Name: رواية تقنية جراحية كأساس في فيفو جزئي الهندسة الكبد في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 27 s
Description: تعلم تقنية جراحية جديدة لإجراء perfusion في فص الكبد الأيسر في الفئران. يوفر هذا النموذج ظروفاً حيوية للبقاء على المدى الطويل ويدعم أبحاث هندسة الكبد المستقبلية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

الكتاب أود أن أشكر ينز جيلينج من معهد التشريح الأول، مستشفى جامعة يينا، لإنتاج رسومات تخطيطية لتشريح الجرذ الكبد.

كانت الإسكان وجميع الإجراءات المنفذة وفقا للتشريع الألماني الرفق بالحيوان. كل شاش وتغطي الملابس والأدوات الجراحية يعقم والمعدة قبل العملية. تنفذ جميع الإجراءات تحت ظروف معقمة.
1. إعداد الفئران للعملية الجراحية
<ol><li>وضع الفئران في دائرة للاستقراء وتخدير الفئران مع إيسوفلوراني 4% ويتبخر والأكسجين 100% في 0.5 لتر في الدقيقة لحوالي 3 دقيقة، حتى يتم تخديره تماما من الفئران.</li>
	<li>إخراج الفئران من قاعة الاستقراء وقياس وزن الجسم.</li>
	<li>يحلق الفراء منطقة العمليات الجراحية في البطن.</li>
	<li>ضع الجزء الخلفي الحيوان في غرفة isoflurane مين 2 إضافية لتعميق التخدير.</li>
	<li>وضع الفئران في الجدول العملية في موقف ضعيف.</li>
	<li>تحديد قناع التخدير إلى منطقة الفم في الفئران والحفاظ على الحيوان تخديره مع تدفق غاز مستمر إيسوفلوراني 2% ويتبخر والأكسجين 100% بمعدل تدفق 0.5 لتر في الدقيقة.</li>
	<li>إصلاح أطرافه مع قطعة من الشريط.</li>
	<li>تطبيق مرهم البيطرية في كلتا العينين لمنع جفاف.</li>
	<li>إدارة البوبرينورفين 0.05 مغ/كغ تحت الجلد، لتخفيف الألم أثناء فترة العملية.</li>
	<li>تطهير ميدان العمليات الجراحية للبطن مع 3 جولات من صبغة اليود تليها جولات 2 من الكحول 70%.</li>
	<li>مكان تعقيم الشاش حول المنطقة حيث ستبذل الشق فقط ترك مجال عملية البطن مكشوف.</li>
	<li>المضي قدما لإجراء العملية عند غائب منعكس سحب إصبع القدم-رشة من الفئران.</li>
</ol>2-فتح البطن للفئران
<ol><li>جعل شق الجلد والعضلات البطن عرضية باستخدام مقص وكواجولاتور كهربائية.</li>
	<li>الإصلاح وسحب العملية الرهابه تجاه الرأس استخدام خياطة البوليبروبيلين 4-0. ملاحظة: إيلاء اهتمام لرفع عملية الرهابه عمودياً لفضح أفضل في الكبد، ولكن المتابعة مع توخي الحذر لتجنب تقييد شديد في الجهاز التنفسي والاختناق.</li>
	<li>فتح التجويف البريتوني عن طريق سحب كلا الجانبين من جدران البطن نحو رأسه بخطافات سوبكوستال اثنين لفضح الكبد.</li>
	<li>تغطية الإثني عشر والأمعاء الدقيقة في تجويف البطن مع شاش ترطب لتجنب التجفيف.</li>
	<li>أرفع الفصوص اليسار واليمين الوسط باستخدام شاش ترطب وعقد لهم ضد الصدر لفضح أفضل هيلم الكبد.</li>
	<li>مكان الفئران تحت ستيريوميكروسكوبي (8 X التكبير).</li>
	<li>إسقاط بعض الملحية الدافئة في البطن وعلى سطح الكبد والأمعاء كل عدة دقائق، لمنع تجفيف أثناء الإجراء بأكمله.</li>
</ol>3. إنشاء ممر الالتفافية داخل الفص الجانبي الأيسر
<ol><li>تشريح الوريد البابي الأيمن واضطر أنه مع خياطة حرير 6-0 في القاعدة (الشكل 2A).</li>
	<li>كتلة الشريان الكبدي الأيسر، والقناة الصفراوية الأيسر إلى جانب الوريد البابي الوسط الأيسر والشريان الكبدي الوسط الأيسر، والقناة الصفراوية الوسط الأيسر مع المشابك الصغيرة لمنع تدفق بيرفوساتي إلى الفص المتوسط الأيسر (الشكل 2).</li>
	<li>فصل الفص الجانبي الأيسر بقطع الأربطة المحيطة للفص بالمقص الصغير.</li>
	<li>كتلة الوريد الكبدي الجانبي الأيسر لقط في قاعدة الفص الجانبي الأيسر مع المشابك الصغيرة (الشكل 2). ملاحظة: تأكد من عدم المشبك الوريد البابي الأيسر، وكذلك عن طريق الخطأ.</li>
	<li>استخدام المشابك البعوض اضغط حرف مزدوج الوريد البابي الأيمن والحفاظ على المنوال مع التوتر السليم ل cannulation لاحقاً.</li>
