Name: الاعتراف برواية كائن ومكان الكائن السلوكية اختبار في الفئران على الميزانية (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: تعلم بروتوكول اختبار الاعتراف بالكائن وموقعه السلوكي في الفئران لتقييم الذاكرة. تُستخدم مهام OLT وNORT مع تصميم حجيرات أكريليك اقتصادية لضمان نتائج موثوقة في أبحاث علم الأعصاب.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم تمويل هذا العمل من قبل NS089938 R00 من المعاهد الوطنية للصحة والتمويل الأولى من إصابات الدماغ المزمن واكتشاف مواضيع جامعة ولاية أوهايو إلى EDK.

<ol><li>Krakauer, J. W., Ghazanfar, A. A., Gomez-Marin, A., Maclver, M. A., Poeppel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroscience+Needs+Behavior%3A+Correcting+a+Reductionist+Bias%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Neuroscience Needs Behavior: Correcting a Reductionist Bias.</a> Neuron. 93 (3), 480-490 (2017).</li>
<li>Lange, F., Seer, C., Kopp, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+flexibility+in+neurological+disorders%3A+Cognitive+components+and+event-related+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+and+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">Cognitive flexibility in neurological disorders: Cognitive components and event-related potentials.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 83, 496-507 (2017).</li>
<li>Barnett, J. H., Blackwell, A. D., Sahakian, B. J., Robbins, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Paired+Associates+Learning+%28PAL%29+Test%3A+30+Years+of+CANTAB+Translational+Neuroscience+from+Laboratory+to+Bedside+in+Dementia+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Topics+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The Paired Associates Learning (PAL) Test: 30 Years of CANTAB Translational Neuroscience from Laboratory to Bedside in Dementia Research.</a> Current Topics in Behavioral Neuroscience. 28, 449-474 (2016).</li>
<li>Eichenbaum, H., Otto, T., Cohen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hippocampus-what+does+it+do%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+and+Neural+Biology%22%5BJournal%5D)">The hippocampus-what does it do?</a> Behavioral and Neural Biology. 57 (1), 2-36 (1992).</li>
<li>Bartsch, T., Wulff, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hippocampus+in+aging+and+disease%3A+From+plasticity+to+vulnerability%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The hippocampus in aging and disease: From plasticity to vulnerability.</a> Neuroscience. 19 (309), 1-16 (2015).</li>
<li>Smith, B. M., Yao, X., Chen, K. S., Kirby, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Larger+Social+Network+Enhances+Novel+Object+Location+Memory+and+Reduces+Hippocampal+Microgliosis+in+Aged+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Aging+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Larger Social Network Enhances Novel Object Location Memory and Reduces Hippocampal Microgliosis in Aged Mice.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 10 (142), 1-16 (2018).</li>
<li>Chieffi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+Influence+on+Hippocampal+Function%3A+Possible+Involvement+of+Orexin-A%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Exercise Influence on Hippocampal Function: Possible Involvement of Orexin-A.</a> Frontiers in Physiology. 14 (8), 85(2017).</li>
<li>Garth, A., Roeder, I., Kempermann, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+in+an+enriched+environment+learn+more+flexibly+because+of+adult+hippocampal+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Hippocampus%22%5BJournal%5D)">Mice in an enriched environment learn more flexibly because of adult hippocampal neurogenesis.</a> Hippocampus. 26 (2), 261-271 (2016).</li>
<li>Brown, R. E., Stanford, L., Schellinck, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developing+standardized+behavioral+tests+for+knockout+and+mutant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Institute+for+Laboratory+Animal+Research+Journal%22%5BJournal%5D)">Developing standardized behavioral tests for knockout and mutant mice.</a> Institute for Laboratory Animal Research Journal. 41 (3), 163-174 (2000).</li>
<li>Barker, G. R., Warburton, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((When+is+the+hippocampus+involved+in+recognition+memory%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">When is the hippocampus involved in recognition memory?</a> Journal of Neuroscience. 31 (29), 10721-10731 (2011).</li>
<li>Savage, S., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+behavior+testing%3A+memory%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Animal behavior testing: memory.</a> British Journal of Anaesthesia. 113 (1), 6-9 (2015).</li>
<li>Fanselow, M. S., Dong, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+the+dorsal+and+ventral+hippocampus+functionally+distinct+structures%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Are the dorsal and ventral hippocampus functionally distinct structures?</a> Neuron. 65 (1), 7-19 (2010).</li>
<li>Vogel-Ciernia, A., Wood, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examining+object+location+and+object+recognition+memory+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Examining object location and object recognition memory in mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. 69, 1-17 (2014).</li>
<li>Ammassari-Teule, M., Passino, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dorsal+hippocampus+is+selectively+involved+in+the+processing+of+spatial+information+even+in+mice+with+a+genetic+hippocampal+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Psychobiology%22%5BJournal%5D)">The dorsal hippocampus is selectively involved in the processing of spatial information even in mice with a genetic hippocampal dysfunction.</a> Psychobiology. 25 (2), 118-125 (1997).</li>
<li>Le Merrer, J., Rezai, X., Scherrer, G., Becker, J. A., Kieffer, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+hippocampus-dependent+and+facilitated+striatum-dependent+behaviors+in+mice+lacking+the+delta+opioid+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Impaired hippocampus-dependent and facilitated striatum-dependent behaviors in mice lacking the delta opioid receptor.</a> Neuropsychopharmacology. 38 (6), 1050-1059 (2013).</li>
<li>Hattiangady, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+location+and+object+recognition+memory+impairments%2C+motivation+deficits+and+depression+in+a+model+of+Gulf+War+illness%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Object location and object recognition memory impairments, motivation deficits and depression in a model of Gulf War illness.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, 78(2014).</li>
<li>Oliveira, A. M., Hawk, J. D., Abel, T., Havekes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-training+reversible+inactivation+of+the+hippocampus+enhances+novel+object+recognition+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Post-training reversible inactivation of the hippocampus enhances novel object recognition memory.</a> Learning and Memory. 17 (3), 155-160 (2010).</li>
<li>Cohen, S. J., Stackman, R. W. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+rodent+hippocampal+involvement+in+the+novel+object+recognition+task%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Assessing rodent hippocampal involvement in the novel object recognition task.</a> Behavioral Brain Research. 285, 105-117 (2014).</li>
<li>Cohen, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Rodent+Hippocampus+Is+Essential+for+Nonspatial+Object+Memory%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">The Rodent Hippocampus Is Essential for Nonspatial Object Memory.</a> Current Biology. 23 (17), 1685-1690 (2013).</li>
<li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+exposure+to+males%2C+including+men%2C+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nature Methods. 11 (6), 629-632 (2014).</li>
<li>Ennaceur, A., Delacour, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats.+1%3A+Behavioral+data%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats. 1: Behavioral data.</a> Behavioral Brain Research. 31 (1), 47-49 (1988).</li>
<li>Leger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Object+recognition+test+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Object recognition test in mice.</a> Nature Protocols. 8 (12), 2531-2537 (2013).</li>
<li>Wolf, A., Bauer, B., Abner, E. L., Ashkenazy-Frolinger, T., Hartz, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+Behavioral+Test+Battery+to+Assess+Learning+and+Memory+in+129S6%2FTg2576+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Library+of+Science+ONE%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive Behavioral Test Battery to Assess Learning and Memory in 129S6/Tg2576 Mice.</a> Public Library of Science ONE. 11 (1), e0147733(2016).</li>
<li>Ennaceur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-trial+object+recognition+in+rats+and+mice%3A+methodological+and+theoretical+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">One-trial object recognition in rats and mice: methodological and theoretical issues.</a> Behavioural Brain Research. 215, 244-254 (2010).</li>
<li>Lueptow, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Object+Recognition+Test+for+the+Investigation+of+Learning+and+Memory+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (126), e55718(2017).</li>
<li>Wasserstein, R. L., Lazar, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ASA%27s+Statement+on+p-Values%3A+Context%2C+Process%2C+and+Purpose%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Statistician%22%5BJournal%5D)">The ASA's Statement on p-Values: Context, Process, and Purpose.</a> The American Statistician. 70 (2), 129-133 (2016).</li>
<li>Ranstam, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+the+P-value+culture+is+bad+and+confidence+intervals+a+better+alternative%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Why the P-value culture is bad and confidence intervals a better alternative.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 20 (8), 805-808 (2012).</li>
</ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

