Name: تحديد الكفاءة الإنجابية التي تؤكد بداية البلوغ، والقيام تحليل خصوبة في الفئران والجرذان (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 38 s
Description: اكتشف طريقة غير جراحية لتقييم بداية البلوغ في الفئران والجرذان من خلال فصل القلفة وفتح المهبل، مما يتيح إجراء دراسات خصوبة دقيقة على الحيوانات الناضجة جنسياً.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

أشكر المؤلف المساهمة في الأعمال الأولية التي هي الأساس لهذا المنشور. بفضل أيتور أغيري، جنفييف هاء ريان وايريكا ل. للحصول على تعليمات إعداد المخطوطة. وبفضل جيسيكا لي سورا والذقن أوستن للمساعدة التقنية مع المخطوطة. وأيد H.M.H. يونيس كينيدي شرايفر الوطني معهد صحة الطفل والتنمية البشرية من "معاهد الصحة الوطنية في" إطار جائزة رقم R00HD084759.

تم الموافقة على "رعاية الحيوان المؤسسية" و "اللجنة استخدام من جامعة ولاية ميشيغان" كافة الأساليب الموصوفة هنا وتجري وفقا للدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.
1. تحديد بداية البلوغ
<ol><li>اتبع المبادئ التوجيهية المؤسسية للملابس، كحد أدنى، ومن الضروري ارتداء معطف مختبر نظيفة وقفازات نظيفة. دائماً التعامل مع الفئران ارتداء قفازات نظيفة.</li>
	<li>إعداد مساحة العمل عن طريق وضع وسادة على الطاولة.<ol>
<li>مكان أعلى قفص ماوس نظيفة مع الشبكة التي تواجه صعودا على لوحة المفاتيح.</li>
		<li>قم بإعداد مقياس في مساحة العمل. ضع كوب نظيف 500 – 1000 مل على الحجم والكتلة الفارغة.</li>
		<li>ضع ورقة بجوار منطقة العمل لوزن الجسم سجل وفصل بريبوتيال، وافتتاح المهبل أو السفاد الأول.</li>
	</ol>
</li>
	<li>تحديد الفئران للدراسة. إجراء عمليات تفتيش يومية لبداية البلوغ حتى يتم الوصول إلى سن البلوغ. إجراء التفتيش وفي الوقت نفسه اليوم طوال فترة الدراسة. بداية البلوغ يمكن أن يحدث في أقرب وقت بعد الولادة يوم 11-12-19، ولكن في الأجهزة الأكثر تجريبية، رصد بداية البلوغ يبدأ ~ 22 يوما.</li>
	<li>ضع القفص الماوس في مساحة العمل (الخطوة 1، 2). فتح القفص ووضع غطاء وزجاجة مياه وحامل الطعام على المائدة.</li>
	<li>تحديد فصل بريبوتيال في الفئران الذكور.<ol>
<li>أثناء الضغط الماوس من ذيله، وضعه في أعلى القفص الماوس نظيفة من الخطوة 1.2.1. بينما التمسك بلطف الذيل، اسمحوا الماوس استكشاف شبكة أعلى القفص ~ 5 s.</li>
		<li>اجذب الذيل إلى الخلف؛ عادة ما يؤدي هذا الحيوان تتحرك إلى الأمام بينما التمسك بالشبكة مع اليدين. أغلق نهج اليد الأخرى على الجلد بالرقبة والاذنين.</li>
		<li>فهم الجلد فضفاض بين الكتفين والرقبة مع الإبهام والسبابة. من المهم الحصول على عقد جيد للجلد، كما أنه سيمنع الماوس من تحول رئيسها لدغة.</li>
		<li>الاستيلاء على الجلد على ظهره بالاصابع المتبقية وأنه عقد بالضغط على يده. عقد إيمانا راسخا دون إعاقة التنفس والدم التدفق، أو ضررا العظام، العضلات أو الجلد. تشغيل اليد على كشف بطن الماوس، مع دعم الجزء الخلفي الماوس داخل كف اليد.</li>
		<li>مع اليد الحرة، بلطف دفع عودة الجلد حول القضيب دون إجبار. في فصل بريبوتيال، شرائح الجلد preputial الخلف فضح حشفة القضيب (الشكل 2A، السهم عرض الفاصل بريبوتيال). سجل وجود أو عدم وجود فصل بريبوتيال.</li>
		<li>وزن الماوس برفق وضعه في الكأس 500-1000 مل من الخطوة 1.2.2 وتسجيل الوزن.</li>
		<li>إعادة إدخال الماوس في القفص الإسكان بعقد سم الكأس 0-2 على الكلمة القفص وتلميح ببطء فوق الكأس السماح للماوس للخروج من تلقاء نفسها. تنظيف اخلطها بالماء والمنظفات المعتدلة والجافة قبل العودة إلى الجدول وترينج المقياس.</li>
	</ol>
</li>
	<li>تحديد فتح المهبل في الفئران الإناث.<ol>
<li>مكان كرة القطن، كوب وزجاجة من المياه المعقمة في مكان العمل (الخطوة 1، 2). صب الماء في الكأس. يرطب الكرة القطن بالماء المعقم ووضعه بجوار أعلى القفص من الخطوة 1.2.1.</li>
		<li>ضع القفص الماوس في مساحة العمل (الخطوة 1، 2)، ونقل الماوس من قفصة الرئيسية إلى أعلى القفص (الخطوة 1.2.1) خلال عقد في قاعدة الذيل. بلطف سحب الذيل لتشجيع حركة الماوس إلى الأمام.</li>
		<li>رفع الذيل مع دعم الوركين مع الأصابع الحرة. السماح هيندليمبس للحفاظ على الاتصال مع الجزء العلوي من القفص. إذا كان الماوس يتحرك كثيرا، أنه عقد في اليد كما هو موضح في الخطوات 1.5.1-1.5.4.</li>
		<li>تنظيف الفرج مع الكرة القطن هوميديفيد المياه من الخطوة 1.6.1 برفق. استخدام كرة القطن هوميديفيد نظيفة لكل الماوس. لتحديد فتح المهبل وفحص الفرج وتحديد ما إذا كان المهبل مفتوحة تماما (الشكل 2A، افتتاح المهبلي الإناث).</li>
		<li>السجل إذا حدث افتتاح المهبل. وزن الماوس وإعادته إلى القفص الصفحة الرئيسية كما هو موضح في الخطوات 1.5.6-1.5.7.</li>
