Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) for RNA Isolation from Endothelial Cells In Vivo

Patrick Moran; Yichen Guo; Rong Yuan; Nicholas Barnekow; Jordan Palmer; Adam Beck; Bin Ren

doi:10.3791/59624

ترجمة تنقية التقارب الريبوسم (TRAP) لعزل الحمض النووي الريبي عن الخلايا البطانية في الجسم الحي

JoVE Journal
Biochemistry
Author Produced

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biochemistry

Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) for RNA Isolation from Endothelial Cells In Vivo

ترجمة تنقية التقارب الريبوسم (TRAP) لعزل الحمض النووي الريبي عن الخلايا البطانية في الجسم الحي

Full Text

12,388 Views

08:53 min

May 25, 2019

DOI: 10.3791/59624-v

Patrick Moran^1,2, Yichen Guo^3,4, Rong Yuan^1,3, Nicholas Barnekow¹, Jordan Palmer², Adam Beck³, Bin Ren^3,4,5

¹Blood Research Institute,Blood Center of Wisconsin, ²Department of Medicine,Medical College of Wisconsin, ³Department of Surgery,The University of Alabama at Birmingham, ⁴Department of Biomedical Engineering,The University of Alabama at Birmingham, ⁵GBS Program, Graduate School,The University of Alabama at Birmingham

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

نقدم نهجا ً لتنقية الرَّناة الرَّاقيزة المنوّجة الوعائية من الخلايا البطانية الوعائية (ECs) مباشرة في أنسجة الدماغ والرئة والقلب باستخدام الأنسجة الوراثية الخاصة بالجماعة الأوروبية للبروتين الفلوري الأخضر المعزز (EGFP) في ريبوسوسوم بالاشتراك مع تنقية الحمض النووي الريبي .

مرحبا، أنا بن رين، أنا أستاذ مشارك في الجراحة والهندسة الطبية الحيوية في جامعة ألاباما كلية برمنغهام للطب. مختبرنا المهتمة على بيولوجيا الخلايا البطانية وظيفة الأوعية الدموية اكوجينيسيس في سياق هذه الأمراض القلبية الوعائية الشائعة والسرطانات. أحد أبحاثنا يركز على تنظيم اللاجينية والنسخ من التغاير بين الخلايا البطانية والتخلق الوعائي.

لفهم آليات النسخ من تولد الأوعية، أنشأنا خطوط الماوس المعدلة وراثيا هندسة، والتي قمنا ليس فقط حذف جينات محددة المرتبطة تولد الأوعية الدموية في الخلايا البطانية، ولكن سيتم وضع علامات وراثية على مسبار GFP تعزيز الريبوس من الخلايا البطانية الأصلية. وبهذه الطريقة، يمكننا عزل وتنقية حلقات من الحمض النووي الرسول المرتبطة من الخلايا البطانية في مختلف أعضاء الأنسجة مباشرة في الحيوانات المعدلة وراثيا. يمكننا بعد ذلك استخدام الحمض النووي رسول تنقية لتحليل المصب من النصوص ونسخ.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos