة بماء الببتون لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة مع 140 دورة في الدقيقة من الرج. بعد الغسيل ، على لوح ميكروتيتر ، قم بعمل خمس تخفيفات تسلسلية بمقدار 10 أضعاف من ماء الاستحمام الذي يحتوي الآن على البكتيريا. بعد ذلك، ضع خمس قطرات ميكرولتر من كل مخفف باستخدام ماصة متعددة القنوات على الألواح باستخدام أجار MacConkey وعدد الألواح باستخدام طريقة الإسقاط 6x6.

يجب أن تمتص القطرات بسرعة في أجار. لزراعة التخفيفات بطريقة القطرة 6 × 6 ، تأكد من تجفيف ألواح أجار عدد الألواح وألواح أجار ماكونكي بشكل مناسب حتى تمتص القطرات بسرعة في أجار. ثم استزراع الصفائح الملقحة على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة.

تحضير فرن تجفيف اللحوم لتطبيق زيت الزعتر العطري عن طريق البخار. انقع ورق ترشيح مقاس 12 × 20 سم بالحجم المطلوب من TEO يحتوي على 79٪ ثيمول. الآن خذ العينات المتبقية في ورق القصدير وانقلها مع ورق الترشيح إلى فرن التجفيف المجهز مع TEO حتى تجف لمدة ست ساعات.

في موازاة ذلك ، عالج مجموعة تحكم من العينات في فرن تجفيف اللحوم بدون TEO. بعد التجفيف ، لتقييم بقاء الإشريكية القولونية على العينات المعالجة بالبكتيريا ، كرر نفس الإجراء لغسل العينات بماء الببتون بمشاجرة واحدة. في هذه الحالة ، بعد 10 دقائق من الاهتزاز ، انقل العينات في الحمام إلى حاضنة عند 37 درجة مئوية لمدة ست ساعات قبل التخصيب.

بعد التخصيب المسبق ، قم بعمل خمس تخفيفات بمقدار 10 أضعاف من ماء الاستحمام كما كان من قبل. بعد ذلك ، استخدم طريقة الإسقاط 6 × 6 لزرع التخفيفات على ألواح الكشف واحتضان الألواح لمدة 24 ساعة. في اليوم التالي ، حدد وحدات تشكيل المستعمرة لكل جرام من اللحم.

افحص الصفائح بحثا عن وجود البكتيريا الهوائية المتوسطة التي تظهر على شكل بقع بيضاء على أجار عدد الألواح ، واحسب مستعمرات الإشريكية القولونية النموذجية في أجار ماكونكي والتي تظهر باللون الأحمر إلى الوردي الداكن. لتحليل البيانات الميكروبيولوجية ، قم بتحويل الأعداد إلى سجل CFU لكل جرام واستخدم تحليلا للمتغيرات لتحديد التأثيرات الرئيسية للعلاج. أثناء عملية التجفيف ، لا يتم التخلص من جميع الإشريكية القولونية.

تدخل بعض البكتيريا حالة قابلة للحياة ولكنها غير قابلة للزراعة. لذلك ، عندما يتم تخزين اللحوم بشكل غير صحيح تحت درجة حرارة عالية و / أو رطوبة ، يمكن أن تصبح هذه البكتيريا قابلة للحياة مرة أخرى وربما تضر بالمستهلكين. يمكن أن تؤدي معالجة اللحوم بجرعات مختلفة من TEO أثناء التجفيف إلى القضاء كليا أو جزئيا على الإشريكية القولونية.

تم تحديد عدد البكتيريا الهوائية المتوسطة والعصيات المعوية على عينات اللحوم على لوحات PCA و MCA. عندما تم تطبيق 1.5 مل من TEO ، لم يلاحظ نمو البكتيريا حتى بعد مرحلة ما قبل التخصيب لمدة ست ساعات. هذه الجرعة تتوافق مع 0.028 مليلتر من بخار TEO لكل لتر من الهواء.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية معالجة اللحوم بمرحلة بخار الزيوت الأساسية أثناء التجفيف وتقييم عدد البكتيريا القابلة للحياة في المنتج النهائي. بالإضافة إلى هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل التقييم الحسي وتحليل GC من أجل الإجابة على أسئلة إضافية حول قبول المستهلك للمنتج النهائي وكمية بقايا زيت الزعتر العطري. لا تنس أن العمل مع قطاعة اللحوم والبكتيريا المسببة للأمراض يمكن أن يكون خطيرا ، ويجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل ارتداء معدات الحماية المناسبة واستخدام خزانة السلامة الرقائقية.