Name: نموذج انصباب الجنبي في الفئران بتقطير تحسن من بولياكريلاتي/نانوسيليكا (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 32 s
Description: تعلم بروتوكول إنشاء نموذج انصباب الجنبي في الفئران باستخدام بولياكريلات/نانوسيليكا عبر التقطير الرغامي. تُستخدم هذه الطريقة لدراسة سمية النانومواد وتأثيراتها على صحة الرئة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ومولت الدراسة الحالية وإنتاج هذه المادة "مؤسسة العلوم الطبيعية الوطنية الصينية" (منحة 81773373، 81172614، ومنحة 81441089). ونحن نشكر الدكتور جين يان والدكتور عموم يوجي، لإدارة الطوارئ، مستشفى تشاويانغ في بكين، والدكتور تشو بنغ من قسم "الطب بالموجات فوق الصوتية"، مستشفى تشاويانغ ببكين للمساعدة على إنتاج أشرطة الفيديو.

الدراسة للمبادئ التوجيهية للجامعة الطبية في العاصمة (بكين، الصين أمثلة) لرعاية واستخدام الحيوانات التجريبية. ووافق جميع الإجراءات "الحيوان الأخلاقية اللجنة من العاصمة الطبية جامعة" في الصين.
1-التجريبية الاستعدادات
ملاحظة: تأقلم الإناث محددة خالية من العوامل الممرضة ويستار (الوزن: 200 ± 10 جرام) إلى بيئات تجريبية لمدة أسبوع قبل الإدارة (الظروف البيئية: الضوء/الظلام: 12 ح/ح 12، درجة حرارة 22 ± 2 درجة مئوية، والرطوبة 50 ± 10%).
<ol><li>استخدام مل 10 طازجة من تعليق السلطة الفلسطينية/نبسي (نانوسيليكا Ø:20 ± 5 نانومتر من بلمرة مستحلب في الموقع) المخفف في المحلول الملحي العادي في تركيزات 3.125 و 6.25 12.5 ملغ/مل، على التوالي10. قبل الإدارة، sonicate أن الإيقاف لمدة 20-30 دقيقة ودوامه لمدة 10 دقائق لمنع تراكم جسيمات نانوية.</li>
	<li>تقسيم مجموعة فئران 20 على قدم المساواة إلى أربع مجموعات: مجموعة واحدة لكل تركيز السلطة الفلسطينية/نبسي (0 و 3.125، 6.25 و 12.5 ملغ/مل).</li>
	<li>لتخدير لهم، وضع الفئران في حاوية مغلقة مع 1.5 مل خماسي البروم ثنائي الفينيل (99.5%) أو أي إياكوك أخرى الموافقة على البروتوكولات. بعد 60-90 ثانية للتخدير، التحقق من عدم الرد على دواسة العاكسة. ضمان أن يتم التنفس الفئران.</li>
	<li>وضع الفئران أنيسثيتيزيد على المجلس وإصلاح الأسنان الأمامية مع خط معقمة من النايلون في المجلس أيضا.</li>
	<li>فتح فمه، وكشف عن شرخ المزمار بمساعدة الملقط الجراحي والعدسة الأمامية.</li>
	<li>غرس الفئران مع 0.5 مل تعليق السلطة الفلسطينية/نبسي للرئة كل الفئران لما مجموعة 1 مل باستخدام أنبوب غرامة بإبرة حادة معقمة في القصبات الهوائية الثنائية.</li>
	<li>ضع الفئران على لوحة بلاستيكية في موقف ضعيف وتمكنك من استرداد الفئران ببطء في 5-10 دقيقة.</li>
