Name: بروتوكول تفضيل مكان مكيفة لقياس الحضانة للرغبة في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 11 s
Description: اكتشف بروتوكول تفضيل المكان المكيف بالمورفين لدراسة حضانة الرغبة في الفئران. يتيح هذا الأسلوب للباحثين استكشاف آليات الإدمان وذكريات المخدرات على المدى الطويل.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذا العمل قبل الوطنية العلوم الطبيعية مؤسسة من الصين (تشرف) 31741058 (Y.Z.)، منح "حكومية شنتشن" (JCYJ20170818162613877 و JCYJ20170818163217196) والصين بعد الدكتوراه العلوم مؤسسة منحة عام 2017 م 622826 (K.Z.).

الإجراءات التجريبية التي أجريت وفقا للمبادئ التوجيهية "الرعاية الوطنية" و "استخدام الحيوانات" والتجارب التي وافقت عليها لجنة الاستخدام في "شنتشن معاهد للتكنولوجيا المتقدمة"، الصينية ورعاية الحيوان المؤسسية أكاديمية العلوم.
1-الحيوان التعود
<ol><li>الحصول على الفئران الذكور البالغين من الحيوانات المختبرية والمحافظة عليها تحت دائرة ضوء/الظلام ح 12 (الضوء على من 07:00 إلى 19:00) مع حرية الوصول إلى الغذاء والماء.</li>
	<li>التعامل مع الحيوانات باللعب معهم أو الربت عليها مرتين يوميا لمدة أسبوعين قبل التجارب.</li>
	<li>تعيين الحيوانات عشوائياً إلى مجموعات المالحة أو المورفين.</li>
</ol>2-المخدرات إعداد
<ol><li>إعداد هيدروكلوريد المورفين ك 10 ملغ/مل وحقن الفئران إينترابيريتونيلي (القائمة) في وحدة تخزين 1 مل/كغ.</li>
	<li>كعنصر تحكم، حقن الفئران بالمياه المالحة في حجم 1 مل/كغ.</li>
</ol>3-حزب الشعب الكمبودي الجهاز
<ol><li>بناء جهاز حزب الشعب الكمبودي ثلاثة-دائرة مع إشارات مختلفة عن طريق اللمس (الكلمة) واختبار الأفضلية الفئران الأولى لدائرتي الجانب. الجهاز يتألف من مجلسين كبيرة الجانب الأسود (30 سم × 25 سم × 30 سم، ل × ث × ح) وواحد الدائرة البيضاء المتوسطة (11 سم × 25 سم × 30 سم، ل × ث × ح) مع الكلمة PVC السلس الأبيض. اثنين من جانب الدوائر يكون القوام الكلمة مختلفة منبهات somatosensory: واحدة مع شبكة أرضية شبكي، والأخرى مع أرضية PVC الخام.</li>
	<li>وتختلف تركيبة الإشارات عن طريق اللمس للتأكد من أن الجهاز غير منحازة، منذ إنشاء جهاز متحيز عرضه تسفر عن نتائج إيجابية زائفة4. ملاحظة: مسألة منهجية مهمة في تصميم جهاز حزب الشعب الكمبودي، ما إذا كان الجهاز هو "منحازة" أو "غير منحازة"4. إذا كانت مجموعة من الفئران غير مدربين يظهر أي تفضيل الأولية لغرفة جانبية واحدة على أخرى، يعتبر الجهاز "غير منحازة". وبخلاف ذلك، تنظر فيه بوصفه "منحازة"13.</li>
</ol>4-حزب الشعب الكمبودي الداخلي
<ol><li>إنشاء نموذج حزب الشعب الكمبودي التي يسببها المورفين أساسا وفقا للدراسات السابقة21،22 مع التعديل لتكييف النقاط الزمنية، عدد من تكييف الدورات وتكييف الفترة التجريبية واختبار النقاط الزمنية20 . ويرد وصف قصيرة أدناه، منها الجدول الزمني التجريبي هو مبين في الشكل 1.</li>
	<li>تكييف ما قبل المرحلة<ol>
<li>وخلال هذه المرحلة (اليوم 1 إلى 3)، إزالة المقصلة الأبواب للسماح بحرية الوصول إلى الجهاز برمته ووضع الحيوان في الدائرة الوسطى.</li>
		<li>سجل نشاط الحيوانات لمدة 15 دقيقة.</li>
		<li>حساب الوقت الذي يقضيه في اثنين من جانب الدوائر في اليوم 3 كخط أساس، ويشير هذا ك T0.</li>
		<li>إزالة الفئران التي أدخل أقل من-أربع مرات أما من جانب الدوائر من تجربة23 كهذه الفئران من المرجح أن تواجه مشاكل في الرفاه العام (مثلاً، والفراء القذرة ووجود أورام). فحص الحالة الصحية للحيوانات خلال الفترة التجريبية كاملة.</li>
	</ol>
</li>
	<li>مرحلة تكييف ملاحظة: تشمل المرحلة تكييف 6 أيام (يوم 4 إلى 9).<ol>
<li>لمواضيع مكيفة المورفين، حقن الفئران القائمة مع المورفين (10 مغ/كغ) أو المحلول الملحي (1 مل/كغ) بالتناوب في الصباح (09:00) وعقد جلسات مسائية (19:00) (إلى جانب 10 ح).</li>
		<li>قصر الفئران فورا بعد كل الحقن المخدرات يقترن (غير مفضل) أو إقران المالحة الدائرة (المفضلة) لمدة 45 دقيقة (الشكل 1B).</li>
		<li>الحفاظ على نظام تسجيل الفيديو. ملاحظة: حسب تجربتنا، حوالي 5% فئران قد التنفس بعد أول حقن المورفين (10 مغ/كغ). في مثل هذه حالة، زيادة معدل البقاء على قيد الحياة من الفئران الاكتئاب الجهاز التنفسي، الحصول على الفئران خارج قاعة تكييف وسحب به اللسان ووضعه على ورقة بيضاء الأنسجة في قفصة المنزل.</li>
		<li>لضوابط مكيفة المالحة، إعطاء الفئران حقن المالحة (1 مل/كجم) قبل التعرض إلى غرفة جانبية واحدة من جهاز حزب الشعب الكمبودي، وخلال الجلسة الصباحية، وإلى الجانب الآخر خلال الدورة المسائية 45 دقيقة/الدورة تمشيا مع مجموعة المورفين (الشكل ج 1).</li>
	</ol>
</li>
	<li>مرحلة الاختبار<ol>
<li>وخلال هذه المرحلة، إزالة المقصلة الأبواب للسماح بحرية الوصول إلى الجهاز برمته ووضع الحيوان في الدائرة الوسطى للسماح لهم بحرية استكشاف الجهاز كله لمدة 15 دقيقة.</li>
		<li>سجل نشاطها خلال هذا 15 دقيقة.</li>
		<li>إجراء اختبارات تكييف بعد ثلاث، أي اختبار 1 (T1)، واختبار 2 (T2) واختبار 3 (T3)، 2 يوما، أيام 10 و 18 يوما بعد آخر دورة التكييف في دولة خالية من المورفين، على التوالي (الشكل 1A).</li>
		<li>وتختلف نقاط وقت الاختبار لأهداف تجريبية مختلفة. ملاحظة: للتقليل من عدد الفئران المطلوبة، يستخدم تصميم ضمن هذا الموضوع. ومع ذلك، إلى استبعاد الأثر الانقراض، مطلوب بين موضوع تصميم.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58384/58384fig1.jpg"> رقم 1: الإجراءات التجريبية. (أ) التجريبية الإجراءات العملية حزب الشعب الكمبودي بأكملها. (ب) التجريبية جدول مرحلة تكييف من مجموعة المورفين. (ج) التجريبية الجدول الزمني لمرحلة تكييف المجموعة المالحة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58384/58384fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
5-بيانات التحليل
<ol><li>حساب نقاط حزب الشعب الكمبودي في مجموعة morphine(saline): حزب الشعب الكمبودي درجة = الوقت الذي يقضيه في قاعة (غير مفضل) إقران المخدرات/الوقت الإجمالي المستغرق في كلا المجلسين تكييف.</li>
	<li>القيام بتحليل البيانات عشرات حزب الشعب الكمبودي ومداخل الغرف الجانبية مع الأساليب الإحصائية المناسبة باستخدام SPSS.</li>
	<li>تقديم جميع البيانات السلوكية كما يعني ± ووزارة شؤون المرأة، حيث أن وزارة شؤون المرأة هو الخطأ المعياري للوسط. يأخذ في الاعتبار القيم ف &lt; 0.05 إحصائيا هامة وتشير إلى جانب العلامات النجمية (*) وأوكتوثوربيسين (#) في الأرقام.</li>
</ol>