	</ol>
</li>
	<li>السفاد أول مؤشر للاباضة الأولى.<ol>
<li>ضع كوب مع الماء المعقم وشريحة زجاجية مسمى ماصة 200 ميليلتر مع تلميح نظيفة في مجال العمل (الخطوة 1، 2).</li>
		<li>عقد الأنثى كما هو موضح في الخطوة 1.6.2-1.6.3. ضع طرف ماصة تحتوي على ~ 50 ميليلتر من الماء المعقم في افتتاح المهبل.</li>
		<li>بلطف تدفق الخلايا من جدار المهبل من خلال إدخال واستيعاب ~ 50 ميليلتر من الماء 2-4 مرات. تشويه المحتوى من طرف الماصة إلى شريحة الميكروسكوب زجاجية مسماة.</li>
		<li>مراقبة بعناية مورفولوجيا الخلوية في مجهر برايتفيلد استخدام 10 X أو 20 X الهدف أو السماح أيردري تشويه ح ~ 1 وثم كونتيرستين بمحلول أزرق الميثيلين 0.1% (حله في ddH2س) (الشكل 2). إلى كونتيرستين، وتراجع الشريحة المجففة إلى الحل الميثيلين الأزرق 0.1% ل ~ 30 ثانية. واسمحوا الهواء الشرائح الجافة ح 1.</li>
		<li>مراقبة الشرائح من الخطوة 1.7.4 في مجهر حقل مشرقة في 10 X أو 20 س. إنشاء مرحلة دورة الشبقية (الشكل 2)20 عن طريق مراقبة مورفولوجيا الخلايا التي تسمح بالتمييز بين أربع مراحل متميزة لدورة الشبقية (الشكل 2). ملاحظة: تتميز ميتيستروس بخليط من الخلايا الظهارية الحرشفية كورنيفيد والكريات البيضاء، ديستروس بالكريات البيضاء، بروستروس بخليط من الكريات البيضاء والخلايا الظهارية الأنوية السفاد بالخلايا الظهارية كورنيفيد (الشكل 2) 20.</li>
		<li>تسجيل وزن الجسم والعودة الماوس إلى قفصة الصفحة الرئيسية كما هو موضح في الخطوات 1.5.6-1.5.7. يتم إنهاء مسحات المهبل في اليوم عندما تم الماوس به السفاد الأول (الشكل 2).</li>
	</ol>
</li>
</ol>2-مرغوب فيه تربية شروط الغرفة
<ol><li>التأكد من أن الغرفة تربية درجة حرارة ~ 20-24 درجة مئوية، مع 55 ± 10% رطوبة، ومتجانسة الغرف الضوء كثافة ~ 300-400 لوكس حوالي 1 متر فوق الطابق21. يسمح هذا كثافة الضوء شدة الضوء قفص منتصف المرغوب فيه من لوكس 25-80. لاختبار كثافة الضوء، استخدام ضوء متر.</li>
	<li>استخدام نظام الآلي للتحكم في الإضاءة في الغرفة تربية لضمان التوقيت المناسب للإضاءة في جميع أنحاء هذه التجربة. طول النهار الظروف المثلى لتقييم معدل الخصوبة في مجموعة القوارض من يوم ح 12 (12 ح النور والظلام ح 12، LD12:12)، لشروط "الصيف--مثل" مع ح 14 في الظلام (LD14:10) خفيفة و 10 ح21.</li>
	<li>إعداد أقفاص تربية.<ol>
<li>إعداد قفص ماوس نظيفة مع غطاء، والماء، والغذاء والفراش، وتداخل كل تربية زوج.</li>
		<li>ملء بطاقات القفص مع جميع المعلومات المطلوبة، بما في ذلك الجنس، وتاريخ الميلاد، وضغط الماوس، وتاريخ عند التزاوج يتم إعداد.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3-خصوبة الدراسة
<ol><li>تحديد الحيوانات التي ستستخدم لدراسة الخصوبة. التأكد من وجود الحيوانات ناضجة جنسياً (الخطوة 1). مجموعة عمر المستخدمة عادة لإعداد دراسة خصوبة في الفئران هو الأسابيع 10-16 من العمر، سن التي أنجزت فيها النضج الجنسي في الظروف الأكثر تجريبية.</li>
	<li>على طاولة نظيفة، ضع القفص تربية إعدادها في "الخطوة 2، 3".</li>
	<li>الصيد وأمسك الماوس.<ol>
<li>ببطء إدخال يد القفاز في القفص الماوس. اترك اليد في القفص لفترة قصيرة من الزمن (~ 5-30 ثانية)، السماح للفئران تتكيف مع رائحة القفازات واليد. تجنب الحركات المحمومة ومتشنج.</li>
		<li>أقل من ناحية المقعر قريبة من الجزء السفلي من القفص وتناولها ببطء للفئران. سيتم تشغيل بعيداً. عند تشغيلها على اليد، فخ ذيل ماوس واحدة بين الإبهام والسبابة.</li>
		<li>أرفع الماوس من ذيله ل s 2-3. إذا كان الماوس يحتاج إلى عقد أطول، التمسك الذيل وضع الماوس في اليد الكاسي الحفاظ على الاستمرار في الذيل.</li>
	</ol>
</li>
	<li>نقل 1 الذكور والإناث 1 بعد ذلك في قفص تربية بالضغط عليها من ذيله (الخطوة 3، 3). التأكد من وجود الإناث في نفس المرحلة استروس عند إعداد المقايسة الخصوبة. تحديد مرحلة استروس من الإناث عن طريق إجراء لطاخة مهبلية كما هو موضح في "الخطوة 1، 7".</li>
	<li>إغلاق القفص، وضمان أن الفئران بالمواد الغذائية والمياه وتداخل. إرفاق قفص حامل البطاقة مع بطاقة قفص القفص.</li>
	<li>ضع القفص تربية على الرف الإسكان. إجازة تربية القفص دون عائق قدر الإمكان لكامل مدة الدراسة الخصوبة. إجراء دراسة الخصوبة لمدة 30 يوما. لكل زوج من تربية والاحتفاظ بسجلات تفصيلية ونلاحظ 1) تاريخ التزاوج هو إعداد، 2) تاريخ ليتر يولدون و 3) عدد الجراء ولد، بما في ذلك الجراء الميت والحي. إجراء تدقيقات القمامة يوميا طوال فترة الدراسة.</li>
	<li>إطالة الخصوبة هو وضع دراسة لمدة 30-60 يوما إضافيا إذا لم يوجد أو لها تأثير ضعيف على الخصوبة في "الخطوة 3، 6".</li>
</ol>

