A في فيفيفو نقص الإستروجين نموذج الماوس لفحص علاجات الإستروجين الخارجية من خلل القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث

تفتقر إلى نماذج المختبرات التي تنطوي على الفئران نقص هرمون الاستروجين تقديم بيانات الطنين الطنين pons. هذا الإجراء مفيد بشكل خاص لفحص علاجات الإستروجين الخارجية من الخلل الوظيفي القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن استئصال الأوفاريت دون شق dorsolateral مزدوج هو طريقة أسهل وأقل استهلاكا للوقت التي تتجنب التصاق تجويف البطن الشديد والتهاب.

إثبات الإجراء سيكون يو تشانغ يين، طالب دراسات عليا من مختبري. لإجراء عملية استئصال ثنائية في الفئران خروج المغلوب APOE، أولاً تأكيد عدم الاستجابة لدواسة منعكس ووضع الحيوان في موقف عرضة على وسادة التدفئة. ضع مرهم على عيون الحيوان واغطي الحيوان بستار جراحي.

جعل شق شق واحد سنتيمتر الجانبي إلى خط الوسط، واحد سنتيمتر الجانبي إلى الأضلاع الساحلية، واستخدام ملقط لتشريح بصراحة الأنسجة تحت الجلد. باستخدام نظارات تشريح، وتحديد الأنسجة الدهنية البيضاء في تجويف البطن. باستخدام مقص صغير وملقط الصغرى، وجعل شق 0.5 إلى واحد سنتيمتر واحد من خلال اللفافة، حتى يتم التوصل إلى تجويف البطن، واستخدام ملقط صغيرة لسحب بلطف الأنسجة الدهنية البيضاء.

وينبغي ملاحظة مبيض وردي على شكل توت، ملفوف في الأنسجة الدهنية، داخل تجويف البطن. استخدام خياطة أحادية ل ligate 0.5 إلى واحد سنتيمتر في الأوعية القريبة وقرن الرحم، واستخدام مقص صغير لحصاد المبيض. إعادة الأنسجة المتبقية إلى تجويف البطن، واستخدام خياطة أحادية الفردية لإغلاق بشكل منفصل العضلات والجلد طبقات.

ثم حصاد المبيض على الجانب contralateral من الحيوان، كما أظهرت للتو، والسماح للماوس لاسترداد على وسادة التدفئة مع الرصد، حتى إعادة شغل كامل. مرة واحدة في الأسبوع، من الأسبوع السابق إلى 12 أسابيع بعد الجراحة، وقياس وزن الجسم من كل وهمية وتجريبية على التوازن. بالنسبة للكوليسترول الكلي والبلازميا وقياس الدهون الثلاثية، في الأسبوع 12، قم بإعداد منطقة الصدر البطني بنسبة 70٪الإيثانول، وأدخل إبرة قياس 25 في البطين الأيمن.

التعرق ببطء، حتى ملليلتر واحد من الدم يتدفق في الحقنة، وصرف العينة في أنبوب جمع 1.5 ملليلتر تحتوي على عشرة ميكرولترات من 0.5 EDTA الضرس. عكس الأنبوب عدة مرات جيدا لخلط EDTA في الدم، ووضع الأنبوب على الجليد على الفور. في غضون 30 دقيقة من جمع، الطرد المركزي العينة لمدة 20 دقيقة في 400 مرة G وأربع درجات مئوية.

جمع بعناية البلازما فائقة لتخزين في ناقص 80 درجة مئوية. لعزل الشريان الأورطي، في الأسبوع 12، إرفاق إبرة 25 قياس إلى حقنة 50 ملليلتر مليئة PBS، وإدراج الإبرة في البطين الأيسر من الحيوان التجريبي. قطع الأذين الأيمن لتجنب ارتفاع الضغط من الضخ، و perfuse أنسجة القلب في 05 إلى 08 ملليلتر من برنامج تلفزيوني في الدقيقة معدل التدفق.

امتصاص السائل في التسريب مع أنسجة المختبر واستخدام مقص ملقط لإزالة الأضلاع والرئتين. افتح تجويف البطن لإزالة الأعضاء الداخلية، للحصول على رؤية أفضل للدهر. فهم القلب مع ملقط الصغيرة للسماح بفصل من الشريان الأبهر dorsally، من العمود الفقري، حتى التشعب الحرقفي.

ثم إصلاح القلب والأبهرة لمدة 48 ساعة في 4٪ شبهformaldehyde, قبل تخزين عينة الأنسجة في المالحة في درجة حرارة الغرفة أو في درجتين إلى ثماني درجات مئوية لبضع ساعات. بعد اثني عشر أسبوعا من اتباع نظام غذائي عالي الكوليسترول، تظهر الفئران ذات القدرة على الاستئصال زيادة ملحوظة في تركيزات البلازما الكلية للكوليسترول والدهون الثلاثية. الفئران Ovariectomized، لكل تدار شفويا مع oestradiol بيتا 17، أو PPD عن طريق انتشار البندق، يحمل انخفاض كبير تركيزات الكوليسترول في الدم في البلازما الكلي من الفئران التي تعمل بالصفح.

مستويات ثلاثية الدهون البلازما انخفاض في الفئران المُجَاَدَّة، لكلّ مُدار شفوياً مع 17 بيتا أويستراديول، لكن ليس مع PPD. في حين لوحظ وجود ميل نحو زيادة وزن الجسم في الفئران ذات الوفيات، مقارنة بالفئران التي تعمل بالرسوم، لا تلاحظ أي تغييرات كبيرة في وزن الجسم بشكل عام، بين المجموعات الأربع من الحيوانات. يتم زيادة البلاك الأقصى من الشريان الأورطي التصاعدي في الفئران ذات المعدلات المُجَرَّحة، مقارنةً بجميع المجموعات الأخرى، بالتزامن مع انخفاض عام في وظيفة القلب، التي لوحظت في هذه الحيوانات.

علاوة على ذلك ، فإن متوسط النسبة المئوية لمنطقة الآفة الأبهرية ، نسبة إلى المنطقة الأبهرية بأكملها ، يزداد بشكل كبير في الفئران المُجَرَّة. كما هو متوقع ، يتم تقليل وجود هذه الآفات مع oestradiol 17 بيتا ، أو علاج PPD. الخطر الرئيسي لعملية استئصال الأوفاري هو الربط الحالب، الذي يؤدي إلى ارتفاع معدل الوفيات.

تذكر أيضا لقطع عميق بالقرب من فروع الشريان الكلوي، لتجنب الضرر الأبهري.