</ol>2. الفحص بالموجات فوق الصوتية الانصباب الجنبي
<ol><li>استخدام نظام الموجات فوق الصوتية مع محول صفيف خطي (التردد: 8 ميغاهرتز) لدراسة الفئران في أيام 1 و 3، 7 و 1410.</li>
	<li>إعطاء التخدير (10% كلورال هيدرات، 0.35 مل/100 غرام، والقائمة) على الفئران، والتحقق من عدم وجود ردود الفعل الدواسة.</li>
	<li>إزالة الشعر من الصدر وأعلى البطن للفئران باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية. ثم ضع الفئران على لوحة تصاعد في موقف ضعيف.</li>
	<li>تغطية الجلد مع هلام المغلفة، ومن ثم ضع محول على مساحة ربية ومنطقة سوبكوستال للكشف عن السائل الجنبي. ملاحظة: من أجل الكشف عن انصباب دقة، اليسار واليمين الجانبية ومواقف اختيرت لإجراء فحص بالموجات فوق الصوتية.</li>
	<li>وضع الفئران على لوحة بلاستيكية في موقف ضعيف وبعد الفحص بالموجات فوق الصوتية وتتيح استرداد الفئران ببطء في 10 دقيقة.</li>
</ol>3. الصدر ط م المسح الضوئي الانصباب الجنبي
<ol><li>في إدارة ما بعد أيام 7 و 14، تخدير الفئران مع 10% كلورال هيدرات (الملكية الفكرية). تنظر فيه العمق الكافي للتخدير عند الجرذان لن نرد على دواسة ردود الفعل. ملاحظة: الإدارة بعد انتهاء اليوم السابع هو أنسب وقت لمراقبة الانصباب الجنبي بمسح CT.</li>
	<li>ضع الفئران على ورقة بلاستيكية في موقف معرضة وثم مسح على صدره للتحقيق في الانصباب الجنبي استخدام قيراط 64-قناة باستخدام الإعدادات التالية: تكوين كاشف 64 مم × 0.625 مم، 120 كيلوفولت (الذروة)، و 350 من ماس.</li>
</ol>4-جمع الانصباب الجنبي والعزلة من جسيمات نانوية في الانصباب الجنبي
<ol><li>الصدر بعد ط م المسح الضوئي للفئران وتحت التخدير كلورال هيدرات، تحقق منعكس دواسة للفئران وحلاقة الشعر من البطن إلى الصدر، وثم تطهير الجلد باليود.</li>
	<li>جلب الفئران إلى المنطقة الجراحية.</li>
	<li>تحت التخدير، قطع بسرعة 1-1.5 سم في الجلد وعضلات البطن الرهابه على طول خط الوسط مع الحجاب الحاجز سليمة.</li>
	<li>فتح الصدر وفحص تجاويف الجنبي الثنائية بمساعدة الملقط، لا سيما الثنائية الزوايا فرنك الساحلي بعناية. جمع 1-2 مل الانصباب الجنبي الضوء الأصفر مع المحاقن معقمة 2 مل.</li>
	<li>بمجرد القيام بذلك، التضحية الفئران مع IACUC الموافقة على البروتوكول.</li>
	<li>الطرد المركزي الانصباب الجنبي في أنبوب 2 مل لمدة 15 دقيقة في 300 x ز من أجل عزل جسيمات نانوية.</li>
	<li>استخدام قطره من الطبقة العليا وهو السائل مشرق ومراقبة تحت انتقال إلكترون microscope(TEM,) في جهد تعجيل من 60-80 كيلو فولت.</li>
</ol>