<ol><li>Schneider, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Energy+balance+and+reproduction%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Energy balance and reproduction.</a> Physiology and Behavior. 81 (2), 289-317 (2004).</li>
<li>Walton, J. C., Weil, Z. M., Nelson, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+photoperiod+on+hormones%2C+behavior%2C+and+immune+function%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+Neuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Influence of photoperiod on hormones, behavior, and immune function.</a> Frontiers Neuroendocrinology. 32 (3), 303-319 (2012).</li>
<li>Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+small+population+of+hypothalamic+neurons+govern+fertility%3A+the+critical+role+of+VAX1+in+GnRH+neuron+development+and+fertility+maintenance%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+communications%22%5BJournal%5D)">A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance.</a> Neuroscience communications. 2, (2016).</li>
<li>Kauffman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+differentiation+and+the+Kiss1+system%3A+Hormonal+and+developmental+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Sexual differentiation and the Kiss1 system: Hormonal and developmental considerations.</a> Peptides. , (2009).</li>
<li>Bronson, F. H., Dagg, C. P., Snell, G. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBronson%2C+FH+%22Reproduction%22">Reproduction</a>. , Dover Publications, Inc. New York. (1966).</li>
<li>Chehab, F. F., Mounzih, K., Lu, R., Lim, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+onset+of+reproductive+function+in+normal+female+mice+treated+with+leptin%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Early onset of reproductive function in normal female mice treated with leptin.</a> Science. , (1997).</li>
<li>Yoshimura, S., Yamaguchi, H., Konno, K., Ohsawa, N., Noguchi, S., Chisaka, A. <a target="_blank" href="https://www.jstage.jst.go.jp/article/tox/18/3/18_3_141/_article/-char/ja/">Observation of Preputial Separation is a Useful Tool for Evaluating Endocrine Active Chemicals.</a> J Toxicologic Pathology. 18, 141-157 (2005).</li>
<li>Ahima, R. S., Dushay, J., Flier, S. N., Prabakaran, D., Flier, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptin+accelerates+the+onset+of+puberty+in+normal+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Leptin accelerates the onset of puberty in normal female mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 99 (3), 391-395 (1997).</li>
<li>Bohlen, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+short-day+photoperiod+delays+the+timing+of+puberty+in+female+mice+via+changes+in+the+kisspeptin+system%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">A short-day photoperiod delays the timing of puberty in female mice via changes in the kisspeptin system.</a> Frontiers in Endocrinology. 9 (FEB), 1-9 (2018).</li>
<li>Shahab, M., Mastronardi, C., Seminara, S. B., Crowley, W. F., Ojeda, S. R., Plant, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+hypothalamic+GPR54+signaling%3A+A+potential+mechanism+for+initiation+of+puberty+in+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Increased hypothalamic GPR54 signaling: A potential mechanism for initiation of puberty in primates.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. , (2005).</li>
<li>Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+small+population+of+hypothalamic+neurons+govern+fertility%3A+the+critical+role+of+VAX1+in+GnRH+neuron+development+and+fertility+maintenance%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+communications%22%5BJournal%5D)">A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance.</a> Neuroscience communications. 2, 5-9 (2016).</li>
<li>Navarro, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+Neurokinin+B+in+the+Control+of+Female+Puberty+and+Its+Modulation+by+Metabolic+Status%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Role of Neurokinin B in the Control of Female Puberty and Its Modulation by Metabolic Status.</a> Journal of Neuroscience. 32 (7), 2388-2397 (2012).</li>
<li>Hoffmann, H. M., Tamrazian, A., Xie, H., Pérez-Millán, M. I., Kauffman, A. S., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterozygous+deletion+of+ventral+anterior+homeobox+%28Vax1%29+causes+subfertility+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Heterozygous deletion of ventral anterior homeobox (Vax1) causes subfertility in mice.</a> Endocrinology. 155 (10), 4043-4053 (2014).</li>
<li>Kauffman, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Kisspeptin+Receptor+GPR54+Is+Required+for+Sexual+Differentiation+of+the+Brain+and+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The Kisspeptin Receptor GPR54 Is Required for Sexual Differentiation of the Brain and Behavior.</a> Journal of Neuroscience. 27 (33), 8826-8835 (2007).</li>
<li>Teles, M. G., et al. <a target="_blank" href="https://miami.pure.elsevier.com/en/publications/brief-report-a-gpr54-activating-mutation-in-a-patient-with-centra">Brief report: A GPR54-activating mutation in a patient with central precocious puberty.</a> New England Journal of Medicine. , (2008).</li>
<li>Korenbrot, C. C., Huhtaniemi, I. T., Weiner, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preputial+separation+as+an+external+sign+of+pubertal+development+in+the+male+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+of+reproduction%22%5BJournal%5D)">Preputial separation as an external sign of pubertal development in the male rat.</a> Biology of reproduction. , (1977).</li>
<li>Gaytan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+a+method+for+precise+dating+of+female+puberty+in+laboratory+rodents%3A+The+puberty+ovarian+maturation+score+%28Pub-Score%29%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Development and validation of a method for precise dating of female puberty in laboratory rodents: The puberty ovarian maturation score (Pub-Score).</a> Scientific Reports. 7 (March), 1-11 (2017).</li>
<li>Caligioni, C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19575469">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. , 1-11 (2010).</li>