<ol><li>Leshner, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addiction+is+a+brain+disease%2C+and+it+matters%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Addiction is a brain disease, and it matters.</a> Science. 278 (5335), 45-47 (1997).</li>
<li>Koob, G. F., Volkow, N. D. <a target="_blank" href="https://www.nature.com/articles/npp2009110">Neurocircuitry of Addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 35 (1), 217-238 (2010).</li>
<li>Zhu, Y., Wienecke, C. F., Nachtrab, G., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+thalamic+input+to+the+nucleus+accumbens+mediates+opiate+dependence%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A thalamic input to the nucleus accumbens mediates opiate dependence.</a> Nature. 530 (7589), 219-222 (2016).</li>
<li>Tzschentke, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+reward+with+the+conditioned+place+preference+paradigm%3A+a+comprehensive+review+of+drug+effects%2C+recent+progress+and+new+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Measuring reward with the conditioned place preference paradigm: a comprehensive review of drug effects, recent progress and new issues.</a> Progress in Neurobiology. 56 (6), 613-672 (1998).</li>
<li>Tzschentke, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+reward+with+the+conditioned+place+preference+%28CPP%29+paradigm%3A+update+of+the+last+decade%5BTitle%5D)+AND+%22Addiction+Biology%22%5BJournal%5D)">Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade.</a> Addiction Biology. 12 (3-4), 227-462 (2007).</li>
<li>Mucha, R. F., vander Kooy, D., O'Shaughnessy, M., Bucenieks, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+reinforcement+studied+by+the+use+of+place+conditioning+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Drug reinforcement studied by the use of place conditioning in rat.</a> Brain Research. 243 (1), 91-105 (1982).</li>
<li>van Ree, J. M., Gerrits, M. A., Vanderschuren, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opioids%2C+reward+and+addiction%3A+An+encounter+of+biology%2C+psychology%2C+and+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Opioids, reward and addiction: An encounter of biology, psychology, and medicine.</a> Pharmacological Reviews. 51 (2), 341-396 (1999).</li>
<li>Le Merrer, J., Becker, J. A., Befort, K., Kieffer, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reward+processing+by+the+opioid+system+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Reward processing by the opioid system in the brain.</a> Physiological Reviews. 89 (4), 1379-1412 (2009).</li>
<li>Bardo, M. T., Bevins, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditioned+place+preference%3A+what+does+it+add+to+our+preclinical+understanding+of+drug+reward%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Conditioned place preference: what does it add to our preclinical understanding of drug reward?</a> Psychopharmacology. 153 (1), 31-43 (2000).</li>
<li>Bardo, M. T., Rowlett, J. K., Harris, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditioned+place+preference+using+opiate+and+stimulant+drugs%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+%26+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">Conditioned place preference using opiate and stimulant drugs: a meta-analysis.</a> Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 19 (1), 39-51 (1995).</li>
<li>Sun, Y., Pan, Z., Ma, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+entrances+to+side+compartments+indicate+incubation+of+craving+in+morphine-induced+rat+and+tree+shrew+CPP+models%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Increased entrances to side compartments indicate incubation of craving in morphine-induced rat and tree shrew CPP models.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 159, 62-68 (2017).</li>
<li>Sun, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+caudal+part+of+the+posterior+insula+of+rats+participates+in+the+maintenance+but+not+the+acquisition+of+morphine+conditioned+place+preference%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Neuroscience+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">The caudal part of the posterior insula of rats participates in the maintenance but not the acquisition of morphine conditioned place preference.</a> CNS Neuroscience & Therapeutics. , (2018).</li>
<li>Cunningham, C. L., Ferree, N. K., Howard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apparatus+bias+and+place+conditioning+with+ethanol+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Apparatus bias and place conditioning with ethanol in mice.</a> Psychopharmacology. 170 (4), 409-422 (2003).</li>
<li>Carles, S. -S., Rainer, S. <a target="_blank" href="https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/j.1369-1600.2006.00012.x">REVIEW: Behavioural assessment of drug reinforcement and addictive features in rodents: an overview.</a> Addiction Biology. 11 (1), 2-38 (2006).</li>
<li>Grimm, J. W., Hope, B. T., Wise, R. A., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroadaptation.+Incubation+of+cocaine+craving+after+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuroadaptation. Incubation of cocaine craving after withdrawal.</a> Nature. 412 (6843), 141-142 (2001).</li>
<li>Gawin, F., Kleber, H. <a target="_blank" href="https://www.psych.theclinics.com/article/S0193-953X(18)30614-2/abstract">Pharmacologic treatments of cocaine abuse.</a> Psychiatric Clinics of North America. 9 (3), 573-583 (1986).</li>
<li>Li, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+amygdala+extracellular+signal-regulated+kinase+signaling+pathway+is+critical+to+incubation+of+opiate+craving%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Central amygdala extracellular signal-regulated kinase signaling pathway is critical to incubation of opiate craving.</a> J Neurosci. 28 (49), 13248-13257 (2008).</li>
<li>Lubbers, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Extracellular+Matrix+Protein+Brevican+Limits+Time-Dependent+Enhancement+of+Cocaine+Conditioned+Place+Preference%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The Extracellular Matrix Protein Brevican Limits Time-Dependent Enhancement of Cocaine Conditioned Place Preference.</a> Neuropsychopharmacology. 41 (7), 1907-1916 (2016).</li>
<li>Bardo, M. T., Miller, J. S., Neisewander, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditioned+place+preference+with+morphine%3A+the+effect+of+extinction+training+on+the+reinforcing+CR%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Conditioned place preference with morphine: the effect of extinction training on the reinforcing CR.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 21 (4), 545-549 (1984).</li>
<li>Sun, Y., Zong, W., Zhou, M., Ma, Y., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-conditioned+place+preference+treatment+of+chloral+hydrate+interrupts+the+rewarding+effect+of+morphine%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Pre-conditioned place preference treatment of chloral hydrate interrupts the rewarding effect of morphine.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. , 60-63 (2015).</li>
<li>Lin, X., Wang, Q., Cheng, Y., Ji, J., Yu, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+of+protein+expression+profiles+in+the+amygdala+during+the+process+of+morphine-induced+conditioned+place+preference+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Changes of protein expression profiles in the amygdala during the process of morphine-induced conditioned place preference in rats.</a> Behavioural Brain Research. 221 (1), 197-206 (2011).</li>
<li>Lv, X. -F., Xu, Y., Han, J. -S., Cui, C. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+activity-regulated+cytoskeleton-associated+protein+%28Arc%2FArg3.1%29+in+the+nucleus+accumbens+is+critical+for+the+acquisition%2C+expression+and+reinstatement+of+morphine-induced+conditioned+place+preference%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of activity-regulated cytoskeleton-associated protein (Arc/Arg3.1) in the nucleus accumbens is critical for the acquisition, expression and reinstatement of morphine-induced conditioned place preference.</a> Behavioural Brain Research. 223 (1), 182-191 (2011).</li>
<li>Meng, Z., Liu, C., Hu, X., Ma, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Somatosensory+cortices+are+required+for+the+acquisition+of+morphine-induced+conditioned+place+preference%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Somatosensory cortices are required for the acquisition of morphine-induced conditioned place preference.</a> PLoS One. 4 (11), e7742(2009).</li>
<li>Shalev, U., Morales, M., Hope, B., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-dependent+changes+in+extinction+behavior+and+stress-induced+reinstatement+of+drug+seeking+following+withdrawal+from+heroin+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Time-dependent changes in extinction behavior and stress-induced reinstatement of drug seeking following withdrawal from heroin in rats.</a> Psychopharmacology. 156 (1), 98-107 (2001).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrolytic+lesions+of+the+bilateral+ventrolateral+orbital+cortex+inhibit+methamphetamine-associated+contextual+memory+formation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Electrolytic lesions of the bilateral ventrolateral orbital cortex inhibit methamphetamine-associated contextual memory formation in rats.</a> Brain Research. , (2015).</li>
<li>Vanderschuren, L. J., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+seeking+becomes+compulsive+after+prolonged+cocaine+self-administration%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Drug seeking becomes compulsive after prolonged cocaine self-administration.</a> Science. 305 (5686), 1017-1019 (2004).</li>
<li>Deroche-Gamonet, V., Belin, D., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+addiction-like+behavior+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Evidence for addiction-like behavior in the rat.</a> Science. 305 (5686), 1014-1017 (2004).</li>
<li>Augier, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+mechanism+for+choosing+alcohol+over+an+alternative+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A molecular mechanism for choosing alcohol over an alternative reward.</a> Science. 360 (6395), 1321-1326 (2018).</li>
<li>Sun, Y. M., Yang, J. Z., Sun, H. Y., Ma, Y. Y., Wang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+tree+shrew+chronic+morphine+dependent+model%5BTitle%5D)+AND+%22Dongwuxue+Yanjiu%22%5BJournal%5D)">Establishment of tree shrew chronic morphine dependent model.</a> Dongwuxue Yanjiu. 33 (1), 14-18 (2012).</li>
<li>Duan, Y., Shen, F., Gu, T., Sui, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addiction%3A+From+Context-Induced+Hedonia+to+Appetite%2C+Based+on+Transition+of+Micro-behaviors+in+Morphine+Abstinent+Tree+Shrews%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Psychology%22%5BJournal%5D)">Addiction: From Context-Induced Hedonia to Appetite, Based on Transition of Micro-behaviors in Morphine Abstinent Tree Shrews.</a> Frontiers in Psychology. 7, 816(2016).</li>
<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphine-induced+conditioned+place+preference+in+rhesus+monkeys%3A+Resistance+to+inactivation+of+insula+and+extinction%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Morphine-induced conditioned place preference in rhesus monkeys: Resistance to inactivation of insula and extinction.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 131, 192-200 (2016).</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

