التحليل الكمي للأشعة المقطعية الصغرى من أورتوباثي في نموذج ماوس β-أمينوبروبيونيتريلي-المستحث الابهر والتشريح

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال بيولوجيا الأوعية الدموية ، مثل تحديد كيفية تأثر حجم الأوعية الدموية في النماذج الحيوانية المختلفة لأمراض الأوعية الدموية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن التصوير المقطعي المحوسب الصغير يتيح صورا مفصلة لكل من السفن الكبيرة والصغيرة ، سواء في الجسم الحي أو خارج الجسم الحي ، والتي يمكن قياسها بدقة. قبل 24 ساعة من التحليل المقطعي المحوسب ، قم بإجراء العمليات الجراحية لإعداد العينة لإجراء وفرة داخل القلب بعد الوفاة.

للتخدير ، استخدم 3٪ إيزوفلوران ، وتأكد من استخدام زبال الفحم. بعد ذلك ، حافظ على التخدير بنسبة اثنين إلى 2.5 في المائة من الأيزوفلوران من قناع الوجه ، المتصل أيضا بزبال مع لتر واحد من الأكسجين في الدقيقة. قبل بدء الجراحة ، قم بإجراء قرصة إصبع القدم للتحقق من عدم وجود منعكس الدواسة.

ثم قم بإعداد حقل عملي بالأدوات وما إلى ذلك. بعد ذلك ، ضع في الاستلقاء الظهري وقم بتأمين الأطراف. الآن ، باستخدام المقص ، قم بعمل شق خط الوسط عبر الجلد والأنسجة الرخوة فوق القص بين ارتفاق العانة إلى الشق القصي.

بعد ذلك ، استخدم المقص لإنشاء ثقب في الحجاب الحاجز في عملية الخنجري لدخول التجويف الصدري. بعد ذلك ، استمر في استخدام المقص لتشريح الحجاب الحاجز لجدار الصدر البطني بشكل ثنائي. قطع الغضاريف الساحلية لفصل الأضلاع عن القص عند الحد القصي الأيمن.

الآن ، ضع مشبك مرقئ ناعما على طرف القص بالقرب من عملية الخنجري وحرك الإرقاء في الجمجمة بحيث يتم وضعه فوق رأس الفأر. بعد ذلك ، قم بتشريح أي مرفقات بين القلب وجدار الصدر بحدة. قلل من عدد الأوعية التالفة أثناء تحضير ، حيث سيؤدي ذلك إلى تسرب عامل التباين من الأوعية المقطوعة ، مما سيغير الحجم المطلوب للتعبئة الكاملة ، وسيقدم القطع الأثرية إلى التصوير النهائي.

الآن ، قم بتوصيل إبرة قسطرة IV عيار 27 بحقنة محملة مسبقا ب 10 ملليلتر من PBS heparinized واملأ كل الأنابيب بالمخزن المؤقت ، وإزالة جميع فقاعات الهواء. من الضروري إزالة جميع الفقاعات من الخطوط. بعد ذلك ، قم بشق البطين الأيمن على الفور ، أو الوريد الأجوف السفلي ، لتصريف محلول الهيبارين والدم.

للمضي قدما ، استخدم القنية لثقب البطين الأيسر ، الذي تم تثبيته بواسطة المشبك. قم بإجراء الوفرة بمعدل ثابت ملليلترين في الدقيقة باستخدام مضخة حقنة. يجب أن يكون هناك ابيضاض مرئي للأعضاء.

في غضون بضع دقائق ، يجب أن تكون الدورة الدموية للوريد خالية من الدم. بعد ذلك ، أوقف المضخة وافصل أنبوب القسطرة عن المحقنة ، لكن لا تحرك إبرة القسطرة. الآن ، افصل محلول عامل التباين إلى خمسة ملليلتر ، وأضف عامل المعالجة واخلطه جيدا.

بعد ذلك ، قم بتحميل خمسة ملليلتر من الخليط في حقنة سعة 10 ملليلتر وقم بغزارة بعامل التباين بمعدل ثابتين في الدقيقة. استمر في التسريب بعد نقطة رؤية عامل الصب يخرج من. سوف يعالج عامل التباين في 20 دقيقة.

بمجرد الشفاء ، احصد الأعضاء ذات الأهمية وإصلاحها في الفورمالين المحايد بنسبة 10٪. بعد ذلك ، لا يتم استخدام العينات للمسح الضوئي بالأشعة المناوية الدقيقة ، وإصلاح الذبيحة بأكملها. خلاف ذلك ، ضع الذبيحة على صينية معدنية وضعها في الثلاجة على أربع درجات مئوية لتعالجها طوال الليل.

في اليوم التالي ، احصل على صور التصوير المقطعي المحوسب بالأشعة السينية لكل فأر باستخدام ماسح ضوئي للأشعة المقطعية الدقيقة. اضبط معلمات الماسح الضوئي على النحو التالي ؛ ذروة جهد أنبوب الأشعة السينية يبلغ 55 كيلو فولت ، وتيار 150 ميكروأمبير ، وعامل تكبير النظام 2.19 ، وعامل تجميع بكسل كاميرا CCD من اثنين. سينتج عن عامل التجميع هذا حجم بكسل فعال يبلغ 29 ميكرون.

بعد ذلك ، قم بتحليل الصور لتحديد تمدد الأوعية الدموية باستخدام نهج موحد. قياس قطر المحور الصغير عند أوسع نقطة من ثلاثة مواقع ؛ من قوس الأبهر والشريان الأورطي الصدري الهابط والشريان الأورطي البطني. من الناحية المثالية ، يجب على مراقبين ، أحدهما أعمى ، تحليل كل صورة.

باستخدام القياسات ، حدد تمدد الأوعية الدموية على أنها تمدد موضعي أو منتشر لأجزاء الأبهر إلى أقطار أكبر من 50٪ من القطر المرجعي. تم تحليل 20 فأرا بالغا من الذكور من خلفية مختلطة وتتراوح أعمارهم بين 20 و 30 أسبوعا مع أو بدون علاج BAPN. كان كل منها غزيرا بمطاط سيليكون خالق للإشعاع قائم على الرصاص.

كان متوسط قطر الشريان الأورطي الصاعد في الفئران المعالجة ب BAPN أكبر بكثير من قطر الضوابط غير المعالجة المطابقة للعمر. نقاط البيانات من الفئران التي تم تحديدها لإصابتها بتمدد الأوعية الدموية باللون الأحمر. على النقيض من ذلك ، لم يكن لتثبيط ليسيل أوكسيديز مع BAPN تأثير كبير على متوسط الصدر الهابط ، ولم يؤثر هذا العلاج على أقطار الأبهر البطني.

تم تعريف تمدد الأوعية الدموية على أنه 1.5 ضعف متوسط قطر المجموعة غير المعالجة. يؤدي العلاج إلى زيادة كبيرة في تمدد الأوعية الدموية بهذا التعريف. تم تحديد تمدد الأوعية الدموية في الفئران المعالجة ب BAPN حصريا في الشريان الأورطي ، مع تحديد معظمها في الشريان الأورطي الصدري.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إثراء الأوعية الدموية للتصوير الشعاعي. بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء تحليل الوفرة والصورة في غضون ساعتين إذا تم إجراؤه بشكل صحيح. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر أنه يمكن تعديل بروتوكولات التصوير المقطعي المحوسب بمساعدة طاقم الأشعة لتحسين الحصول على الصور للأغراض المحددة للتجارب الفردية.