<li>Mayer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Timing+and+completion+of+puberty+in+female+mice+depend+on+estrogen+receptor+-signaling+in+kisspeptin+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Timing and completion of puberty in female mice depend on estrogen receptor -signaling in kisspeptin neurons.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (52), 22693-22698 (2010).</li>
<li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Vaginal+Lavage%2C+Crystal+Violet+Staining%2C+and+Vaginal+Cytological+Evaluation+for+Mouse+Estrous+Cycle+Staging+Identification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification.</a> Journal of Visualized Experiments. (67), 4-9 (2012).</li>
<li>Hedrich, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHedrich%2C+H+%22The+Laboratory+Mouse%22">The Laboratory Mouse</a>. , Academic Press. (2012).</li>
<li>Hoffmann, H. M., Trang, C., Gong, P., Kimura, I., Pandolfi, E. C., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+Vax1+from+Gonadotropin-Releasing+Hormone+%28GnRH%29+Neurons+Abolishes+GnRH+Expression+and+Leads+to+Hypogonadism+and+Infertility%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Deletion of Vax1 from Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) Neurons Abolishes GnRH Expression and Leads to Hypogonadism and Infertility.</a> Journal of Neuroscience. 36 (12), 3506-3518 (2016).</li>
<li>Sloboda, D. M., Howie, G. J., Pleasants, A., Gluckman, P. D., Vickers, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-+and+postnatal+nutritional+histories+influence+reproductive+maturation+and+ovarian+function+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Pre- and postnatal nutritional histories influence reproductive maturation and ovarian function in the rat.</a> PLoS ONE. , (2009).</li>
<li>Manual, R. <a target="_blank" href="https://scholar.google.com/scholar?hl=en&as_sdt=0%2C22&q=Breeding+Strategies+for+Maintaining+Colonies+of+Laboratory+Mice&btnG=">Breeding Strategies for Maintaining Colonies of Laboratory Mice.</a> Management. , (2007).</li>
<li>Kennedy, G. C., Mitra, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+weight+and+food+intake+as+initiating+factors+for+puberty+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Body weight and food intake as initiating factors for puberty in the rat.</a> The Journal of Physiology. , (1963).</li>
<li>Sisk, C. L., Foster, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neural+basis+of+puberty+and+adolescence%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The neural basis of puberty and adolescence.</a> Nature Neuroscience. 7 (10), 1040-1047 (2004).</li>
<li>Nelson, J. F., Karelus, K., Felicio, L. S., Johnson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+influences+on+the+timing+of+puberty+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+of+reproduction%22%5BJournal%5D)">Genetic influences on the timing of puberty in mice.</a> Biology of reproduction. , (1990).</li>
<li>Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+longitudinal+study+of+estrous+cyclicity+in+aging+C57BL%2F6J+mice%3A+I.+Cycle+frequency%2C+length+and+vaginal+cytology%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+of+reproduction%22%5BJournal%5D)">A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology.</a> Biology of reproduction. , (1982).</li>
<li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weight+and+age+at+puberty+in+female+and+male+mice+of+strains+selected+for+large+and+small+body+size%5BTitle%5D)+AND+%22Genetical+Research%22%5BJournal%5D)">Weight and age at puberty in female and male mice of strains selected for large and small body size.</a> Genetical Research. , (1984).</li>
<li>Rodriguez, I., Araki, K., Khatib, K., Martinou, J. C., Vassalli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+vaginal+opening+is+an+apoptosis-dependent+process+which+can+be+prevented+by+the+overexpression+of+Bcl2%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Mouse vaginal opening is an apoptosis-dependent process which can be prevented by the overexpression of Bcl2.</a> Developmental Biology. , (1997).</li>
<li>Lomniczi, A., Wright, H., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0091302214000752">Epigenetic regulation of female puberty.</a> Frontiers in Neuroendocrinology. 36, 90-107 (2015).</li>
<li>Selmanoff, M. K., Goldman, B. D., Ginsburg, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+changes+in+serum+luteinizing+hormone%2C+follicle+stimulating+hormone+and+androgen+levels+in+males+of+two+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Developmental changes in serum luteinizing hormone, follicle stimulating hormone and androgen levels in males of two inbred mouse strains.</a> Endocrinology. 100 (1), 122-127 (1977).</li>
<li>Larder, R., Clark, D. D., Miller, N. L. G., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothalamic+Dysregulation+and+Infertility+in+Mice+Lacking+the+Homeodomain+Protein+Six6%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hypothalamic Dysregulation and Infertility in Mice Lacking the Homeodomain Protein Six6.</a> Journal of Neuroscience. 31 (2), 426-438 (2011).</li>
<li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+yield+and+composition+in+mice%3A+Effects+of+litter+size+and+lactation+number%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology+--+Part+A%3A+Physiology%22%5BJournal%5D)">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comparative Biochemistry and Physiology -- Part A: Physiology. 84 (1), 127-133 (1986).</li>
<li>Chahoud, I., Paumgartten, F. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+litter+size+on+the+postnatal+growth+of+rat+pups%3A+is+there+a+rationale+for+litter-size+standardization+in+toxicity+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+research%22%5BJournal%5D)">Influence of litter size on the postnatal growth of rat pups: is there a rationale for litter-size standardization in toxicity studies.</a> Environmental research. 109 (8), 1021-1027 (2009).</li>
<li>Pandolfi, E. C., Hoffmann, H. M., Schoeller, E. L., Gorman, M. R., Mellon, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haploinsufficiency+of+SIX3+Abolishes+Male+Reproductive+Behavior+Through+Disrupted+Olfactory+Development%2C+and+Impairs+Female+Fertility+Through+Disrupted+GnRH+Neuron+Migration%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Haploinsufficiency of SIX3 Abolishes Male Reproductive Behavior Through Disrupted Olfactory Development, and Impairs Female Fertility Through Disrupted GnRH Neuron Migration.</a> Molecular Neurobiology. , (2018).</li>
</ol>

