وضع بروتوكول رهيزوبوكس الأمثل لتصور النمو الجذري والقدرة على الاستجابة للعناصر المغذية مترجمة

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال علم الجذر وRizosphere ، مثل كيفية استجابة الجذور للبقع المترجمة من المواد الغذائية. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بإجراء قياسات متكررة وغير غازية لنظام جذر واحد في التربة ، ولكنها لا تتطلب معدات متخصصة وغير مكلفة نسبيًا. جمع أجزاء لRizobox للتجميع.

وتشمل هذه الألواح الأمامية والخلفية المصنوعة من الاكريليك واضحة حوالي 40 سنتيمترا في 61 سنتيمترا. عند هذه النقطة، هناك مساحات جانبية وسفلى على رأس اللوحة الخلفية. ومحاذاة الفواصل مع الثقوب حفر سابقا في لوحات.

قطع طول الحشو البوليستر للذهاب على طول الجزء السفلي من Rhizobox. وضع الحشو على اللوحة الخلفية مباشرة فوق المسافة السفلية للمساعدة في منع التسرب. وضع اللوحة العليا في موقف على الفواصل لعقد الحشو في مكان.

الآن الحصول على الأجهزة لتجميع Rhizobox. استخدام المسمار، واثنين من غسالات، والجوز الهكية لكل من الثقوب حفر. ضع غسالة على اللوحة الأمامية وشد المسمار من خلال ذلك إلى اللوحة الخلفية.

غسالة أخرى وجوزة الهكية. لتجنب فقدان التربة، تأكد من أن جميع المسامير ضيقة جدا. أيضا، إنشاء اثنين من الفواصل لتشكيل التصحيحات العلاج والتحكم.

جعلها مع أوراق البولي ايثيلين عالية الكثافة وتأمين المسمار في الجزء العلوي للسماح الإدراج الجزئي فقط. للحرمان من الضوء والحد من الحرارة، وإعداد حالة واقية التي يمكن أن أرفق مربع. وأخيرا، بناء إطار لتشجيع الجذور على النمو ضد اللوحة الخلفية.

هذا الإطار PVC يحمل مربع بزاوية 55 درجة تقريبا. وقد جاهزة خليط متجانس من التربة الحقل والرمال. تبدأ مع كيس كبير يحتوي على خليط الركيزة لكل Rhizobox.

تسمية اثنين من أكياس ziptop صغيرة لكل مربع للعلاج وبقع السيطرة. استخدام مقياس وتزن 30 غراما من الركيزة الرملية التربة. نقل الركيزة إلى حقيبة التحكم.

بنفس الطريقة، إضافة 30 غراما من الركيزة إلى كيس العلاج. ثم تزن غرام واحد من النيتروجين 15 تسمية مصدر النيتروجين وإضافته إلى كيس العلاج. مزيج الركيزة ومصدر النيتروجين تماما.

العمل مع واحد Rhizobox وانها الرقعة الفواصل. إدراج الفواصل اثنين في Rhizobox حتى المسمار يمنع المزيد من الحركة. وضع علامة على عمق الحافة السفلية للفواصل على جانب صندوق Rhizobox.

ثم إزالة الفواصل للخطوات التالية. باستخدام القمع، وملء Rhizobox من كيس كبير من الركيزة إلى العمق ملحوظ. نقل القمع ذهابا وإيابا ببطء وبشكل منتظم لملء Rhizobox بشكل موحد.

عندما يكون الركيزة في العمق ملحوظ، ووضع الفواصل في المربع. يجب أن تكون خمسة سنتيمترات من الجانبين الأيسر والأيّن من منطقة الجزاء. استمر في ملء الصندوق حتى يبلغ الركيزة حوالي خمسة سنتيمترات من أعلى الصندوق.

بعد ذلك ، قم بترتيب الري البطيء للركيزة في المربع مع 150 ملليلتر من الماء مع باعث بالتنقيط أو باليد. السماح لها بقية عدة ساعات أو بين عشية وضحاها بحيث ينتشر الماء والمنطقة المحيطة بكل مفر هو الرطب تماما. عند هذه النقطة، وإزالة الفواصل لترك تجويف فارغ للبقع.

الآن، شريط فيلم الشفافية إلى خارج منطقة الجزاء. استخدم الشفافية لتسمية تصحيح واحد كعلاج والآخر كتحكم. ثم استخدم القمع وركيزة التحكم المعدة لملء التصحيح التحكم.

هذا هو التصحيح عنصر التحكم المسمى بعد أن تم تعبئة. الانتقال لملء التصحيح العلاج مع الركيزة العلاج المعدة بنفس الطريقة. عند الانتهاء من ذلك، استخدم علامة دائمة لتتبع حدود كل تصحيح على فيلم الشفافية.

بعد ذلك، املأ صندوق Rhizobox بالتساوي مع الركيزة المتبقية من الحقيبة الكبيرة. الانتهاء من خلال تتبع الجزء العلوي من الركيزة على الشفافية. بمجرد أن يصبح الصندوق جاهزاً، زرع بذور مُنبتة.

أولاً، استخدم ملعقة ضيقة لحفر حفرة في وسط صندوق Rhizobox. يجب أن يكون عمق الثقب 2.5 سنتيمتر. وضع البذور في داخل البذرة ضمان اتجاه الراديكالية مباشرة إلى أسفل.

تتبع موقع البذرة على الشفافية المرفقة في المربع. تغطية البذور، ثم المياه مع ما يصل إلى 50 ملليلتر من المياه الأيونية. بعد ذلك، أرفق الصندوق في حالته لمنع الضوء من التفاعل مع الجذور أثناء النمو.

خذ الصندوق إلى الإطار المعد له. ضع صندوق Rhizobox على الإطار لتشجيع النمو نحو الإطار الخلفي. استرداد مربع بعد كل ثلاثة إلى أربعة أيام من نمو النبات.

مع إزالة الحالة، تتبع جذور النباتات مرئية باستخدام قلم لون مختلف في كل مرة. كما في هذا المثال، تكون متسقة ومنهجية لهذه الخطوة. العودة مربع مغطى إلى موقفها وضمان أنه في اتجاهها الأصلي.

هنا ، يتم رسم أطوال الجذر الكلي للجذور التي تم تتبعها على ظهر 24 Rhizoboxes ضد أطوال الجذور التي تم قياسها باستخدام الماسح الضوئي وبرامج الكمبيوتر. مؤامرة مماثلة لأنماط الجذر تتبع في الجزء الأمامي من مربع يدل على أن جذور نمت بشكل تفضيلي ضد الجزء الخلفي من مربع. المنحدرات الثابتة في هذه المؤامرة من اللوغاريتم من طول الجذر الكلي كدالة أيام من النمو تشير إلى أن معدلات النمو كانت متشابهة بين صناديق مختلفة.

فيما يلي بيانات عن كثافة طول الجذر للنمط الوراثي للذرة الواحدة. كثافة التصحيح التحكم أصغر من كثافة التصحيح النيتروجين المعالجة. وقارنت التجربة كثافة طول الجذر لستة أنواع جينية منفصلة من الذرة.

في جميع الحالات، كانت كثافة طول الجذر أكبر في التصحيح معالجة النيتروجين 15 المسمى مقابل التصحيح التحكم. ويمكن الجمع بين هذا البروتوكول وأساليب أخرى مثل التهجين الموضعي أو التهجين الموضعي من أجل تصور التوزيع الزوائ لنشاط الإنزيم أو الميكروبات.