هنا، أسلوب استخدام نموذج حزب الشعب الكمبودي مورفين وصف إنشاء الذاكرة مكافأة على المدى الطويل في الفئران مع العظة somatosensory كسياق مكيفة. يتم تعديل بروتوكول سابق21 مع جهاز حزب الشعب الكمبودي متوازنة لبناء هذه ذاكرة مكافأة طويلة الأجل، ودورات المياه المالحة والمورفين مجموعة على الأقل 10 ح عن بعضها البعض. وبالإضافة إلى ذلك، تتم إضافة المزيد من الدورات تكييف أثناء مرحلة تكييف لتعزيز التعلم النقابي. وبصرف النظر عن عشرات حزب الشعب الكمبودي، تقاس بمداخل الغرف الجانبية اثنين ونمط زيادة مداخل الغرف الجانبية بشكل مماثل مع ذلك زيادة الاستجابات النشطة في نموذج الإدارة الذاتية.
عدة عوامل تؤثر على إنشاء نموذج حزب الشعب الكمبودي المشار إليها أعلاه. هو أحد العوامل الرئيسية تصميم الجهاز: الفئران بشكل عام ينبغي أن يكون التفضيل مماثلة لكلا المجلسين الجانب لضمان التوازن في الجهاز. هو جهاز غير متوازن يمكن أن تخفي اقتناء حزب الشعب الكمبودي بسبب تفضيل عالية الأولية إلى جانب واحد الدائرة13. ولذلك، ينبغي تجنب الأفضلية القصوى لغرفة جانبية واحدة (أكثر من 90% من إجمالي الوقت في أي من الدوائر الجانبية) عند اختيار النسيج من الكلمة أو غيرها العظة السياقية. لأغراض تجريبية مختلفة، يمكن أن توازن المجربون جهاز حزب الشعب الكمبودي، عن طريق تعديل المحفزات السياقية. لجهاز متوازن، هي طريقتين لتصميم تجريبي استخداماً4. يتمثل أحد السبل متحيزة للمخدرات زوج مع الدائرة غير المفضلة مع جميع المواضيع؛ طريقة غير متحيزة الزوج نصف الحيوانات مع المخدرات في قاعة غير المفضلة، والنصف الآخر مع الدائرة المفضل. كلا الاتجاهين يمكن تأسيس حزب الشعب الكمبودي13 ولكن الدراسات17،25 مع التصميم الأخير دائماً استبعاد العديد من المواضيع بسبب تفضيلها القوى إلى جانب واحد الدائرة. كما توجد مشكلة عدم حصانة الفرد إلى المخدرات إدمان26،،من2728 ، تم اختيار تصميم متحيزة في هذه الدراسة لتجنب إقصاء الأصحاء. واحد الحد من تصميم متحيزة هو تأثير تفضيل غير متناسقة للغرف الجانبية. كما هو مبين في الشكل 2، لدى الفئران في المجموعة المالحة متسقة عشرات حزب الشعب الكمبودي منخفضة للدائرة الأولى بغير المفضلة. وهكذا، هو استبعاد إمكانية أن الأفضلية غير متناسقة للغرف الجانبية يمكن أن تؤثر على عشرات حزب الشعب الكمبودي في المجموعة المورفين بتعيين عناصر التحكم المالحة. لتجنب تأثير سقف قاعة المفضل، نستخدم الدائرة الأولية غير المفضلة كقاعة مقترن بالمورفين. لتجنب تأثير الجدة والإجهاد على تفضيل خط الأساس إلى جانب الدوائر، يتم تنفيذ ثلاثة تكييف ما قبل الدورات، والدورة الثالثة ويستخدم كخط الأساس. العامل الرابع هو الفاصل بين الدورتين المالحة والمورفين. في نموذجنا، نختار فترات من 10 ساعات على الأقل لتجنب أثر الانسحاب في فترة تكييف المالحة. الجرعة المورفين عاملاً هاما أيضا. حمل جرعة منخفضة للغاية من المورفين، مثل 0.01 مغ/كغ6، لا تفضيل المكان. الناجمين عن حزب الشعب الكمبودي أعلى درجة17 في الفئران بجرعة 10 مغ/كغ ويستخدم عادة في الفئران المورفين حزب الشعب الكمبودي الدراسات17،،من2123. ومع ذلك، يمكن حمل المورفين 10 مغ/كغ (القائمة) التنفس في حوالي 5% من الفئران. ويمكن استخدام جرعات أقل من المورفين، مثل 5 مغ/كغ، في الدراسات المستقبلية. للأنواع الأخرى، مثل شجرة النمرة، ينبغي النظر في التسامح للمخدرات عند بناء نموذج حزب الشعب الكمبودي. منذ النمرة شجرة تطور سريع التسامح للمورفين، زيادة جرعة من المورفين ينبغي أن تستخدم أثناء تكييف المرحلة29،30.
تعديل البروتوكول، أنشئت مكافأة ذاكرة طويلة الأجل لمدة 18 يوما على الأقل بعد 6 أيام من تكييف11 (الشكل 2). وينبغي قياس الدراسات المستقبلية ما إذا كان يمكن الإبقاء على حزب الشعب الكمبودي لفترة أطول. الانتكاس المتكررة هي الحاجز الرئيسي في علاج الإدمان على المخدرات. الإجهاد ومنبهات البيئية والمخدرات يمكن أن تحفز الانتكاس. بعد انقراض الذاكرة حزب الشعب الكمبودي، يمكن استخدام هذا النموذج نموذج الانتكاس الناجمة عن الإجهاد أو المخدرات.
زيادة مداخل الدوائر إقران المخدرات في المجموعة المورفين في الامتناع عن ممارسة الجنس فترة11 (الشكل 3)، الذي يشبه مع زيادة الاستجابات النشطة في نموذج الإدارة الذاتية. غير أن زيادة مداخل قاعة إقران المالحة أيضا مع نموذج حزب الشعب الكمبودي في الفئران وشجرة الزبابة11، الذي يختلف عن الردود غير نشط لنموذج الإدارة الذاتية. هذا الاختلاف قد سبب المبادئ الأساسية المختلفة لنماذج اثنين: واحد تكييف الكلاسيكية، والآخر تكييف هواء فعال. وإلى جانب ذلك، لم تظهر شجرة الزبابة مع الأغذية يواجه حزب الشعب الكمبودي هذا نمط من مداخل زيادة30. ولذلك، يعتقد زيادة مداخل كل الغرف الجانبية في الحيوانات تعاني المورفين لتمثيل حنين المحتضنة للمخدرات. على الرغم من أن الحد من استخدام التدابير المتكررة في موضوع واحد لا يمكن استبعادها، النمط الإدخالات زيادة كان المصانة في11من الفئران، الزبابة شجرة11،30 والقرود31. ومع ذلك، بين تصميم الموضوع الامتناع عن ممارسة الجنس أثناء الفترة يوصي بشدة للدراسات المستقبلية لاستبعاد أثر انقراض القياسات المتكررة.
وبصرف النظر عن زيادة مداخل، عشرات حزب الشعب الكمبودي بجرعات منخفضة من المورفين (1 مغ/كغ و 3 مغ/كغ) زاد تدريجيا خلال الفترة17الامتناع عن ممارسة الجنس. هذه النتائج تشير إلى أن نموذج حزب الشعب الكمبودي يمكن أيضا نموذج في الحضانة من حنين الظاهرة. ومع ذلك، على زيادة درجة من حزب الشعب الكمبودي قد تمثل أيضا زيادة ذاكرة للتحفيز مشروط. في هذا الجانب، مداخل إلى جانب الدوائر في جهاز الدائرة ثلاثة، ومماثلة للاستجابات الفعالة في نموذج الإدارة الذاتية، أكثر شبهاً بحثاً عن المخدرات أو تأثير الأدوية مجزية. سيكون من المثير للاهتمام أن تحقق اتجاهات مداخل الغرف الجانبية أثناء فترة الامتناع عن ممارسة الجنس في نماذج الفئران حزب الشعب الكمبودي لجرعات أقل من المورفين. ينبغي أن يتم الدراسات المستقبلية مع المخدرات والفئران الأخرى للتحقق من ما إذا كانت هذه الظاهرة هي حفظت عبر المخدرات أنواع إساءة المعاملة/.