	<li>بعناية تجعل شق في الجدار الأمامي من الوريد البابي الأيسر بثقب مع قسطرة إبرة مسكن 24-ز ( الشكل 3A). ملاحظة: لإنشاء تجاوز، هناك حاجة نقاط وصول الأوعية الدموية في الوريد البابي الأيمن والوريد الكبدي الأيسر. لهذه الخطوة، ومن المفضل إنشاء وصول الأوعية الدموية بثقب السفن بإبرة بدلاً من إجراء شق أكبر باستخدام مقص. وهذا يقلل من خطر تضيق النزيف والإصدارات الأحدث.</li>
	<li>سحب القسطرة وتأخذ الإبرة خارج القسطرة للحصول على قسطرة خالية من إبرة 24-ز.</li>
	<li>الاتصال القسطرة بأنبوب نضح، ومن الذي يربط نقطة النهاية الأخرى لحقنه 20 مل مع 15 مل 40 هيبارينيزيد U/mL المالحة في مضخة التروية.</li>
	<li>قم بتشغيل المضخة بيرفوسينج على أنبوب لطرد الهواء خارجاً من الأنبوب والقسطرة خالية من الإبرة.</li>
	<li>إيقاف تشغيل المضخة التروية.</li>
	<li>مرة أخرى، إدراج القسطرة خالية من إبرة الوريد البابي الأيسر عبر شق ثقب في الوريد (الشكل 3B). ملاحظة: نظراً لكون هناك مساحة محدودة للغاية لتحديد القسطرة، ولم يتم إصلاحها عند هذه النقطة. ولذلك، ينبغي استخدام الجراح العناية لتجنب تشريد القسطرة مقني.</li>
	<li>بعناية تجعل شق آخر على هامش المنطقة المكشوفة الوريد الكبدي الجانبي الأيسر بثقب مع قسطرة ز 22 أو 24 إبرة مسكن (الشكل 3). ملاحظة: من المستحسن أن القسطرة تكون أصغر قليلاً من السفينة.</li>
	<li>سحب القسطرة وتأخذ الإبرة خارج القسطرة للحصول على قسطرة خالية من إبرة 22-ز.</li>
	<li>قم بتشغيل المضخة نضح نتخلل المالحة هيبارينيزيد في الفص الجانبي الأيسر عن طريق القسطرة خالية من إبرة مقني 24-ز الوريد الأيسر بوابة تدفق بمعدل 0.5 مل/دقيقة.</li>
	<li>استخدام الشاش الجاف لامتصاص السوائل النفايات المتدفقة خارج حول منطقة شق الوريد الكبدي الجانبي الأيسر.</li>
	<li>كانولاتي في الوريد الكبدي الجانبي الأيسر عبر شق ثقب الوريد مع القسطرة خالية من إبرة 22-ز، لإنشاء منفذ للسوائل لتقليل التلوث داخل البطن (الشكل 3D). ملاحظة: من الصعب من الناحية الفنية لإصلاح القسطرة مقني فص الكبد. ولذلك، الجراح أن تولي اهتماما لتجنب تشريد القسطرة. بدلاً من ذلك، دون cannulation الوريد الكبدي الجانبي الأيسر مع قسطرة، سوائل النفايات يمكن أيضا أن تستوعب في منطقة شق الوريد فقط مع شاش جافة.</li>
	<li>الحفاظ على بيرفوسينج الفص الجانبي الأيسر مع المالحة هيبارينيزيد لحوالي 20 دقيقة (المجموعة 1) ومن ثم فقط مع المالحة ح 2، ح 3، أو 4 ح (المجموعة 2، المجموعة 3، والمجموعة 4، على التوالي).</li>
	<li>إيقاف تشغيل المضخة لوقف في التروية.</li>
</ol>4-الفسيولوجية ضخه من الفص الجانبي الأيسر
<ol><li>خلع القسطرة كلا من الوريد البابي الأيمن والوريد الكبدي الجانبي الأيسر.</li>
	<li>إغلاق شق الوريد المدخل الأيسر مع خياطة بولي أميد 11-0.</li>
	<li>إغلاق شق الوريد الكبدي الجانبي الأيسر مع خياطة بولي أميد 11-0 كذلك.</li>
	<li>أونكلامب الوريد الكبدي الجانبي الأيسر.</li>
	<li>أونكلامب في الوريد البابي الوسط الأيسر، والقناة الصفراوية الأيسر والشريان الكبدي الأيسر.</li>
	<li>قطع حرف مزدوج في الوريد البابي الأيمن فتح الوريد.</li>
</ol>5-إغلاق جدار البطن
<ol><li>إغلاق الطبقة العضلية لجدار البطن بخياطة متقطعة مع خياطة بوليجلاكتين امتصاص 910 4-0.</li>
	<li>إغلاق طبقة الجلد من جدار البطن بخياطة متقطعة مع خياطة بوليديوكسانوني امتصاص 4-0.</li>
	<li>بعد إغلاق البطن، تطهير شق الجلد بالكحول 70%.</li>
</ol>6-بعد العملية الجراحية معاملة الفئران
<ol><li>ضع الحيوان على لوح الاحترار للإنعاش لمدة حوالي 10 دقائق وثم وضعه في قفص جديد.</li>
	<li>إدارة البوبرينورفين 0.05 مغ/كغ تحت الجلد 2 × يوميا لمد 3 على التوالي بعد للإفراج عن الألم.</li>
</ol>

<ol><li>Kim, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN+%2F+SRTR+2016+Annula+Data+Report%3A+Liver%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation.+Suppl%22%5BJournal%5D)">OPTN / SRTR 2016 Annula Data Report: Liver.</a> American Journal of Transplantation. Suppl. 1, 172-253 (2018).</li>
<li>Palakkan, A. A., Hay, D. C., Anil Kumar, P. R., Kumary, T. V., Ross, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+tissue+engineering+and+cell+sources%3A+issues+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+International%22%5BJournal%5D)">Liver tissue engineering and cell sources: issues and challenges.</a> Liver International. 33, 666-676 (2013).</li>
<li>Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+extracellular+matrix%3A+not+just+pretty+fibrils%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The extracellular matrix: not just pretty fibrils.</a> Science. 326, 1216-1219 (2009).</li>
<li>Flaim, C. J., Chien, S., Bhatia, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+extracellular+matrix+microarray+for+probing+cellular+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">An extracellular matrix microarray for probing cellular differentiation.</a> Nature Methods. 2, 119-125 (2005).</li>
<li>Wells, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+matrix+stiffness+in+regulating+cell+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">The role of matrix stiffness in regulating cell behavior.</a> Hepatology. 47, 1394-1400 (2008).</li>
<li>Ren, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+two+decellularization+methods+in+the+development+of+a+whole-organ+decellularized+rat+liver+scaffold%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+International%22%5BJournal%5D)">Evaluation of two decellularization methods in the development of a whole-organ decellularized rat liver scaffold.</a> Liver International. 33, 448-458 (2013).</li>
<li>Yagi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human-scale+whole-organ+bioengineering+for+liver+transplantation%3A+a+regenerative+medicine+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Human-scale whole-organ bioengineering for liver transplantation: a regenerative medicine approach.</a> Cell Transplantation. 22, 231-242 (2013).</li>
<li>Jiang, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryo-chemical+decellularization+of+the+whole+liver+for+mesenchymal+stem+cells-based+functional+hepatic+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Cryo-chemical decellularization of the whole liver for mesenchymal stem cells-based functional hepatic tissue engineering.</a> Biomaterials. 35, 3607-3617 (2014).</li>
<li>Uygun, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+reengineering+through+development+of+a+transplantable+recellularized+liver+graft+using+decellularized+liver+matrix%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Organ reengineering through development of a transplantable recellularized liver graft using decellularized liver matrix.</a> Nature Medicine. 16, 814-820 (2010).</li>
<li>Baptista, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+whole+organ+decellularization+for+the+generation+of+a+vascularized+liver+organoid%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">The use of whole organ decellularization for the generation of a vascularized liver organoid.</a> Hepatology. 53, 604-617 (2011).</li>
<li>Bruinsma, B. G., Kim, Y., Berendsen, T. A., Yarmush, M. L., Uygun, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Layer-by-layer+heparinization+of+decellularized+liver+matrices+to+reduce+thrombogenicity+of+tissue+engineered+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+and+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Layer-by-layer heparinization of decellularized liver matrices to reduce thrombogenicity of tissue engineered grafts.</a> Journal of Clinical and Translational Research. 1 (1), (2015).</li>
<li>Park, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decellularized+Liver+Extracellular+Matrix+as+Promising+Tools+for+Transplantable+Bioengineered+Liver+Promotes+Hepatic+Lineage+Commitments+of+Induced+Pluripotent+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">Decellularized Liver Extracellular Matrix as Promising Tools for Transplantable Bioengineered Liver Promotes Hepatic Lineage Commitments of Induced Pluripotent Stem Cells.</a> Tissue Engineering Part A. 22, 449-460 (2014).</li>
<li>Ko, I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineered+transplantable+porcine+livers+with+re-endothelialized+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Bioengineered transplantable porcine livers with re-endothelialized vasculature.</a> Biomaterials. 40, 72-79 (2015).</li>
<li>Bao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+of+a+portal+implantable+functional+tissue-engineered+liver+using+perfusion-decellularized+matrix+and+hepatocytes+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Construction of a portal implantable functional tissue-engineered liver using perfusion-decellularized matrix and hepatocytes in rats.</a> Cell Transplantation. 20, 753-766 (2011).</li>
<li>Pan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-vivo+organ+engineering%3A+Perfusion+of+hepatocytes+in+a+single+liver+lobe+scaffold+of+living+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Biochemistry+%26+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">In-vivo organ engineering: Perfusion of hepatocytes in a single liver lobe scaffold of living rats.</a> The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 80, 124-131 (2016).</li>
<li>Madrahimov, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marginal+hepatectomy+in+the+rat%3A+from+anatomy+to+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Marginal hepatectomy in the rat: from anatomy to surgery.</a> Annals of Surgery. 244, 89-98 (2006).</li>
<li>Mussbach, F., Settmacher, U., Dirsch, O., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineered+Livers%3A+A+New+Tool+for+Drug+Testing+and+a+Promising+Solution+to+Meet+the+Growing+Demand+for+Donor+Organs%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Bioengineered Livers: A New Tool for Drug Testing and a Promising Solution to Meet the Growing Demand for Donor Organs.</a> European Surgical Research. 57, 224-239 (2016).</li>
<li>Mussbach, F., Settmacher, U., Dirsch, O., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+engineering+as+a+new+source+of+donor+organs%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Der+Chirurg%22%5BJournal%5D)">Liver engineering as a new source of donor organs: A systematic review.</a> Der Chirurg. 87, 504-513 (2016).</li>
<li>Xie, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+systemic+and+hepatic+hemodynamic+parameters+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Monitoring of systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e51955(2014).</li>
<li>Zhou, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decellularization+and+Recellularization+of+Rat+Livers+With+Hepatocytes+and+Endothelial+Progenitor+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Decellularization and Recellularization of Rat Livers With Hepatocytes and Endothelial Progenitor Cells.</a> Artificial Organs. 40, E25-E38 (2016).</li>
<li>Yagi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human-scale+whole-organ+bioengineering+for+liver+transplantation%3A+a+regenerative+medicine+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Human-scale whole-organ bioengineering for liver transplantation: a regenerative medicine approach.</a> Cell Transplantation. 22, 231-242 (2013).</li>
<li>Otsuka, H., Sasaki, K., Okimura, S., Nagamura, M., Nakasone, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropatterned+co-culture+of+hepatocyte+spheroids+layered+on+non-parenchymal+cells+to+understand+heterotypic+cellular+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Science+and+Technology+of+Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Micropatterned co-culture of hepatocyte spheroids layered on non-parenchymal cells to understand heterotypic cellular interactions.</a> Science and Technology of Advanced Materials. 14, 065003(2013).</li>
<li>Bale, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+coculture+strategies+for+primary+hepatocytes+and+liver+sinusoidal+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+C%3A+Methods%22%5BJournal%5D)">Long-term coculture strategies for primary hepatocytes and liver sinusoidal endothelial cells.</a> Tissue Engineering Part C: Methods. 21, 413-422 (2015).</li>
<li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+perfusion-decellularization+methods+of+porcine+livers+for+clinical-scale+whole-organ+bioengineering%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Optimizing perfusion-decellularization methods of porcine livers for clinical-scale whole-organ bioengineering.</a> BioMed Research International. , 785474(2015).</li>
<li>Barakat, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+decellularized+porcine+liver+for+engineering+humanized+liver+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Use of decellularized porcine liver for engineering humanized liver organ.</a> Journal of Surgical Research. 173 (1), e11-e25 (2012).</li>
<li>Navarro-Tableros, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recellularization+of+rat+liver+scaffolds+by+human+liver+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">Recellularization of rat liver scaffolds by human liver stem cells.</a> Tissue Engineering Part A. 21 (11-12), 1929-1939 (2015).</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

