Name: مجموعه سريعة من الازهار العطر متطاير باستخدام تقنيه مجموعه المتقلبة الراسي لأخذ العينات الحرارية GC-MS (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 22 s
Description: تعلم طريقة سريعة لجمع المركبات العطرية المتطايرة من الأزهار باستخدام تقنية GC-MS الحرارية. تقلل هذه الطريقة وقت أخذ العينات من ساعات إلى 10 دقائق فقط، مما يساعد الباحثين على دراسة تلقيح النباتات بكفاءة عالية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

[وزاره الزراعة]-[أرس] بحث رقم [6036-22000-028-د]. استخدام أسماء التجارة أو الشركات أو الشركات في هذا المنشور هو لمعلومات وراحة القارئ. ولا يشكل هذا الاستخدام تاييدا رسميا أو موافقه من وزاره الزراعة في الولايات المتحدة أو دائره البحوث الزراعية علي اي منتج أو خدمه باستثناء الآخرين الذين قد يكونون مناسبين. بالاضافه إلى ذلك ، قدمت جامعه فلوريدا قسم البيولوجيا-لويس وفيرينا فون زمالة في علم الاحياء الاوركيد (2017) ، وجامعه فلوريدا زمالة بحوث الدراسات العليا (2014-2018) التمويل أيضا. كما نشكر سيندي بينينجتون من جامعه ستانسون لمصنع الاوركيد المستخدم اثناء تصوير هذا الفيديو.

ملاحظه: يجب عدم ارتداء العطور أو المستحضرات المعطرة والمنتجات خلال اي من هذه الإجراءات.
1. اختيار زهره
ملاحظه: الزهور المستخدمة يمكن ان تكون اما تنمو بشكل طبيعي في البيئة أو الاحتفاظ بها في ظل الظروف البيئية الاصطناعية. يمكن ان تختلف درجه الحرارة والرطوبة ومستوي الضوء اثناء الجمع استنادا إلى أنواع الزهور المستخدمة المحددة ، وما هو نوع البيانات التي يتم جمعها. علي سبيل المثال ، تم جمع البيانات خلال النهار وفي الليل لنفس الزهرة لتحديد ما إذا كان العطر يختلف علي مر الأيام ، وجمعت من الزهور في الموقع والاحتباس الحراري.
<ol><li>حدد زهره التي يتم فتحها في البداية ، لتوحيد عينه الوقت جمع. هذه الضوابط لزهره تغيير العطر مع مرور الوقت.</li>
	<li>اعتمادا علي مده الوقت تزهر ، إذا كان ذلك ممكنا ، والانتظار علي الأقل 24 ساعة بعد تزهر لجمع العينة ، ووضع الوقت القياسي لجميع العينات.</li>
	<li>إذا كان هناك الزهور تزهر متعددة علي النبات ، بمناسبه واحد التي سيتم استخدامها مع الشريط الضعيف أو شيء من هذا القبيل لضمان أخذ عينات متكررة من نفس الزهرة.</li>
</ol>2-اعداد المواد
<ol><li>استخدام أكياس الفرن (حوالي 40.5 سم × 44.5 سم) وأنابيب PTFE المموج.</li>
	<li>في البداية ، يغلي أكياس الفرن في الماء ل ~ 30 دقيقه لأزاله المركبات البلاستيكية المتبقية. لتجف ، اخبز في فرن عند 175 درجه مئوية.</li>
	<li>مره واحده وقد جفت أكياس ، أضافه اتحاد البولي بروبيلين الحاجز إلى كل زاوية من نهاية مغلقه من أكياس الفرن. تسمح هذه المرفقات بتوصيل الأنابيب لدفع الهواء المصفي في الفحم وسحب العطر من المساحة الراسية.</li>
	<li>شطف جميع الحقائب والأنابيب مع 75 ٪ الايثانول. دع كلا الهواء يجف بعد الشطف.</li>
	<li>بعد أكياس الفرن والمجففة ، وأكياس خبز وأنابيب في فرن في حرارة منخفضه ، حوالي 74-85 درجه مئوية لمده 30 دقيقه.</li>
</ol>3. مجموعه متقلبة
ملاحظه: قفازات النيوبرين العقيمة تحتاج إلى ان ترتديه في جميع انحاء هذه العملية ، كما الاتصال كيس أو خراطيش فلتر يمكن ان تلوث العينات.
<ol><li>غطي الزهرة المختارة بكيس فرن مخبوز. Cinch الحقيبة معا باحكام مع التعادل البريدي البلاستيكية تحت زهره لمنع تدفق الهواء غير المرغوب فيه في الحقيبة.</li>
	<li>نعلق أنبوب من ماخذ الهواء من معدات جمع وتوصيله إلى واحده من النقابات الحاجز علي كيس الفرن.</li>
	<li>علي الاتحاد الحاجز الأخرى ، نعلق خرطوشه فلتر الزجاج التي تحتوي علي البوليمر المساميه الممتزه.</li>
	<li>ارفق أنبوب ثان لمعدات التجميع علي مدخل الفراغ. الاتصال نهاية الأنبوب الثاني علي خرطوشه فلتر مجموعه متقلبة الزجاج.</li>
	<li>تشغيل كل من مضخة الهواء والفراغ في نفس الوقت تعيين في ~ 0.05 L/min. فان المساحة الراسية حول زهره ملء مع الهواء ، ولكن لا تصبح مبالغ فيها. سيقوم النظام بسحب الهواء من الكيس من خلال الفلتر ، ومحاصره متطاير الازهار.</li>
	<li>السماح للجهاز لتشغيل لمده 10 دقيقه ومن ثم إيقاف كل من مضخة الهواء والفراغ. ملاحظه: أنواع الزهور التي تنتج/تنبعث منها كميه اقل من العطر قد تحتاج إلى أخذ عينات لفتره أطول من الزمن.</li>
	<li>تفكيك الأنابيب وخرطوشه فلتر الزجاج. ضع الفلتر في قارورة زجاجيه بغطاء من المسامير. مره واحده علي الغطاء ، ختم القارورة مع الشريط الموضوع الأنابيب PTFE.</li>
	<li>خزن العينات في الفريزر حتى يتم تحليلها باستخدام GC-MS.</li>
	<li>كرر هذه العملية مع كيس الفرن نظيفه وفلتر الزجاج ، وهذه المرة مع كيس الفرن فارغه ، لجمع عينه الهواء فارغه كعنصر تحكم. ويسمح ذلك بتحديد اي متطاير للخلفية يتم جمعها. ملاحظه: يجب ان يتم تكرار مجموعه العينات في نفس الوقت تقريبا كل يوم ، حيث تنتج بعض الزهور مستويات مختلفه من العطور علي مدار اليوم.</li>
</ol>4. GC-MS
<ol><li>أزاله خرطوشه فلتر الزجاج من الفريزر ووضعها في GC-MS في منفذ حاقن.</li>
	<li>الإفراج عن متطاير المساحة الراسية التي تم جمعها علي الممتزه البوليمر المساميه من الممتزات عن طريق التسخين في فخ جمع الحرارية (الانتقال) إلى 220 درجه مئوية لمده 8 دقائق داخل تدفق غاز الهيليوم (معدل: 1.2 mL/min).</li>
	<li>جمع المركبات مستوعب في وحده فخ الباردة لانتقال العدوى في-130 درجه مئوية. يتم تنظيم درجه حرارة الفخ الباردة من قبل برنامج GC-MS.</li>
	<li>فلاش تسخين وحده مصيدة البرد لحقن المركبات في العمود الشعرية من الكروماتوغرافي الغاز التي تم توصيل وحده فخ الباردة. تبدا الطريقة لانتقال العدوى عند-20 درجه مئوية وتنتهي عند 150 درجه مئوية.</li>
	<li>برنامج GC-MS للارتفاع من 40 درجه مئوية إلى 280 درجه مئوية في 15 درجه مئوية/دقيقه ، مع عقد 5 دقائق في 40 درجه مئوية.</li>
</ol>5-تحليل البيانات
<ol><li>لتحديد الهوية ، قارن أطياف الكتلة من العينة إلى تلك من مكتبات الأطياف الجماهيرية (NIST وقسم الإيكولوجيا الكيميائية ، جامعه Goteborg ، السويد11) ، فضلا عن أوقات الاستبقاء من متطاير إلى أوقات المعايير المجمعة الاصليه12.</li>
	<li>قارن بين الكروماتوجرام من المتطاير المجمعة للتعرف علي القمم المتكررة الشائعة.</li>
	<li>بعد تحديد متطاير الذروة ، استخدم Pherobase (قاعده بيانات علي الإنترنت من semiochemicals والفيرومونات) لتحديد ما إذا كانت قد وصفت سابقا في عطور الازهار10.</li>
</ol>

