عالية الإنتاجية الجر قوة الفحص المجهري باستخدام PDMS يكشف عن الآثار التي تعتمد على الجرعة من تحويل عامل النمو-β على الانتقال الظهاري إلى Mesenchymal

نحن نقدم عالية الإنتاجية الجر قوة الجر تسرب ملفقة مع مطاط السيليكون (PDMS). هذا الفحص الجديد هو مناسبة لدراسة التغيرات المادية في انقباض الخلايا خلال مختلف العمليات البيولوجية والطبية الحيوية والأمراض. نحن نبين فائدة هذه الطريقة عن طريق قياس زيادة تعتمد على TGF-β في الانقباض خلال الانتقال الظهاري إلى mesenchymal.

مختبري مهتم بعلم الأحياء الميكانيكية، الذي يدرس كيف تمارس الخلايا وتتأثر بالقوى الميكانيكية. إحدى الطرق التي يمكننا بها قياس علم الأحياء الميكانيكية هي قياس قابلية الخلية. في الخلايا الملتمَكة، يظهر التقلص في قوى الجر التي تمارس على ركيزة الخلية. نحن نقوم بتحديد هذه القوى باستخدام منهجية يشار إليها عموما باسم المجهر قوة الجر أو TFM. ويتم تنفيذ TFM في مجموعة متنوعة واسعة من الطرق المختلفة ، ولكن الجانب الشائع هو أنه أسلوب مختبر متسلسل وبطيء يتم عادة في طبق واحد مثل هذا هنا. وهذا يقيدنا بتقييم مجموعة سكانية واحدة أو حالة واحدة في كل مرة. في جميع أنحاء في ثقافة الخلية تحسنت منذ بعض الوقت ولكن خلق أطباق متعددة وفكرنا، لن يكون كبيرا أننا يمكن أن لـ TFM مع نفس الإنتاجية المتزايدة ونفس الكفاءة من الوقت والكواشف؟ وهذا كان حلنا. لذلك أنشأنا 96 جيدا الجر قوة الطبق. ويبدو مشابها جدا لطبق ثقافة الأنسجة 96 التقليدية بشكل جيد، ولكن مع هذا الطبق لا يمكننا فقط دراسة 96 ظروف مختلفة ثقافة الخلية، ولكن أيضا تحديد قابلية الخلية. هذا يقدم حلاً أعلى بكثير من الإنتاجية من نهج طبق واحد، مما يسمح لنا بفحص ظروف الخلايا المتنوعة والاستجابات المتعاقدة. أثناء الانبثاث السرطاني، تنتقل الخلايا السرطانية من موقعها الأساسي إلى المواقع الثانوية، مما ينشر المرض في جسمنا. هذا السلوك النقيلي للخلايا السرطانية يمثل 90٪ من الموت المرتبطة بالسرطان. واحدة من الآليات المقترحة للخلايا السرطانية الظهارية للحصول على نوع ظاهري أكثر هجرة والغازية هو التحول الظهارية-mesenchymal, EMT. خلال EMT، يصبحون أكثر هجرة و توغل، وتغيير سلوكهم الجسدي. لفهم أفضل هذه التغيرات في السلوك البدني، ونحن الاستفادة لدينا الركيزة السيليكون لينة لقياس التغيرات في انكماش خلايا الغدة الثديية الماوس مع التعريفي EMT بواسطة TGF-In هذه الدراسة، وحققنا كيف تركيزات مختلفة ووقت الحضانة من TGF-تأثير على سلوك الخلايا البدنية. Polydimethylsiloxane هو المطاط متوافقة جدا مع أدنى معامل يونغ من حوالي 0.6 كيلوباسكال. صلابة هذه المواد يمكن أيضا أن تكون قابلة للتواؤم باستخدام تركيزات مختلفة من وكيل crosslink بما في ذلك SYLGARD 184.To قياس الخصائص الميكانيكية ل PDMS نستخدم rh. بعد خلط الجزء A والجزء B من PDMS، في نسبة وزن واحد إلى واحد وإضافة عامل المعالجة مع نسبة الوزن المحددة، تحميل دفعة أعدت على لوحة rheometer. تأكد من تحميل ما يكفي من العينة لتغطية منطقة المغزل تماما. من المهم التأكد من أن المغزل يلمس العينة تمامًا دون ترك مساحة حرة عند حافتها. وينبغي أن أي عينة إضافية قلصت بعناية ومسحت من لوحة. قياس معامل التخزين النهائي والتبعية الزمنية لللزوجة لكل عينة من خلال القيام بالوقت والتردد الاجتياحات في سلالة القص متذبذب من 0.5٪Newsha]هذا الرسم البياني هو مثال واحد من اختبار سيك، بعد أن فعلت لقياس السلوك الريولوجي من polydimethylsiloxane مع سلالة القص المتذبذبة تطبيقية من 0.5٪ ودرجة الحرارة من 100