الاختبارات المعرفية فعالة عزل وتقييم الوظيفة العصبية لمناطق محددة من الدماغ بدراسة السلوك في بيئة تسيطر عليها1. وقد صممت في البشر، ومهام محددة لتقييم أداء المناطق الدماغ المستهدفة، مثل بطاقة ولاية ويسكونسن فرز المهام للدالة بريفرونتال أو شركاء مقترن بالتعلم اختبار (Cambridge العصبية اختبار الآلي البطارية جامعة كيمبردج) لدالة هيبوكامبال2،3. صممت هذه الاختبارات لدراسة الوظائف في مناطق محددة من الدماغ في البشر بتقييم السلوكيات التي تنجم عن النشاط العصبي لتلك المناطق. أن الهدف النهائي للبحوث الطبية الحيوية الأكثر هو تحسين الصحة البشرية؛ ومع ذلك، لا يمكن إجراء العديد من الدراسات لوظيفة الدماغ في الصحة أو المرض أخلاقيا مع المشاركين البشرية. للدراسات التي يتعذر استخدام المشاركين البشرية، غالباً ما القوارض الصغيرة مثل الفئران نموذج للاختيار. يسمح استخدام نماذج الماوس للسيطرة المباشرة على التلاعب التجريبية بما في ذلك تحوير الجينات، وتنظيم دورات تعريفية للإصابة أو التحوير حتى لنشاط الدائرة من خلال تقنيات أوبتوجينيتيك. اختبار سلوكية من الفئران، مماثلة للتجارب البشرية، ويهدف إلى تقييم تأثير المتغيرات التجريبية على وظيفة الدماغ بقياس السلوكيات التي تعتمد على مناطق محددة.
الحصين بنية أساسية لتكوين الذاكرة في البشر والقوارض4. وبشكل أكثر تحديداً، يلعب الحصين جزءا حاسما في الذاكرة التصريحية التي تنطوي على بيانات علائقية، ولكن الذاكرة غير الإجرائية، التي تعتمد على هذه المراكز الحركية من الدماغ4. وظيفة الذاكرة هيبوكامبال تم كيز دراسة عبر العديد من ميادين علم الأعصاب لأنها حساسة رائع لاضطراب. اضطرابات سلبية تتراوح فترات طويلة من التوتر والشيخوخة للمضبوطات والسكتة الدماغية المرتبطة بالضرر هيبوكامبال5. وفي المقابل، تحسين التدخلات الإيجابية، مثل التفاعل الاجتماعي، وإثراء البيئة المادية، أو ممارسة، الدالة هيبوكامبال6،،من78. يمكن أن تكشف الدراسات القوارض مع الاختبار السليم للذاكرة هيبوكامبال ثاقبة الوسطاء الخلوية والجزيئية للذاكرة، فضلا عن آثار التدخلات البيئية المختلفة على الدالة هيبوكامبال.
في القوارض، وضعت عدة اختبارات لدراسة الحصين-تعتمد على التعلم والذاكرة9،،من1011. يمكن تقسيم على نطاق واسع إلى المهام التي تتطلب حافزا مع التكافؤ العاطفية لإحداث تغيير في السلوك، والمهام التي تعتمد على تفضيل القوارض بالتحقيق المحفزات رواية11. على سبيل المثال، تكييف الخوف السياقية، أزواج حافز غير سارة (صدمة القدم) مع السياق البيئي والذاكرة الاختبارات ثم في وقت لاحق للسياق بقياس الخوف الناجم عن تجميد السلوك9،11. متاهة المياه موريس ونظيرتها الجافة، متاهة بارنز، استخدام التعزيز الخارجي السلبي لتعزيز التعلم المكاني4،11. وفي كل حالة، تسعى القوارض الهروب من حالة البرود، يجري مغمورة في المياه الباردة أو عرضه على منصة المضاءة، على التوالي. المتاهة الذراع شعاعي، على النقيض من ذلك، يعتمد على التعزيز الإيجابي كالحيوانات استخدام السلوك مساحات العلف الطبيعي مقترنة بالذاكرة المكانية لاسترداد المواد الغذائية الصغيرة المكافآت4،11. وتستخدم على نطاق واسع هذه المهام وأثمرت المعارف التأسيسية حول الذاكرة هيبوكامبال. ومع ذلك، اختبارات تعزيزات خارجية أو الخوف يحفز المحفزات مثل صدمة إضافة مكون عاطفي إلى هذه السلوكية الإيجابية والسلبية التي في بعض الحالات قد تكون غير مرغوب فيها. على سبيل المثال، هيبوكامبي الظهري والبطني ترتبط بمهام متميزة، الذاكرة المكانية مقابل العاطفي التنظيم، على التوالي12. الاختبارات التي تعتمد على ردود فعل عاطفية للمنبهات قد لا تعكس بدقة الذاكرة المكانية البصر إذا كانت وظائف التنظيم العاطفي هيبوكامبال البطني تتأثر أيضا.
قلت هو اختبار بسيط وفعال يوفر قدرا من الذاكرة المكانية الحصين-تعتمد على13. المهمة يعتمد على تفضيل الحيوان الجوهرية للجدة دون تعزيزات خارجية إضافية ويمكن لذلك عادة تجنب المضاعفات المرتبطة بردود فعل عاطفية التفاضلية13. ويرد هذا البروتوكول لقلت للفئران، ولكن كما أنها فعالة في الفئران إذا يتم تحجيم أبعاد المعدات على النحو المناسب. البروتوكول يتكون من التأقلم بماوس إلى ساحة مفتوحة--الاختبار الميداني ومن ثم السماح للتحقيق في الأجسام 2 فيما يتعلق بالإشارات البيئية المكانية. ثم يتم إزالة الماوس من الساحة، وخلال مهلة (الفاصل الزمني بين المحاكمة أو ITI)، يتم نقل أحد الكائنات. بعد ITI، يعيد إلى الساحة الماوس ويسمح لاستكشاف بحرية. وبصفة عامة، الفئران تفضل الجدة، وإذا كانت تذكر مكان الكائنات من تعرضها الأولية، أنها سوف تنفق المزيد من الوقت التحقيق الكائن تم نقله. الحيوانات مع آفات هيبوكامبال بضعف التعلم السياقية المكانية وتثبت عليه أي تفضيل للكائنات في14،موقع رواية15.
قلت يمكن استخدامها بشكل مستقل أو بالاشتراك مع اختبار إضافية من الذاكرة التي تعتمد على النشاط العصبي من عدة مناطق على الدماغ، مهمة التعرف على كائن رواية (نورت). نورت مطابق لقلت حتى مرحلة الاختبار، عند أحد الكائنات التي يتم استبدال كائن رواية بدلاً من نقله إلى موقع جديد. كما الحال مع قلت، سيفضل الفئران مع ذاكرة جيدة للكائنات تلقائياً في التحقيق في موضوع الرواية. على النقيض من كائن موقع الذاكرة، التي تعتمد اعتماداً كبيرا على ركائز هيبوكامبال، يظهر الكائن الاعتراف بالذاكرة إلى الاعتماد على مجموعة متنوعة من مناطق الدماغ ومشاركة الحصين غير مستقر. العديد من الدراسات تقرير أن الآفات هيبوكامبال أو المنظمة لا تؤثر على الكائن رواية تفضيل10،13،،من1617، بينما يجد آخرون18،مقابل19. ومع ذلك، لا تزال مهمة شائعة استخدام لتقييم وظيفة الذاكرة عامة في القوارض.
ويحدد البروتوكول المعروضة هنا الخطوات التي تنطوي عليها في بدء وتنفيذ قلت ونورت، سواء منها استخدام ساحة مفتوحة--الاختبار الميداني. معدات اختبار سلوكية متاحة تجارياً يمكن أن تكون التكلفة باهظة، خاصة بالنسبة لمختبرات أصغر. ويشمل هذا البروتوكول بالتصميم وخطوات بسيطة لبناء الساحات الداخلية بتكلفة أقل ودون أدوات متخصصة. وعلاوة على ذلك، تفاصيل هذا البروتوكول في مجال اختبار سلوكية مثالية، بما في ذلك الموضع من الساحات والعظة السياقية، ونظام تسجيل الفيديو أن يمهد الطريق لتنفيذ البروتوكولات قلت ونورت. وترد نتائج الممثل للدراسات الناجحة فضلا عن معيبة، مؤكدا على أهمية الاستفادة المثلى من جميع المواد والإجراءات لكل دراسة.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>الوصف</td>
			<td>الخيار</td>
			<td>الكمية</td>
		</tr>
<tr>
<td>الجزء ألف: ورقة اﻷكريليك-"أبيض معتم" (0.635 سم × 40 سم × 40.64 سم)</td>
			<td>حواف الموجه</td>
			<td>2</td>
		</tr>
<tr>
<td>الجزء باء: ورقة اﻷكريليك-"أبيض معتم" (0.635 سم × 40 سم × 41.91 سم)</td>
			<td>حواف الموجه</td>
			<td>2</td>
		</tr>
<tr>
<td>الجزء جيم: ورقة اﻷكريليك-"أبيض معتم" (0.635 سم × 41.91 سم × 41.91 سم)</td>
			<td>حواف الموجه</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>أكريليك الأسمنت (1 نقطة).</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>قضيب قياس 16 هيبو</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>مربع مجموعة</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>كاميرا ويب عالية الدقة</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>برنامج التقاط الفيديو</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>USB 2.0 تمديد الكابلات</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>قناة الكابل</td>
			<td>نا</td>
			<td>1</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 1: قائمة مفصلة من المواد والمعدات اللازمة لاختبار سلوكية.

