تقييم التجانب في نصف الكرة الأرضية مع التسجيل الميداني المحلي الثنائي المحتمل في القشرة الحركية الثانوية للفئران

يمكن استخدام هذه التقنية لمراجعة بعض الخصائص الأساسية للفيزياء الكهربائية الأقاليمية لإضفاء الطابع الجانبي على نصف الكرة الأرضية، وكذلك الاتصال والاتجاه والاقتران. القياس الكهربائي هو وسيلة حساسة وفعالة لتقييم في الحيوانات، والأنشطة العصبية. يوفر هذا البروتوكول طريقة أفضل لدعم في تزامن الإشارات الكهربائية.

قد يوفر فهم الآلية الأساسية لإضفاء الطابع الجانبي للدماغ المتغير المحتمل في مرض الزهايمر المسبب للمرض، رؤى جديدة حول المؤشرات الحيوية المحتملة لعلاج مرض الزهايمر. قبل الجراحة ، تأكد من عمق التخدير من الماوس ، عن طريق إجراء ذيل أو إصبع قدم قرصة مع ملقط. المقبل، ووضع الماوس في جهاز stereotaxic، وإصلاح رأسه.

تطبيق مرهم على كلتا العينين للحفاظ على رطوبة. ثم، حلق الرأس، وتعقيم المنطقة. إجراء شق صغير من 12 إلى 15 ملليمتر، في منتصف المنطقة الحليقة.

باستخدام ملقط، سحب بلطف فروة الرأس بعيدا عن خط الوسط. بعد ذلك، فصل الجلد بلطف، وإزالة الأنسجة المتبقية. تنظيف الجمجمة، وذلك باستخدام براعم القطن المغلفة بيروكسيد الهيدروجين.

تحت مجهر ستيريو، حفر اثنين من الثقوب الصغيرة، من 1 إلى 1.5 ملليمتر رادي، على الجانبين الأيسر والأيمين من الجمجمة، للسماح بإدراج ميكروكيلتروديس تسجيل في المناطق M2. إزالة بعناية ماطر دورا مع إبرة التنغستن. ثم، إدراج اثنين من تسجيل ميكروليكترودات تسجيل منفصلة، مليئة 0.5 كلوريد الصوديوم الضرس، في الثقوب، في زاوية 60 درجة، وذلك باستخدام ميكروموديلاتورات الميكانيكية.

بالنسبة لتسجيل LFP، قم ببطء بخفض أقطاب الزجاج اليمنى والأيسر إلى إحداثيات M2. لمراقبة الجودة، اختبار مقاومة كل قطب كهربائي، وذلك باستخدام مكبر للصوت التفاضلي. المقبل ، تعيين عملية تسجيل في 0.1 هرتز تمريرة عالية ، و1000 تمريرة هرتز منخفضة ، مع 1000 مرة التضخيم.

جمع البيانات الرقمية LFP الخام في حالة مستقرة، لمدة 60 ثانية على الأقل، مع الماوس التنفس بالتساوي في اثنين من التنفس في الثانية الواحدة، تحت التخدير. بعد التسجيل ، ورفع ببطء الأقطاب الكهربائية من الدماغ. حفظ البيانات وتحليل دون اتصال، مع برنامج التحليل.

لإجراء تحليل الارتباط المتبادل، في برنامج التحليل، انقر فوق التحليل، ثم الارتباط الموجي، واستيراد البيانات. بعد ذلك، قم بتعيين إشارة قناة الموجي لتكون القناة الأولى، والآخر كمرجع. قم بتعيين العرض كـ 2، وإزاحته كـ واحد.

لاحقاً، تعيين مدة كل من LFPs إلى 100 ثانية عن طريق تحديد وقت البدء ووقت الانتهاء. ثم اضغط على زر العملية لإجراء تحليل الارتباط المتبادل. انقر فوق الملف، تصدير باسم، ثم حفظ نتائج الارتباط المتبادل المقابلة للمخطط المنبثق الناتج في تنسيق النص.

بعد ذلك، إزالة قيم الارتباط في الوقت الفاصل بين صفر زائد و ناقص 01 ثانية ثم التعامل مع بقية البيانات عبر الارتباط. لإجراء تحليل الاتساق، قم بتشغيل البيانات في برنامج التحليل. بعد ذلك، ترتيب إشارات LFP اثنين كالقنوات الموجي الأول والثاني، ثم تعيين قيمة حجم الكتلة كـ 4096.

حجم الكتلة يعني عدد نقاط البيانات المستخدمة في الأول للتحويل الحقيقي. كلما كان حجم الكتلة أكبر، كلما كان دقة التردد أفضل. حرك الخطوط المنقطة يدويًا، للتأكد من أن دقة الوقت للإشارات في كلتا القناتين يتم تعيينها على أنها نفس الفترة.

اضغط على زر الإضافة لتحميل المنطقة وإجراء تحليل التماسك. بعد ذلك انقر فوق ملف وحفظ باسم، لحفظ نتائج الاتساق المقابلة للمخطط المنبثق الناتجة في شكل نص. لمعرفة ما إذا كان الباثولوجيا مرض الزهايمر المبكر يضعف قدرة التميمة نصف الكرة الأرضية، تم تسجيل LFPs خارج الخلية في M2 اليسار واليمين من فئران APP/PS1 والضوابط نوع البرية، وتم تحليل العلاقة المتبادلة.

وفي أنواع الفئران البرية، أظهرت النتائج أن متوسط الارتباط بين الـ LFPs الأيسر والأيني في فترات زمنية إيجابية يختلف اختلافاً كبيراً عن ذلك في فترات التأخير الزمنية السلبية، مما يعني وجود أوجه عدم تماثل في نصف الكرة الأرضية في مناطق M2 من ضوابط النوع البري. وبالمقارنة، أظهرت LFPs اليسرى والأيمانية لفئران APP/PS1 تزامنًا أعلى في مجال الوقت، مما يشير إلى انخفاض عدم التماثل بين M2 الأيسر والأيني. ثم تم تصفية ذبذبات غاما من LFPs وأجريت تحليلات الاتساق لقياس تشابه الإشارات الكهربائية في نطاق ترددات غاما. وأظهرت النتيجة أن تماسك غاما بين اليسار واليمين M2 في فئران APP/PS1 كان أعلى بكثير من ذلك في فئران النوع البري، مما يشير إلى تزامن أعلى، وبالتالي خفض التميمة بين M2 الأيسر والأيني في فئران APP/PS1.

يوريثان هو السامة والمواد المسببة للسرطان، لذا يرجى دائما توخي الحذر، واتباع أنظمة السلامة عند التعامل معها. من المهم جداً اختبار عمق التخدير كل ساعة، من أجل ضمان LFPs مستقرة يتم تسجيلها. يمكن تطبيق عملية التسجيل والتحليل على مسارات الدماغ الأخرى ، وخاصة بالنسبة للمختبرات التي ليس لديها أنظمة للتسجيل متعدد القنوات في الحيوانات المتحركة بحرية.