الإدارة داخل الشعب الهوائية مباشرة لتحسين ترسب عامل انتقائي داخل الرئة الماوس

النماذج أمراض الرئة في الفئران، وغالبا ما تدار وكلاء التجريبية عن طريق الحقن داخلالجرا. غير أن هذا النهج لا يمكن أن يستهدف رئة واحدة بشكل انتقائي، وقد يكون التوزيع غير متماثل بين الرئتين. عن طريق اعماثة رئة فردية في فأر مُخَذَّب، يمكننا أن نُدير عوامل تجريبية من جانب واحد.

مع تعديل, هذا النهج يمكن استخدامها ثنائيا, تحسين التماثل من الترسيب عبر الرئتين. يعد إعداد القسطرة بما في ذلك التلميع والغج خفيف ووضع العلامات عنصرًا أساسيًا للنجاح. بالطبع، ممارسة هذه التقنية هو أيضا ضروري.

إثبات الإجراء سيكون سومي لياو، مساعد أبحاث محترف من مختبري. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم ، ماوس مُغدَّد ، عمره ثمانية إلى 10 أسابيع ، C57-Black/6 من النسور على خط خياطة متدلى في اتجاه supine. تأمين فضفاضة الماوس مع اثنين إلى ثلاثة قطع من هوك، وحلقة الشريط، وتجنب تقييد التهوية، وتشغيل الصمام الثنائي الإنارة الألياف البصرية الباعث للضوء.

ضع المشغل خلف المنصة، ظهر إلى الماوس. توجيه gooseneck من الإضاءة 2-3 سنتيمترات بعيدا عن الماوس بحيث يضيء منطقة الحنجرة من خلال الجلد. باستخدام ملقط العقيمة في اليد المهيمنة، واسحب اللسان من تجويف الفم.

استخدام اليد غير الدومينة والمثبط العقيم لتسطيح جذر اللسان لفضح على نطاق واسع البلعوم. بعد الإفراج عن ملقط، واستخدام اليد المهيمنة ل intubate القسطرة الموسعة في القصبة الهوائية عن طريق تجويف الفم. تأكيد موضع من خلال مراقبة ما إذا كانت فقاعة في حقنة يتحرك صعودا وهبوطا مع كل نفس.

لتكبل لوبار انتقائي من الرئة اليمنى القاصي، بعد النوب داخل منطقة صناعية، تدوير لوحة بلاستيكية 30 درجة، وتوجيه محور القسطرة بالتوازي مع خط الوسط الماوس إلى عمق الوزن المناسب القائم على، كما هو مبين في الجدول. باستخدام طرف هلام التحميل، وتقديم 20 ميكرولترات من 0.3٪ ايفانز صبغة زرقاء في القسطرة، تليها واحد إلى اثنين من 100 ميكرولتر aliquots من الهواء عن طريق القطارة الزجاج. ثم، سحب القسطرة، والحفاظ على الماوس في موقف لمدة 30 ثانية قبل وضع الحيوان على بطانية الاحترار، مع مراقبة حتى الشفاء الكامل.

لتكنغي انتقائي لوبار من الرئة اليسرى قعر، بعد النوب داخل مصيدة، تدوير المجلس البلاستيك ناقص 74 درجة، وتقدم بلطف القسطرة في القصبات الرئيسية اليسرى في حين وضع ضغط متواضع 90 درجة إلى أسفل ونحو bookend. بعد تعبئة شرائح الرئة السفلى اليسرى، تدوير لوحة من البلاستيك ناقص 30 درجة، وتقديم 40 ميكرولترات من 0.3٪ ايفانز صبغة زرقاء مع تلميح هلام التحميل. ثم، تسليم واحد إلى اثنين من 100-300-microliter aliquots من الهواء عبر القطارة الزجاج، وسحب القسطرة للسماح للماوس لاسترداد، كما هو موضح.

لإدارة الرئة كامل الحق، بعد النوب داخل منطقة العرض، تدوير لوحة من البلاستيك 30 درجة، وتوجيه القسطرة بالتوازي مع خط الوسط الماوس، والوصول إلى الأعماق اللازمة لتقبل لوبار الوجه الأيمن. تأكيد مظهر علامة tachypnea، وتدوير الماوس ناقص 74 درجة لتمكين المساعدة الجاذبية لتسليم عامل. سحب القسطرة إلى موقف الذي يتوافق مع اقلاع قصبات mainstem الحق، وضمان أن شطبة من القسطرة يواجه إلى أسفل.

تسليم 30 ميكرولترات من 0.3٪ ايفانز صبغة زرقاء إلى الرئة اليمنى، تليها واحد إلى اثنين من 100-300 ميكرولتر aliquots من الهواء. ثم، سحب القسطرة، والسماح للماوس لاسترداد. لإدارة الرئة بأكملها اليسار، بعد التجلب داخل الطرف، تدوير المجلس البلاستيك ناقص 74 درجة، وتقدم بلطف القسطرة في القصبات الرئيسية اليسرى في حين وضع ضغط متواضع على حد سواء 90 درجة إلى أسفل ونحو bookend.

تأكيد علامة tachypnea لا، وتدوير الماوس 86 درجة للسماح المساعدة الجاذبية مع إدارة وكيل. سحب القسطرة إلى القصبات الرئيسية اليسرى، وتدوير شطبة القسطرة لمواجهة الهبوط. تسليم 30 ميكرولترات من 0.3٪ ايفانز صبغة زرقاء مع تلميح هلام التحميل إلى الرئة اليسرى، تليها واحد إلى اثنين من 100-300-microliter اسكوت عن الهواء.

ثم، سحب القسطرة، للسماح للماوس لاسترداد، كما هو موضح. يؤدي التسليم الثنائي لـ FITC-dextran من خلال كل من الإدارة داخل المجرى وداخل القصبة الهوائية إلى عدم التكافؤ في الرئة مع تركيزات نسبية أكبر في الرئة اليسرى. وهذا يشير إلى أن التسليم الرئوي غير المتماثل للعوامل التجريبية بعد الإدارة داخل مركز العمل ليست نتيجة للعرض غير المتماثل لهذه العوامل لكل قصبة تشنجية ولكن يتم تخفيف التسليم متساوي mainstem من خلال الاختلافات في وزن الرئة والكتلة.

الجرعة المعدلة داخل إدارة القصبة يحسن التماثل من تسليم عامل parenchymal الرئة. على الرغم من هذا التصحيح، ومع ذلك، لا يزال لوحظ عدم تجانس مستمر داخل فصوص مختلفة من الرئة اليمنى. بعد 21 يوماً من إصابة الرئة الليفية الناجمة عن bleomycin داخل الرحم، لوحظ الالتهاب في الغالب في الرئة اليسرى، مع إصابة أقل ملحوظة في الرئة اليمنى.

على العكس من ذلك، الجرعة المعدلة داخل الناحية الداخلية bleomycin الإدارة يؤدي إلى انخفاض طفيف في إصابة في الرئة اليسرى وزيادة إصابة في الرئة اليمنى، مع أكبر إصابة واضحة في فصوص الوسط والمتفوق. أثناء إدارة الرئة بالكامل، لا تنسى سحب القسطرة وتميل إلى مشطة القسطرة.