<table><tbody><tr><td>علامة بيضاء - 9٪ أكريليك مصبوب ملون شفاف وغير شفاف (Chemcast)</td><td>TAP Plastics</td><td>NA</td><td>1/4 بوصة × 15.75 بوصة × 15.75 بوصة مع علامة حواف موجهة</td></tr><tr><td>أبيض - 9٪ أكريليك مصبوب ملون شفاف وغير شفاف (Chemcast)</td> <td>TAP Plastics</td><td>NA</td><td>1/4 بوصة × 15.75 بوصة × 16.5 بوصة مع علامة حواف موجهة</td></tr><tr><td>أبيض - 9٪ أكريليك مصبوب ملون شفاف وغير شفاف (Chemcast)</td> <td>TAP Plastics</td><td>NA</td><td>1/4 بوصة × 16.5 بوصة × 16.5 بوصة مع حواف</td></tr> موجهة <tr><td>TAP الأسمنت الأكريليك (1 نقطة)</td><td>TAP Plastics</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>16 G Hypo Applicator</td><td>TAP Plastics NA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>لاول مرة برنامج التقاط الفيديو Pro Edition NCH</td><td>Software</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Stanely SAE / Metric Comb Square</td><td>Grainger</td><td>6R171</td><td></td></tr><tr><td>Logitech Pro Stream Webcam C922x</td><td>CDW</td><td>4429927</td><td></td></tr><tr><td>Belkin 16 'USB 2.0 كابل تمديد نشط</td><td>CDW</td><td>570691</td><td></td></tr><tr><td>Panduit Pan-Way LD Surface Raceway (8 ')</td> <td>CDW</td><td>300902</td><td></td></tr><tr><td>الإشارات المكانية / البيئية</td> كائنات <td>NA</td><td></td><td>المتغيرة</td></tr><tr><td>لاختبار</td><td></td><td>متغير NA</td><td></td></tr><tr><td>70٪ الإيثانول</td><td>متغير</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>الشريط على الوجهين</td><td>متغير</td><td>NA</td><td></td></tr></tbody></table>

الاعتراف برواية كائن ومكان الكائن السلوكية اختبار في الفئران على الميزانية

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

اختبار سلوكية ذات الصلة اثولوجيكالي هو عنصر حاسم في أي دراسة يستخدم الماوس نماذج لدراسة آثار المعرفي لمختلف التغيرات الفسيولوجية أو المرضية. كائن الموقع (OLT) والكائن رواية الاعتراف بالمهمة (نورت) مهمتين السلوكية فعالة تستخدم عادة للكشف عن وظيفة والصحة النسبية لمناطق محددة من الدماغ تشارك في الذاكرة. في حين أن كلا من هذه الاختبارات استغلال تفضيل الملازمة للفئران للجدة لتكشف عن الذاكرة لسبق واجهت الكائنات، قلت يقيم أساسا التعلم المكانية، التي تعتمد اعتماداً كبيرا على النشاط هيبوكامبال. وفي المقابل، يقيم نورت، التعلم غير المكانية من هوية الكائن، الذي يعتمد على مناطق متعددة في الدماغ. تتطلب كلا المهمتين ساحة مفتوحة--الاختبار الميداني، والكائنات بما يعادل قيمة جوهرية للفئران ومنبهات بيئية مناسبة، ومعدات تسجيل الفيديو والبرمجيات. النظم المتاحة تجارياً، في حين ملائمة، يمكن أن يكون مكلفاً. هذه المخطوطة تفاصيل طريقة بسيطة وفعالة من حيث التكلفة لبناء الساحات وإعداد المعدات اللازمة لأداء قلت ونورت. وعلاوة على ذلك، يصف المخطوط بروتوكولا اختبار كفاءة يتضمن قلت ونورت ويوفر أساليب نموذجية للحصول على البيانات وتحليلها، فضلا عن نتائج تمثيلية. يمكن توفير نظرة متعمقة في وظيفة الذاكرة لمختلف نظم نموذجية الماوس الإنجاز الناجح لهذه الاختبارات وتقييم المناطق العصبية الأساسية التي تدعم هذه الوظائف.

ويقدم الشكل 3 أمثلة نموذجية النتائج الإيجابية والسلبية التي تم الحصول عليها مع الذكور والإناث البالغين C57Bl/6 أجهزة الماوس باستخدام هذا البروتوكول6. تفسير البيانات قلت ونورت دائماً ينطبق على البيانات المجمعة من مجموعة (انظر المناقشة الواردة أدناه). الوقت تحقيق لماوس واحدة لا يمكن تفسيره كالذاكرة أو نقص في الذاكرة. ومع ذلك، أداء مجموعة من الفئران (أي.، عينات متعددة) ويمكن مقارنة بمجموعات أخرى أو إلى مستويات ثابتة من فرصة استخدام الاختبارات الإحصائية. أثناء محاكمة تدريب نموذجي، مجموعات من الفئران لا تظهر أفضلية كبيرة في المتوسط لأي من الكائنات كما هي سواء رواية على قدم المساواة ولا تملك أي قيمة سلبية أو إيجابية جوهريا للفئران (الشكل 3 ألف و 3 باء). إذا إظهار البيانات التجميعية لمجموعة من الفئران أفضلية كبيرة لكائن واحد على الآخر أثناء التدريب، هذه الكائنات يجب عدم استخدام نظراً لأن التفضيل الأصيل/النفور سوف يتيه النتائج في المحاكمات اللاحقة. بالإضافة إلى ذلك، وقت التحقيق التام لجميع الفئران يجب أن تستوفي الحد أدنى من معايير (مجموعة تقليديا في 20 ثانية21) وينبغي مقارنة للتأكد من أنه لا يوجد أي اختلاف الأساس في التحقيق التي قد تؤثر على الاختبارات اللاحقة من الذاكرة.
خلال قلت، ينعكس الذاكرة للموقع الكائن بالفئران التي تنفق في المتوسط إلى حد كبير أكثر من 50% من مجموع التحقيق وقت مع الكائن تم نقله (الشكل 3A). إذا تختلف أوقات التحقيق التام للفئران الفردية إلى حد كبير، أن النتائج أفضل يصور كمؤشر لتمييز للكائنات (الشكل 3B). الزيادة الكبيرة في مؤشر متوسط التمييز في الشكل 3 (ب) يشير إلى أن الفئران أنفاق المزيد من الوقت مع الكائن بعد ذلك انتقلت. ما إذا كانت تقاس بالزيادة في النسبة المئوية من الوقت أو مؤشر التمييز، تقترح الزيادة في التحقيق للكائن بعد فإنه يتم نقل أن الفئران تذكر حيث يوجد الكائن أثناء التدريب.
محاكمة هذا البروتوكول الأخير يقيم الكائن الاعتراف بالذاكرة. يوضح مثال ممثل مع مجموعة واحدة من أجهزة الماوس أعلى متوسط النسبة مئوية لوقت التحقيق (الشكل 3) فضلا عن التمييز الإيجابي لمؤشر (الشكل 3D) مقارنة بقيم عنصر التحكم الثابتة 50% و 0، على التوالي. مع البيانات قلت، إذا كان هناك تباين كبير في وقت التحقيق التام بين الفئران الفردية، مؤشر التمييز هو المرجح أن أفضل طريقة تمثيل هذه البيانات. 3E الشكل يبين مثال لمقارنة المجموعة 2 في نورت وبعض المضاعفات الإحصائية التي يمكن أن تنشأ في هذه الاختبارات (انظر المناقشة). بينما يظهر تي-اختبار عينة واحدة للمجموعة ب التحقيق إلى حد كبير فوق 50%، نفس اختبار للمجموعة الأولى لا. وهذا الاستنتاج لا يعني أن A و B تختلف عن بعضها البعض. لتحديد مجموعة الاختلافات، يجب إجراء منفصلة اثنين-غير حدودي مان-ويتني اختبار عينة مقارنة المجموعات ب إلى أ. اختبار مان-ويتني غير حدودي عينة اثنين من هذه البيانات المجموعة تمثيلاً يظهر أي فرق معتد به (p = 0.66) بين المجموعتين في النسبة المئوية لوقت التحقيق رواية كائن.
على حد سواء أن قلت ونورت حساسة للغاية للقيمة الجوهرية للكائنات واختبار شامل للكائن المعادلة ضروري للتأكد من أنه لا يوجد أي تحيز الجوهرية التي يمكن الخلط بين النتائج. 3F الشكل و الجيل الثالث 3g إظهار مثال لاختيار كائن غير مناسب. في اختبار تجريبي مع حجم عينة 4، الفئران أظهرت اتجاها نحو الإنفاق أقل من 50% وقت التحقيق مع الكائن A عندما يقترن ضد الكائن ب (3F الشكل). عند هذه الكائنات ثم استخدمت في نورت مع الكائن بالكائن الرواية وحجم عينة أكبر من 16، أمضى الفئران إلى حد كبير أقل من 50% وقت التحقيق مع الكائن A (الشكل 3). هذا النفور من الكائن رواية يتم التعرف عليها بسهولة هنا كوجود خلل تقني في التجربة ومثالا لماذا الاختبار التجريبي للكائنات لتفضيل الأصيل/النفور أمر ضروري.
<img alt="مخطط نتائج اختبار التعرف على الكائنات الجديدة ؛ مؤشر التمييز؛ تحليل السلوك" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58593/58593fig3.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> الشكل 3: بيانات الاختبار السلوكي مع نوع البرية الكبار C57Bl/6 الفئران. (أ) مقارنة بين التحقيق إجمالي النسبة المئوية لكائن تم نقله أثناء التدريب للمحاكمة مقابل يظهر قلت الزيادة الكبيرة في التحقيق، بعد نقل الكائن. ف &lt; 0.0001، اختبار t المزدوجة. (ب) نتائج تمثيلية للتحقيق كائن تم نقله خلال التدريب والتجارب قلت عرض كمؤشر لتمييز وبالمثل تظهر زيادة كبيرة في التحقيق للكائن بعد فإنه يتم نقل. ف &lt; 0.0001، اختبار t المزدوجة. (ج) التحقيق مجموع نسبة الوقت الكائن الرواية في نورت يبين أفضلية كبيرة للتحقيق في موضوع الرواية. * * p = 0.0024، واحد--نموذج اختبار t مقابل. 50 في المائة. (د) نتائج تمثيلية للتحقيق وجوه الرواية في نورت عرض كما تظهر مؤشر تمييز وبالمثل تفضيل للتحقيق في موضوع الرواية. * * p = 0.0024، واحد--نموذج اختبار t مقابل 0. (ه) ممثل نتائج تحليل نورت تشمل مجموعتين مختلفتين من الفئران. المجموعة ب يختلف اختلافاً كبيرا عن 50% باختبار t عينة واحدة (* * ف = 0.0024)، ولكن المجموعة لا (p = 0.5837). في تحليل منفصل، لمقارنة المجموعات، يستخدم اختبار مان-ويتني عينة اثنين بسبب أحجام متفاوتة المجموعة وتم العثور على لا يوجد فرق كبير في التحقيق (p = 0.66، ns). (و) مرة نسبة مع كائن أثناء المحاكمات التحقق من الصحة في حجم عينة صغير يظهر اتجاها نحو النفور من الكائن. p = 0.2159، واحد--نموذج اختبار t. (ز) مع عينة أكبر حجماً والكائن من (و) تستخدم ككائن رواية في نورت، يوجد نفور كبير للكائن، على الرغم من أنها رواية الكائن. * p = 0.0270، واحد--نموذج اختبار t. وهذا مثال لعطل فني في اختيار الكائن. وترد البيانات يعني ± sem. البيانات من لوحات ه ج هي مقتبسة من منشور سابق6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58593/58593fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