<ol><li>Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+scents-+A+checklist+of+volatile+compounds+isolated+by+head-space+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques.</a> Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).</li>
<li>Dudareva, N. A., Pichersky, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDudareva%2C+NA+%22Biology+of+floral+scent%22">Biology of floral scent</a>. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).</li>
<li>Altenburger, R., Matile, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhythms+of+fragrance+emission+in+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Rhythms of fragrance emission in flowers.</a> Planta. 174, 242-247 (1988).</li>
<li>Dodson, C. H., Dressler, R. L., Hills, H. G., Adams, R. M., Williams, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologically+active+compounds+in+orchid+fragrances%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Biologically active compounds in orchid fragrances.</a> Science. 164, 1243-1249 (1969).</li>
<li>Theis, N., Raguso, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pollination+on+floral+fragrance+in+thistles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">The effect of pollination on floral fragrance in thistles.</a> Journal of Chemical Ecology. 31 (11), 2581-2600 (2005).</li>
<li>Heath, R. R., Manukian, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+systems+to+collect+volatile+semiochemicals+from+insects+and+plants+using+a+charcoal-infused+medium+for+air+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of systems to collect volatile semiochemicals from insects and plants using a charcoal-infused medium for air purification.</a> Journal of Chemical Ecology. 18, 1209-1226 (1992).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+floral+fragrance+components+of+species+of+Encyclia+and+Prosthechea+%28Orchidaceae%29+from+Soconusco%2C+southeast+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Lankesteriana%22%5BJournal%5D)">Comparison of floral fragrance components of species of Encyclia and Prosthechea (Orchidaceae) from Soconusco, southeast Mexico.</a> Lankesteriana. 6, 83-139 (2006).</li>
<li>Cancino, A., Damon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+analysis+of+euglossine+bee+pollinated+orchids+from+Soconusco%2C+south-east+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Species+Biology%22%5BJournal%5D)">Fragrance analysis of euglossine bee pollinated orchids from Soconusco, south-east Mexico.</a> Plant Species Biology. 22, 129-134 (2007).</li>
<li>Sadler, J. J., Smith, J. M., Zettler, L. W., Alborn, H. T., Richardson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragrance+composition+of+Dendrophylax+lindenii+%28Orchidaceae%29+using+a+novel+technique+applied+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Environmental+Science%22%5BJournal%5D)">Fragrance composition of Dendrophylax lindenii (Orchidaceae) using a novel technique applied in situ.</a> European Journal of Environmental Science. 1, 137-141 (2011).</li>
<li>Ray, H. A., Stuhl, C. J., Gillett-Kaufman, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Floral+fragrance+analysis+of+Prosthechea+cochleata+%28Orchidaceae%29%2C+an+endangered+native%2C+epiphytic+orchid%2C+in+Florida%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Floral fragrance analysis of Prosthechea cochleata (Orchidaceae), an endangered native, epiphytic orchid, in Florida.</a> Plant Signaling and Behavior. , (2018).</li>
<li>National Institute of Standards and Technology. U.S. Department of Commerce. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nist.gov/">https://www.nist.gov/</a> (2019).</li>
<li>The Pherobase: Databse of Pheromones and Semiochemicals. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.pherobase.com/">http://www.pherobase.com/</a> (2019).</li>
</ol>

ولا يعلن أصحاب البلاغ عن اي تضارب في المصالح.

