أبريل 5, 2018
نقدم هنا، بروتوكول انقباض "عرضية الابهري" (تاك) عن طريق ثوراكوتومي أفقي. هذا الأسلوب إجراء العمليات جراحية صدر كسبها، مغلقة تهدف إلى محاكاة الضغط الزائد وفشل القلب في الفئران التي تستخدم إعدادات المختبر تاك القياسية.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إجراء انقباض الأبهر المستعرض ، في نموذج صدر مغلق للفئران ، مما يؤدي إلى تضخم عضلة القلب البطين الأيسر. تساعد هذه التقنية طفيفة التوغل على تقليل مشاكل الجهاز التنفسي وتقليل الاستجابة الالتهابية. يمكن أن تساعدنا هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية ، في مجال علم المناعة ، على سبيل المثال ، استجابة البلاعم القلبية في تطور تضخم البطين الأيسر.
الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن القفص الصدري يظل سليما ، وبالتالي يتم تقليل الصدمة. نظرا لأن المساحات وأحجام المد والجزر تتكيف مع وزن الجسم ، يمكن استخدام هذا البروتوكول في الفئران ذات الأحجام المختلفة. كما أنه يقلل من الصدمات الجراحية ، ويقلل من الانحراف في قيم القياس.
بعد تخدير الماوس ، وفقا لبروتوكول النص ، حرك الماوس إلى طاولة عمليات يتم التحكم في درجة حرارتها ، وافصل مخروط الأنف المتصل بصندوق تحريض التخدير للحفاظ على التخوير. باستخدام خياطة من النايلون ، قم بإصلاح القواطع العلوية للماوس. اضغط على الذيل لضمان عدم وجود رد فعل.
استخدم شريطا لاصقا لتثبيت الأطراف. بعد إدخال مسبار المستقيم ، ضعي كريم مزيل الشعر على الحلق وأعلى الصدر ، وفقا لتعليمات الشركة المصنعة ، واتركيه لمدة دقيقة واحدة. ثم امسحي الكريم وكرري العملية إذا لزم الأمر.
مع ضبط إعدادات جهاز التنفس الصناعي وفقا للمعايير الفسيولوجية ، تحت المجهر الجراحي ، قم بشق الجلد عند خط الوسط حوالي ثلاثة ملليمترات تحت الفك السفلي وصولا إلى الضلع الثاني. تحديد خط الوسط والأنسجة الضامة للغدة تحت الفك السفلي. بعد ذلك ، استخدم ملقطين بزاوية لتقسيم الغدة برفق وصريح عند خط الوسط ، واستكشاف عضلة القصبة الهوائية.
قم بإعداد القصبة الهوائية برفق ، عن طريق سحب عضلات القصبة الهوائية بصراحة. استخدم الملقط لسحب اللسان لتقويم الحلق لتسهيل التنبيب ، وأدخل قنية التنبيب برفق داخل القصبة الهوائية. تأكد من التنبيب عن طريق التصور المباشر للأنبوب داخل القصبة الهوائية ، والتحقق من حركة الصدر المناسبة.
قم بإعداد كلا الشرايين السباتية ، اللذين يقعان مساعدا للقصبة الهوائية ، باستخدام ملقط لفصل النسيج الضام برفق. ضع جل الموجات فوق الصوتية على طرف مسبار دوبلر 20 هرتز ، وضع طرف المسبار على الشريان السباتي الأيمن والأيسر ، بزاوية أقل من 45 درجة. قم بتدوير المسبار ببطء لتحريكه بشكل جانبي ووسطي للعثور على إشارة دوبلر ، ثم قم بإمالة المسبار لتحسين الإشارة.
باستخدام مجموعة جديدة من القفازات والمقصات المعقمة ، قم بتوسيع شق الجلد وصولا إلى المساحة الوربية الثانية. ثم ، باستخدام طرف الملقط ، افتح المساحة الوربية الثانية ، وأدخل الضاعرات. عند تكبير 200٪ ، حدد خط الوسط والأنسجة الضامة.
ثم استخدم ملقطا بزاوية لتقسيم الغدة الصعترية برفق. قم بإزالة الأنسجة الدهنية حتى يمكن رؤية قوس الأبهر بوضوح. باستخدام ملقط الإبهام الزاوي ، قم بإعداد نفق تحت الشريان الأورطي المستعرض ، بين الشريان العضدي الرأسي ، والشريان السباتي المشترك الأيسر.
ثم ، باستخدام ملقط ناعم ، أمسك خياطة 6-0 ، وقم بتمرير الخيط تحت القوس الأبهري. باستخدام الملقط الثاني ، خذ الخيط من الجانب الآخر من القوس. ضع الفاصل بعناية موازيا للشريان الأورطي المستعرض.
