الحث والتهديف من مرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف في نموذج المورين Xenogeneic والقياس الكمي للخلايا تي البشرية في أنسجة الماوس باستخدام PCR الرقمية

يحدد هذا البروتوكول كيفية الحث على مرض xenograft مقابل المضيف ، أو xenoGVHD ، وكيفية العمى وتوحيد التهديف السريري لضمان النتائج المتسقة. نموذج xenoGVHD يوفر طريقة في الجسم الحي لاختبار العلاجات المثبطة للمناعة ضد الخلايا البشرية بدلا من مورين T، وتحسين ترجمة هذه الدراسات إلى العيادة. ومن خلال هذا الإجراء سيكون عمارة سنغ، وهي طالبة دراسات عليا من مختبري.

قبل يوم واحد من الحقن، ضع شعا السكري غير البدين الذي يبلغ من العمر ثمانية إلى 12 أسبوعًا، أو NSG، الفئران في قفص فطيرة معقمة، وتشعع الفئران في مصدر سيزيوم-137 بجرعة إجمالية قدرها 150 مئوية، مع دوران بطيء لضمان حتى التشعيع. ثم، ضع الفئران في أقفاص نظيفة في خزانة السلامة البيولوجية العقيمة بين عشية وضحاها. في صباح اليوم التالي، وجمع ما يكفي من الدم البشري السليم لعزل 1.1 مرة 10 إلى سبع خلايا أحادية النوى الدم الطرفية، أو PBMCs، لكل فأر، وتمييع الدم heparinized في حجم متساو من مصل البقر الجنينية 2٪، أو FBS، في برنامج تلفزيوني.