علي الرغم من ان هذه التقنية هي قيمه بشكل لا يصدق لسرعه أخذ العينات وقابليتها ، وهو قيد واحد يستخدم للأنواع الابيائيه ، أو تلك التي تنمو علي الأشجار وليس من الأرض. في الدراسة الاصليه10، واحده من الزهور عينات كانت ابيهيتيك. لان الجهاز ثقيل جدا لشنق بحريه ، يجب ان تكون مستقره ، قاعده مرتفعه لأخذ العينات. بالاضافه إلى ذلك ، يمكن توصيل الجهاز اما إلى ماخذ كهربائي أو بطارية تعمل بالطاقة ، لذلك إذا كان هناك أخذ عينات ميدانيه لفترات طويلة ، يجب ان يكون هناك مصدر طاقة لشحن البطاريات عندما لا يكون الجهاز قي...

الزهور تنتج عاده العطر المستخدمة لجذب الملقحات. وتتكون هذه العطور من العديد من المركبات الكيميائية كلها تعمل معا كمزيج الازهار1,2,3. وبدون هذه العطور ، تكون الزهور اقل عرضه لنقل معلوماتها الوراثية باستخدام الملقحات. وقد تم توثيق العطر الازهار في العديد من الأسر النباتية المزهرة ، مع اوردوزيه كونها واحده من الأسر أكثر شيوعا درس4. لفهم دور العطر الازهار في التلقيح ، من المهم لجمع وتحليل غير تدميري المركبات الكيميائية التي تنبعث من الزهور في أوقات مختلفه من اليوم ، وخلال عده أيام إلى أسابيع تزهر زهره مفتوحة ، والعطر يمكن ان تختلف مع مرور الوقت5.
تم تطوير بروتوكول مبكر لهذا النوع من العينات من قبل هيث ومانكيان6. وكان الهدف من أساليب أخذ العينات الخاصة بهم هو الحد من الإجهاد علي العينة (مثل النباتات والحشرات) التي تجري دراستها. وثائق سابقه وثقت ان الإجراءات المدمرة للمصنع كانت مطلوبه ، مثل أزاله تزهر الزهور من أجل جمع العطر. أحدث الزهور العطور المنشورات من قبل cancino ودامون7,8 تستخدم أساليب مماثله. وضعت هذه الدراسة الزهور في الغرف الزجاجية ومرت الهواء النقي عليها ؛ ثم تم امتصاص مركبات العطر من الغرفة علي الممتزات البوليمر المساميه في أنابيب باستور واضحة. تم جمع العطور لمده ساعتين علي الأقل خلال هذه الدراسة. قام سادلر وآخرون9 بدراسات العطور الزهرية علي الاوركيد المعطر في جنوب فلوريدا ، مثل الكثير من الدراسة الاصليه10. مره أخرى ، تطلبت هذه الدراسة ان يتم أخذ عينات من الزهور لأكثر من ساعتين لجمع متطاير العطر ، مع العطر الذي تم جمعه علي الممتزات البوليمر المساميه. وتقدم الورقة هنا طريقه غير مدمره تسمح بأخذ عينات أسرع بكثير ، تدوم 10 دقائق فقط. أيضا ، بدلا من استخدام الفرن غرفه زجاجيه تستخدم أكياس الخبز ، والتي تسمح للحركة أكثر مرونة من الغرفة والحد من فرص الاضرار التي لحقت الزهور. هذه الحقائب تاتي في عده احجام السماح للخيار لتحديد حجم الحقيبة التي من شانها ان تناسب بسهوله العينات الفردية دون الاضرار العينة أو المواد المحيطة بها. وكان الممتزات المستخدمة في هذه الدراسة Tenax المساميه البوليمر الممتزات. هذا يختلف عن porapak ، لان العينة يمكن ان يكون مستوعب حراريا علي العمود GC-MS للتحليل ، والقضاء علي استخدام المذيبات الكيميائية.
الطرق في هذه الدراسة توفر وسيله لعينه بسرعة متطاير العطر التي تنتجها الزهور ، ويمكن استخدامها لعينه من متطاير من عينات أخرى ، وكذلك ، مثل الفيرومونات الحشرات ، أو فطر متطاير. الوقت المخفض لأخذ العينات يعني ان هناك ضغط اقل علي العينة والقدرة علي جمع العديد من العينات في فتره قصيرة من الزمن. علي سبيل المثال ، في Sadler وآخرون9، كانت زهره عبق فقط في الليل ، لذلك فقط اثنين أو ثلاثه عينات يمكن جمعها كل ليله. مع الطريقة هنا ، يمكن ان تؤخذ العينات كل ليله في 15-20 دقائق من نفس الزهرة. بالاضافه إلى ذلك ، باستخدام أكياس بدلا من الغرف الزجاجية ، يمكن تعليق الحيز الراسي أسهل لأخذ العينات في الميدان لجمع في الموقع علي الأنواع النباتية المهددة بالانقراض أو المهددة. باستخدام الطريقة المعروضة هنا ، كنا قادرين علي عينه الزهور 1.5 إلى 2 متر فوق الأرض. هذه الطرق هي مفيده بشكل لا يصدق لجمع العطر في المختبر والميدان ، ويوفر للباحثين مع تقنيه أخذ العينات التي هي سريعة وغير مدمره للعينه.

