مارس 6, 2018
هي أثبت التطبيق العملي والأداء لطرق لتوليد عينات الأنسجة التمثيلية من نماذج حيوانية الخنزير لمجموعة واسعة من التحليلات المصب في مشاريع المصرف البيولوجي، بما في ذلك فولوميتري، عينة عشوائية منتظمة، وتجهيز فرق لعينات الأنسجة لأنواع التحليلات الجزيئية والسمات النوعية والكمية.
يوضح هذا الفيديو تقنيتين رئيسيتين لأخذ عينات ومعالجة عينات أنسجة الخنازير الحيوية. تقدر تقنية الغمر بشكل موثوق الحجم الكلي للأعضاء والأنسجة وتولد تقنية الموجه أقساما عشوائية للأنسجة متناحية، لتقدير غير متحيز للمعلمات المورفولوجية الكمية. الميزة الرئيسية لتقنية الغمر لتحديد كثافة الأنسجة هي أنه يمكن تطبيقها على أي نوع من الأنسجة وأنها تنتج نتائج موثوقة للعينات الصغيرة والكبيرة.
تتمثل مزايا تقنية الموجه في أنها عالية الكفاءة وتعمل أيضا مع عينات الأنسجة الكبيرة. لبدء الحجماختبار لعضو كبير ، قم باستئصال قطعة من الأنسجة ذات الحجم المناسب من العضو. امسح العينة بعناية بمنشفة ورقية لإزالة الدم الزائد وسوائل الأنسجة.
ثم قم بوزن العينة على مقياس دقيق وسجل وزن العينة. أضف 0.9٪ محلول ملحي إلى دورق بحجم مناسب. لا تملأ الدورق بالكامل لمنع الفائض أثناء ظهور الأنسجة.
ضع الدورق على الميزان ثم اغمر ملقطا أو حامل عينة ذاتي الصنع في المحلول الملحي حتى تصل العلامة الموجودة على الملقط أو حامل العينة إلى السائل. بعد ذلك ، أعد تعيين عرض المقياس إلى الصفر. قم بتوصيل عينة الأنسجة بعناية بالملقط أو حامل العينة واغمر العينة بالكامل في المحلول الملحي حتى يتم الوصول إلى الموضع المحدد.
لتسجيل قياسات الكثافة الموثوقة ، من المهم التأكد من أن العينة مغمورة بالكامل وتجنب أي ملامسة للعينة المغمورة بالجدران الداخلية أو قاع الدورق أثناء تثبيت العينة في موضعها ، سجل الوزن المعروض على الميزان. استخدم هذا القياس وكثافة المحلول الملحي في درجة حرارة الغرفة لحساب حجم العينة.
ثم احسب كثافة عينة الأنسجة من وزن العينة وحجمها. بالنسبة للأعضاء والأنسجة الكبيرة ، مثل هذه الكلية ، قم بإجراء قياسات متكررة بعينات متعددة وحساب متوسط الكثافة من القياسات الفردية. بالنسبة للعينات الصغيرة والأعضاء الصغيرة المقاسة إجمالا مثل الغدة النخامية ، كرر القياس ثلاث مرات قبل حساب متوسط كثافة الأعضاء من قيم القياس الفردية.
أخيرا ، احسب الحجم الإجمالي للعضو أو الأنسجة أو حجرة العضو من وزنه وكثافته. ضع عينة من الأنسجة الثابتة على طباعة دائرة متساوية الزوايا بحافة واحدة موازية لاتجاه الصفر إلى 180 درجة. ثم استخدم جدول أرقام عشوائي لتحديد زاوية عشوائية.
أوجد العلامات المقابلة على مقياس الدائرة متساوية الزوايا. باستخدام هذه العلامات ، قم بقص قسم عبر العينة مع توجيه مستوى المقطع بالتوازي مع اتجاه الزاوية العشوائية المشار إليها على مقياس الدائرة متساوية الزوايا وعمودي إلى سطح الراحة للعينة. ضع كتلة الأنسجة بحيث يكون سطح المقطع متجها لأسفل على دائرة مرجحة جيب التمام.
مع وضع حافة سطح الراحة بالتوازي مع الاتجاه الفردي. الآن قم بقص قسم جديد من خلال العينة بزاوية عشوائية محددة باستخدام جدول الأرقام العشوائية. مستوى المقطع الناتج هو قسم عشوائي موحد متناحي.
يوضح هذا الجدول الكثافة التمثيلية للعديد من أنسجة وأعضاء الخنازير المحددة باستخدام تقنية الغمر. تظهر معظم أنسجة الخنازير قيم كثافة أعلى قليلا من تلك التي تشير إلى كثافة الماء. في حين أن الأنسجة التي تسبح في محلول ملحي ، مثل الأنسجة الدهنية على سبيل المثال ، تظهر كثافة أقل من واحد.
يوضح هذا الشكل أربعة أقسام تمثيلية IUR من عضلة القلب البطين الأيسر الخنازير المحضرة بتقنية الموجه. لاحظ زوايا القطع المتغيرة في أقسام IUR المختلفة. بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء تقنية الغمر لتحديد كثافة الأنسجة في بضع دقائق.
إذا تم إجراؤه بشكل صحيح. تعتبر أقسام الأنسجة العشوائية المنتظمة المتناحية، التي تم إنشاؤها باستخدام تقنية الموجه، مناسبة لتقدير أي معلمات مورفولوجية كمية باستخدام طرق التحليل التجسيمي المناسبة. الموسيقى الرقمية.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يوضح هذا الفيديو تقنيتين أساسيتين لأخذ العينات ومعالجة عينات الأنسجة الخنزيرية من البنك الحيوي. تُستخدم تقنية الغمر لتقدير الحجم الإجمالي للعضو والنسيج، بينما تُستخدم تقنية الموجه (orientator) لإنتاج مقاطع نسيجية متناحية عشوائية لإجراء تحليل مورفولوجي كمي غير منحاز.
تؤثر عملية أخذ العينات ومعالجتها بطريقة معيارية لأنسجة البنوك الحيوية الخنزيرية بشكل مباشر على إمكانية تكرار النتائج والقيمة الانتقالية للنماذج قبل السريرية في مجال البحث والتطوير في الأدوية الحيوية. وتتيح البيانات الحجمية والمورفولوجية الموثوقة المستمدة من نماذج حيوانية محدودة وعالية القيمة إجراء مقارنات قوية بين الدراسات وتعزز الثقة التنبؤية في مراحل الاكتشاف المبكرة. وتدعم هذه التقنيات المعتمدة قرارات مجموعة المشاريع من خلال ضمان جودة العينات اللازمة للتحليلات الجزيئية والكمية اللاحقة.
تضع طرق أخذ العينات والمعالجة هذه أنسجة البنوك الحيوية الخنزيرية كمورد أساسي بدءاً من الاكتشاف المبكر وصولاً إلى الأبحاث قبل السريرية، مما يدعم اختبار الفرضيات، وتطوير المقايسات، والدراسات الانتقالية.