نبات رذاذ الكتلي: أسلوب تاين المحيطة سريع مباشرة تقييم نواتج الأيض من الأنسجة النباتية

رذاذ الأوراق MS هو طريقة سريعة للتحليل النوعي وشبه الكمي للأنسجة النباتية السليمة التي لها مجموعة متنوعة من التطبيقات. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن تحليل الأنسجة النباتية مباشرة دون تحضير العينة. على الرغم من أن هذه الطريقة توفر رؤى جيدة في قلوانيات mesembrine من Sceletium, يمكن أيضا استخدامها لتحليل مختلف الأنواع النباتية الأخرى والمواد الكيميائية الخارجية مثل المبيدات الحشرية.

قد يجد الأفراد الجدد في هذه الطريقة صعوبة لأنه من الضروري تحسين البروتوكول لكل نوع نباتي ونوع الأنسجة والمركب ذي الأهمية. استخدم مصدر رش نانو معدل لرذاذ الأوراق MS.As لا توجد مكونات سائلة ضرورية لرذاذ الأوراق MS ، قم بتعديل المصدر عن طريق إزالة مسبار الكروماتوغرافيا السائل من المصدر. يحتوي سلك قياس الطيف الكتلي لرذاذ الأوراق الذي سيطبق الجهد على الأنسجة النباتية على دبوس ملحوم بالسلك من أحد طرفيه ومشبك تم لحاممه على الطرف الآخر.

إذا كان النظام قيد الاستخدام مؤخرا ، فاتركه يبرد عند لمسه قبل إزالة أي مصدر بديل في مخروط الكنس. ثم قم بإرفاق مصدر رذاذ أوراق النانو MS. أخيرا ، قم بإنشاء ملف ضبط وملف طريقة كما هو موضح في بروتوكول النص.

ارتد دائما القفازات ولا تستخدم الأنسجة النباتية التي تم التعامل معها بأيدي عارية. خلاف ذلك ، فإن الأيونات الملوثة مثل البولي إيثيلين جلايكول ستهيمن على الأطياف. أحضر الأنسجة النباتية للتحليل إلى نفس غرفة نظام قياس الطيف الكتلي للسماح بأخذ عينات سريعة.

بالنسبة للأنسجة النباتية التي لا تحتوي على طرف مدبب بشكل طبيعي ، استخدم شفرة حلاقة على شريحة زجاجية لقطع نقطة مدببة. قطع أوراق Sceletium tortuosum في 10 أسابيع بعد الإنبات إلى شرائح رفيعة لكل منها نهاية مدببة لتشكيل نقطة. استخدم الملقط لتحديد الأنسجة النباتية برفق في النهاية التي سيتم تثبيتها.

أمسك الأنسجة بالملقط ، وقم بنقله بعناية إلى المشبك. اضبط الذراع المرن والسلك باستخدام المشبك لوضع الأنسجة بما يتماشى مع مدخل MS. راجع النص لمعرفة المسافة المثلى من مدخل الأيونات لكل مطياف كتلة محدد.

إذا أنتجت المحاولات الأولى شدة إشارة منخفضة ، فيمكن تحريك الأنسجة النباتية بالقرب من مدخل الأيونات. قم بتحميل ملف الأسلوب. قم بتسمية ملف البيانات وقم بتعيين موقع تخزين الملفات.

ثم قم بتشغيل نظام MS بالنقر فوق تشغيل والنقر فوق ابدأ لبدء الحصول على البيانات. ضع مذيبا باستخدام ماصة ذات طرف تحميل هلام لزيادة المسافة بين الجهد العالي ويدي المستخدم للحماية. احصل على البيانات طالما استمرت الإشارة أو حتى يتم جمع الأطياف الكافية ، عادة من 30 إلى 60 ثانية.

أوقف الحصول على البيانات وأوقف نظام MS مؤقتا. بعد الاستحواذ ، قم بإزالة الأنسجة وغسل المشبك ب 100٪ من الميثانول في منديل خال من النسالة. افتح ملف البيانات وافحص الكرونوجرام الأساسي لذروة الكتلة بصريا.

تأكد من أن شدة الإشارة تقارب 10 ملايين إلى 500 مليون. قم بإنشاء ملف أسلوب جديد مع قائمة تضمين M على Z إلى أربعة منازل عشرية. انقر فوق القوائم العالمية والتضمين.

ضمن خصائص PRM ، حدد طاقة التجزئة ومعلمات MS الترادفية الأخرى. للحصول على بيانات MS الترادفية لقلويدات mesembrine ، قم بتقسيم الأيونات عند 276.1583 M فوق Z ، و 290.1742 M فوق Z ، و 292.1897 M فوق Z بطاقة تصادم طبيعية تبلغ 35. بعد ذلك ، قم بتحميل ملف طريقة MS الترادفي وملف بيانات مسمى.

قم بتشغيل نظام MS وابدأ في الحصول على البيانات بإضافة مذيب إذا لزم الأمر. عندما يتم جمع أطياف كافية ، عادة بعد 30 إلى 60 ثانية ، أوقف الاستحواذ. إجراء تحليل البيانات كما هو موضح في بروتوكول النص.

تظهر النتائج التمثيلية للتنميط الأيضي ل Sceletium tortuosum بواسطة رذاذ الأوراق MS والتأين الإيجابي مع عرض الجزء الداخلي من 260 إلى 295 مترا على Z.In هذه الدراسة ، تم الكشف عن ما مجموعه تسعة قلويدات mesembrine بواسطة رذاذ الأوراق MS وتم إجراء تحديدات التعريف. يمثل الكرونوغرام الكتلي لعدد الأيونات الإجمالي لرذاذ الأوراق MS تجربة MS ناجحة لرذاذ الأوراق حيث تم الحفاظ على إشارة مستقرة طوال مدة الاستحواذ. لكل ذروة ، الرقم العلوي هو الوقت بالدقائق والجزء السفلي هو M over Z.تم جمع أطياف الكتلة الترادفية في التأين الإيجابي المصنوع من ورقة Sceletium tortuosum المقطوعة مع رذاذ الأوراق MS. تم إجراء التحديدات القياسية للقلويدات من الكتلة الدقيقة وتجزئة الكتلة لأيزومرات mesembrine M و mesembrenone M و mesembrine و mesembrine M dihydro.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية استخدام رذاذ الأوراق MS للكشف عن مستقلبات النبات. تم استخدام رذاذ الأوراق MS للكشف عن المركبات الداخلية وكذلك المركبات الخارجية مثل المبيدات الحشرية.