<ol><li>Stathopoulos, G. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+factor-kappaB+affects+tumor+progression+in+a+mouse+model+of+malignant+pleural+effusion%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Nuclear factor-kappaB affects tumor progression in a mouse model of malignant pleural effusion.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 34 (2), 142-150 (2006).</li>
<li>Shen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dosage-toxicity-efficacy+relationship+of+kansui+and+licorice+in+malignant+pleural+effusion+rats+based+on+factor+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).</li>
<li>Nel, A., Xia, T., Mädler, L., Li, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxic+potential+of+materials+at+the+nanolevel%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Toxic potential of materials at the nanolevel.</a> Science. 311 (5761), 622-627 (2006).</li>
<li>Maynard, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safe+handling+of+nanotechnology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Safe handling of nanotechnology.</a> Nature. 444 (7117), 267-269 (2006).</li>
<li>Duan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxic+effects+of+silica+nanoparticles+on+zebrafish+embryos+and+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Toxic effects of silica nanoparticles on zebrafish embryos and larvae.</a> PLoS One. 8 (9), 74606(2013).</li>
<li>Skuland, T., Ovrevik, J., Låg, M., Schwarze, P., Refsnes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silica+nanoparticles+induce+cytokine+responses+in+lung+epithelial+cells+through+activation+of+a+p38%2FTACE%2FTGF-%CE%B1%2FEGFR-pathway+and+NF-%CE%BA%CE%92+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Silica nanoparticles induce cytokine responses in lung epithelial cells through activation of a p38/TACE/TGF-α/EGFR-pathway and NF-κΒ signaling.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 279 (1), 76-86 (2014).</li>
<li>Oberdörster, G., Oberdörster, E., Oberdörster, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanotoxicology%3A+an+emerging+discipline+evolving+from+studies+of+ultrafine+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Health+Perspectives%22%5BJournal%5D)">Nanotoxicology: an emerging discipline evolving from studies of ultrafine particles.</a> Environmental Health Perspectives. 113 (7), 823-839 (2005).</li>
<li>Song, Y., Li, X., Du, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+nanoparticles+is+related+to+pleural+effusion%2C+pulmonary+fibrosis+and+granuloma%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Exposure to nanoparticles is related to pleural effusion, pulmonary fibrosis and granuloma.</a> European Respiratory Journal. 34 (3), 559-567 (2009).</li>
<li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterials+in+humans%3A+identification%2C+characteristics%2C+and+potential+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Nanomaterials in humans: identification, characteristics, and potential damage.</a> Toxicologic Pathology. 39 (5), 841-849 (2011).</li>
<li>Zhu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyacrylate%2Fnanosilica+causes+pleural+and+pericardial+effusion%2C+and+pulmonary+fibrosis+and+granuloma+in+rats+similar+to+those+observed+in+exposed+workers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Polyacrylate/nanosilica causes pleural and pericardial effusion, and pulmonary fibrosis and granuloma in rats similar to those observed in exposed workers.</a> International Journal of Nanomedicine. 11, 1593-1605 (2016).</li>
<li>Havelock, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pleural+procedures+and+thoracic+ultrasound%3A+British+Thoracic+Society+Pleural+Disease+Guideline+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Pleural procedures and thoracic ultrasound: British Thoracic Society Pleural Disease Guideline 2010.</a> Thorax. 65, Suppl 2 61-76 (2010).</li>
<li>Jha, A., Ullah, E., Gupta, P., Gupta, G., Saud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sonography+of+multifocal+hydatidosis+involving+lung+and+liver+in+a+female+child%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Sonography of multifocal hydatidosis involving lung and liver in a female child.</a> Journal of Medical Ultrasound. 40 (4), 471-474 (2013).</li>
<li>Hikaru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+analysis+of+70-nm+silica+particles-induced+chronic+toxicity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Histological analysis of 70-nm silica particles-induced chronic toxicity in rats.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 626-629 (2009).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxicity+and+mitochondrial+damage+caused+by+silica+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">Cytotoxicity and mitochondrial damage caused by silica nanoparticles.</a> Toxicology in Vitro. 25, 1619-1629 (2011).</li>
<li>Hikaru, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silica+nanoparticles+as+hepatotoxicants%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Silica nanoparticles as hepatotoxicants.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 496-501 (2009).</li>
<li>Liu, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+and+repeated+dose+toxicity+of+mesoporous+hollow+silica+nanoparticles+in+intravenously+exposed+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Single and repeated dose toxicity of mesoporous hollow silica nanoparticles in intravenously exposed mice.</a> Biomaterials. 32, 1657-1668 (2011).</li>
<li>Ding, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diseases+caused+by+silica%3A+Mechanisms+of+injury+and+disease+development%5BTitle%5D)+AND+%22International+Immunopharmacology%22%5BJournal%5D)">Diseases caused by silica: Mechanisms of injury and disease development.</a> International Immunopharmacology. 2, 173-182 (2002).</li>
<li>Shen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dosage-toxicity-efficacy+relationship+of+kansui+and+licorice+in+malignant+pleural+effusion+rats+based+on+factor+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">The dosage-toxicity-efficacy relationship of kansui and licorice in malignant pleural effusion rats based on factor analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 186, 251-256 (2016).</li>
<li>Ji, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-eight-day+inhalation+toxicity+study+of+silver+nanoparticles+in+Sprague-Dawley+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Inhalation+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Twenty-eight-day inhalation toxicity study of silver nanoparticles in Sprague-Dawley rats.</a> Inhalation Toxicology. 19 (10), 857-871 (2007).</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