إدمان المخدرات هو أمراض مزمنة1 مع عدة مراحل مختلفة2: نهم/التسمم ويؤثر الانسحاب/السلبية وانشغال/تحسبا. في المرحلة الأولى بنهم/التسمم دورة إدمان المخدرات، تأخذ مواضيع المخدرات نظراً لتأثير التعزيز2. في مرحلة يؤثر الانسحاب/السلبية، تجربة المواضيع السلبية دول انسحاب المخدرات، الجسدية والعاطفية التي تعزز آليات تعزيز السلبية المرتبطة بتنمية الإدمان3. في مرحلة الانشغال/توقعا، إعادة مواضيع البحث عن المخدرات بعد الزوال، التي يمكن أن تحدثها الرموز المرتبطة بالمخدرات أو عوامل الإجهاد. في الدراسات الحيوانية من إدمان المخدرات، تستخدم نماذج التفضيل (حزب الشعب الكمبودي) مكان مكيفة لمحاكاة تأثير إيجابي يعزز من المخدرات4،،من56 ، وهكذا، يتم استخدامه لنموذج المرحلة الأولية للمخدرات دورة الإدمان. وتنتج المورفين، عضو الأسرة شبائه الأفيون، أثرا إيجابيا يعزز بتنشيط مستقبلات الأفيونيات في الدماغ7،8.
استناداً إلى مبدأ الكلاسيكية (Pavlovian) تكييف نموذج حزب الشعب الكمبودي وتستخدم عادة لقياس تأثير أدوية الإيذاء، مثل المورفين4،5،،من910، نظراً لأن من السهل مجزية توفر عبر المختبرات. نموذج حزب الشعب الكمبودي نموذجي يتكون من ثلاث مراحل: مراحل قبل تكييف وتكييف واختبار. أثناء مرحلة تكييف، هي إقران خصائص مجزية للمخدرات (التحفيز أونكونديتيونيد) مع واحد أو أكثر حيادا السياقية المحفزات، التي تكتسب خصائص مجزية بعد عدة تكييف الأزواج وتكون بمثابة محفزات مشروط. أثناء مرحلة الاختبار، قياس تفضيل الحيوانات للمقصورات المخدرات إقران وينعكس كمكافأة الذاكرة الخاصة بهم. ولهذا السبب، يستخدم نموذج حزب الشعب الكمبودي أيضا التحقيق في آليات التعلم والذاكرة. إنشاء ذاكرة مكافأة طويلة الأجل من المورفين، تم ضبط المتغيرات التي تؤثر في إنشاء حزب الشعب الكمبودي والأمثل مع أدناه وصف بروتوكول11. المحفزات السياقية مزيج من البصرية، عن طريق اللمس، ورائحة العظة. الاختلافات السياقية المحفزات واختبار الوقت النقاط مصنوعة وفقا لأغراض بحثية مختلفة. على سبيل المثال لدينا الدراسة السابقة12، العظة somatosensory (الكلمة مختلفة القوام) أساسا استخدمت كمحفزات السياقية للتحقيق في دور الجزء والذيلية من قشرة الجزر، منطقة الدماغ باستخدام الدالة سوماتوسينسوري، في الحصول على والحفاظ على الذاكرة مكافأة على المدى الطويل. تصميم الجهاز والإحالة من الفئران للجانبين يفضل/غير المفضلة تؤثر على إنشاء حزب الشعب الكمبودي. يتم استخدام جهاز الدائرة ثلاثة بدلاً من جهاز مجلسين في أدناه البروتوكول لتجنب اختيارات القسري. التوازن بين دائرتي الجانب والإحالة الأولى من الحيوانات في هذه تؤثر على حصول حزب الشعب الكمبودي4،13. وهكذا، يتم تطبيق تصميم متوازنة من جانب الدوائر ومتحيز التعيين من الحيوانات في هذا البروتوكول للحصول على تفضيل مكان قوية. الحفاظ على الذاكرة مكافأة على المدى الطويل يتطلب المزيد من المحاكمات تكييف أثناء مرحلة تكييف. لتقليل تكلفة الوقت أثناء مرحلة تكييف، يضطلع محاكمتين تكييف لليوم الواحد وهي تعوض حقن المورفين/المالحة لتجنب تأثير الانسحاب الحادة من المورفين في محاكمات إقران المالحة4.
إعادة نماذج حيوانية14 أنشئت لنموذج مرحلة الانشغال/تحسبا لدورة الإدمان على المخدرات. ويستخدم حزب الشعب الكمبودي أيضا لدراسة إعادة النماذج الانتكاس والعودة إلى الإدمان سلوك5. الانتكاس واحد من الحواجز في مجال معالجة الإدمان على المخدرات. حنين أحد أسباب الانتكاس المتكررة. والتوق للمخدرات يزيد باستمرار أثناء فترة الامتناع عن ممارسة الجنس، وصف ظاهرة تفريخ حنين15،16. حضانة حنين هو درس على نطاق واسع في نموذج الإدارة الذاتية المخدرات ولكن ليس بنموذج حزب الشعب الكمبودي. استخدام نموذج حزب الشعب الكمبودي تعكس الحضانة شغف للمرة الأولى التي اقترحها لي et al. 17-على نتائج17 أظهرت أن حزب الشعب الكمبودي عشرات من الجرعات المنخفضة من المورفين (1 مغ/كغ و 3 مغ/كغ) ولكن ليس جرعة عالية (10 مغ/كغ) وزاد تدريجيا خلال الأيام ال 14 الأولى من الامتناع عن ممارسة الجنس. وبالمثل، حقن الفئران بجرعة منخفضة من الكوكايين التي أظهرت زيادة حزب الشعب الكمبودي عشرات على مدى الساعة18. واستخدمت عشرات حزب الشعب الكمبودي زيادة جرعة منخفضة من المورفين لتعكس حنين المحتضنة17. كل من أمضى مدة في ويقترح عدد الإدخالات في البيئة المرتبطة بالمخدرات لكي تعكس الردود مشروط يعزز في نموذج حزب الشعب الكمبودي19. استخدام معظم الدراسات الأخيرة عشرات حزب الشعب الكمبودي لمباشرة أو غير مباشرة تعكس الوقت المستغرق في الدوائر إقران المخدرات بينما عدد الإدخالات إلى جانب الدوائر كمعلمة غالباً ما تهمل. لهذه الأسباب، كان يستخدم مورفين بجرعة 10 مغ/كغ، وتم قياس عدد الإدخالات في الدراسة لدينا11. وتبين النتائج أن مداخل للفئران إلى جانب الدوائر زادت زيادة كبيرة خلال فترة الامتناع عن ممارسة الجنس11. يشير هذا إلى أن حزب الشعب الكمبودي العشرات وعدد الإدخالات معلمات مفيدة في تقييم حنين المتزايد للمخدرات والنموذج الكمبودي الذي ينطبق على نموذج في الحضانة من حنين ظاهرة. ومع ذلك، لتقليل عدد الحيوانات اللازمة، من الحيوانات تعاني المورفين اختبار مجموعة مرارا وتكرارا؛ وهكذا، لا يمكن استبعاد تأثير الانقراض مع الحالية ضمن تصميم الموضوع. أ بين تصميم الموضوع مع نفس البروتوكول يمكن التغلب على هذا القيد.
فيما يلي وصف البروتوكول حزب الشعب الكمبودي الذي أنشأ الذاكرة مكافأة على المدى الطويل، وعلى غرار حنين زيادة. بإيجاز، بعد ثلاثة أيام قبل تكييف، تذهب من خلال ستة أيام تكييف مع تكييف محاكمتين يوميا الفئران وثم يتم اختبارها في نقاط زمنية مختلفة بعد المحاكمة تكييف آخر. في هذا النموذج، وحزب الشعب الكمبودي مربع الدائرة ثلاثة كلوريد البوليفينيل (PVC) المستخدمة كجهاز حزب الشعب الكمبودي، هي التي شيدت ومتوازن في الطابق الجهاز. الجهاز يتألف من مجلسين كبيرة الجانب الأسود (30 سم × 25 سم × 30 سم، ل × ث × ح) وواحد الدائرة البيضاء المتوسطة (11 سم × 25 سم × 30 سم، ل × ث × ح) مع الكلمة PVC السلس الأبيض. اثنين من جانب الدوائر يكون القوام الكلمة مختلفة منبهات somatosensory: واحدة مع شبكة أرضية شبكي، والأخرى مع أرضية PVC الخام.

<table><tbody><tr><td>المورفين</td><td>شنيانغ أول مصنع</td><td></td><td></td>للأدوية</tr> جهاز <tr><td>CPP / الكاميرا</td><td>Anlai Technology Company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SPSS</td><td>IBM Inc</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

بروتوكول تفضيل مكان مكيفة لقياس الحضانة للرغبة في الفئران

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

سبب رئيسي للانتكاسات المتكررة شغف للمخدرات. المخدرات حنين الزيادات تدريجيا خلال فترة الامتناع عن ممارسة الجنس، وصف ظاهرة الحضانة للمخدرات حنين. هنا، نحن تصف مكان مورفين مكيفة أفضلية (حزب الشعب الكمبودي) بروتوكول لقياس في الحضانة للرغبة في الفئران. في هذا البروتوكول، يستخدم نموذج حزب الشعب الكمبودي أساسا استخدام الرموز somatosensory لإنشاء ذاكرة مكافأة طويلة الأجل من المورفين. يتم إنشاء مربع حزب الشعب الكمبودي ثلاثة-دائرة التي تختلف في نسيج الكلمة الدائرة. أولاً، يتم اختبار الحيوانات لتفضيلها الأساس لاثنين من جانب الدوائر لمدة ثلاثة أيام متتالية. ثم يتم حقن إينترابيريتونيلي مع المورفين/المالحة ووضعت في هذه الدائرة غير المفضل/المفضلة لمدة 45 دقيقة. بعد 6 أيام تكييف، يتم اختبار تفضيلها للجانب الدوائر لمدة 15 دقيقة عند نقاط زمنية مختلفة بعد آخر دورة التكييف. مع هذا النموذج، ويمكن أن تستمر الذاكرة مكافأة من المورفين لمدة 18 يوما على الأقل. لاختبار ما إذا كان البروتوكول المذكور أعلاه نموذج للرغبة المتزايدة، تحسب عدد المداخل إلى الدوائر الجانبية أثناء فترة الامتناع عن ممارسة الجنس. وتبين النتائج أن زيادة المداخل، مما يوحي بأن النموذج الكمبودي الذي يمكن أن تحاكي في حضانة حنين. الدراسات المستقبلية يمكن أن تستخدم هذا الطراز لدراسة الآليات العصبية الأساسية للذاكرة على المدى الطويل والحضانة من حنين.

