توليد نموذج سرطان الثدي المنتشر مورين أورثوتوبيك والقيام باستئصال الثدي الجذري مورين
نوفمبر 29, 2018
نحن نقدم استئصال الثدي الجذري ونموذج سرطان الثدي مورين أورثوتوبيك مع تقنية الإضاءة الحيوية لتقدير عبء الورم لمحاكاة تطور سرطان الثدي البشرية.
يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال سرطان الثدي حول كيفية محاكاة تطور سرطان الثدي البشري وعلاجه في نموذج الماوس. الميزة الرئيسية لهذا النموذج سرطان الثدي الماوس هو أن لديها ارتفاع معدل ورمريجنيس بعد زرع العظام وانخفاض معدل تكرار المحلية بعد استئصال الثدي. تبدأ من خلال تأكيد عدم وجود استجابة لقرصة إصبع قدمه في فأر أنثى تخديره وسجّل أطراف الحيوان على لوحة جراحية.
باستخدام مسحات القطن العقيمة تعقيم المنطقة الجراحية مع الكلورهيكسيدين، اليود والإيثانول 75٪. و اصنع شقاً جلدياً من خمسة ملليمترات في منتصف جدار الصدر الأمامي المقبل رفع الجانب الأيمن من الجلد المجاورة للشق واستخدام مقص microdissection العقيمة لفصل الجلد من جدار الصدر.
عكس الجلد لفضح الحق رقم اثنين وسادة الدهون ماماري واستخدام حقنة الأنسولين ملليلتر واحد مجهزة إبرة 28.5 قياس لحقن بعناية 20 ميكرولترات من تعليق الخلايا السرطانية من خلال الجرح في وسادة الدهون. عقد الإبرة داخل وسادة الدهون لمدة خمس ثوان للسماح لخليط بروتين الخلايا السرطانية هلامية لترسيخ قبل إزالة الإبرة، وإغلاق شق مع الغرز العقيمة 5-0 غير قابل للاختب. ثم ضع الحيوان في قفص نظيف مع المراقبة حتى إعادة شغل كامل.
لإجراء استئصال الثدي بعد ثمانية أيام من تلقيح السرطان إعداد الماوس لعملية جراحية كما أظهرت للتو، وجعل شق الجلد من خمسة ملليمترات ملليمترين إلى يسار الندبة الجراحية من تلقيح الخلايا السرطانية. تمديد شق نحو جذر forelimb لإزالة الورم، والجلد، بما في ذلك ندبة الجراحية، وآفة في اتصال مع الورم، وحوض العقد الليمفاوية الإبطية التي عادة ما تكون موجودة في وقت استئصال الثدي. ثم أغلق عيوب الجلد مع خياطة معقمة 5-0 غير قابلة للاستخدام في شكل Y.and إعادة الحيوان إلى قفصه مع رصد حتى شغل كامل.
بالنسبة للتكرار الكمي للرئة بعد 21 يومًا من حقن التطعيم 150 ملليغرامًا لكل كيلوغرام من D-Luciferin IP قبل 15 دقيقة من القتل الرحيم. واستخدم مقص مايو المنحني لفتح الجلد والصوانيم في منتصف البطن. اضغط أسفل الكبد حتى يمكن تصور الحجاب الحاجز، وقطع الحجاب الحاجز والأضلاع الثنائية من الكداد إلى سيفالاد.
قم بقلب جدار الصدر الأمامي لفضح الرئتين ورفع الرئتين لتحديد المريء الصدري، الذي يبدو وكأنه سلك يربط الرئتين بالعمود الفقري. قطع المريء مع مقص microdissection واستخدام ملقط لسحب الرئتين الثنائية والقلب نحو caudad. ثم قطع القصبة الهوائية والأوعية الرئيسية إلى قمة الرئة في سيفلاد ووضع الرئتين في طبق بيتري 10 سنتيمترات للتصوير الإنارة الحيوية.
استخدم المقص لإزالة القلب من أنسجة الرئة. تبدأ في حوالي ثمانية أيام بعد ماماري وسادة الدهون خلية سرطان تطعيم الاضاءة الحيوية في الرئتين هو أعمق وأصغر مما كانت عليه في الآفة الأولية التي تعكس عبء الورم الأساسي في الفئران الحية. قياس حجم الورم مع الفرجار يسمح تقدير حجم الورم في الموقع.
