يناير 7, 2019
نقدم هنا، وضع بروتوكول لإنشاء نموذج الاكتئاب الماوس ومراقبة التغييرات السلوك المرتبطة بالإجهاد المزمن المعتدل لا يمكن التنبؤ بها (CUMS)، وتقييم تأثير المضادة الاكتئاب إكسياوياوسان.
يمكن لهذه الطريقة أن تساعد في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الاكتئاب والوقاية والعلاج باستخدام الطب الصيني التقليدي مثل Xiaoyaosan ، وهي صيغة تستخدم على نطاق واسع في هذا المرض النفسي لآلاف السنين في الصين. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي توفير دعم تجريبي لتوافر Xiaoyaosan في الوقاية والعلاج من الاكتئاب. الآثار المترتبة على هذه التقنية تمتد نحو البحوث قبل العيادة على علاج الاكتئاب لأنه يوفر بروتوكول موحد لاستشعار تأثير مضاد للاكتئاب باستخدام الطب الصيني التقليدي.
عموما، سوف الأفراد الجدد لهذا الأسلوب النضال لأن عملية النمذجة معقدة جدا ومعلمات القياس الهامة للسلوكيات الاكتئاب ليس من السهل أن إتقان. للحث على الاكتئاب، وفضح الفئران يوميا إلى أي من 2 من الضغوطات 7 التالية لمدة 21 يوما متتالية. لاحظ إعطاء الدواء للفئران في المجموعتين العلاجية كل يوم قبل النمذجة وتوفير 0.5 ملليلتر من الماء المقطر للفئران في مجموعات التحكم ونموذج.
تعريض الفئران للحرمان من الطعام عن طريق إفراغ تغذية كل قفص. أو الحرمان من المياه عن طريق إزالة زجاجة المياه لمدة 24 ساعة. تعريض الفئران للإجهاد على ضبط النفس ، حيث يتم تقييد الماوس في حوض بلاستيكي صغير لمدة 3 ساعات.
أو قفص فارغ مع الحشو إزالتها. كخيار آخر، وتعريض الفئران لأقفاص مبللة وتسخية عن طريق صب الماء في كل قفص والحفاظ على الرطب لمدة 24 ساعة. تعريض الفئران لأقفاص مزدحمة حيث يتم وضع خمسة فئران في قفص واحد لمدة 25 ساعة.
بالنسبة للخيار الأخير ، يعرض الفئران للسباحة الباردة الجليدية عن طريق إجبار كل فأر على السباحة في حوض أسماك زجاجي واضح مع ماء جليدي لمدة خمس دقائق. وأخيرا، سجل حالة معطف والوزن الجسم أسبوعيا حتى نهاية النمذجة في اليوم 21 وحساب النتيجة الإجمالية للدولة معطف. في اليومين الأولين من اختبار تفضيل السكروز ، منزل الفئران بشكل فردي مع زجاجتين مملوءة بمياه الصنبور.
في اليومين المقبلين، وإعطاء الفئران زجاجتين مليئة 1٪ محلول السكروز. في اليوم الأخير، وإعطاء الفئران زجاجتين لمدة 24 ساعة، واحدة مع مياه الصنبور والآخر مع محلول السكروز 1٪. للقضاء على تفضيل جانبي للفئران في سلوك الشرب ، قم بالتبديل في موضع الزجاجتين بعد 12 ساعة.
سجل حجم كل من محلول السكروز المستهلكة ومياه الصنبور. وأخيرا، حساب تفضيل السكروز. تبدأ بتقسيم أرضية مربع خشبي خشبي من أربعة جوانب لا بريق له إلى 25 مربعات متساوية من الخطوط الزرقاء.
تنظيف مربع حقل مفتوح مع 5٪ الكحول قبل الوصول إلى كل فأرة. ثم ضع الماوس في وسط الحقل المفتوح. تعليق كاميرا رقمية عالية الوضوح حوالي 200 سنتيمتر فوق الحقل وسجل سلوك كل فأرة لمدة 5 دقائق.
وأخيرا ، وتقييم وتحليل الفئران السلوكية الفيديو من قبل برنامج نظام تتبع الفيديو وتسجيل البيانات من إجمالي المسافة الجارية وعدد من الإدخالات في منطقة الوسط. تم تحسين حالة معطف الفئران بشكل ملحوظ بعد العلاج المستمر مع شياويوسان أو فلوكستين مقارنة مع المجموعة النموذجية. وقد تجلى انخفاض كبير في وزن الجسم من خلال الأسبوع الثالث.
في خط الأساس، كان لدى الفئران في جميع المجموعات تفضيل سكروز مماثل. ومع ذلك، لوحظ انخفاض كبير في تفضيل السكروز بعد 3 أسابيع من إجراءات الإجهاد في المجموعة النموذجية. وعلاوة على ذلك، أظهرت جميع الفئران حالة سلوكية مماثلة قبل التعرض للإجهاد عند خط الأساس.
ومع ذلك، بعد التعرض للإجهاد لمدة 3 أسابيع، كانت المسافة الإجمالية التي تم نقلها في 5 دقائق أقل بكثير في المجموعة النموذجية من مجموعة التحكم. انخفض عدد الإدخالات في المنطقة الوسطى من المجموعة النموذجية بشكل كبير مقارنة بمجموعة التحكم. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن نتذكر لإجراء هذا الاختبار السلوك وكذلك إدارة الدواءين، 1-2 قبل ساعات النمذجة اليومية من أجل تأكيد الآثار التي من قبل الدواء نفسه.
بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل اختبار السباحة القسري من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل هل يمكن لـ Xiaoyaosan تحسين السلوك اليائس للفئران الاكتئابية في اختبار السباحة القسري؟ بعد أن يكون تطوير، هذه التقنية مهدت الطريق للباحثين في استكشاف تأثير وآلية الكامنة في الطب الصيني في مجال الوقاية والعلاج من الاكتئاب.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه المقالة بروتوكولاً لإنشاء نموذج فأر للاكتئاب من خلال الإجهاد الخفيف غير المتوقع المزمن (CUMS)، وتقييم تأثيرات مضادات الاكتئاب لعقار Xiaoyaosan، وهو دواء صيني تقليدي.
تعد النماذج السلوكية الموحدة، مثل نموذج الإجهاد الخفيف المزمن غير المتوقع (CUMS) في الفئران، بالغة الأهمية لتقييم المرشحات الجديدة من مضادات الاكتئاب وتقليل المخاطر المرتبطة بالأصول العصبية والنفسية في مراحلها المبكرة. وتتيح النقاط النهائية السلوكية الكمية ومقارنات المجموعات الضابطة ثقة تنبؤية في مدى التفاعل مع الهدف وتقييم النتائج الوظيفية. ويدعم هذا البروتوكول الاستمرارية الانتقالية من مرحلة الاكتشاف وصولاً إلى التقييم قبل السريري للمركبات ذات النشاط العصبي، بما في ذلك المرشحات من الطب التقليدي.
يضع هذا البروتوكول الاختبارات السلوكية القائمة على نموذج الإجهاد المزمن غير القابل للتوقع (CUMS) كجسر يربط بين مرحلة الاكتشاف المبكر وتقييم المركبات الواعدة في مرحلة ما قبل السريرية ضمن تطوير الأدوية النفسية والعصبية.