ليس له علاقة بالكشف عن صاحب البلاغ.

الرفاه العام للفئران أمر بالغ الأهمية ل تحليل خصوبة ناجحة21. عند القيام تحليل خصوبة، من المهم أن لا جسديا التحقق في الفئران كل يوم كهذا يمكن أن يسبب الإجهاد. كذلك تجنب التغييرات المتكررة القفص، أن هذه أيضا مرهقة. من الناحية المثالية سوف يتم التغييرات القفص لا يزيد عن 1-2 مرات في الأسبوع. التعرض للضوء أثناء مرحلة الظلام يؤثر سلبا على تربية في القوارض ليلية. لا يتم تشغيل الأضواء في الغرفة تربية خلال ساعات الظلام. إذا كان الدخول إلى الغرفة المطلوبة خلال ساعات الظلام، استخدام الإضاءة الخافتة الضوء الأ...

المرحلة الانتقالية من خلال سن البلوغ مطلوب لبلوغ مرحلة النضج الجنسي والكفاءة التناسلية. الانتقال البلوغ والحفاظ على معدل الخصوبة في سن البلوغ ينظم المحور الإنجابية، كما وصف المحور طائي جوندال الغدة النخامية (الشكل 1). وينظم توقيت بداية البلوغ والحفاظ على خصوبة محكم العوامل الداخلية، فضلا عن البيئة زيادة فرص البقاء على قيد الحياة للأبناء والآباء والأمهات1،2. يوفر هذا البروتوكول نهجاً غير الغازية لتحديد بداية البلوغ في الفئران والجرذان للتأكد من النضج الجنسي قبل إعداد دراسة خصوبة لتقييم الكفاءة التناسلية.
دراسة خصوبة في الحيوانات الناضجة جنسياً ويمكن أن تبدأ بعد أن مرت الحيوانات إلى سن البلوغ. قبل بداية البلوغ، محور الإنجابية هادئة، والدافع الرئيسي للنضج الجنسي، تروج – الإفراج عن هرمون (GnRH)، يطلق على الغدة النخامية بكميات غير كافية الشروع في سن البلوغ (الشكل 1). بداية البلوغ هو عملية معقدة والتي ينتج عنها زيادة جنره الإفراج في نيافة الوسيط. جنره يشجع الهرمون (LH) والمسام تحفيز إفراز هرمون (FSH) من الغدة النخامية، هما هرمونات ضرورية نضج جوندال ووظيفتها الإنجابية (الشكل 1)3،،من45 .
الإهانات إلى المحور الإنجابية يؤدي إلى انخفاض الخصوبة ويمكن أيضا التقدم أو التأخر في بداية البلوغ. وتشمل الشروط المعروفة للتأثير في توقيت بداية البلوغ والكفاءة الإنجابية التعرض للمواد الكيميائية6،7،1،وزن الجسم ارتفع أو انخفض8تغييرات في الصماء 2،طول اليوم9 والطفرات الوراثية10،11،،من1213،،من1415.
بداية مرحلة النضج الجنسي هو خطوة حاسمة يتعين استكماله قبل إعداد مقايسة خصوبة. مزايا تحديد بداية البلوغ من خلال فصل بريبوتيال وفتح المهبل والسفاد الأول، هي الخصائص غير الغازية لهذه الإجراءات، كما أنها لا تتطلب جمع الدم أو التضحية بالحيوان16، 17.
بعد أن يتم تحديد بداية البلوغ، بشكل صحيح إعداد دراسة خصوبة سوف توفر معلومات هامة حول السلامة المحور الإنجابية، وعادة ما يكون له ميزة ثانية لتوليد الحيوانات التجريبية لإجراء مزيد من الدراسات (التنقيح) 18-إعداد دراسة الخصوبة الموصوفة في هذا البروتوكول يمكن الكشف عن العجز في الصغيرة والكبيرة على حد سواء في الكفاءة التناسلية في الذكور والإناث. مفتاح معلمات تقييم تشمل 1) الوقت للقمامة الأولى، 2) عدد ليتر ولدت في حجم 3) القمامة وإطار زمني معين. وأخيراً، ترد توصيات لنوع متابعة الدراسات التي يمكن إجراؤها لتحديد سبب ضعف الخصوبة.
وصف البروتوكول يشير إلى الفئران وبيانات تمثيلية تعكس العمل المنجز في الفئران المعدلة وراثيا. ومع ذلك، كافة البروتوكولات شملت تصلح أيضا في الفئران.