كما يسمح نموذج استئصال الثدي هذا أيضًا بمراقبة عبء الورم النقيلي التسلسلي دون الحاجة إلى القتل الرحيم للحيوانات. ويمكن أيضا أن يكون حجم عبء الورم من الانبثاث الرئة عن طريق التصوير فيفو السابقين، ولكن القيد هو أن الفئران يجب أن يكون القتل الرحيم. ويمكن أيضا أن يتم رصد بقاء الماوس بعد العلاج الجراحي كنقطة نهاية سريرية قابلة للترجمة.
بعد تطورها مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال سرطان الثدي لاستكشاف ليس فقط تطوير دواء جديد ، ولكن أيضا أبحاث سرطان الثدي بشكل عام.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
نظرة عامة
تقدم هذه المقالة نموذجاً فئرانياً لسرطان الثدي في موضعه الأصلي، وذلك باستخدام تقنية التلألؤ البيولوجي لتقدير العبء الورمي. يهدف هذا النموذج إلى محاكاة تطور سرطان الثدي البشري وعلاجه بشكل دقيق.
المكونات الرئيسية للدراسة
مجال العلم
- أبحاث سرطان الثدي
- نماذج الفئران
- التصوير بالتلألؤ البيولوجي
خلفية علمية
- تتناول الدراسة أسئلة رئيسية حول تطور سرطان الثدي.
- وتسلط الضوء على مزايا معدل التسرطن العالي في هذا النموذج.
- كما يظهر النموذج معدلاً منخفضاً للنكس الموضعي بعد عملية استئصال الثدي.
- ويعد فهم هذه العوامل أمراً بالغ الأهمية لتطوير علاجات فعالة.
الغرض من الدراسة
- إنشاء نموذج موثوق من الفئران لدراسة سرطان الثدي.
- تقييم العبء الورمي باستخدام تقنيات التصوير المتقدمة.
- تسهيل الأبحاث حول تطور سرطان الثدي المشابه للحالات البشرية.
الطرق المستخدمة
- التأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في الفئران المخدرة.
- التحضير الجراحي بما في ذلك تعقيم المنطقة.
- إجراء شق جلدي بطول خمسة مليمترات في جدار الصدر.
- استخدام مقصات التشريح الدقيق لفصل الجلد.
النتائج الرئيسية
- يظهر النموذج معدلًا مرتفعًا من تطور الورم.
- لوحظت معدلات تكرار منخفضة بعد التدخل الجراحي.
- يقوم التلألؤ البيولوجي بقياس العبء الورمي بشكل فعال.
- يوفر النموذج رؤى حول ديناميكيات سرطان الثدي لدى البشر.
الاستنتاجات
- يُعد هذا النموذج الفأري أداة قيمة لأبحاث سرطان الثدي.
- وهو يتيح استقصاء الاستجابات العلاجية.
- ويمكن أن تساهم النتائج في فهم أفضل لتطور السرطان.
الأسئلة الشائعة
الأهمية التنفيذية في القطاع الصناعي
يعالج نموذج سرطان الثدي المتماثل في الفئران هذه الفجوة الحرجة في أبحاث الأورام قبل السريرية من خلال تمكين محاكاة قابلة للتكرار وعالية الدقة لتطور سرطان الثدي البشري والتدخل الجراحي. ويدعم هذا النموذج التحقق من الأهداف وتقليل المخاطر الميكانيكية من خلال تقييم كمي لعبء الورم باستخدام التصوير بالتلألؤ الحيوي. كما تساهم معدلات تكون الأورام المرتفعة وانخفاض معدل الانتكاس الموضعي بعد استئصال الثدي في تعزيز الثقة التنبؤية في دراسات فعالية الأدوية قبل السريرية.
التطبيقات الاستراتيجية في البحث والتطوير للمستحضرات الصيدلانية الحيوية
الاكتشاف المبكر والتحقق من الهدف
- القيمة العلمية: تتيح استجواب الفرضيات العلاجية في سياق وسادة دهنية ثدية ذات صلة فسيولوجياً.
- القيمة التشغيلية: تدعم التحقق الوظيفي من الأهداف مع معدلات عالية من تكوين الأورام مما يقلل من الضوضاء البيولوجية.
- القيمة التنبؤية: تسهل عملية فرز المحفظة الدوائية من خلال نمذجة استيطان الورم وتطوره بشكل مشابه للبشر.
الفحص وتطوير المقايسة
- القيمة العلمية: تجهيز أنظمة أورام في الموقع الأصلي (orthotopic) مُصادق عليها لإجراء مسح للمركبات في المراحل اللاحقة.
- القيمة التشغيلية: توحيد إجراءات زرع الورم واستئصال الثدي لضمان الحصول على نتائج مقايسة قابلة للتكرار.
- القابلية للتوسع: تتيح المراقبة الطولية بالتلألؤ البيولوجي لتقييم عبء الورم بشكل متسلسل.
الأبحاث translationale والسريرية الأولية
- الاستمرارية الترجمية: ينمذج الانتشار النقيلي المرتبط بالمرض إلى الرئتين من أجل التقييم قبل السريري.
- تقليل المخاطر الآلية: يتيح تقييم عبء الورم النقيلي بعد استئصال الثدي لتوجيه استراتيجيات العلاج المساعد.
- النموذج قبل السريري: يدعم قرارات التقدم المعدلة وفقاً للمخاطر من خلال قياس النقائل الرئوية خارج الجسم الحي (ex vivo).
تكامل خطوط المعالجة وسير العمل
يتكامل هذا النموذج ضمن تسلسل عملية الاكتشاف، بدءاً من التحقق المبكر من الهدف وصولاً إلى اختبارات الفعالية قبل السريرية، مما يدعم تحديد المركبات الرائدة ومواءمة المؤشرات الحيوية الانتقالية.
- بيولوجيا الاكتشاف: تدعم اختبار الفرضيات عبر الزرع في الموضع الأصلي وقياس مدى نمو الورم.
- الفحص المجهري: تتيح جاهزية المقايسة من خلال الإجراءات الجراحية الموحدة والتقدير الكمي القائم على التلألؤ البيولوجي.
- التحليلات: توفر قياسات كمية للمتغيرات التابعة عبر تصوير الرئة خارج الجسم وتقدير حجم الورم باستخدام الفرجار.
- الأبحاث الانتقالية: تربط الاستمرارية قبل السريرية من خلال مراقبة العبء النقائلي ونقاط النهاية الخاصة بالبقاء على قيد الحياة.
- إعادة الاستخدام المؤسسي: تؤسس منصة جراحية وتصويرية قابلة لإعادة الاستخدام لدراسات الأورام التكرارية.
التأثير التشغيلي والمؤسسي
- القيمة العلمية: ثقة تنبؤية في التحقق من الهدف من خلال معدلات عالية من تكوين الأورام ومعدلات منخفضة من التكرار.
- القيمة التشغيلية: التقييس، وقابلية التكرار، وقابلية التوسع في الإجراءات الجراحية والتصويرية.
- القيمة الاستراتيجية: تحسين قرارات المضي قدماً أو التوقف (go/no-go) وتقليل المخاطر البيولوجية في المراحل المتأخرة عبر نمذجة موثوقة للنقائل السرطانية.
- التأثير على المحفظة: تحديد الأولويات المعدلة وفقاً للمخاطر بناءً على عبء ورمي نقائلي قابل للقياس الكمي.
اعتبارات التنفيذ
- الخبرة المطلوبة في تقنيات الجراحة للفئران ومراقبة التخدير.
- تشمل احتياجات الأجهزة محاقن الأنسولين، ومقصات التشريح الدقيق، وأنظمة التصوير بالتلألؤ البيولوجي.
- يتطلب التوحيد القياسي بين الفرق اتساقاً في موضع الشق الجراحي وتقنيات الخياطة.
- تشمل اعتبارات التكيف عبر أنظمة النماذج تباين الوسادة الدهنية الثديية والتحقق من التعبير عن إنزيم luciferase.
- تشمل القيود العملية الحاجة إلى القتل الرحيم من أجل تقدير كمية النقائل الرئوية خارج الجسم (ex vivo).