وتبين النتائج التمثيلية التالية يمكن الإبقاء مورفين يمكن إنشاء حزب الشعب الكمبودي بنجاح البروتوكول المذكورة أعلاه والذاكرة مكافأة المورفين على المدى الطويل (الشكل 2). ويعكس عدد الإدخالات إلى جانب الدوائر، يماثل عدد الردود النشط في النموذج من الإدارة الذاتية، والخاصية بعضا من المورفين. ولوحظ ازدياد عدد إدخالات (الشكل 3)، مما يشير إلى الحضانة للشهوة، استخدام هذا النموذج الكمبودي المورفين.
حزب الشعب الكمبودي الذاكرة يمكن أن تستمر بعد دورة تكييف الأخيرة ما لا يقل عن 18 يوما.
واحد وعشرون من الفئران في المجموعة المورفين والفئران 10 في المجموعة المالحة استخدمت لاختبار التعبير عن الذاكرة مجزية طويلة الأجل. ANOVA مختلطة كشفت وجود اختلافات كبيرة في التفاعل بين المجموعة واختبار (F (3,87) = 4.973، ف = 0.003)، اختبار (F (3,87) = 18.237، ف &lt; 0.001) ومجموعة (F (1,29) = 11.413، ف = 0.002). اختلافات كبيرة بين الاختبارات (F (3,60) = 46.628، ف &lt; 0.001) في مجموعة المورفين ولكن لا المالحة group(F(3,27) = 1.576، ف = 0، 218) تم الكشف عن طريق اتجاه واحد ANOVA متكررة. وأظهر تحليل مقارنة متعددة بونفيروني التكيف مع اختلافات كبيرة بين ثلاثة اختبارات و T0 في المجموعة المورفين. كما هو مبين في الشكل 2، ذكرى مكافأة المورفين استمر 18 يوما على الأقل وقد انخفض في اتجاه تعتمد على الوقت. يتم الحصول على البيانات من دراسة منشورة سابق11.
مداخل حجرات جانبية في مجموعة المورفين ازدادت تدريجيا
مجموعة المورفين لاختبار هذا اتجاه المداخل، المجموعة (إقران المالحة وإقران المورفين) كعامل بين المواضيع والاختبار (T0، T1، T2 و T3) كعامل ضمن المواضيع وحددت ANOVA مختلطة. لا توجد اختلافات كبيرة في التفاعل بين المجموعة واختبار (F (2.311,92.449) = 1.915، ف = 0.147) ومجموعة (F(1,40) = 0.898، ف = 0.349)، لكن أهمية في اختبار (F(2.311,92.499) = 24.243، ف &lt; 0.001)، تم الكشف عنها. وأظهر تحليل مقارنة متعددة مع الأقل أهمية الفرق (LSD) اختبار الاختلافات الكبيرة بين T1 و T0 (ف &lt; 0.001)، T2 و T0 (ف &lt; 0.001) و T3 و T0 (ف &lt; 0.001) في مجموعة المورفين في مداخل إقران المورفين. المقصورات إقران المحلول الملحي، وفيما يتعلق بوجود دلالات إحصائية بين T2 و T0 (ف = 0.002) و T3 و T0 (ف = 0.003) لكن لا T1 و T0 (ف = 0.246)، وهو مماثل للنمط الحضانة للهيروين حنين24. بشكل عام، مجموعة مداخل الغرف الجانبية في المورفين زيادة الوقت-[دبندنتلي].
الفئران التي دخلت أكثر في كثير من الأحيان إلى حجرة إقران المورفين من حجرة إقران المالحة في T1 (t(1,21) =-2.833، ف = 0.010) و T2 (t(1,21) =-4.458، ف = 0.0002) لكن لا T3 (t(1,21) =-0.471، ف = 0.642) (ثنائي الطرف ازدواج الاختبارات تي).
مجموعة المالحة مماثلة مع مجموعة المورفين، ANOVA مختلطة طبق وكشف لا اختلافات كبيرة في التفاعل بين المجموعة واختبار (F(3,54) = 0.345، ف = 0.793)، اختبار (F(3,54) = 1.793، p = 0.159) ومجموعة (F(1,18) = 0.151، ف = 0.702). وهكذا، ومداخل الغرف الجانبية في المجموعة المالحة كانت مستقرة على مر الزمن.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58384/58384fig2.jpg"> رقم 2: حزب الشعب الكمبودي الذاكرة يمكن أن تستمر لكن الانخفاض مع مرور الوقت ما لا يقل عن 18 يوما- الاحتفاظ الذاكرة من حزب الشعب الكمبودي في المجموعة المورفين (ن = 21) والمجموعة المالحة (n = 10) قيمت بقياس درجة حزب الشعب الكمبودي للعديد من النقاط الزمنية بعد تكييف آخر (T1، 2 يوما؛ T2، أيام 10 و T3، 18 يوما). تكون كافة القيم من حزب الشعب الكمبودي عشرات يعني ± sem. # # # يشير إلى ف &lt; 0.001 و # # يعني ف &lt; 0.01 بالمقارنة مع مجموعة المالحة؛ ويشير إلى ف &lt; 0.001 بالمقارنة مع T0 في المجموعة المورفين. تم تعديل هذا الرقم من الشمس et al.، 201711. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58384/58384fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58384/58384fig3.jpg"> الشكل 3: مداخل الغرف الجانبية في مجموعات المورفين والمالحة. مداخل الغرف الجانبية اثنين في المجموعة المورفين (ن = 21) ومجموعة المالحة (n = 10) قيمت في عدة نقاط زمنية بعد تكييف آخر (T1، 2 يوما؛ T2، أيام 10 و T3، 18 يوما) ومقارنة مع T0. وتكون كافة القيم من المداخل يعني ± sem. في المجموعة (أ) المورفين، مداخل إلى جانب منتخبي المورفين زيادة كبيرة من T1 إلى T3 حين مداخل الدائرة إقران المالحة فقط زيادة كبيرة من T2. اختبارات t المقترنة مع إقران المورفين حجرة وحجرة إقران المالحة أظهرت زيادات كبيرة جداً في T1 و T2. في المجموعة (ب) المالحة، هناك أي تغييرات كبيرة في المداخل على كلا الجانبين. لقد تم تعديل هذا الرقم من الشمس et al.، 201711. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58384/58384fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

هنا، مورفين مكيفة مكان تفضيل (حزب الشعب الكمبودي) بروتوكول وصف لقياس الحضانة للرغبة في الفئران.

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في معالجة بعض الأسئلة الرئيسية في مجال إدمان المخدرات حول الرغبة الشديدة في تعاطي المخدرات وحضانة الاستجابة للرغبة الشديدة. مع ستة أيام فقط من تكييف المورفين ، يمكن تمديد استجابة الذاكرة تفضيل المكان المشروط إلى 18 يوما لمراقبة الظواهر حنين في نموذج الفئران. الآثار المترتبة على هذا النموذج تكييف المورفين الفئران تمتد نحو تعزيز فهمنا الآليات الكامنة في حضانة الرغبة الشديدة.قبل البدء في الإجراء، وبناء غرفة ثلاثة مشروطة مكان الجهاز التفضيل تتكون من اثنين كبيرة، أسود 30 من قبل 25 من قبل 30 غرف جانبية سم. وبيض واحد 11 في 25 في 30 سم غرفة متوسطة، مع سلس، الكلمة البلاستيكية البيضاء. ثم إضافة الإشارات عن طريق اللمس مختلفة إلى الغرف الجانبية لاختبار التفضيلات الأولية للجرذ.لتكييف مسبق للحيوانات، وإزالة الأبواب المقصلة للسماح بالوصول الحر إلى الجهاز بأكمله. ووضع فأر في الغرفة الوسطى. سجل نشاط الحيوان لمدة 15 دقيقة، وحساب الوقت الذي يقضيه في الغرفتين الجانبيتين في اليوم الثالث كخط أساس.لتكييف من الحيوانات, حقن المورفين مكيفة الفئران المجموعة مع ملليلتر واحد لكل كيلوغرام من 10 ملليغرام لكل ملليلتر المورفين هيدروكلوريد IP في الصباح. ومع ملليلتر واحد للكيلوغرام الواحد بعد 10 ساعات، كل يوم لمدة ستة أيام. وضع كل فأر في الدواء المناسب لها الاقتران، غير المفضل أو المالحة، غرفة المفضل لمدة 45 دقيقة مباشرة بعد كل حقنة.لاختبار الحيوانات مكيفة المورفين، في أيام اثنين و 10 و 18 بعد جلسة تكييف الماضي، وإزالة الأبواب المقصلة للسماح بالوصول الحر إلى الجهاز بأكمله. وسجل نشاط كل لمدة 15 دقيقة بعد وضعه في الغرفة الوسطى لاستكشاف الجهاز بأكمله في حالة خالية من المورفين. يتم تقييم الاحتفاظ بالذاكرة لتفضيل المكان المشروط في مجموعات المورفين والملوحة من خلال قياس درجة تفضيل المكان المشروط في نقاط زمنية متعددة بعد جلسة التكييف الأخيرة.ويماثل عدد البنود في الغرف الجانبية عدد الردود النشطة في نموذج الإدارة الذاتية، مما يعكس الخاصية المعززة للمورفين ومع زيادة عدد المدخلات التي تشير إلى حضانة الرغبة الشديدة. وكما هو موضح، يمكن بنجاح تحديد أفضلية مكان مكيفة بالمورفين باستخدام هذا البروتوكول. استحث ذكرى مكافأة المورفين طويلة الأجل لمدة تصل إلى 18 يوما بعد آخر جلسة تكييف.عند محاولة هذا الإجراء، من المهم أن تتذكر أن تختار تحقيق التوازن بين الإشارات اللمسية. بعد هذا الإجراء، يمكن تنفيذ تدابير أخرى مثل إعادة بعد كل تكييف. للإجابة على أسئلة إضافية حول ما إذا كانت الإعادة إلى العمل في ظل حضانة الرغبة الشديدة لها آليات مماثلة.بعد إعادة, مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال إضافة المخدرات لاستكشاف حضانة حنين في نماذج تفضيل مكان مشروطة الفئران.