بالموجات فوق الصوتية هو الأداة الأكثر ملاءمة لتحديد الأمراض الرئوية، ونظرا لحساسية ممتازة للسائل حرة في التجويف الجنبي11. وهذا لأنه يمكن الكشف بالموجات فوق الصوتية فورا عن التباين في مقاومة الصوتية من الهواء والسوائل في الرئة12. وإلى جانب ذلك، أكثر مرونة في نموذج الحيوانات الصغيرة من قيراط بالموجات فوق الصوتية على الرغم من ذلك، تنعكس الموجات الصوتية الهواء في الرئة وإعاقة من مراقبة التغييرات الخزعات بعد تقطير جسيمات نانوية. ولذلك، نحن جنبا إلى جنب الصدر الأشعة المقطعية والم...

الانصباب الجنبي مظهر سريرية شائعة جداً من الأمراض الرئوية مع مجموعة متنوعة من الأسباب. وجود نموذج انصباب الجنبي حيوانات مفيدة مهم جداً لدراسة هذه الأمراض الرئوية، ودور كل من طبقتين الغشاء الجنبي، وآليات الانصباب الجنبي، ومعاملتها. ومع ذلك، أفادت بعض نماذج الانصباب الجنبي تركز أساسا على الانصباب الجنبي الخبيث أو العوامل البيولوجية بدلاً من جسيمات نانوية في البيئة1،2. هنا، نحن نقدم نموذجا جديداً الانصباب الجنبي بسيطة وآمنة وفعالة.
مع تطوير تكنولوجيا النانو، والتوسع في استخدام نانوبرودوكتس، هناك قلق بشأن المخاطر المحتملة للمواد النانوية للبيئة و صحة الإنسان3،4. المواد النانوية الأخذ بعوامل الخطر، ويحتمل أن تؤدي إلى إخطار جديدة داخل مكان العمل أو عن طريق التلوث البيئي. وتظهر الدراسات في المختبر والمجراه في أن المواد النانوية يمكن أن يؤدي إلى تلف الجهاز متعدد للرئتين، القلب، الكبد، الكلي، والجهاز العصبي، فضلا عن الصحة الإنجابية والجهاز المناعي5،ق6. بالإضافة إلى ذلك، أفادت بعض الدراسات أن سمية محددة من المواد النانوية بسبب تلك الخصائص الفيزيائية الفريدة3،4،7.
وقد أبلغنا أن مجموعة من العمال بالتعرض المهني للمواد النانوية قدم سريرياً مع انصباب التامور والتجويف الجنبي وتليف رئوي والحبيبي8،9. تم عزل جسيمات نانوية السليكا في المرضى هذه الانصباب الجنبي9. من أجل إنتاج والتحقق من الانصباب الجنبي الناجم عن جسيمات نانوية المستنشقة في الإنسان، أجرينا التجربة بغرس بولياكريلاتي/نانوسيليكا (PA/نبسي) عن طريق الجهاز التنفسي في الفئران، الذي يحاكي التنفس البشري في حقيقية البيئة، ووجد أن إعطاء تقطير من السلطة الفلسطينية/نبسي يمكن أن يسفر عن الانصباب الجنبي لدى الفئران. وهنا نقدم لك كيفية جعل الانصباب الجنبي في الفئران بتقطير إعطاء من السلطة الفلسطينية/نبسي، وكيفية عزل جسيمات نانوية في الانصباب الجنبي. هذا النموذج قد تكون مفيدة لدراسة المزيد من نانوتوكسيكولوجي والأمراض الانصباب الجنبي.

نظام <table><tbody><tr><td>الموجات فوق الصوتية دوبلر الملون Acuson S2000</td><td>سيمنز للحلول الطبية ، ماونتن فيو ، كاليفورنيا</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>& nbsp ؛ بولي أكريليت / نانو سيليكا</td><td>جامعة فودان ، شنغهاي ، الصين</td><td></td><td>مصنوعة حسب الطلب مع النانو السيليكا (20 & plusmn; 5) نانومتر</td></tr><tr><td>10٪ هيدرات الكلور</td><td>بكين للأعمال الكيميائية</td><td>302-17-0</td><td></td></tr><tr><td>سرعة الضوء 16 التصوير المقطعي المحوسب الحلزوني</td><td>GE Healthcare ،</td> مركز Wistar الخالي من مسببات الأمراض في الولايات المتحدة <td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>في Lianhelihua (بكين ، الصين)</td><td></td><td>فئران ويستار</td></tr></tbody></table>

نموذج انصباب الجنبي في الفئران بتقطير تحسن من بولياكريلاتي/نانوسيليكا

A Pleural Effusion Model in Rats by Intratracheal Instillation of Polyacrylate/Nanosilica

الانصباب الجنبي نتيجة سريرية تنتشر العديد من الأمراض الرئوية. وجود نموذج انصباب الجنبي حيوانات مفيدة مهم جداً لدراسة هذه الأمراض الرئوية. نماذج الانصباب الجنبي السابقة دفع المزيد من الاهتمام للعوامل البيولوجية بدلاً من جسيمات نانوية في البيئة. وهنا نقدم نموذجا لجعل الانصباب الجنبي في الفئران بتقطير تحسن من بولياكريلاتي/نانوسيليكا، وأسلوب العزل نانوحبيبات في الانصباب الجنبي. قبل إعطاء تقطير بولياكريلاتي/نانوسيليكا مع تركيزات 12.5 3.125 و 6.25 ملغ/kg∙mL، الانصباب الجنبي في الفئران التي عرضت في اليوم 3، وبلغ ذروته في الأيام 7-10 في مجموعات 6.25 و 12.5 ملغ/kg∙mL، ثم ببطء انخفضت واختفت في يوم 14. عند زيادة تركيز بولياكريلاتي/نانوسيليكا، الانصباب الجنبي ينتج أكثر وأسرع. تم الكشف عن هذا السائل الجنبي بالفحص بالموجات فوق الصوتية أو الأشعة المقطعية الصدر المسح الضوئي وأكد تشريح الفئران. جسيمات نانوية والسليكا لوحظت في الانصباب الجنبي لدى الفئران بالمجهر الإلكتروني الإرسال. وأظهرت هذه النتائج أن التعرض إلى بولياكريلاتي/نانوسيليكا يؤدي إلى تنظيم دورات تعريفية الانصباب الجنبي، التي تتمشى مع تقريرنا السابق في البشر. بالإضافة إلى ذلك، هذا النموذج مفيد لدراسة المزيد من نانوتوكسيكولوجي والأمراض الانصباب الجنبي.

استخدام الموجات فوق الصوتية والصدر، وجدنا لا الاراقة الجنبي يوم 1 في جميع الفئات. ومع ذلك، في اليوم 3، الانصباب الجنبي ظهرت في 6.25 و 12.5 ملغ/kg∙mL المجموعات. وكان الانصباب أساسا في زاوية فرينيك حق الساحلي، بينما انصباب التامور قدمت فقط في 12.5 ملغ/kg∙mL مجموعة. وعلاوة على ذلك، في يوم 7، الانصباب الجنبي (1 فيديو) وانصباب التامور (2 فيديو) تم الكشف عن 6.25 ملغ/kg∙mL مجموعة (الشكل 1). الانصباب الجنبي زاد ببطء إلى أقصى حد في ال...

نقدم هنا، وضع بروتوكول لبناء نموذج انصباب الجنبي في الفئران بتقطير تحسن من بولياكريلاتي/نانوسيليكا.

Pleural effusion is a prevalent clinical finding of many pulmonary diseases. Having a useful animal pleural effusion model is very important to study ...

