التعبير وتنقية TRPC3 الإنسان حساسة للدهن قناة الأيونات الموجبة للتصميم الهيكلي بالفحص المجهري واحد-الجسيمات Cryo-إلكترون

8.8K مشاهدة

استشهد بها 4

08:27 دقيقة

يناير 7, 2019

10.3791/58754-v

يناير 7, 2019

8.8K مشاهدة

Emery Haley^*¹ , Wooyoung Choi^*¹ , Chen Fan¹ , Weinan Sun²^,³ , Juan Du¹ , Wei Lü¹

¹Van Andel Institute, ²Vollum Institute, ³Janelia Research Campus

^* These authors contributed equally

ويصف هذا البروتوكول التقنيات المستخدمة لتحديد هياكل قناة أيون بالميكروسكوب cryo-الإلكتروني، بما في ذلك نظام باكولوفيروس لكفاءة التعبير عن الجينات في خلايا الثدييات مع الحد الأدنى من الجهد وسمية واستخراج البروتين وتنقية، والتحقق من الجودة، وإعداد شبكة العينة والفحص، فضلا عن جمع البيانات وتجهيزها.