هنا نقدم بروتوكول الذي يشمل تعليمات شاملة لإنشاء اقتصادا مكان الكائن مورين والكائن رواية الاعتراف السلوكية الاختبار، بما في ذلك تصميم والتكلفة، وبناء المعدات المطلوبة، وكذلك تنفيذ اختبار سلوكية، وجمع البيانات وتحليلها.

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

يمكن أن يساعد هذا الأسلوب في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول تنظيم الذاكرة. على سبيل المثال، نحدد دور بروتينات محددة في الذاكرة عن طريق اختبار الفئران خروج المغلوب المعدلة وراثيا في هذه المهام. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها طريقة سريعة وفعالة من حيث التكلفة لإجراء اختبار الذاكرة في أي مختبر.مظاهرة لبناء الساحة أمر بالغ الأهمية، لأن لحام المذيبات سوف تسفر عن نتائج قوية فقط إذا تم تنفيذها بعناية. تبدأ من خلال الحصول على خمس أوراق من الاكريليك، والاسمنت الاكريليك، وطبق 16 قياس النابوة. إزالة طلاء ورق واقية من أوراق الاكريليك.ثم الجافة تناسب جميع المواد للتأكد من أن الأحجام صحيحة. المقبل، وتجميع وتحميل حقنة مع الاسمنت الاكريليك. محاذاة الحافة الطويلة من الجدار الخارجي مع الحافة العليا للقاعدة والتأكد من أنها عمودي على بعضها البعض باستخدام مزيج أو مربع آلة.ثم استخدام حقنة لتطبيق حبة صغيرة وثابتة من الاسمنت مباشرة إلى زاوية القطعتين التي انضمت. ضع القطعتين في مكانهما لمدة خمس دقائق حتى يتم تعيينهما في البداية. كرر نفس الخطوات لإرفاق الجدار الخارجي الآخر بالقاعدة.ثم، نعلق اثنين من الجدران الداخلية، واحد في وقت واحد، والقاعدة مع الاسمنت الاكريليك. وأخيرا ، استخدم الحقنة لتطبيق حبة صغيرة وثابتة من الاسمنت مباشرة إلى الزاوية التي يتم تشكيلها الآن من قبل الجدار الخارجي والجدار الداخلي. تبدأ الدورة التعود بتقسيم الفئران إلى مجموعات من أربعة، ونزل لهم في أقفاص عقد نظيفة الفردية.بعد ذلك، أحضر مجموعة واحدة من الفئران إلى غرفة الاختبار والسماح لهم بالتأقلم لمدة 30 دقيقة على الأقل. بعد التأقلم، ابدأ في تسجيل الفيديو. وضع كل فأر في الساحة التي تواجه جدران زاوية الافراج عنهم، والسماح للفئران لاستكشاف الساحات بحرية لمدة ست دقائق.ثم، توقف عن تسجيل الفيديو، وارجع الفئران إلى أقفاصها القابضة النظيفة خلال الفاصل الزمني بين المحاكمات. تنظيف جميع الساحات مع مرفق الحيوانية طرق التنظيف الموصى بها، مثل المسح مع الإيثانول 70٪ لتقليل العظة الشم. وأخيرا، بعد الانتهاء من ما مجموعه ثلاث جلسات التعود، والعودة جميع الفئران إلى أقفاص وطنهم.بعد 24 ساعة، أحضر نفس المجموعة من الفئران إلى غرفة الاختبار، واسمح لهم بالتأقلم مع غرفة الاختبار لمدة 30 دقيقة على الأقل، كما حدث قبل جلسات التعود في اليوم السابق. إجراء تجربة التدريب باستخدام اثنين من الكائنات وضعت في الساحة. الصق الأشياء بشريط مزدوج الوجه ستة بستة سنتيمترات بعيدا عن ركنين غير مفرجين، بحيث يتم موازنتهما في الحلبة.السماح للفئران للتحقيق في الساحة والكائنات بحرية لمدة 10 دقائق. ثم إيقاف تسجيل الفيديو. ضع الفئران مرة أخرى في أقفاصها القابضة النظيفة لمدة 20 دقيقة ، وانظف المناطق بالإيثانول.بعد ذلك، لتنفيذ المهمة OLT موقع الكائن، نقل أحد الكائنات المستخدمة في التجربة التدريب إلى زاوية جديدة غير الافراج، ولصق الكائن ستة سنتيمترات من كل جدار من تلك الزاوية مع الشريط على الوجهين. كرر تسجيل الفيديو نفسه من الفئران في المنطقة لمدة 10 دقائق، كما هو موضح سابقا. وأخيراً، لتنفيذ مهمة التعرف على الكائن رواية NORT، استبدال الكائن الذي لم يتم نقله أثناء OLT مع كائن رواية، ولصق الكائن رواية ستة سنتيمترات من جدارين من الزاوية مع الشريط على الوجهين.كرر تسجيل الفيديو نفسه من الفئران في المنطقة لمدة 10 دقائق، كما هو موضح سابقا. أثناء OLT، تنعكس الذاكرة لموقع الكائن بواسطة مجموعة من الماوس الإنفاق، في المتوسط، وقت أكثر بشكل ملحوظ مع كائن بعد أن انتقلت. ويمكن أيضاً أن يُمثَّل ذلك على أنه زيادة في مؤشر التمييز.في NORT، وتنعكس الذاكرة لموقع الكائن من قبل مجموعة من الفئران الإنفاق، في المتوسط، أكثر بكثير من 50٪ من وقت التحقيق مع الكائن الرواية أو عرض مؤشر التمييز أكبر بكثير من الصفر. اختيار الكائنات التي لا يوجد لدى أجهزة الماوس تفضيل متأصل لها هو المفتاح. على سبيل المثال، في اختبار تجريبي بحجم عينة من أربعة، أظهرت الفئران اتجاهًا نحو إنفاق أقل من 50٪ من وقت التحقيق مع الكائن A عندما يتم إقرانه ضد الكائن B.When تم استخدام الكائن A ككائن جديد في NORT ، مع حجم عينة أكبر من 16 ، أنفقت الفئران أقل بكثير من 50٪ من وقت التحقيق مع الكائن A.هذه البيانات تشير إلى نفور متأصل إلى A.During هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر أن تنظف جميع الكائنات والساحات بين الاستخدام.في هذه الطريقة، يمكن تسجيل التحقيق في الكائن يدويًا بواسطة الباحثين أو باستخدام البرامج التجارية. البرمجيات لديها تكاليف أعلى مقدما ولكن، بمجرد معايرة، قد توفر الوقت والموارد المالية على المدى الطويل.

novel-object-recognition-object-location-behavioral-testing-mice-on

Research

JoVE Journal

Behavior

سلوك

نظام آلي بالكامل لقياس الخصائص ذات مغزى من الناحية الفسيولوجية للآليات التوسط توطين المكانية، الزمانية التعريب، والمدة، ومعدل وتقدير الاحتمالات، تقييم المخاطر، والاندفاع، والدقة والإحكام من الذاكرة، من أجل تقييم آثار التلاعب الجيني والدوائي على آليات التأسيسية الإدراك في الفئران.

الآلي، الكمي المعرفي / الفحص السلوكية من الفئران: للحصول على الوراثة، الصيدلة، الإدراك الحيوانية والتعليمات الجامعية

مراقبة لفترة طويلة وشاملة من الفئران في بيئة المنزل القفص يوفر فهما أعمق للسلوك المنحرف في نماذج الفئران من أمراض الدماغ. وتصف هذه الورقة محطة السلوكية المتكاملة (INBEST) باعتبارها عنصرا أساسيا في التحليل السلوكي المعاصر.

السلوكية Phenotyping من نماذج الأمراض الفئران مع محطة المتكاملة السلوكية (INBEST)

يصف هذا البروتوكول وسيلة لقياس مؤانسة الماوس. وتصويرها بالفيديو الفئران لأنها تتحرك وتتفاعل في قفص خاص. معالجة الفيلم يسمح لتقدير الآلي للمؤانسة مع دقة ممتازة والموثوقية.

تقييم التجريبية من الفأر المؤانسة باستخدام الآلي صورة نهج المعالجة

السلوكيات المقيدة والمتكررة (RRBs) تعطل حياة الأفراد المصابين.  يصعب نمذجة هذه السلوكيات في القوارض ، مما يجعل البحث الطبي الحيوي الأساسي في العلاجات أو التدخلات المحتملة للوائح الراديو.  نصف هنا استكشاف الأشياء الجديدة على أنه اختبار محتمل ل RRBs ذات الترتيب الأعلى في الفئران.

رواية استكشاف كائن باعتباره الفحص المحتملة لالعالي ترتيب المتكرر السلوك في الفئران

وصف هنا هو نهج فرز السلوكية نظموا التي يمكن استخدامها لفحص للمركبات التي تظهر في فعالية الجسم الحي على السلوكيات الحركية المعرفية والوظيفية في نماذج الماوس المعدلة وراثيا من β-الداء النشواني و تاوباثي. يتم تحسين هذه الأساليب لمركبات الشاشة للنشاط في مهام الذاكرة قصيرة الأجل والعمل.

تقييم التناوب العفوي، التعرف على الكائن الرواية وتسلسل الأطراف في الماوس المعدلة وراثيا نماذج من اميلويد β وتاور الاعتلال العصبي

اختبار التعرف على الكائن (ORT) مقايسة بسيطة وفعالة لتقييم التعلم والذاكرة في الفئران. يرد أدناه وصف المنهجية.

اختبار كائن رواية الاعتراف للتحقيق في التعلم والذاكرة في الفئران

ويصف هذا البروتوكول تحليل السلوكي، استناداً إلى اختبار المتاهة بارنز، لدراسة دفاعية غريزية كيف يتم تعديل الإجراءات بعلم البيئة المكانية.

تحليل السلوكي للتحقيق في دور الذاكرة المكانية خلال الدفاع الغريزي في الفئران

بطارية اختبار سلوكية شاملة للمهارات الحركية، مزاج — بما في ذلك التفاعل الاجتماعي، والاكتئاب، والقلق – ويهدف الإدراك لتكرار تقييم التغييرات السلوكية المتصلة نيوروديجينيريشن في الفئران.

بطارية اختبار سلوكية لتكرار تقييم المهارات الحركية، والمزاج، والإدراك في الفئران

يوفر هذا البروتوكول خطوات مفصلة لمهمة موقع الكائن مع أربعة تكرارات باستخدام نفس الفوج من الفئران. الترميز الضعيف والقوي يمكن أن ينتج ذكريات قصيرة وطويلة الأجل. يمكن أن تكون مرونة البروتوكول مع التكرار مفيدة للدراسات التي تنطوي على العمليات الجراحية عن طريق توفير الوقت والعمل.

تصميم تجريبي داخل الموضوع باستخدام مهمة موقع الكائن في الفئران

لقد طورنا منصة واحدة لتتبع سلوك الحيوان خلال مهمتين للتعلم الترابطي تعتمد على الألياف المتسلقة. يسمح التصميم منخفض التكلفة بالتكامل مع التجارب البصرية الجينية أو التصويرية الموجهة نحو تسلق نشاط المخيخ المرتبط بالألياف.

منصة مرنة لمراقبة التعلم الترابطي الحسي المعتمد على المخيخ

هنا ، نقدم إعدادا مبسطا للأجهزة والبرامج مفتوحة المصدر للتحقيق في التعلم المكاني للماوس باستخدام الواقع الافتراضي (VR). يعرض هذا النظام مسارا خطيا افتراضيا لماوس مقيد الرأس يعمل على عجلة من خلال استخدام شبكة من المتحكمات الدقيقة وجهاز كمبيوتر أحادي اللوحة يقوم بتشغيل حزمة برامج رسومية Python سهلة الاستخدام.

نظام واقع افتراضي مفتوح المصدر لقياس التعلم المكاني في الفئران المقيدة الرأس

تعلم بروتوكول اختبار الاعتراف بالكائن وموقعه السلوكي في الفئران لتقييم الذاكرة. تُستخدم مهام OLT وNORT مع تصميم حجيرات أكريليك اقتصادية لضمان نتائج موثوقة في أبحاث علم الأعصاب.

الاعتراف برواية كائن ومكان الكائن السلوكية اختبار في الفئران على الميزانية

استكشف المزيد من الفيديوهات