Evaluation of Biomarkers in Glioma by Immunohistochemistry on Paraffin-Embedded 3D Glioma Neurosphere Cultures

Felipe J. N&#250;&#241;ez; Flor M. Mendez; Maria B. Garcia-Fabiani; Joaqu&#237;n Pardo; Marta Edwards; Pedro R. Lowenstein; Maria G. Castro

doi:10.3791/58931

تقييم المؤشرات الحيوية في الدبقي التي Immunohistochemistry على الثقافات نيوروسفيري جزءا لا يتجزأ ...

JoVE Journal
Cancer Research

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Cancer Research

Evaluation of Biomarkers in Glioma by Immunohistochemistry on Paraffin-Embedded 3D Glioma Neurosphere Cultures

تقييم المؤشرات الحيوية في الدبقي التي Immunohistochemistry على الثقافات نيوروسفيري جزءا لا يتجزأ من البارافين الدبقي 3D

Full Text

8,310 Views

06:32 min

January 9, 2019

DOI: 10.3791/58931-v

Felipe J. Núñez^1,2, Flor M. Mendez², Maria B. Garcia-Fabiani^1,2, Joaquín Pardo^1,3, Marta Edwards^1,2, Pedro R. Lowenstein^1,2, Maria G. Castro^1,2

¹Department of Neurosurgery,University of Michigan Medical School, ²Department of Cell & Developmental Biology,University of Michigan, ³INIBIOLP, Histology B-Pathology B, School of Medicine,UNLP

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

نيوروسفيريس نمت كثقافات 3D تشكل أداة قوية لدراسة البيولوجيا الدبقي. نقدم هنا بروتوكولا لأداء إيمونوهيستوتشيميستري مع الحفاظ على هيكل ثلاثي الأبعاد نيوروسفيريس الدبقي عن طريق تضمين البارافين. هذا الأسلوب يتيح لتوصيف خصائص نيوروسفيري الدبقي مثل ستيمنيس وتمايز العصبية.

هذا البروتوكول مهم لأنه يمكن استخدامه لدراسة وجود العلامات الحيوية الورم الدبقي من خلال طريقة تحافظ على بنية ثلاثية الأبعاد من الخلايا العصبية الورم. الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هو أن يتم الحفاظ على مورفولوجيا الخلايا العصبية مقارنة مع طريقة cytospin التي تتعرض الخلايا للتلاعب المجهدة وتصبح بالارض. يمكن تطبيق هذه الطريقة على أي أنظمة أخرى لثقافة الأنسجة التي يتم فيها زراعة الخلايا في 3D والحفاظ على الهيكل مهم.

للبدء، الخلايا العصبية أو ن ن في قارورة T-25 حتى يتم التقاء الخلايا. انتخاب الورم NS في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر. (إمبيليت) في 300 جي لمدة خمس دقائق

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos