Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Josiah Fernandez; Enrique C Torchia

doi:10.3791/59353

عزل وتلطيخ الخلايا الكيراتينية الجلد الماوس لدورة الخلية تحليل محدد للتعبير البروتين الخلوي عن طر...

JoVE Journal
Developmental Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Developmental Biology

Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

عزل وتلطيخ الخلايا الكيراتينية الجلد الماوس لدورة الخلية تحليل محدد للتعبير البروتين الخلوي عن طريق قياس الخلايا الشامل

Full Text

8,127 Views

12:34 min

May 9, 2019

DOI: 10.3791/59353-v

Josiah Fernandez¹, Enrique C Torchia¹

¹Department of Dermatology and Charles C. Gates Center for Regenerative Medicine,University of Colorado Anschutz Medical Campus

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

يصف هذا البروتوكول كيفية عزل خلايا القرنية الجلدية من نماذج الماوس، ووصمة عار مع الأجسام المضادة ذات العلامات المعدنية، وتحليل الخلايا الملونة عن طريق قياس الخلايا الشاملة من أجل تحديد نمط التعبير من البروتينات ذات الأهمية في مراحل دورة الخلية المختلفة.

وهذا البروتوكول هام لسببين رئيسيين. رقم واحد، فإنه يسمح للمستخدم لتكون قادرة على تحديد حالات دورة الخلية من خلايا الجلد التي تم عزلها من نموذج حيواني. كما أنه يسمح لنا أن تكون قادرة على تحليل التعبير البروتين في المراحل المنفصلة من دورة الخلية.

بالمقارنة مع الأساليب السابقة لتحديد انتشار الخلايا ، تسمح طريقتنا بتحديد أكثر دقة للمراحل المختلفة في دورة الخلية ، ويمكننا أيضًا تحليل أكثر من 40 علامة مختلفة في المراحل المختلفة لتقسيم الخلية. هذا يعزز إلى حد كبير من تطبيق وبراعة الأسلوب. يمكن استخدام هذا البروتوكول في أبحاث السرطان وفي أي نوع آخر من الأمراض حيث توجد حاجة لتحديد أنماط تعبير بروتينية محددة لدورة الخلايا.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos