قياس التغيرات الحادة في نشاط العصب متعاطفة الكلوي ردا على الجهاز العصبي المركزي التلاعب في الفئران تخديره

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول الجهاز العصبي اللاإرادي ، خاصة حول آليات الجهاز العصبي المركزي التي تنظم التدفق الودي إلى الكلى. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بقياس تأثير التلاعب بالجهاز العصبي المركزي على التدفق الكلوي الودي إلى الكلى. قبل قنية الشرايين ، افحص قسطرة استشعار الضغط تحت تكبير عال للتأكد من أن القسطرة خالية من الفقاعات والحطام ولديها الغضروف المفصلي السليم بين المكونات المملوءة بالسوائل والهلام.

قبل كل عملية زرع ، أعد ملء الجل في الطرف البعيد للقسطرة واستخدم مغناطيسا لتشغيل جهاز الإرسال. ضع نصف عقدة علوية فضفاضة في الخيط القريب لسد الشريان الفخذي لفترة وجيزة. وعند الإمساك بإدخال القسطرة في اليد غير المهيمنة ، استخدم ملقط قنية الوعاء الدموي لإمساك طرف قنية وحدة القياس عن بعد لتجنب إزاحة الجل من الحافة.

استخدم طرف إبرة مثني عيار 22 لثقب ثقب في الشريان وإدخال القنية في الشريان قدر الإمكان. ثم قم بتأمين قسطرة الضغط برباطات الخياطة القريبة والبعيدة. وثني جسم غرسة القياس عن بعد داخل الجناح المجاور للشق.

للوصول إلى الدماغ ، حرك الجرذ برفق إلى وضع الانبطاح في إطار جراحة تجسيمية مع الرأس بين قضبان الأذن واضبط شريط القاطع لمعادلة ارتفاع لامدا وبريجما. بعد ذلك ، قم بعمل شق ذيلية منقارية بطول سنتيمترين عبر خط الوسط لفروة الرأس واستخدم أدوات تطبيق قطنية لإزالة أي نسيج ضام بإحكام من سطح الجمجمة. ضع بيروكسيد الهيدروجين على الجمجمة المكشوفة للمساعدة في تصور خيوط بريجما ولامدا وخط الوسط.

باستخدام أطلس لدماغ الفئران لتوجيه الاستهداف ، قم بحفر قطع عظم ثقب لدغ بحجم الوصول إلى القطب الكهربائي عبر الجمجمة. لعزل الأعصاب الكلوية الودية ، قم بتوصيل نشاط العصب الكلوي الودي أو قطب RSNA بمكبر صوت مسبق 10X ومضخم قطب كهربائي دقيق وقم بعمل شق مشرط يمتد من أربعة إلى خمسة سنتيمترات أسفل الأضلاع في الاتجاه الذيلي بشكل جانبي قليلا إلى العمود الفقري. تشريح حاد لتصور العضلات المجاورة للنخاع وعمل شق ذيلي منقاري سطحي للغاية من واحد إلى سنتيمترين حيث تلتقي الدهون بالعضلة.

باستخدام أدوات التطبيق ذات الرأس القطني ، انشر الدهون بعيدا عن العضلات لتصور الكلى دون دخول الفضاء البريتوني. واستخدم الضاعرات لفصل الكلى برفق عن العضلات المجاورة للنخاع لتصور الشريان الكلوي والشريان الأورطي البطني. واستخدام التكبير العالي للتعرف على الأعصاب الكلوية في جيب الشق.

يمكن رؤية الحزم العصبية بسهولة أكبر في الزاوية اليمنى التي يشكلها الشريان الأورطي والشريان الكلوي الذي يتبع الشريان الكلوي عن كثب من الشريان الأورطي إلى الكلى. ثم استخدم ملاقط التشريح الدقيق لتشريح جزء من حزمة العصب ليتم وضعه برفق على قطب التسجيل من الأنسجة المحيطة. قم بتأمين قطب RSNA السلكي في حامل وقم بخفض القطب الكهربائي إلى مستوى الجزء العصبي.

استخدم خطافا عصبيا لرفع جزء من العصب الكلوي برفق على القطب الكهربائي دون شد العصب. واملأ الشق بالزيت المعدني للحفاظ على ترطيب العصب الكلوي الودي المكشوف. قم بتوصيل مشبك تأريض بالحيوان والطرف الآخر بقفص فاراداي واستخدم مرشح التمرير العالي والمنخفض لتوجيه الإشارة إلى مكبرات الصوت.

ثم اضبط الكسب حتى 10 كيلو هرتز بما في ذلك شاشة صوتية لتقييم نمط انفجار RSNA. لتقييم جودة تسجيل RSNA ، استحضر baroreflex بحقن 100 ميكرولتر في الوريد بسعة 100 ميكروغرام لكل مليلتر فينيليفرين لزيادة ضغط الدم وتثبيط نشاط العصب الكلوي الودي لضبط موضع الأقطاب الكهربائية لتحسين الإشارة حسب الضرورة. بمجرد الحصول على إشارة واضحة ، قم بشفط الزيت المعدني وقم بتثبيت القطب في مكانه باستخدام هلام السيليكا.

في هذه التجربة التمثيلية ، تم استخدام الحقن الوريدي للفينيليفرين للحث على زيادة في متوسط الضغط الشرياني ولاستحضار الضغط الرضوي وتثبيط الودي العابر. لتحديد كمية RSNA ، تم تصحيح RSNA الخام ومتوسطه لمقاطع 10 ثوان غير متداخلة وتم طرح تقدير الضوضاء من كل مقطع. عند تنفيذ هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التأكد من أن الجرذ مخدر بشكل كاف ، وأنه تم وضعه بشكل صحيح في الإطار التجسيمي وأن النظام مؤرض بشكل كاف لتقليل الضوضاء الكهربائية.

بعد هذا الإجراء وجمع أنسجة المخ ، يمكن تطبيق طرق الأنسجة لتوصيف أنواع نوى الجهاز المركزي التي تتحكم في الاستجابة الودية. تسمح هذه التقنية لعلماء الأعصاب باستكشاف آليات التنظيم اللاإرادي في الفئران المخدرة والتي تعلم الدراسات المستقبلية على لفهم التحكم في ضغط الدم ووظائف الكلى. لا تنس أنه من الأهمية بمكان تقييم مستوى التخدير كل 15 دقيقة على الأقل.

ولتوفير التخدير التكميلي حسب الحاجة.