بحظر وكانولاتينج الوريد البابي الأيمن مع قسطرة كمدخل السوائل والوريد الكبدي الجانبي الأيسر قسطرة أخرى كمنفذ للسوائل، ونحن بنجاح إنشاء في فيفو السوائل التفافية داخل الفص الجانبي الأيسر، مما يدل على أن على الرغم من أن التقنية التي تنطوي على تحد كبير بسبب الحجم الصغير لهذه السفن كانوليشن وخطر التسبب بنزيف، من الممكن. ونجا حتى الفئران تمر بفترة طويلة نضح من 4 ساعات 1 أسبوع على الأقل، تبين أن الفئران يمكن أن يتسامح مع هذا الإجراء الجراحي.
في المقطع التالي، يصف لنا ثلاث خطوات من الناحية الت...

المؤشرات لزرع آخذة في التوسع باستمرار. وفي المقابل، معدلات التبرع بالجهاز والجودة الشاملة للأجهزة آخذة في الانخفاض، مما أدى إلى زيادة طلب على الطعوم. واستمر عدد المرشحين إضافة إلى قائمة الانتظار لعملية زرع كبد لزيادة (مثلاً، في الولايات المتحدة، وأضيفت المرضى 11,340 في عام 2016، مقارنة مع 10,636 في عام 2015)1. وعلى الرغم من جهود كبيرة، على عدد الأجهزة المتوفرة لا تلبي الاحتياجات السريرية. بسبب ازدياد نسبة الإصابة بأمراض الكبد، تتوفر العديد من المرضى مع نهاية مرحلة من أمراض الكبد يموت على قائمة الانتظار لزرع قبل جهازا مانحة. لتلبية الطلب الهائل ترقيع المانحة الكبد، اتباع نهج بديلة باستخدام أنسجة الكبد مبادئ الهندسة يجري بنشاط2. في الوقت الحاضر، تقنية بيولوجية المطورة حديثا للهندسة الكبد يمكن أن يحتمل أن التغلب على هذا النقص.
هندسة الكبد يتكون من خطوتين: توليد سقالة اللاخلوي، متبوعاً بتعمير من السقالة. للحصول على سقالة كبد اللاخلوي بيولوجية، هو الكبد اكسبلانتيد perfused عبر نظام الأوعية الدموية مع المنظفات الأيونية أو النطاق، يمكن إزالة المواد الخلوية من الكبد. في معظم الدراسات السابقة، قد حققت سقالة كبد اللاخلوي بيولوجية نضح الكبد مع مزيج من دوديسيل كبريتات الصوديوم و TritonX100. كنتيجة لذلك، تم إزالة كافة الخلايا، بينما أبقى على هيكل المصفوفة خارج الخلية. وقد ريسيديد السقالات الجهاز مع خلايا ناضجة وسرطانه الخلية، فضلا عن خطوط الخلايا البطانية، وخلايا الكبد الأولية مع أو بدون التطبيق المتزامن لخلايا بطانية أو الخلايا الجذعية الوسيطة (MSC). معظم الباحثين تركز على السابقين فيفو الكبد الهندسية3،4،5،6،،من78،9،10، 11،12،،من1314. ومع ذلك، في معظم الدراسات السابقة، تم زرع فقط من القطع الصغيرة من مكعبات سقالة repopulated في مواقع مختلفة من زرع هيتيروتوبيك. في عدد قليل من الدراسات، تم زرع السقالات repopulated الجزئية كالابتزاز مساعدة. ومع ذلك، كان الوقت بقاء المبلغ الأقصى8،ح 72 فقط14. وبقدر ما نعلم، زرع أورثوتوبيك من طعم كبد كامل repopulated لم تم تنفيذها أو نشرت حول. مهمة طويلة الأجل وزرع الأعضاء هندسيا لا تزال في مراحلها الأولى. ولذلك، هناك حاجة إلى نهج بديل للهندسة السابقين فيفو الكبد.
الهندسة في فيفو الكبد قد تمثل بديلاً لدراسة إعادة تعمير الكبد تحت الظروف الفسيولوجية. وتتعدد مزايا في فيفو الكبد الهندسة مقارنة ب السابقين فيفو الكبد الهندسة. في فيفو repopulated الجزئي الكبد سقالة يخضع التروية الدموية الفسيولوجية مع درجة حرارة مناسبة وكافية الأوكسجين والمغذيات وعوامل النمو على عكس السابقين فيفو التروية مع الاصطناعية الثقافة المتوسطة. وعلاوة على ذلك، يحتفظ الكبد العادي الجزئية المتبقية وظيفة الكبد، أساسا السماح ببقاء على المدى الطويل. منذ ما زالت عاجزة عن الحفاظ على بقاء على المدى الطويل من الحيوانات التجريبية التي لها وظيفة الكبد8مزروع السابقين فيفو هندسيا كبد الاختلاس، نحن نتصور أن في فيفو الجزئي الكبد انجينيرينجوولد تصبح في نهاية المطاف نموذج واعدة مزيد من الدراسة تطور كبد هندسيا مع الملاحظات البقاء على قيد الحياة أطول من السابقين فيفو.
مؤخرا، قدمت مجموعة بحوث (عموم والزملاء)، للمرة الأولى، تقنية في فيفو الكبد الهندسة15. أنهم حققوا نضح معزولة من الفص الكبد أدنى حق في الفئران الحية على الرغم من التحديات التشريحية والتقنية. وأفادوا بالمضاعفات والنتائج الأولى لتعمير في فيفو على استخدام خط خلية الأولية تتمثل الفئران. ومع ذلك، نموذج نضح الجراحية في فيفو لعموم et al. له العيوب. أنهم حققوا نضح واحد فص الكبد في الفئران على حساب حجب تماما بالوريد البابي وأدنى الوريد الأجوف، مما قد يسبب أذى شديدا للحيوان. كانت التضحية الفئران التجريبية بعد 6 ساعات فقط من وقت الملاحظة الموضعية. ولذلك، تقنية التروية فص الكبد في فيفو يحتاج إلى مزيد من التحسين لتحقيق البقاء على قيد الحياة بعد العملية الجراحية.
قمنا بتطوير نموذج رواية البقاء على قيد الحياة في فيفو نضح فص الكبد، استناداً إلى الدراسات السابقة لتشريح الفئران16، تقنية cannulation الوريد البابي لرصد الفسيولوجية في الفئران17، والهندسة الحيوية الكبد الكبد 18 , 19-الخطوات الرئيسية لهذا الإجراء موضحة في الشكل 1A - 1E.
هذا الأسلوب مناسبة لأولئك الذين يريدون استخدام هذا النموذج نضح التجريبية في فيفو للبحوث الأساسية بشأن معاملة الجهاز الجزئي بالحقن بالمخدرات، و في فيفو ديسيلولاريزيشن بتر كيميائية لأمراض الجهاز (مثلاً ، سرطان الكبد)، في فيفو ثقافة الخلية في مصفوفة ديسيلولاريزيد مقارنة السابقين فيفو ثنائي الأبعاد وثلاثي الأبعاد خلية ثقافة نظم20،21،،من2223 , 24 , 25 , 26، و في فيفو الكبد الهندسية التي ديسيلولاريزيشن وإعادة تعمير.

<table><tbody><tr>مضخة <td></td><td></td><td></td><td>التروية</td></tr><tr><td>Perfusor VI</td><td>B. Braun ،</td> قسطرة Melsungen <td></td><td></td></tr><tr><td></td> Versatus-W & nbsp ؛<td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> القسطرة</td><td>Terumo</td><td>SR + DU2419PX</td><td>24G ، 0.74 & مرات ؛ 19 مم</td></tr><tr><td>Versatus-W & nbsp ؛ قسطرة</td><td>Terumo</td><td>SR + DU2225PX</td><td>22G ، 0.9 & مرات ؛ 25 مم</td></tr><tr>أداة <td></td><td></td><td></td><td>جراحية صغيرة</td></tr><tr><td>مقص صغير</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td>رقم 14058-09</td><td></td></tr><tr><td>micro serrefine</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td>No.18055-05</td><td></td></tr> قضيب <tr><td>المشابك الدقيقة</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td>رقم 18057-14</td><td></td></tr><tr><td>ملقط صغير مستقيم</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td>رقم 00632-11</td><td></td></tr><tr><td>ملقط صغير منحني</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td>رقم 00649-11</td><td></td></tr><tr><td>حامل إبرة صغيرة</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td>رقم 12061-01</td><td></td></tr><tr><td>أدوات</td><td></td><td></td><td></td>جراحية</tr><tr><td>عامة قياسية مقاصات</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td></td><td></td></tr><tr><td>البعوض المشبك</td><td>F & middot; S & middot; L</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ملقط مسنن</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ملقط مسنن</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td></td><td></td></tr><tr><td>حامل إبرة</td><td>F & middot ؛ S & middot; L</td><td></td><td></td></tr><tr><td>خياطة</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4-0 برولين</td><td>إيثيكون</td><td></td><td></td></tr><tr><td>4-0 ETHICON * II</td><td>ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6-0 حرير</td><td>ethicon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>11-0 بولي</td><td>أميد ethicon</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

رواية تقنية جراحية كأساس في فيفو جزئي الهندسة الكبد في الفئران

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

هندسة الجهاز هو استراتيجية رواية لإنشاء جهاز الكبد البدائل التي يمكن أن تستخدم في زرع الأعضاء. في الآونة الأخيرة، في فيفو الكبد الهندسية، بما في ذلك في فيفو الجهاز ديسيلولاريزيشن تليها إعادة تعمير، برزت نهجاً واعداً أكثر السابقين فيفو الكبد الهندسة. ومع ذلك، لم يتحقق البقاء على قيد الحياة بعد العملية الجراحية. الهدف من هذه الدراسة تطوير تقنية جراحية رواية من فيفو نضح انتقائية فص الكبد في الفئران كشرط مسبق للهندسة في فيفو الكبد. ونحن توليد تجاوز دائرة إلا من خلال الفص الجانبي الأيسر. ثم، هو perfused الفص الجانبي الأيسر مع هيبارينيزيد المالحة. يتم إجراء التجربة مع أربع مجموعات (n = 3 الفئران كل مجموعة) استناداً إلى أوقات مختلفة نضح 20 دقيقة، ح 2، ح 3، وحاء 4 البقاء على قيد الحياة، فضلا عن تغيير لون الميكروسكوب مرئية وغياب العزم الأشيع من خلايا الدم في ثالوث المدخل والكبدية، تؤخذ كمؤشر لإنشاء نموذج ناجح. بعد نضح الانتقائي للفص الجانبي الأيسر، نلاحظ أن الفص الجانبي الأيسر، الواقع، تحولت من اللون الأحمر إلى أصفر باهت. وفي تقييم النسيجي، لا خلايا الدم مرئية في الفرع في الوريد البابي والوريد المركزي وفي الجيوب. الفص الجانبي الأيسر أحمرا بعد إعادة فتح الأوعية المحجوبة. نجا 12/12 الفئران الإجراء لأكثر من أسبوع واحد. ونحن الأول من يقدم نموذجا جراحية في فيفو نضح فص كبد واحد بفترة طويلة البقاء على قيد الحياة لأكثر من أسبوع واحد. على عكس التقرير المنشور سابقا، أهم ميزة لهذه التقنية المقدمة هنا أن الحفاظ على التروية 70 ٪ من الكبد في جميع أنحاء الإجراء بأكمله. إنشاء هذا الأسلوب يوفر أساسا في فيفو جزئي الهندسة الكبد في الفئران، بما في ذلك ديسيلولاريزيشن وريسيلولاريزيشن.