قم بإعداد عقدة مزدوجة فضفاضة على الفاصل وتأكد من الوضع الأمثل للفاصل بالتوازي مع الشريان الأورطي. بعد ذلك ، اربط العقدة الأولى ، وقم بعمل عقدة معاكسة ثانية بسرعة ، قبل إزالة الفاصل على الفور. الخطوة الأكثر أهمية في الإجراء بأكمله هي ربط كلتا العقدتين بسرعة وإحكام ، وإزالة الفاصل على الفور.
أغلق المساحة الوربية الثانية ، بخيطة 6-0 من مادة البولي بروبيلين ، وانتبه بشكل خاص للأوعية تحت الترقوة عند الربط. ثم ، باستخدام خياطة 6-0 من مادة البولي بروبيلين ، قم بغرزة الجلد بنمط خياطة مستمر. تأكيد الربط ، وإجراء رعاية ما بعد الجراحة ، وفقا لبروتوكول النص.
تتحقق قياسات سرعة تدفق دوبلر هذه من صحة TAC الناجح ، مما يؤدي إلى زيادة سرعة الدم في الشريان السباتي الأيمن ، بسبب ارتفاع الضغط في البطين الأيسر والشريان الأورطي ، بينما يتسبب في سرعة تدفق الدم المخففة بعد التضيق في الشريان السباتي الأيسر. كما هو موضح في هذا الرسم البياني ، زادت نسب وزن القلب ووزن الجسم بشكل ملحوظ في فئران TAC ، مقارنة بالفئران غير النطاقات ، بعد ستة أيام من الجراحة. كانت هذه النسبة ثابتة تقريبا بعد 21 يوما.
معدل ضربات القلب له تأثير كبير على انقباض البطين الأيسر والناتج القلبي. يكشف هذا الرسم البياني أنه لم تكن هناك اختلافات في معدلات ضربات قلب الفئران ذات النطاقات الأبهرية وغير الأبهرية ، بعد 21 يوما. كما هو موضح هنا ، تم إثبات النطاقات المستمرة للشريان الأورطي من خلال زيادة ضغط الدم الانقباضي ، والذي تم قياسه عن طريق قسطرة البطين الأيسر بعد 21 يوما.
منالمعروف أن الفئران الستة السوداء C57 تصاب بتضخم غريب الأطوار مع خلل وظيفي انقباضي بعد TAC. تم العثور على زيادة في قطر البطين الأيسر ، والتي تبدو أيضا مهمة في قياسات حجم الضغط. نتيجة لذلك ، زادت أحجام الانقباضي والانبساطي بشكل كبير.
بمجرد إتقانها ، يمكن تنفيذ هذه التقنية في أقل من 10 دقائق ، إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. أخيرا ، يوفر هذا الإجراء تحليلا محسنا للاستجابة المناعية في تضخم البطين الأيسر ، لأن الحد الأدنى من الصدمة الجراحية يقيد الحث غير المحدد للجهاز المناعي. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء انقباض الأبهر المستعرض الموحد والحد الأدنى من التوغل.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تستعرض هذه المقالة بروتوكولاً لإجراء تضيق الأبهر المستعرض (TAC) في نموذج فأري مغلق الصدر. وقد صُممت هذه التقنية ذات التدخل الجراحي المحدود لاستحثاث تضخم البطين الأيسر مع تقليل الصدمات الجراحية والاستجابات الالتهابية إلى أدنى حد.
يقلل نموذج تضييق الأبهر المستعرض (TAC) مغلق الصدر من الصدمات الجراحية ويحافظ على أنماط التنفس الفسيولوجية، مما يتيح تقييماً قبل سريري أكثر موثوقية لآليات تضخم القلب وفشل القلب. ومن خلال تقليل التداخل المناعي الناتج عن عملية بضع الصدر، يعزز هذا النموذج الثقة في التحقق من الأهداف ضمن برامج اكتشاف أدوية القلب والأوعية الدموية وعلم المناعة. ويدعم هذا النهج التعافي السريع ونتائج ديناميكية دموية قابلة للتكرار، مما يسهل التحديد الفعال للمركبات الواعدة وتقليل المخاطر المتعلقة بالآليات في مراحل الاكتشاف المبكرة.
تندرج هذه الطريقة ضمن سلسلة عمليات الاكتشاف بدءاً من التحقق من الهدف وصولاً إلى اختبارات الفعالية قبل السريرية، مما يوفر نموذجاً قياسياً منخفض الصدمات للتقييم الديناميكي الدموي والنمطي المناعي.