<table><tbody><tr><td>كرات قطنية معقمة</td><td>فيشر</td><td>22456885</td><td></td></tr><tr><td>حامي السطح</td><td>فيشر</td><td>1420637</td><td></td></tr><tr><td>عداد الضوء</td><td>VWR</td><td>21800-014</td><td></td></tr><tr><td>الميثيلين الأزرق &nbsp ؛</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9140</td><td></td></tr><tr><td>مجهر الشرائح</td><td>Genesee Scientific</td><td>29-101</td><td></td></tr><tr><td>رف Optimouse مع أقفاص</td><td>أنظمة AnimalCare</td><td>C89100</td><td></td></tr><tr><td>سلة زجاجة المياه &nbsp;</td><td>أنظمة AnimalCare</td><td>C61011</td><td></td></tr><tr><td>قمم قفص مفلترة</td><td>أنظمة رعاية</td><td>C78210</td><td></td></tr><tr><td>أنظمة التغذية القياسية Optimice</td><td>أنظمة رعاية</td><td>C40100SG</td><td></td></tr><tr><td>حامل بطاقة القفص</td><td>أنظمة العناية بالحيوان</td><td>C43251</td><td></td></tr><tr><td>بطاقات القفص</td><td>أنظمة رعاية</td><td>M52010</td><td></td></tr><tr><td>زجاجة أنظمة Assambley</td><td>AnimalCare</td><td>C79122P</td><td></td></tr><tr><td>سرير R'Nest التعشيش</td><td>أندرسون</td><td>BRN4WSR</td><td></td></tr><tr><td>1/8 "مفروشات كوز الذرة &nbsp;</td><td>مقياس الماوس</td> القياسي Andersons <td>8B</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Teklad</td><td>7904 (7004)</td><td></td></tr> <tr><td>مقياس</td><td>VWR</td><td>10205-004</td><td></td></tr><tr><td>دورق بولي بروبلين</td><td>فيشر</td><td>14-955-111F</td><td></td></tr></tbody></table>

تحديد الكفاءة الإنجابية التي تؤكد بداية البلوغ، والقيام تحليل خصوبة في الفئران والجرذان

Determination of Reproductive Competence by Confirming Pubertal Onset and Performing a Fertility Assay in Mice and Rats

تقييم الكفاءة الإنجابية أمر بالغ الأهمية لفهم تأثير المعاملة أو التلاعب بالجينات على محور الإنجابية، كما وصف المحور طائي جوندال الغدة النخامية. المحور الإنجابية هو integrator رئيسية المدخلات البيئية والداخلية تكييف الخصوبة إلى الظروف المواتية للاستنساخ. قبل الشروع في دراسة خصوبة في الفئران والجرذان، يتم تقييم النضج الجنسي لاستبعاد إمكانية أن تعمل الإنجابية ملاحظتها هي سبب تأخر أو تغيب بداية البلوغ. ويصف هذا البروتوكول نهجاً غير الغازية لتقييم بداية البلوغ في الذكور من خلال تحديد فصل بريبوتيال، وفي الإناث عن طريق فتح المهبل والسفاد الأول. بعد التأكد من إتمام البلوغ وبلوغ مرحلة النضج الجنسي، يمكن الشروع في دراسة خصوبة. يصف الإجراء شروط التربية المثلى للفئران والجرذان وكيفية إعداد دراسة خصوبة، وما المعايير لتقييم وتحديد ما إذا كان العلاج أو حذف الجينات تؤثر على الخصوبة.

النتائج المعروضة من اثنين من نماذج مختلفة وراثيا الماوس حيث تم حذف النسخ عامل البطني الأمامي هوميوبوكس 1 (Vax1) في الجسم كله في اليل واحد، يشار هنا إلى heterozygote الفئران (HET)13، أو Vax1 تم حذف شرطيا داخل جنره الخلايا العصبية22، يطلق عليها هنا كو الشرطي (ككو). قبل إعداد دراسة الخصوبة، من المهم أن تؤكد بداية البلوغ في جميع الفئران.
أولاً، أنشئ يوم والوزن في افتت...

العديد من العلاجات والطفرات الجينية تؤثر على توقيت النضج الجنسي والخصوبة. ويصف هذا البروتوكول طريقة غير الغازية لتقييم بداية البلوغ في الفئران والجرذان قبل إعداد دراسة خصوبة في الحيوانات الناضجة جنسياً.

Assessment of reproductive competence is critical for understanding the impact of a treatment or genetic manipulation on the reproductive axis, also ...