ذكر اثنا عشر (الذين تتراوح أعمارهم بين 12-13 أسبوعا) استخدمت الفئران لويس لتقييم تأثير نضح فص الكبد انتقائية. أجريت هذه التجربة في أربع مجموعات (n = 3 الفئران في كل مجموعة). استخدام فترات مختلفة نضح لمدة 20 دقيقة، 2 ساعة، 3 ساعات و 4 ساعات، اتباع الخطوات الموضحة أعلاه، بنجاح حققنا في فيفو نضح فلقة واحدة.
في فيفو نضح الفص الجانبي الأيسر:
<p class="jove_content" fo:k...

نقوم بإنشاء تقنية جراحية رواية لنموذج نضح فص كبد واحد في فيفو في الفئران كشرط مسبق لمواصلة دراسة في فيفو الكبد الجزئي الهندسية في المستقبل.

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

على مدى السنوات القليلة الماضية، أصبحت هندسة الكبد موضوعا ساخنا في جميع أنحاء العالم نظرا لإمكانات توليد زرع ترقيع الكبد قادرة. مهما قابل للتطبيق وظيفة طويلة الأجل وزرع الأعضاء المهندسة لا تزال رؤية للمستقبل. مؤخرا في vivo فص الكبد إسراف أصبح استراتيجية واعدة لبدء هندسة الكبد.ميزة رئيسية من هذه التقنية هو أن في vivo إعادة ملء جزئية الكبد سقالة تعرض إسراف الدم scatological. هذا يوفر سقالة مع درجة الحرارة المناسبة، والأكسجين الكافي، والمواد المغذية وعوامل النمو على النقيض من وفرة السابقين vivo مع ثقافة اصطناعية المتوسطة. ميزة أخرى هي أن الكبد المتبقي يحافظ على وظيفة الكبد وبالتالي يسمح أساسا البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل.ومع ذلك فإن نموذج الفص الواحد في vivo هو تحدي تقنيًا ولم يتحقق بعد البقاء على قيد الحياة المنطوق. هنا نحن نذهب لتقديم نموذج آخر الجراحية مع البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل كأساس لمزيد من في vivo واحد هندسة الفص الكبد. قبل أن نُظهر النموذج الجراحي، نود أن نعطي مقدمة موجزة عن تشريح كبد الفئران.لإنشاء لدينا نموذج فص الكبد واحد وفرة اخترنا الفص الجانبي الأيسر. هذا هو الفص الكبدي الوحيد مع إمدادات الأوعية الدموية الصرفي واضح يسمح لإنشاء الالتفافية. هذا هو إعادة بناء ثلاثي الأبعاد للنظام الوريدي للبوابة في الفئران.تركيزنا هنا هو على الوريد البوابة اليسرى التي سوف تكون في وقت لاحق بمثابة مدخل السوائل. هذا هو إعادة بناء ثلاثية الأبعاد للنظام الوريدي الكبدي في الفئران. هنا تركيزنا على الوريد الكبدي الجانبي الأيسر الذي سيكون في وقت لاحق بمثابة منفذ السوائل.هذا التوضيح من تشريح الأوعية الدموية الكبد يسلط الضوء على نقاط الوصول إلى الأوعية الدموية المستخدمة لنموذج الضخ الجزئي. هذه الرسوم المتحركة يوضح مخطط توليد في vivo اليسار شكل الفص الكبد الجانبي. من أجل إنشاء النموذج الجراحي ونحن نذهب لتوليد التفاف الدائرة داخل الفص الجانبي الأيسر.لهذا الغرض نحن بحاجة إلى سد الأوعية التالية الوريد البوابة اليسرى، والشريان الكبدي الأيسر، والقناة الصفراوية اليسرى، والوريد البرتال الوسيط الأيسر، والشريان الكبدي والقناة الصفراوية، والوريد الكبدي الجانبي الأيسر. ثم نحن بحاجة إلى cannulate الوريد البوابة اليسرى مع 24 الغاتة القسطرة. بعد ذلك يتم تزييته الوريد الكبدي الجانبي الأيسر باستخدام قسطرة 22 غيج.ثم يتم توصيل القسطرة في الوريد الأيسر إلى مضخة الضخ. يتم وضع الشاش الجاف عند مقبِل القسطرة في الوريد الكبدي الجانبي الأيسر لامتصاص سائل النفايات. بهذه الطريقة يتم إنشاء تجاوز.ثم الفص الجانبي الأيسر المُلَكِن بالملاط الملحي المُهَدِمِيِ المُسَلَّقِدِ بمعدل تدفق قدره 0.5 ملليلتر في الدقيقة. يتم استعادة الضخ الفسيولوجي إلى الفص الجانبي الأيسر بعد إعادة فتح السفن المحظورة. الآن يتم تأسيس نموذج التسريب الجراحي.وقد قامت السلطات المحلية بتقييم جميع الإجراءات التي تم عرضها في هذا الفيديو والموافقة عليها. يتم تطهير حقل العملية من البطن مع ثلاث جولات من صبغة اليود تليها جولتين من 70٪ الكحول. يتم وضع الشاش العقيم على البطن وترك فقط حقل العملية يتعرض.يتم إجراء شق عرضية على جدار البطن من الفئران. يتم استخدام خياطة برولين 4-0 لإصلاح عملية xiphoid وسحبه نحو الرأس. يتم سحب كلا الجانبين من جدران البطن العليا باستخدام اثنين من السنانير تحت المستوى للوصول إلى التعرض الكامل للجهاز.ثم يمكننا رؤية فصوص الكبد هنا الفص الجانبي الأيسر الذي يستخدم للانكسار الانتقائي. نحن نغطي الاثني عشر والأمعاء الدقيقة في تجويف البطن مع الشاش الرطب إلى جفاف المبيض.نكشف عن حلم الكبد عن طريق رفع الفصوص الوسيطة بالشاش المبلل. يتم وضع الجرذ تحت مجهر معقمة. نحن تشريح الوريد البوابة اليسرى.