<table><tbody><tr><td>الحاجز اتحاد</td><td>كول بالمر</td><td>UX-06390-10</td><td></td></tr><tr><td>FEP أنابيب</td><td>كول بالمر</td><td>UX-06407-60</td><td></td></tr><tr><td>كروماتوغرافيا الغاز</td><td>هيوليت باكارد</td><td>6890</td><td></td></tr><tr><td>الصوف الزجاجي ، سيجما</td><td>ألدريتش</td><td>20411</td><td></td></tr><tr><td>بطانة مدخل</td><td>Agilent</td><td>5062-3587</td><td></td></tr><tr><td>مطياف الكتلة</td><td>هيوليت باكارد</td><td>5973</td><td></td></tr><tr><td>كيس فرن رينولدز</td><td>رينولدز المنتجات الاستهلاكية</td><td>بحجم</td><td></td>تركيا</tr><tr><td>تيناكس بوليمر مسامي</td><td>ممتص سيجما ألدريتش</td><td>11982</td><td></td></tr></tbody></table>

مجموعه سريعة من الازهار العطر متطاير باستخدام تقنيه مجموعه المتقلبة الراسي لأخذ العينات الحرارية gc-ms

Rapid Collection of Floral Fragrance Volatiles using a Headspace Volatile Collection Technique for GC-MS Thermal Desorption Sampling

وقد تم أخذ عينات من العطور من العديد من عائلات زهره وتحليل متطاير. معرفه المركبات التي تشكل العطور يمكن ان يكون خطوه هامه للحفاظ علي الزهور المهددة أو المهددة بالانقراض. لان العطر الزهري هو أمر بالغ الاهميه لجذب الملقحات ، ويمكن استخدام هذه الطريقة لفهم أفضل أو حتى تعزيز التلقيح. نحن نقدم بروتوكول باستخدام فلتر هواء الفحم المحمولة والفراغ لجمع متطاير العطر الازهار ، والتي يتم تحليلها من قبل GC-MS. باستخدام هذه الطريقة ، يمكن أخذ عينات متطاير العطر باستخدام طريقه غير مدمره مع الجهاز الذي يتم نقله بسهوله. وتستخدم هذه المنهجية اجراء أخذ العينات السريعة ، وخفض وقت أخذ العينات من 2-3 ساعة إلى 10 دقائق تقريبا. باستخدام GC-MS ، يمكن تحديد مركبات العطور بشكل فردي ، استنادا إلى المعايير الاصليه. يتم تقديم الخطوات المستخدمة لجمع الروائح والتحكم في البيانات ، من اعداد المواد لجمع مخرجات البيانات.

وتظهر البيانات التمثيلية الواردة من المجموعة المذكورة علي انها كروماتوجرام في الشكل 1. بالاضافه إلى الكروماتوجرام ، يتم أيضا توفير ملف بيانات النتائج (الملف التكميلي 1). يوفر ملف البيانات هذا وقت الاستبقاء لكل ذروه (RT) ، وتعريف ما هو المركب الذي يكون الذروة (مكتبه/معرف). قمم بين 10:00 و 15:00 دقيقه هي متطاير الازهار ، ويرجع ذلك إلى الوزن الجزيئي للمركبات10. وتدل الأرقام الواردة فوق القمم علي أوقات استبقاء المركبات المحددة التي يشار اليها بملف البيانا...

هنا ، نقدم بروتوكولا لجمع العطر الازهار متطاير من تزهر الزهور ، وذلك باستخدام اجراء أخذ العينات غير المدمرة.