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الإنجاب، مثل كيفية تحديد بداية البلوغ في الفئران والجرذان من خلال الفصل قبل البلوغ، وفتح المهبل، وإنشاء أول estrus قبل إجراء دراسة الخصوبة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه من خلال تأسيس بداية البلوغ باستخدام النهج غير الغازي المُثبت ، من الممكن متابعة وإجراء دراسة الخصوبة في الحيوانات الناضجة جنسيًا. وتمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية نحو تشخيص العجز في الإنجاب، كما هو ناجم عن الطفرات الجينية أو العلاجات المعرضة للتأثير على الكفاءة الإنجابية، مثل المواد الكيميائية التي تعطل الغدد الصماء.على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة الكفاءة الإنجابية في الفئران، فإنه يمكن أيضا أن تطبق على أنظمة نموذج أخرى، مثل الفئران والهامستر. إن العرض المرئي لهذه الطريقة أمر بالغ الأهمية، لأنه يتطلب مهارات جيدة وحساسة للتعامل مع الحيوانات. من المهم بشكل خاص أن تعقد الفئران بشكل صحيح لتحديد البصرية التالية من فصل preputial وفتحة المهبل.لتحضير منطقة العمل، ضع لوحة على الطاولة. ثم وضع قفص الماوس نظيفة أعلى مع الشبكة التي تواجه، على لوحة. بعد ذلك، قم بإعداد مقياس في منطقة العمل.وضع من 500 إلى 1000 ميليلتر منقار نظيفة على مقياس و tare ذلك. ثم ضع ورقة بجانب منطقة العمل لتسجيل البيانات. بعد ذلك، ضع قفص الماوس في منطقة العمل.افتح القفص وأزل الغطاء وزجاجة الماء وحامل الطعام إلى الطاولة. بينما عقد الماوس من الذيل، وضعه على أعلى قفص الماوس نظيفة. مع الحفاظ على عقد من الذيل، والسماح للماوس لاستكشاف الشبكة من أعلى القفص.سحب بلطف الذيل إلى الوراء والاقتراب من جهة أخرى إلى الجلد على مقربة من الرقبة والأذنين. فهم الجلد فضفاض بين الكتفين والرقبة مع الإبهام والسبابة. ثم الاستيلاء على الجلد على ظهره مع الأصابع المتبقية وعقد الماوس عن طريق الضغط بلطف على اليد.مع اليد الحرة، ودفع بلطف الجلد حول القضيب مرة أخرى. في الفصل قبلية، الجلد preputial الشرائح إلى الوراء، وفضح القضيب جلانس. بعد الفحص، تسجيل وجود أو عدم وجود فصل preputial.بعد ذلك، قم بوزن الفأرة وسجل وزنها. ثم إعادة إدخال الماوس إلى قفص السكن من خلال عقد منقار على أرضية القفص والسماح للماوس للخروج من تلقاء نفسها. ضع كرة قطنية، وقارب كبير، وزجاجة من الماء المعقم في منطقة العمل.صب الماء المعقم في القارص. ثم، ترطيب الكرة القطن مع الماء العقيم في الكوابر، ووضعها بجوار أعلى قفص نظيفة. ضع قفص الماوس في منطقة العمل.ثم نقل الماوس إلى أعلى القفص من خلال عقد من قبل قاعدة ذيله. سحب بلطف على ذيل الماوس لتشجيع حركة إلى الأمام من قبل الماوس. بعد ذلك، رفع الذيل في حين دعم الوركين مع ثلاثة أصابع.تنظيف بلطف الفرج مع الكرة القطن المرطبة، ثم فحص الفرج لتحديد ما إذا كان المهبل مفتوح تماما. سجل إذا حدث فتح مهبلي. ثم وزن الماوس وإعادته إلى القفص المنزل.إعداد قفص الماوس نظيفة مع غطاء، الماء، والغذاء، والفراش، والمواد التعشيش لكل زوج تربية الفئران. ثم املأ بطاقات القفص بالمعلومات المطلوبة. وضع قفص الفراش المعدة على طاولة نظيفة، ثم ببطء إدخال يد قفاز في قفص الماوس وتركها في القفص لفترة قصيرة من الزمن.اقترب ببطء من الفئران بيد قفاز. عندما الفئران تشغيل أكثر من جهة، والاستيلاء على ذيل الماوس واحد بين الإبهام وإصبع السبابة، ثم رفع الماوس من الذيل. يمكن أن تعقد الماوس من قبل الذيل دون دعم من الجسم لمدة تصل إلى اثنين إلى ثلاث ثوان.ضع الفأر في قفص التكاثر المعد ، ثم أغلق القفص بعد التأكد من أن الفئران الذكور والإناث لديهم الطعام والماء ومواد التعشيش. وباستخدام الطريقة المعروضة، تمت دراسة نموذجين مختلفين للماوس المعدل وراثيا. حدث فتحة المهبل والفصل قبلية في نفس العمر والوزن في كل من الفئران غير المغايرة والفئران التحكم.وعلى العكس من ذلك، تأخر فتح المهبل والفصل قبل البوتيال بشكل كبير في خروج الإناث والذكور المشروطين، وارتبطا بزيادة وزن الجسم. في 4.5 أسابيع من العمر، والضوابط الإناث والفئران بالضربة القاضية المشروطة كان وزن الجسم مماثلة، في حين أن الذكور بالضربة القاضية المشروطة كانت أثقل قليلا من الضوابط. وهذا يشير إلى أن التأخير في فتحة المهبل والفصل قبلية من الفئران خروج المشروطة لم يكن مرتبطا مع تأخير في زيادة الوزن.بعد الانتهاء من بداية البلوغ ، بدأت دراسة الخصوبة في سن 10 إلى 16 أسبوعا. كل من الذكور والإناث الفئران غير المغايرة كانت دون الخصوبة. ولدت الإناث غير المغايرة عدد أقل من القمامة في الدراسة التي استمرت ثلاثة أشهر، وولدت الفئران غير المغايرة للذكور والإناث نفايات أصغر.ولتوضيح أهمية تأكيد بداية البلوغ قبل إعداد فحص الخصوبة، تم تقييم الكفاءة الإنجابية في فئران الضربة القاضية المشروطة. خلال دراسة الخصوبة لمدة 70 يومًا ، لم يولد الذكور أو الإناث المشروطين أي نفايات. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن نتذكر التعامل مع الفئران بعناية والبقاء هادئًا أثناء الاقتراب والتعامل مع الحيوانات.بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ طرق أخرى مثل قياس مستويات هرمون الجنس المتداولة للإجابة على أسئلة إضافية، مثل ما إذا كان العقم أو أي نوع فرعي آخر ناجم عن هرمون تستوستيرون غير طبيعي، هرمون الاستروجين، هرمون تحفيز بصيلات، ومستويات هرمون اللوتين. لا تنسى أن العمل مع الفئران يمكن أن يكون خطيرا بسبب خطر العض وتطوير الحساسية. للحد من التعرض، ينبغي دائما اتخاذ الاحتياطات مثل ارتداء القفازات ومعطف المختبر، والتعامل الدقيق مع الفئران، أثناء تنفيذ هذا الإجراء.