ثم نلخت الوريد البرونتال الأيسر مع خياطة حريرية 6-0. يتم حظر الشريان الكبدي الأيسر، القناة الصفراوية اليسرى، وكذلك الوريد البولي الوسيط الأيسر، والشريان الكبدي الوسيط الأيسر، والقناة الصفراوية الوسيطة اليسرى باستخدام المشابك الدقيقة. نحن نمنع الوريد الكبدي الجانبي الأيسر مع المشابك الدقيقة في قاعدة الفص الجانبي الأيسر.لإنشاء مدخل السائل ، يتم ثقب جذع الوريد المدخل مع قسطرة مسكن لإبرة 24 غيج. ولكن لم يتم إدخال القسطرة. ثم نقوم بإزالة الإبرة من القسطرة وتوصيل القسطرة بمضخة الضخ.لطرد الهواء من الأنبوب والقسطرة، نُنْزعُ بالملحة الملحية المُهدَّرة لمدة دقيقة. ثم نقوم بتشغيل المضخة. بعد ذلك يتم إدخال القسطرة الحرة الإبرة، التي ترتبط الآن إلى مضخة الضخ، في الوريد البوابة اليسرى.وبهذه الطريقة نحن تقليل التلاعب من السفينة معبّل. هنا منطقة مكشوفة من الوريد الكبدي الجانبي الأيسر نحن ذاهبون إلى cannulate بطريقة مماثلة. أولاً نخلق ثقباً في التصريف في الوريد الكبدي الجانبي الأيسر عن طريق ثقبه بـ 22 غيج أو 24 قسطرة إبرة غيج.نوصي بأن تكون القسطرة أصغر قليلاً من الوعاء. ثم نبدأ في دس الفص الجانبي الأيسر مع المالحة المهترة بمعدل تدفق 0.5 ملليلتر في الدقيقة. يتم امتصاص السائل النفايات المتدفقة مع الشاش.لتقليل التلوث داخل الأضصال مع سائل النفايات، نقوم بإعادة إدخال القسطرة المجانية للإبرة في الوريد الكبدي الجانبي الأيسر. وهكذا فإن الوريد الكبدي الجانبي الأيسر المُعلّم يعمل كمخرج سائل. نستمر في ضخ الفص الجانبي الأيسر مع المالحة المهجلة.يمكن رؤية السائل الدموي يقطر من المنفذ. يشير السهم إلى أن الفص الجانبي الأيسر تحول إلى اللون الأصفر أثناء الضخ مع الملح الملحي المُهدَف. في نهاية التسريب يتم أخذ القسطرة من الأوعية.يتم إغلاق فتحة الصرف الصحي على الوريد الكبدي الجانبي الأيسر مع خياطة واحدة من 11-0 pollumite. يتم إغلاق فتحة مدخل على الوريد البوابة اليسرى مع خياطة pollumite 11-0 كذلك. يبدأ الانسياب من الوريد فوق الوهنية بعد إزالة المشبك على الوريد الكبدي الجانبي الأيسر.يتم استعادة الانفعال الفسيولوجي بعد إزالة المشبك من الشريان الكبدي الأيسر والقناة الصفراوية ، وكذلك الهياكل الوعائية الوسيطة اليسرى. ويتحقق اكتمال إعادة ضخ بعد إعادة فتح الوريد بوابة اليسار كما هو مبين من قبل تغيير اللون إلى اللون الأحمر الداكن. ينور من يسار فص فيما بعد.السهم الأبيض في هذه الصورة يشير إلى أن الفص الكبد الهدف كان في الواقع perfused بشكل انتقائي. هنا تظهر الأسهم البيضاء أن الفصوص المتبقية، والتي تمثل حوالي 70٪ من الكبد يحتفظ الضخ الفسيولوجي طوال العملية بأكملها. إعادة ضخ الفص الجانبي الأيسر.هنا يشير السهم الأحمر إلى أن الفص الجانبي الأيسر يتم إعادة دمجه من الناحية الفسيولوجية بعد إعادة فتح السفن المحظورة. السهم الأزرق يظهر أن الفص المتوسط الأيسر قد اُرد إلى نقص التروية. تم فحص الفص الجانبي الأيسر المُركّب بشكل انتقائي باستخدام تلطيخ H E.ويبين الشكل ألف أنه في الفص الجانبي الأيسر المُخلوق لا يمكن اكتشاف أي خلايا دم في فرع الوريد البوّاب والجيوب الأنفية. كما هو متوقع الخلايا الحمراء مرئية في فرع من الشريان الكبدي. في الشكل B الفص caudate السفلية بمثابة السيطرة.خلايا الدم واضحة للعيان وفروع الوريد بروتال والشريان الكبدي وكذلك الجيوب الأنفية. يوضح الشكل C أنه في الفص الجانبي الأيسر المُخلوق لا توجد خلايا دم مرئية في الوريد المركزي. في المقابل، يوضح الشكل D أن خلايا الدم الفص السفلية في الوريد المركزي تظهر في الوريد المركزي في التحكم.حققنا معدل بقاء 100٪ في الأسبوع الواحد في 12 إجراء متتالي. قارنا لدينا في vivo الكبد الفص نموذج الوربي مع نموذج بان والزملاء. الاختلافات الرئيسية في المنهجية والنتائج بين بان ومجموعتنا هي: اختاروا الفص السفلي الأيمن بينما اخترنا الفص الجانبي الأيسر كفص كبد مستهدف ؛ لقد حظروا vena cava والوريد الرئيسي المؤدي إلى ارتفاع ضغط الدم في البوابة.في المقابل حافظنا على وجود بوابة 70٪ من الكبد؛ ضحوا بالجرذان بين العمليات في حين أن معدل البقاء على قيد الحياة لمدة أسبوع واحد هو 100٪، مزايا نموذجنا الجراحي الجديد: أنه صعب تقنيًا ولكنه ممكن؛ وأنه جيد التحمل كما يتضح من معدل البقاء على قيد الحياة بنسبة 100٪. ومع ذلك، فإن أحد القيود هو أن الفص المتوسط الأيسر قد اُرد إلى نقص التروية بسبب انسداد الوريد المدخلي. التطبيقات المحتملة لتقنيتنا تشمل: التي يمكن استخدامها لعلاج الجهاز الجزئي في vivo عن طريق perfusion مع المخدرات؛ في vivo إزالة الخلايا الجزئية كما استئصال الكيميائية؛ في vivo خلية نظام الثقافة بالمقارنة مع السابقين vivo؛ وفي vivo هندسة الكبد.