مجموعه سريعة من الازهار العطر متطاير باستخدام تقنيه مجموعه المتقلبة الراسي لأخذ العينات الحرارية GC-MS

Fragrances of many flower families have been sampled and the volatiles analyzed. Knowing the compounds that make up the fragrances can be an important ...

لأن العطر الأزهار أمر بالغ الأهمية لجذب الملقحات، يمكن استخدام هذه الطريقة لفهم أفضل أو حتى تعزيز التلقيح من أنواع الزهور المحلية. مع هذه الطريقة، يتم أخذ عينات من المواد المتطايرة العطر باستخدام طريقة غير مدمرة مع آلة نقلها بسهولة. وتستخدم هذه المنهجية أخذ عينات سريعة، حيث تخفض وقت أخذ العينات من ساعتين إلى ثلاث ساعات إلى 10 دقائق.وتوفر هذه الطرق طريقة لأخذ عينات سريعة من المواد المتطايرة التي تنتجها الزهور ويمكن استخدامها لأخذ عينات من عينات أخرى، مثل فرمون الحشرات. للبدء ، حدد زهرة غير مفتوحة في البداية ، ووضع علامة على الزهرة مع الشريط الواهن لضمان أخذ عينات متكررة من نفس الزهرة. تغلي أكياس الفرن في الماء لمدة 30 دقيقة لإزالة المركبات البلاستيكية المتبقية.لتجف، يُخبز في فرن على حرارة 175 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة. مرة واحدة وقد جفت أكياس، إضافة اتحاد البولي بروبلين السائبة إلى كل زاوية من نهاية مغلقة من أكياس الفرن. شطف جميع الحقائب والأنابيب مع 75٪ الإيثانول والسماح لهم الهواء الجاف.ثم، خبز الحقائب والأنابيب في فرن على نار هادئة، بين 74 إلى 85 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. اعتمادا على مدة من الوقت تزهر، إذا كان ذلك ممكنا الانتظار 24 ساعة على الأقل بعد تزهر لجمع العينة. غطي الزهرة المختارة بحقيبة فرن مخبوزة.Cinch كيس معا بإحكام مع ربطة عنق من البلاستيك الرمز البريدي تحت زهرة لمنع تدفق الهواء غير المرغوب فيها في الحقيبة. ارتداء قفازات النيوبرين المعقمة، إرفاق أنبوب من منفذ الهواء من معدات جمع وربطه إلى واحدة من النقابات السائبة على حقيبة الفرن. على الاتحاد السائبة الأخرى، نعلق خرطوشة تصفية الزجاج التي تحتوي على مسامية البوليمر الماميز.إرفاق أنبوب الثاني إلى معدات جمع على المدخلات فراغ. قم بتوصيل نهاية الأنبوب الثاني بكارتريدج تصفية المجموعة المتطايرة الزجاجي. بدوره على كل من مضخة الهواء والفراغ في نفس الوقت وتعيين في 0.05 لتر في الدقيقة الواحدة.تمتلئ مساحة الرأس حول الزهرة بالهواء ولكن ليس بالتضخم المفرط. يسحب النظام الهواء من الحقيبة من خلال الفلتر ، مما يحاصر الأزهار المتطايرة. السماح للجهاز لتشغيل لمدة 10 دقائق.ثم إيقاف كل من مضخة الهواء والفراغ. تفكيك الأنابيب وخراطيش تصفية الزجاج. ضع الفلتر في قارورة زجاجية وبرغي على غطاء.ختم القارورة مع الشريط مؤشر ترابط الأنابيب PTFE. قم بتخزين العينة في ثلاجة حتى تحليل GCMS. كرر هذه العملية مع حقيبة الفرن فارغة لجمع عينة الهواء فارغة كتحكم.لتكرار متسقة من نفس المواد المتطايرة، كرر جمع العينة في نفس الوقت كل يوم، كما تنتج بعض الزهور مستويات مختلفة من العطر على مدار اليوم. أولاً، قم بإزالة خرطوشة تصفية الزجاج من الفريزر ووضعها في GCMS في منفذ الحقن. لإطلاق المتطايرات مساحة الرأس التي تم جمعها على ممزاز البوليمر المسامية من الامتزاز، تسخين مصيدة جمع الحرارية إلى 220 درجة مئوية لمدة ثماني دقائق في غضون تدفق غاز الهيليوم في 1.2 ملليلتر في الدقيقة.قارن الكروماتوجرامات من المتطايرات التي تم جمعها لتحديد قمم تكرار المشتركة. بعد تحديد التقلبات الذروة، استخدم Pherobase لتحديد ما إذا كان قد تم وصفها سابقا في العطور الأزهار. في هذه الدراسة، تظهر البيانات التمثيلية من GCMS على شكل كروماتوجرام.القمم بين 10 و 15 دقيقة هي الأزهار المتطايرة. تمت الإشارة إلى المواد المتطايرة التي تم جمعها في Pherobase لتحديد ما إذا كانت قد وصفت سابقا في عطر الأزهار. فعلى سبيل المثال، تم تحديد المركب رقم 21، الذي يبلغ وقت الاحتفاظ به 10.311 على أنه البنزالديهيد.البنزالديهيد قابل للبحث في Pherobase مع قائمة بجميع أنواع الزهور ، التي نظمتها عائلة النبات ، والتي تم تحديد مجمع العطر منها. تظهر أنواع السحلية هنا، والتي تم تحديد البنزالديد منها لتكون موجودة في العطر الأزهار. استغرق الأساليب السابقة ساعتين إلى أربع ساعات لكل عينة.ومن شأن استخدام المذيبات لإزالة العينة من المرشح أن يؤدي إلى ذروة المذيبات على GCMS. هذا من شأنه إخفاء المركبات من صفر إلى 3.5 دقيقة. هذا الأسلوب يسمح لجميع المركبات أن ينظر إليها.

