نموذج الفأر من انسداد الأمعاء الجزئي

الهدف العام من هذا الإجراء الجراحي هو إنتاج عوائق معوية بشكل موثوق ومتسق في الفئران تسهل دراسة التغيرات الجزيئية والظاهرية في أنسجة الجهاز الهضمي التي تحدث استجابة للعوائق. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الجهاز الهضمي المحيط بالآليات الخلوية الكامنة وراء التغيرات المظهرية الناتجة عن انسداد الأمعاء. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في أنها موثوقة وقابلة للتكرار وفعالة من حيث التكلفة.

يمتد تأثير هذه التقنية إلى علاج انسداد الأمعاء لأنها تحاكي حالات النمط الظاهري التي لوحظت في الأمراض البشرية الناجمة عن انسداد الأمعاء. سيظهر هذا الإجراء Se Eun Ha ، ما بعد الدكتوراه ، و Lai Wei ، طالب دراسات عليا ، وكلاهما من مختبرنا. بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرص إصبع القدم ، ضع مرهما على عيون وضع الفأر على وسادة تسخين.

قم بإزالة الشعر من البطن باستخدام كريم إزالة الشعر وتنظيف الجلد المكشوف بنسبة 70٪ من الإيثانول. قم بتطهير موقع الجراحة بمحلول بوفيدون اليود ولف بورق معقم مقاس 25 × 50 سم مع فتحة 2.5 × 2.5 سم لمنطقة الجراحة. قم بتأمين الستارة بشرائط معقمة عند حدود الفتحة والجلد واستخدم شفرة مشرط رقم 15 لعمل شق جلدي طولي يبلغ طوله ثلاثة سنتيمترات.

باستخدام الملقط والمقص الجراحي ، افصل الجلد بعناية عن الطبقة العضلية والعجزية دون شق الأنسجة وحدد موقع الخط الآلبا. ثم استخدم ملقطا صغيرا ومقصا لقطع سنتيمترين على طول الخط ألبا لفضح التجويف داخل الصفاق وتحديد موقع الأعور بعناية. استخدم الملقط الدقيق لتحريك الأعور والقولون القريب والدقاق ببطء ورفق من داخل التجويف داخل الصفاق إلى الستارة المعقمة وترطيب أنسجة الأمعاء على الفور بشاش معقم منقوع بمحلول ملحي بنسبة 0.9٪.

حدد موقع المساريق بين الدقاق والقولون القريب وقم بعمل شق سنتيمتر واحد في المساريق الموازي للدقاق وتحته مباشرة مع الحرص على تجنب قطع أي وعائية. قم بالقطع طوليا لفتح الوعاء المساريقي واستخدم ملقطا صغيرا لفتح حلقة سيليكون معقمة بحجم مناسب. أدخل أحد طرفي الحلقة من خلال الشق واجعل نهاية الحلقة ملامسة للطرف الأول لإعادة الأداة إلى شكلها الأصلي.

تأكد من أن الحلقة تحيط بالدقاق بالكامل وأغلق الحلقة بخياطة. يجب أن تكون الشقوق الموجودة في المساريق كبيرة بما يكفي لتناسب الحلقة ، ولكنها صغيرة بما يكفي بحيث لا يتم شق الأوعية الدموية. تأكد أيضا من وضع الحلقة على الدقاق وليس على القولون.

أعد الأمعاء بعناية إلى موقعها التشريحي الأصلي واستخدم خياطة قابلة للامتصاص في غرزة مستمرة بسيطة لإغلاق الطبقة العضلية على طول الخط الآلبا. نظف أي نزيف بشاش معقم منقوع بمحلول ملحي بنسبة 0.9٪ واستخدم خياطة نايلون جديدة وغرزة بسيطة مستمرة لإغلاق الجلد. ثم قم بتطهير موقع الجرح بالبوفيدون اليود وحقن المضادات الحيوية قبل وضع في بوابة الاحترار مع المراقبة حتى الاستلقاء الكامل.

في هذه التجربة ، تم ملء الأمعاء الدقيقة جزئيا وانتفاخها في ثمانية أيام بعد جراحة الانسداد الجزئي وتم ملؤها وانتفاخها بالكامل في 13 يوما بعد جراحة الانسداد الجزئي مقارنة بالحيوانات التي تم تشغيلها بواسطة الوهم. علاوة على ذلك ، تم تقليل تكوين الحبيبات البرازية في القولون في اليوم الثامن و 13 بعد جراحة الانسداد الجزئي مقارنة بتلك الموجودة في الضابطة. تم تضخم طبقة العضلات الملساء في الدقاق في أعلى الحلقة في ثمانية أيام بعد جراحة الانسداد الجزئي مع ملاحظة المزيد من التضخم في اليوم 13.

نمت خلايا العضلات الملساء بمعدلات سريعة تدريجية في جميع طبقات الأنسجة الثلاث في ثمانية و 13 يوما بعد جراحة الانسداد الجزئي كما تم تقييمها من خلال التحليل الكيميائي المناعي بينما تدهورت الخلايا الخلالية ل Cajal داخل الطبقات داخل الطبقات العضلية وبين العضلات. تم إعادة تشكيل مجموعات فرعية من الخلايا الإيجابية لمستقبلات عامل النمو المشتق من الصفائح الدموية ، والمعروفة أيضا باسم خلايا ألفا PDGFR ، ديناميكيا داخل الطبقات العضلية للفئران ذات الانسداد الجزئي مع نمو لوحظ في ثمانية أيام بعد الجراحة والتي تدهورت بحلول اليوم 13. بالإضافة إلى ذلك ، فقدت الخلايا العصبية أيضا بشكل كبير في المناطق العضلية وداخل الفئران المصابة بالانسداد الجزئي في كل من اليومين الثامن و 13 بعد الجراحة.

بمجرد إتقانها ، يجب إكمال هذه التقنية في غضون 30 دقيقة لضمان بقاء الماوس. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم معالجة الأنسجة بسرعة ودقة. بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل اختبار اتجاه الجهاز الهضمي للإجابة على أسئلة إضافية حول كيفية تغيير الانسداد للتمعج المعوي.

بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال أبحاث الجهاز الهضمي لاستكشاف عواقب انسداد الأمعاء في الفئران. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية وضع حلقة حول دقاق الفأر بسرعة وبشكل صحيح لإنشاء انسداد جزئي معوي. لا تنس أن العمل باستخدام الأدوات والإبر الجراحية يمكن أن يكون خطيرا للغاية ، لذا اتخذ الاحتياطات المناسبة.

تأكد أيضا من ارتداء قفازات معقمة وممارسة تقنيات التعقيم أثناء تنفيذ هذا الإجراء.