يمكن أن توفر هذه الطريقة نظرة ثاقبة على سمية المواد النانوية ويمكن تطبيقها لدراسة السمية الرئوية. وقد اشتق هذا الأسلوب لدراسة آثار القذف الجنبي الناجم عن التمدد البولي أكريلات/نانوسيليكا. قبل البدء في تقطير, سونيكات جديدة, 10 ملليلتر, polyacrylate / nanosilica تعليق في المالحة العادية لمدة 20 إلى 30 دقيقة, تليها 10 دقائق من دوامة, قبل تخفيف التعليق إلى 3.125, 6.25, و 12.5 مليغرام في تركيزات مليلتر.بعد ذلك ، تأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع في فأر مُقصّر ، وأصلح الأسنان الأمامية للحيوان إلى اللوحة مع قطعة من سلسلة النايلون. باستخدام ملقط و يتيح أمامي، وفتح بلطف الفم لتصور شق من glottis، وإدراج أنبوب غرامة في bronchus الثنائية. ثم، غرس 0.5 ملليلتر من جزيئات polyacrylate /nanosilica من خلال الأنبوب في الرئتين، ووضع الفئران في موقف سوبين مع الرصد حتى الشفاء الكامل.في الأيام الأولى، ثلاثة، سبعة، و 14 بعد تقطير، واستخدام آلة الحلاقة الكهربائية لإزالة الشعر من الصدر والبطن العلوي من كل الفئران تخدير، ووضع الفئران على لوحة تصاعد نظام الموجات فوق الصوتية مع محول صفيف خطي في موقف سوبين. تطبيق هلام الموجات فوق الصوتية على الجلد المكشوف، ووضع محول على الفضاء الوربي ومنطقة تحت سطح الجسم للكشف عن السائل الجنبي. من أجل الكشف عن الانصباب بدقة، حدد مواضع الجانب الأيمن والأيسر لإجراء فحص الموجات فوق الصوتية.في اليوم السابع ، يتم اكتشاف كل من الانصباب الجنبي والانصباب الم pericardial في 6.25 ملليغرام لكل كيلوغرام لكل ملليلتر مجموعة غرست. في اليوم السابع و 14 ، تُشعّب الأشعة المقطعية الصدرية من 12.5 ملليغرام لكل كيلوغرام لكل ملليلتر من الحيوانات المغروسة غير طبيعية في زاوية الكُمَرة الخلفية الحادة ، مما يشير إلى كمية صغيرة من الانصباب الجنبي. يكشف المجهر الإلكتروني للإرسال لعينات الانصباب الجنبي جسيمات نانوية نانوية بشكل فردي وفي مجموعات مع مورفولوجيا تتفق مع تلك التي لوحظت للجسيمات النانوية داخل التعليق المعد.الشيء الأكثر أهمية هو أن نتذكر لتصور شق من glottis وإدخال أنبوب غرامة في bronchus الثنائية. ويمكن أيضا أن تغرس الجسيمات النانوية عن طريق الاستنشاق أو الحقن في الوريد، كما تم إجراء كلتا الطريقتين في الدراسات السابقة. هذه التقنية مفيدة لدراسة تطور الانصباب الجنبي.

a-pleural-effusion-model-rats-intratracheal-instillation

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

فالتجهيزات داخل الرغامى تسليم المواد المذابة مباشرة إلى الرئتين. هذا الإجراء يستهدف تسليم instillate في المناطق البعيدة من الرئة ، وبالتالي فإنه غالبا ما تدرج في الدراسات الرامية إلى دراسة الحويصلات الهوائية. ونحن نقدم بروتوكول بقاء مفصلة عن أداء فالتجهيزات داخل الرغامى في الفئران.

القصبة الهوائية التقطير المباشر للمواد المذابة في الرئة ماوس

يوضح هذا الفيديو إنشاء عدوى الرئة في نموذج قوارض مناعية عن طريق التنبيب وتركيب المعلقات البكتيرية في فصوص الرئة. يتيح هذا النموذج دراسات الفعالية المضادة للبكتيريا في ذات الكفاءة المناعية.

التقطير داخل الشعب الهوائية للمكورات العقدية الرئوية في نماذج القوارض ذات الكفاءة المناعية

الغرس الانتقائي داخل الشعب الهوائية إلى الرئة اليسرى في الفئران يؤدي إلى إصابة حادة حادة أحادية ومحدودة ذاتيا ً التي نماذج متلازمة الضائقة التنفسية الحادة البشرية (ARDS) الناجمة عن شفط حمض المعدة.