a-conditioned-place-preference-protocol-for-measuring-incubation

Research

JoVE Journal

Behavior

سلوك

وتستخدم توسعا استثابي المخدرات الإدارة الذاتية ومشروطة تفضيل مكان (CPP) إجراءات في مجال البحوث لنموذج مختلف مكونات تعزيز المخدرات واستهلاكها ، والإدمان لدى البشر. في هذا التقرير ، جنبا إلى جنب ونحن الطرق التقليدية لحزب الشعب الكمبودي والإدارة الذاتية بوصفها نهجا جديدا لتعزيز دراسة المخدرات والإدمان في الفئران.

رواية جهاز وطريقة لتدعيم المخدرات

الاستجابة للمنبهات الغذاء أو الدواء ، المقترنة زيادات على مدى فترة من الامتناع عن ممارسة الجنس ، وهذا قد تتصل زيادة الحساسية للسلوكيات الانتكاس. نحن هنا من التفصيل إجراء لتقييم هذه "حضانة شغف" في الفئران التي لديها ذاتيا السكروز.

طريقة عامة لتقييم الحضانة لالتوق السكروز في الجرذان

توضح هذه المقالة كيفية microinject ناقلات فيروسية في مخ الفأر ثم اختبار في تفضيل مكان الهواء نموذج يتضمن مرحلة الاستحواذ، وإعادة الانقراض.

حقن مكروي التجسيمي من ناقلات فيروسية وإذ تعرب عن لجنة المساواة العرقية recombinase البكتيري المحور إلى دراسة دور الجينات المستهدفة في الكوكايين مكيفة مكان ميول

يهدف هذا البروتوكول إلى تمكين الباحثين من إجراء تجارب مصممة لاختبار هذه الجوانب من الإدمان باستخدام تفضيل المكان المشروط ومقايسات التحسس السلوكي الحركي.

تقييم التوعية السلوكية التي يسببها الكوكايين ومشروطة مكان الأفضلية في الفئران

هو تصور مفاعليه جديلة كالحساسية لمنبهات مرتبطة بخبرات تعاطي المخدرات التي تسهم في حنين والانتكاس في البشر ممتنعين. وعلى غرار مفاعليه جديلة في الفئران بقياس الاتجاه أتينشونال تجاه الرموز المرتبطة بالمخدرات التي ينتج عنها سلوك نهج مشهي في اختبار مفاعليه جديلة بعد الإدارة الذاتية وأجبر الامتناع عن ممارسة الجنس.

بروتوكول لقياس مفاعليه جديلة في نموذج الفئران من اضطراب استخدام الكوكايين

ويصف هذا البروتوكول مكيفة مكان التفضيل (حزب الشعب الكمبودي) كنموذج للانتكاس. يسمح هذا الإجراء بقياس الانتكاس في الحيوانات المختبرية، والنظر في تأثير منبهات البيئية المرتبطة بالمخدرات كحنين والانتكاس في المدمنين الممتنعين حاليا تركيز برامج العلاج من تعاطي المخدرات.

إعادة البحث عن المخدرات في الفئران باستخدام نموذج تفضيل المكان مكيفة

ووصف الإجراء الذي يسمح مظاهرة من زيادة قوية من المخدرات تسعى في الفئران المقيدة الغذاء. التالية الهيروين التدريب الإدارة الذاتية، الفئران تذهب من خلال فترة الامتناع عن ممارسة الجنس، في بيئة خالية من المخدرات، أثناء التي هي أقل ما يقال الغذائية المقيدة. ثم يتم اختبار التماس المخدرات في البيئة المرتبطة بالمخدرات.

إجراء لدراسة تأثير الغذاء المطول تقييد على الهيروين المفضل في الجرذان متقشف

محتوى الدهون الغذائية تأثيرات كل من كمية الطاقة والجسم تكوين الدهون في الثدييات. من خلال دراسة تفضيل الفئران للغذاء عالي الدهون في سلسلة من التجارب الاختيار، فمن الممكن لاختبار الفروق الوراثية والتدخلات الدوائية على تفضيلهم للأغذية عالية الدهون.

ميول الدهون: نموذج الرواية من سلوك الأكل في الجرذان

إجراء دراسة لقدرة الكحول المرتبطة السياق البيئي لتحريك يوصف تجديد السلوك الكحول التماس في الفئران.

إجراءات لمراقبة الناجم عن السياق تجديد مكيفة بافلوف-السلوك الكحول التماس في الجرذان

تعدل هرمونات الغدد التناسلية مثل هرمون الاستروجين تكوين الذاكرة في عدد من النماذج التجريبية بما في ذلك ذاكرة انقراض الخوف. يصف هذا البروتوكول مجموعة من الطرق للتحقيق في تأثير هرمونات الغدد التناسلية على وجه التحديد أثناء الانقراض في الإناث اللواتي يركبن الدراجات بشكل طبيعي ، بما في ذلك مراقبة دورة الشبق وإعطاء هرمون الاستروجين الخارجي.

بروتوكول لدراسة الانقراض من الخوف مشروطة في ركوب الدراجات وبطبيعة الحال إناث الفئران

اكتشف بروتوكول تفضيل المكان المكيف بالمورفين لدراسة حضانة الرغبة في الفئران. يتيح هذا الأسلوب للباحثين استكشاف آليات الإدمان وذكريات المخدرات على المدى الطويل.

بروتوكول تفضيل مكان مكيفة لقياس الحضانة للرغبة في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات