فبراير 2, 2018
نقدم هنا، على بروتوكول لدراسة سلوك نمو النبات وخاصة تعمل بطريقة استنساخه. نعرض كيفية تقديم متغير وفي نفس الوقت الشروط الخفيفة مستقرة. تحليلات سليمة تعتمد على إعداد عينة كافية والتقييمات الإحصائية صحيحة.
الهدف العام من هذا التحليل الظاهري البصري والجزيئي هو مقارنة نمو النبات في ظل ظروف الإضاءة المختلفة والأنماط الجينية المختلفة. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال أبحاث النبات مثل التأقلم مع ظروف الإضاءة المختلفة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تعطي نتائج قابلة للتكرار وقابلة للقياس الكمي.
سيوضح الإجراء فرانكا سيلر ، فني في مختبري. للبدء ، احسب حجم العينة المناسب وقم بإعداد العدد المطلوب من ستة × سبعة سنتيمترات من الأواني مع التربة وزرع بذرة واحدة في كل منها. ثم قم بتبخير البذور عند أربع درجات مئوية لمدة يومين.
اضبط رطوبة الهواء النسبية للغرفة المناخية على 65٪ ودرجة الحرارة على 22 و 16 درجة مئوية لمدة 16 ساعة في النهار ، ثماني ساعات ليلة دورة. ثم اضبط الضوء على جميع المستويات على شدة 200 ميكرومول لكل سنتيمتر مربع وثانية. استخدم مقياس الطيف المدمج لمراقبة المخرجات الطيفية باستمرار.
ضع النباتات في الغرفة المناخية ، وقم بتغطيتها بسطح شفاف ، حتى تظهر الكوتالينين المتطورة. افحص النباتات بصريا ، وسجل بيانات النمو فوتوغرافية على فترات منتظمة. لضمان تناسق الصور، استخدم حامل ثلاثي القوائم للكاميرا وشريط مقياس لكل صورة.
أولا ، ضع نباتا في الظلام لبضع دقائق. ثم قم بإعداد مقياس فلوري معدل بالنبض وكاميرا على مسافة مناسبة من المصنع. يجب أن تكون الوردة الكاملة مرئية في النافذة الحية.
ابدأ تشغيل البرنامج ، وحدد الخيار المصغر الذي يظهر في نافذة تحديد الوحدة. ثم انقر فوق موافق. بعد ذلك ، حدد اللون الأزرق في النافذة المنبثقة ، وانقر فوق موافق.
حدد خيار الفيديو المباشر ، وقم بتدوير حلقة ضبط العدسة الموضوعية لتركيز الصورة ، وحدد منطقة معينة من النبات. للخروج من النافذة المباشرة، انقر على مربع الخروج في الزاوية العلوية اليسرى. حدد منطقة محل اهتمام ، أو AOI ، بالإعدادات الافتراضية.
ستظهر دائرة ومربع أحمر بمتوسط قيمة FT للبكسل الموجود في AOI تلقائيا في منتصف الشاشة. تحتاج إلى حذف هذا الهيئة العربية للتصنيع ، قبل تحديد معرفتك. ثم اقبل الإعدادات الافتراضية في علامة التبويب الموجودة على اليسار.
بعد ذلك ، انقر فوق إضافة في علامة التبويب AOI ، ثم ضع الدائرة داخل منطقة الورقة. كرر هذه العملية خمس مرات لكل ورقة ، واختر عدة أوراق لكل نبات. ضع علامة في المربع ذي الصلة ، مع الحد الأقصى للعائد الكمي PS 2 ، لتحديد صورة FV / FM.
قم بتطبيق وميض ضوء مشبع لقياس معلمات التمثيل الضوئي ، عن طريق تحليل الضغط الفلوري ، بالضغط على الزر F0 ، FM. حدد موقع النتائج في علامة تبويب التقرير. حدد جميع المربعات ذات الصلة ، وقم بتصديرها إلى برنامج التحليل المناسب.
في هذه الدراسة ، تم استخدام مصابيح LED لتوفير كمية وجودة ضوء ثابتة في مراقبة وتحليل نمو النبات وأنواع الوريد. تم جمع البيانات من النباتات بعد 12 و 21 و 28 يوما من الخياطة. يظهر المتوسط الذي يؤثر على قيم العائد الكمي PS 2 ل 5 نباتات و 5 في هذا الشكل.
تمتقييم البيانات من النباتات المزروعة تحت أشعة الشمس المحاكاة والضوء الأزرق أو الأحمر المخصب إحصائيا. يوضح هذا الشكل متوسط تأثير قيم الغلة الكمومية PS 2 البالغة 5 نباتات و 5 في اليوم. كان متوسط قيم النباتات المزروعة تحت الضوء الأزرق والأحمر أعلى بكثير من تلك التي نمت تحت أشعة الشمس المحاكاة.
بمجرد التثبيت ، يمكن أن توفر مصابيح LED ظروف إضاءة مستقرة أو متغيرة من خلال توفير الكثير من الطاقة مقارنة بمصابيح الفلورسنت. أثناء التجربة ، من المهم تناول النباتات يوميا. بعد تطويرها ، تمهد هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال أبحاث النبات لاستكشاف سلوك النمو في ظل ظروف الإضاءة المختلفة بطول موجة محدد.
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية النمو وتحليل النباتات فيما يتعلق بنوع الوريد البصري والجزيئي بطريقة كمية.
تقدم هذه المقالة بروتوكولاً لدراسة سلوك نمو النبات في ظل ظروف إضاءة متنوعة. وتؤكد المقالة على أهمية قابلية التكرار والتقييم الإحصائي في تحليل الأنماط الظاهرية.
يتيح التحليل الكمي لنمو Arabidopsis thaliana تحت ظروف إضاءة محكومة اختباراً قوياً للفرضيات في مجالات بيولوجيا النبات ومسارات التكنولوجيا الحيوية الزراعية. وتدعم بيئات LED المستقرة والقابلة للبرمجة، إلى جانب القياسات المظهرية الموحدة، الثقة التنبؤية في مراحل الاكتشاف المبكر والتحقق من السمات. يقلل هذا النهج من الغموض التجريبي ويعزز إمكانية تكرار النتائج في الأبحاث الانتقالية وتطوير المنصات.
يتكامل هذا البروتوكول ضمن سلسلة العمليات الممتدة من الاكتشاف إلى التحقق، مما يدعم الاختبار المبكر للفرضيات، وتطوير المقايسات، وتقييم السمات الانتقالية.