نموذج لإصابة الرئة الحادة المحدودة ذاتياً عن طريق الغرس من جانب واحد داخل الشعب الهوائية

وصفها هو ثقافة الخلية وطريقة التعرض لنموذج القصبات الهوائية في المختبر واقعية، والتعرض المتكرر للجسيمات لاختبار السمية.

نموذج ظهاري لواجهة هوائية-سائلة لتعرض واقعي ومكرر للاستنشاق للجسيمات المحمولة جواً لاختبار السمية

هذه التقنية لغرس الأدوية مباشرة في القصبة الهوائية للقوارض حديثي الولادة مهمة في دراسة تأثير الأدوية أو البيولوجيا التي تدار محليا على أمراض الرئة حديثي الولادة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضا استخدام هذه الطريقة للحث على إصابة الرئة في النماذج الحيوانية.

طريقة طفيفة التوغل لتقطير الأدوية داخل القصبة الهوائية في القوارض حديثي الولادة لعلاج أمراض الرئة

تم إنشاء نماذج حيوانية مختلفة للتليف الرئوي باستخدام بليوميسين لتوضيح التسبب في التليف الرئوي وإيجاد أهداف دوائية جديدة. ومع ذلك، فإن معظم نماذج التليف الرئوي التي تستهدف أنسجة الرئة لديها إعطاء غير متساو للأدوية. هنا ، نقترح نموذجا للتليف الرئوي المنتظم الناجم عن إرذاذ بليوميسين الأنف.

نموذج فأر للتليف الرئوي الناجم عن إرذاذ بليوميسين الأنف

تصف هذه الدراسة تقنية لإنشاء نموذج فئران السيليكا مع استنشاق السيليكا من خلال الجسم كله في غرفة الاستنشاق. يمكن للفئران المصابة بالسحار السيليكي عن كثب العملية المرضية لداء السيليكاتس البشري بطريقة سهلة وفعالة من حيث التكلفة مع قابلية جيدة للتكرار.

إنشاء نموذج فأر السحار السيليسي عن طريق تعرض الجسم بالكامل للسيليكا القابلة للتنفس

يصف هذا البروتوكول طريقة لإنشاء نموذج فأر من السحار السيليكي من خلال التعرض المتكرر لمعلقات السيليكا عن طريق التنقيط الأنفي. يمكن لهذا النموذج أن يحاكي بكفاءة وسهولة ومرونة العملية المرضية لداء السيليكات البشري مع قابلية عالية للتكرار والاقتصاد.

نموذج فأر السحار السيليسي الذي تم إنشاؤه عن طريق الاستنشاق المتكرر لغبار السيليكا البلوري

يوضح هذا البروتوكول تقنية الشفط الفموي البلعومي لاستخدامها في نموذج الفئران البيوميسين للتليف الرئوي.

إعطاء البلعوم الفموي للبليوميسين في نموذج الفئران للتليف الرئوي

هنا، نقدم بروتوكولا لنمذجة التليف الرئوي في الفئران باستخدام البليوميسين المنبعث من الرذاذ عبر القصبة الهوائية. تتيح هذه الطريقة المحسنة الولادة بشكل منتظم وكمي ودقيق دون شق جراحي، مما يعزز قابلية تكرار وموثوقية التليف الناتج عن البليومايسين.

طريقة مكررة لتوصيل بليوميسين داخل القصبة الهوائية لنماذج الفئران القابلة للتكاثر وقليلة التوغل للتليف الرئوي

تعلم بروتوكول إنشاء نموذج انصباب الجنبي في الفئران باستخدام بولياكريلات/نانوسيليكا عبر التقطير الرغامي. تُستخدم هذه الطريقة لدراسة سمية النانومواد وتأثيراتها على صحة الرئة.

نموذج انصباب الجنبي في الفئران بتقطير تحسن من بولياكريلاتي/نانوسيليكا

استكشف المزيد من الفيديوهات