rapid-collection-floral-fragrance-volatiles-using-headspace-volatile

Research

JoVE Journal

Biochemistry

الكيمياء الحيوية

وهناك طريقة بسيطة تسمح لاستخراج السريعة وتحليل الهرمونات النباتية متعددة من عينات الأنسجة الصغيرة. يستخدم الإجراء استخراج بخار المرحلة كخطوة تنقية الرسمي. ويتم تحليل العينات بواسطة أيونات + GC / MS مع التأين الكيميائية التي تنتج أساسا (M +1).

الهرمونات النباتية خلال رصد استجابات التوتر

التأين مطياف الكتلة الثانوية electrospray (سيسي - MS) تمكن من الكشف عن المركبات العضوية المتطايرة من دون الحاجة إلى أي معالجة مسبقة العينة. هذا البروتوكول يوفر إرشادات لتوصيف (في غضون دقائق) السريع للبكتيريا باستخدام المركبات العضوية المتطايرة سيسي - MS.

تميز باستخدام مواد متطايرة الجرثومي الثانوي قداس الطيف Electrospray التأين (سيسي - MS)

ووصف طريقة سريعة لتحليل مركب متطاير في الفاكهة. ويفصل بسرعة المتطايرة موجودة في فراغ الرأس من جناسة من العينة والكشف مع اللوني للغاز فائقة السرعة (GC) إلى جانب وجود سطح الموجة الصوتية (SAW) الاستشعار. ويناقش أيضا إجراء لمعالجة البيانات وتحليلها.

تحليل الفاكهة المتطايرة باستخدام الأنف الالكتروني

العظة حاسة الشم التوسط السلوكيات المختلفة في الحشرات، وغالبا ما تكون معقدة هي مزيج يتألف من عشرات إلى مئات من مركبات طيارة. باستخدام كروماتوغرافيا الغاز مع تسجيل متعدد القنوات في الفص antennal الحشرات، ونحن تصف طريقة لتحديد المركبات النشطة بيولوجيا.

تحديد مواد متطايرة الشم باستخدام الغاز اللوني موضوع وحدة تسجيلات (GCMR) في الفص Antennal الحشرات

تتبع أبخرة المتفجرات من مادة تي ان تي وRDX جمعها على أنابيب مملوءة الامتزاز الحراري المواد الماصة تم تحليلها باستخدام نظام الامتزاز درجة الحرارة المبرمجة إلى جانب لGC مع خاصية التقاط كاشف الإلكترون. يتم الجمع بين التحليل الآلي المباشر مع طريقة ترسب السائل للحد من تقلب العينة وحساب الانجراف الأجهزة والخسائر.

الكشف عن كمية من المتفجرات عن طريق تتبع الأبخرة درجة الحرارة المبرمجة الامتزاز الغاز اللوني-الكترون التقاط الكاشف

يتم تشريح العمال القصر من أنواع النمل اكسبلودينس كولوبوبسيس لعزل المحتوى مثل الشمع المخزنة في الخزانات الغدة الفك السفلي لامداده بهم لاستخراج المذيبات اللاحقة والتحليل بواسطة الفصل اللوني للغاز-قياس الطيف الكتلي. ويرد أيضا الشرح وتحديد المكونات المتطايرة باستخدام برمجيات المصدر المفتوح ميتابوليتيديتيكتور.

عزل محتويات الخزان الغدة الفك السفلي من Bornean ' تنفجر النمل (Formicidae) لتحليل فولاتيلومي GC-MS وميتابوليتيديتيكتور

لقد طورنا منهجية فعالة لأخذ العينات وتحليل إشارات الرائحة من أجل فهم كيفية استخدامها في الاتصالات الحيوانية. على وجه الخصوص ، نستخدم مساحة الرأس الصلبة المرحلة microextraction مقرونة قياس الطيف الكروماتوغرافيا كتلة الغاز لتحليل المكونات المتطايرة من الروائح الحيوانية وعلامات الرائحة.

أخذ العينات وتحليل إشارات رائحة الحيوان

مجموع التبخر الصلبة المرحلة Microextraction (TV-SPME) يتبخر تماما عينة السائل في حين يتم sorbed التحليلات على ألياف SPME. وهذا يسمح لتقسيم التحليل بين بخار المذيبات فقط وطلاء الألياف SPME.

قياس الطيف الكتلي للكروماتوغرافيا الغازية مقترن باختصاص ميكروإكستراكشن المرحلة الصلبة للتبخير الكلي كأداة للطب الشرعي

يتم وصف منصة استخراج الغاز والكروماتوغرافيا ذات الطور الصلب في مساحة الرأس هنا لتحديد وقياس كمية متطايرة سريعة وموثوقة وشبه آلية في ثمار الكشمش الأسود الناضجة. يمكن استخدام هذه التقنية لزيادة المعرفة حول رائحة الفاكهة واختيار الأصناف ذات النكهة المحسنة لغرض التربية.

تنميط المركبات المتطايرة في فاكهة الكشمش الأسود باستخدام الاستخراج المجهري للمرحلة الصلبة في مساحة الرأس إلى جانب كروماتوغرافيا الغاز - قياس الطيف الكتلي

يصف هذا البروتوكول استخراج المركبات العضوية المتطايرة من عينة بيولوجية باستخدام طريقة استخراج المواد الماصة بمساعدة الفراغ ، وكروماتوغرافيا الغاز إلى جانب قياس الطيف الكتلي باستخدام سكة إعداد العينات Entech ، وتحليل البيانات. كما يصف استزراع العينات البيولوجية وفحص النظائر المستقرة.

التقاط المركبات العضوية المتطايرة الميكروبية المنتجة بنشاط من العينات المرتبطة بالإنسان باستخدام استخراج المواد الماصة بمساعدة الفراغ

تظهر هنا طريقة لإثراء وتحليل المكونات المتطايرة لمستخلصات الشاي باستخدام تبخر النكهة بمساعدة المذيبات واستخراج المذيبات متبوعا بقياس الطيف الكتلي اللوني للغاز ، والذي يمكن تطبيقه على جميع أنواع عينات الشاي.

تحليل رائحة الشاي على أساس إثراء تبخر النكهة بمساعدة المذيبات

تعلم طريقة سريعة لجمع المركبات العطرية المتطايرة من الأزهار باستخدام تقنية GC-MS الحرارية. تقلل هذه الطريقة وقت أخذ العينات من ساعات إلى 10 دقائق فقط، مما يساعد الباحثين على دراسة تلقيح النباتات بكفاءة عالية.

مجموعه سريعة من الازهار العطر متطاير باستخدام تقنيه مجموعه المتقلبة الراسي لأخذ العينات الحرارية GC-MS

استكشف المزيد من الفيديوهات