مجموعه سريعة من الازهار العطر متطاير باستخدام تقنيه مجموعه المتقلبة الراسي لأخذ العينات الحرارية GC-MS

هنا ، نقدم بروتوكولا لجمع العطر الازهار متطاير من تزهر الزهور ، وذلك باستخدام اجراء أخذ العينات غير المدمرة.

لأن العطر الأزهار أمر بالغ الأهمية لجذب الملقحات، يمكن استخدام هذه الطريقة لفهم أفضل أو حتى تعزيز التلقيح من أنواع الزهور المحلية. مع هذه الطريقة، يتم أخذ عينات من المواد المتطايرة العطر باستخدام طريقة غير مدمرة مع آلة نقلها بسهولة. وتستخدم هذه المنهجية أخذ عينات سريعة، حيث تخفض وقت أخذ العينات من ساعتين إلى ثلاث ساعات إلى 10 دقائق.

وتوفر هذه الطرق طريقة لأخذ عينات سريعة من المواد المتطايرة التي تنتجها الزهور ويمكن استخدامها لأخذ عينات من عينات أخرى، مثل فرمون الحشرات. للبدء ، حدد زهرة غير مفتوحة في البداية ، ووضع علامة على الزهرة مع الشريط الواهن لضمان أخذ عينات متكررة من نفس الزهرة. تغلي أكياس الفرن في الماء لمدة 30 دقيقة لإزالة المركبات البلاستيكية المتبقية.

لتجف، يُخبز في فرن على حرارة 175 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة. مرة واحدة وقد جفت أكياس، إضافة اتحاد البولي بروبلين السائبة إلى كل زاوية من نهاية مغلقة من أكياس الفرن. شطف جميع الحقائب والأنابيب مع 75٪ الإيثانول والسماح لهم الهواء الجاف.

ثم، خبز الحقائب والأنابيب في فرن على نار هادئة، بين 74 إلى 85 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. اعتمادا على مدة من الوقت تزهر، إذا كان ذلك ممكنا الانتظار 24 ساعة على الأقل بعد تزهر لجمع العينة. غطي الزهرة المختارة بحقيبة فرن مخبوزة.

Cinch كيس معا بإحكام مع ربطة عنق من البلاستيك الرمز البريدي تحت زهرة لمنع تدفق الهواء غير المرغوب فيها في الحقيبة. ارتداء قفازات النيوبرين المعقمة، إرفاق أنبوب من منفذ الهواء من معدات جمع وربطه إلى واحدة من النقابات السائبة على حقيبة الفرن. على الاتحاد السائبة الأخرى، نعلق خرطوشة تصفية الزجاج التي تحتوي على مسامية البوليمر الماميز.

إرفاق أنبوب الثاني إلى معدات جمع على المدخلات فراغ. قم بتوصيل نهاية الأنبوب الثاني بكارتريدج تصفية المجموعة المتطايرة الزجاجي. بدوره على كل من مضخة الهواء والفراغ في نفس الوقت وتعيين في 0.05 لتر في الدقيقة الواحدة.

تمتلئ مساحة الرأس حول الزهرة بالهواء ولكن ليس بالتضخم المفرط. يسحب النظام الهواء من الحقيبة من خلال الفلتر ، مما يحاصر الأزهار المتطايرة. السماح للجهاز لتشغيل لمدة 10 دقائق.

ثم إيقاف كل من مضخة الهواء والفراغ. تفكيك الأنابيب وخراطيش تصفية الزجاج. ضع الفلتر في قارورة زجاجية وبرغي على غطاء.

ختم القارورة مع الشريط مؤشر ترابط الأنابيب PTFE. قم بتخزين العينة في ثلاجة حتى تحليل GCMS. كرر هذه العملية مع حقيبة الفرن فارغة لجمع عينة الهواء فارغة كتحكم.

لتكرار متسقة من نفس المواد المتطايرة، كرر جمع العينة في نفس الوقت كل يوم، كما تنتج بعض الزهور مستويات مختلفة من العطر على مدار اليوم. أولاً، قم بإزالة خرطوشة تصفية الزجاج من الفريزر ووضعها في GCMS في منفذ الحقن. لإطلاق المتطايرات مساحة الرأس التي تم جمعها على ممزاز البوليمر المسامية من الامتزاز، تسخين مصيدة جمع الحرارية إلى 220 درجة مئوية لمدة ثماني دقائق في غضون تدفق غاز الهيليوم في 1.2 ملليلتر في الدقيقة.

قارن الكروماتوجرامات من المتطايرات التي تم جمعها لتحديد قمم تكرار المشتركة. بعد تحديد التقلبات الذروة، استخدم Pherobase لتحديد ما إذا كان قد تم وصفها سابقا في العطور الأزهار. في هذه الدراسة، تظهر البيانات التمثيلية من GCMS على شكل كروماتوجرام.

القمم بين 10 و 15 دقيقة هي الأزهار المتطايرة. تمت الإشارة إلى المواد المتطايرة التي تم جمعها في Pherobase لتحديد ما إذا كانت قد وصفت سابقا في عطر الأزهار. فعلى سبيل المثال، تم تحديد المركب رقم 21، الذي يبلغ وقت الاحتفاظ به 10.311 على أنه البنزالديهيد.

البنزالديهيد قابل للبحث في Pherobase مع قائمة بجميع أنواع الزهور ، التي نظمتها عائلة النبات ، والتي تم تحديد مجمع العطر منها. تظهر أنواع السحلية هنا، والتي تم تحديد البنزالديد منها لتكون موجودة في العطر الأزهار. استغرق الأساليب السابقة ساعتين إلى أربع ساعات لكل عينة.

ومن شأن استخدام المذيبات لإزالة العينة من المرشح أن يؤدي إلى ذروة المذيبات على GCMS. هذا من شأنه إخفاء المركبات من صفر إلى 3.5 دقيقة. هذا الأسلوب يسمح لجميع المركبات أن ينظر إليها.