determination-reproductive-competence-confirming-pubertal-onset

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

هنا، نحن تصف كيفية تحديد المرحلة من الفئران الإنجابية (مقدمات الوداق، شبق، تلية الوداق، أو هجوع الودق) من خلال جمع بسيطة غير الغازية، وتقييم الخلوي لعينات مسحة المهبل. وصفنا علم الخلايا المهبلية كذلك كيف يعكس تعميم مستويات الهرمونات التي تقوم عليها من خلال الانتقال التناسلي للدورة الفئران.

أداء الغسل المهبلي، كريستال تلوين بنفسجي، والتقييم النسيجية المهبلية لتحديد دورة دقي الماوس التدريج

مطلوب تميع السائل المنوي للحيوانات المنوية أن يتحرر من هلام المنوي. وتوفر هذه الدراسة إجراءات جمع السائل المنوي من الجماع بعد انتهاء الأنثى التناسلي، وقياس الوقت تميع السائل المنوي.

جمع بعد التزاوج السائل المنوي من الإناث المسالك التناسلية وقياس لتسييل المني في الفئران

يصف لنا تطوير نموذج الماوس مثل متلازمة تكيس المبايض العجاف مع بيليه ديهدروتستوسترون لدراسة الفسيولوجيا المرضية لمتلازمة تكيس المبايض والذرية من هذه السدود مثل متلازمة تكيس المبايض.

نموذج الماوس هايبراندروجينيك لدراسة متلازمة تكيس المبيض

تقلصات الرحم مهمة لرفاه الإناث. ومع ذلك، قد تؤدي زيادة الانقباض المرضية إلى عسر الطمث، وخاصة في الإناث الأصغر سنا. هنا، ونحن نصف إعداد خارج الجسم الحي بسيطة تسمح بتقييم سريع لفعالية مرخيات العضلات الملساء التي يمكن استخدامها لعلاج عسر الطمث.

طريقة فيفو السابقة لتقييم الحركة التلقائية للجهاز التناسلي للماوس وخوارزمية تتبع حركة الرحم المستندة إلى MATLAB لتحليل البيانات

توضح هذه المقالة كيفية إجراء اختبارات السلوك الجنسي في الفئران الذكور.

تقييم السلوك الجنسي للفئران الذكور

في هذا البروتوكول، نصف إجراءات التحليل النوعي والكمي للأنماط الظاهرية التنموية لدى الفئران المرتبطة بعيوب القلب الخلقية.

تحليل عيوب القلب الخلقية في أجنة الفئران باستخدام أساليب النسيج النوعي والكمي

تفصل هذه الدراسة العوامل الحاسمة التي يجب مراعاتها في التصاميم التجريبية التي تشمل إناث الفئران. وبمعنى أوسع، تعمل هذه البيانات على تقليل وصمة العار والمساعدة في تطوير أدوات تشخيص وتدخل أكثر شمولا.

مراقبة دورة القوارض الحثالة باستخدام غسل المهبل: لا يوجد شيء مثل الدورة العادية

يمكن لطريقة التلاعب بعنق الرحم المقدمة أن تحفز الحمل الكاذب في الفئران دون الحاجة إلى تربية الإناث مع الذكور الذين تم استئصال الأسهر. مطلوب تحريض الحمل الكاذب لنجاح نقل الأجنة غير الجراحي والتلقيح الاصطناعي غير الجراحي ، وكلاهما مقدم أيضا.

تحفيز الحمل الكاذب في إناث الفئران دون الحاجة إلى قطع الأسهر قبل نقل الأجنة غير الجراحي أو التلقيح الاصطناعي

هنا ، نقدم طريقة لإجراء حقن المنوية المستديرة (ROSI) في الفئران ، وهي تقنية ذات تطبيقات سريرية واعدة وفائدة للتحقيق في الآليات الكامنة وراء التطور الجنيني.

حقن الفأر المستدير Spermatid

العمل بأمان وإنسانية مع القوارض البحث يتطلب الكفاءات الأساسية في أساليب المناولة وضبط النفس. هذه المادة سوف يقدم المبادئ الأساسية اللازمة للتعامل مع بأمان وفعالية إدارة المركبات على الفئران والجرذان.

دليل ضبط النفس وطرق الإدارة المشتركة في مجمع الفئران والجرذان

اكتشف طريقة غير جراحية لتقييم بداية البلوغ في الفئران والجرذان من خلال فصل القلفة وفتح المهبل، مما يتيح إجراء دراسات خصوبة دقيقة على الحيوانات الناضجة جنسياً.

تحديد الكفاءة الإنجابية التي تؤكد بداية البلوغ، والقيام تحليل خصوبة في الفئران والجرذان

استكشف المزيد من الفيديوهات