a-novel-surgical-technique-as-foundation-for-vivo-partial-liver

Research

JoVE Journal

Bioengineering

الهندسة الحيوية

نقدم تنقيحا سهلة لوضع هذه التقنية اثنين الكفة الكلاسيكية لزرع الكبد orthotopic في الفئران.

زراعة كبد في الفئران

زراعة كبد في الفئران هو نموذج تجريبي لا غنى عنه للبحوث الطبية الحيوية. هنا نقدم إجراءاتنا الجراحية لزرع الكبد الفئران مثلي مع إعادة الإعمار كبدي الشرايين باستخدام الكسب غير المشروع 50٪ جزئية.

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

نحن تصف تصميم الجهاز "رابط سريع" لتسهيل زرع مثلي كبد الفئران.

أجهزة التصنيع والادوات لتسهيل الجرذ زرع الكبد

وقد تم وضع فريد كبد الفئران نموذج المشبك نقيري لدراسة تأثير الجزيئات الدوائية في تخفيف إصابة نقص التروية ضخه. يتضمن هذا النموذج إقناء؛ إدخال القنية المباشر لتوريد المدخل إلى الجزء الكبد الدماغية عن طريق أحد فروع الوريد البابي، والسماح للتسليم الكبدي المباشر.

طريقة التسليم المباشر القطاعي البينية الكبد باستخدام نموذج الفأر الكبد نقيري المشبك

لقد قمنا بوصف بروتوكول لأداء ظهرت الجزئي (PHx) وزرع الخلايا عن طريق الطحال في إيماءة. إخضاعها (إيماءة. /J CB17-بركدكمشمولان) الفئران. في هذا البروتوكول، ويتم شق إلى فضح ويرسخ الفص الأيسر من الكبد متبوعاً بشق آخر لزرع الخلايا إينتراسبلينيك.

إينتراسبلينيك زرع خلايا الكبد بعد ظهرت جزئيا في إيماءة. الفئران مشمولان

ويرد هنا، بروتوكول التي تنطوي على الفئران أرتيرياليزيد إعادة زرع الكبد الجزئي. على وجه التحديد، كان الكبد 70% مستأصل في فيفو باستخدام أسلوب تحديث لظهرت السفينة المنحى. الشريان الكبدي الذي أعيد بطريقة نهاية-إلى-جانب. تعديل أسلوب الكفة لتقصير وقت ملامسة الأجوف فينا إينفراهيباتيك.

أرتيرياليزيد إعادة "زرع الكبد الجزئي الفئران" مع في فيفو المنحى السفينة 70% ظهرت

وتظل إعادة إعمار الأجوف فينا سوبراهيباتيك (شفك) خطوة صعبة في زرع الكبد أورثوتوبيك الفئران. في هذه المقالة، نحن إظهار بروتوكول خطوة بخطوة للتعمير شفك في الفئران باستخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسية.

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

نقدم هنا، طريقة جديدة لاستئصال جزئي للفص الكبدي الأيسر في الفئران حديثي الولادة (يوم 0). هذا البروتوكول الجديد مناسبة لدراسة إصابة الكبد الحاد والإصابة وردا في إعداد المواليد.

ظهرت مفصص الجزئي: نموذج جراحية لتجديد الكبد مورفولوجك

هنا ، نصف منصة تسمح بالتصوير غير الجراحي في الجسم الحي لكرويات الكبد المحفورة في الغرفة الأمامية لعين الفأر. يمتد سير العمل من توليد كرويات من خلايا الكبد الأولية إلى الزرع في عين الفأر والتصوير في الجسم الحي بدقة خلوية بواسطة الفحص المجهري متحد البؤر.

التصوير في الجسم الحي لكرويات الكبد المحفورة في الغرفة الأمامية لعين الفأر

يوفر بروتوكول زراعة الكبد الإضافي غير المتجانس الموصوف هنا أداة استقصائية عملية لاستكشاف آليات رفض الطعم الخيفي الكبدي. يساعد هذا النموذج في تخفيف العقبات الجراحية والإجهاد الحيواني لزراعة الكبد في الفئران.

نموذج زرع فئران الكبد الكامل المساعد غير المتجانس باستخدام فغر الكبد الخيفي لدراسات رفض الطعم الخيفي

تعلم تقنية جراحية جديدة لإجراء perfusion في فص الكبد الأيسر في الفئران. يوفر هذا النموذج ظروفاً حيوية للبقاء على المدى الطويل ويدعم أبحاث هندسة الكبد المستقبلية.

رواية تقنية جراحية كأساس في فيفو جزئي الهندسة الكبد في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات