حامل عينة الكل في واحد لبلورات الأشعة السينية الجزيئية مع الحد الأدنى من تشتت الخلفية

ويمكن استخدام حامل العينة هذا لزراعة البلورات وجمع بيانات الحيود بالأشعة السينية. وقد تم استخدام حامل العينة هذا على 24-آبار لوحات التي تستخدم على نطاق واسع في المجتمع MX. الجانب المهم جدا هو أنه لا يوجد أي تلاعب مطلوب.

ولم يكن هناك حامل عينة يضم هذه الجوانب الموصوفة هنا من قبل. رؤية شيء ما هو دائما أفضل بكثير من مجرد قراءة عنه. من خلال مشاهدة الفيديو ، يمكن للمستخدم المحتملين فهم ميزات وتعقيدات حامل العينة الجديد على الفور.

للبدء، إنشاء سطح نظيف والغبار خالية من استخدام قماش رطبة، خالية من الوبر. تأخذ واحدة حامل عينة من مربع لها ووضع بلطف، احباط الصفراء التي تواجه، على سطح نظيف لتجنب الضرر أو ثقب غير مرغوب فيه من احباط COC المؤخر. إعداد قطرات التبلور على احباط الأصفر كما سيتم ذلك على الشرائح غطاء المستخدمة عادة.

وضع قطرات بلطف لتجنب أي تمزق أو ثقب من احباط باستخدام ماصة. على نوع 2 ونوع 3 أصحاب العينة، قطرتين هي الحد الأقصى الموصى به. على حامل عينة النوع 1، يمكن وضع ما يصل إلى ثلاث قطرات.

الوجه حامل العينة أكثر ووضعها على تجويف مدهون مسبقا من لوحة لينبرو 24-well well على غرار. استخدام المعينات تحديد المواقع من حامل العينة لتوجيهه إلى وضعه الأمثل. ضمان الموضع الصحيح لصاحب العينة من أجل تجنب التبخر غير المرغوب فيها.

عن طريق وضع لوحة التبلور تحت مجهر ناقل الحركة الخفيفة، من دون أو بدون المستقطبات، ورصد نمو البلورات دون أي اضطراب في التجربة. قم بإجراء عملية التبريد تحت مجهر ضوء الإرسال. تخترق بلطف احباط COC الخارجي باستخدام كانولا غرامة.

تأكد من أن احباط الصفراء الداخلية لا تزال بمنأى. يجب أن يكون ثقب الحق بجانب قطرة التي يتم التلاعب بها. إدراج فتيل الورق غرامة في حفرة مطعون.

دفع بعناية الفتيل إلى الأمام حتى يمس احباط البوليميد الأصفر. إبقاء الفتيل في اتصال مع احباط مثقبة. سوف الفتيل تمتص بعيدا كل حل الزائدة.

الوقت اللازم لإزالة السائل الكامل يعتمد على لزوجة من الحلول وتكوين الخمور الأم. بعد أن يتم امتصاص كل السائل بعيدا، تراجع بلطف فتيلة ورقة. تذكر موقف من قطرة، لأنه قد لا تكون مرئية بعد إزالة الخمور الأم.

خذ ماصة قياسية لتطبيق حجم صغير من محلول الحماية المبردة ، باستخدام طرف مقذوف من خلال نفس الثقب. لإعادة ختم احباط COC الذاتي الشفاء، ضع بلطف إصبع محمي على الحفرة لمدة ثانية واحدة تقريباً وانزلق عبر الثقب. الضغط الطفيف في تركيبة مع ارتفاع درجة الحرارة تعزيز إعادة التكتية من ثقوب التي ليست كبيرة جدا.

حل يغاند في الخمور الأم في التركيز المطلوب في أنبوب رد فعل. تدور الحل لمدة 10 دقائق في 12،000 مرات ز من أجل إزالة الجسيمات غير قابلة للذوبان. استخدم جهاز طرد مركزي يتم التحكم فيه بدرجة حرارة إذا لزم الأمر.

ضع بلطف ثلاثة ميكروليترس كحد أقصى من الحل المحتوي على ligand في الفجوة بين احباط COC والفيلم بوليميد باستخدام طرف ماص طويل مقذوف؛ تراجع عن الطرف. لإعادة ختم احباط COC الذاتي الشفاء، ضع بلطف إصبع محمي على الحفرة لمدة ثانية واحدة تقريباً وانزلق عبر الثقب. احتضان التجربة لبعض الوقت للسماح بالانتشار عبر الغشاء.

يعتمد الوقت النقع للغاية على لزوجة حل الناشر ومكوناته. كرر الخطوات نقع يغاند عدة مرات لامتصاص في وقت لاحق يغاندس مختلفة. لتقليل تشتت المذيبات، قم بإزالة الحل الزائد قبل جمع البيانات.

ضمان بيئة مستقرة، والرطوبة التي تسيطر عليها شعاع مع الظروف المحددة مسبقا. لتنفيذ جمع بيانات الحيود في الموقع في درجة الحرارة المحيطة، ارفع برقة رقائق COC الشفافة عند النقطة المعينة باستخدام ملقط وتقشيرها. الآن بلطف رفع حامل العينة من تجويفه وإدراجه على الفور في قاعدة حامل عينة مغناطيسية معدة مسبقا.

لا الغراء ضروري لهذه الخطوة. تطبيق ضغط لطيف لضمان الموضع الصحيح لحامل العينة داخل القاعدة. بالنسبة لحاملي العينات مع حلقة خارجية قابلة للإزالة، مارس ضغطًا لطيفًا من خلال التمسك بالحلقة الخارجية وقطعها عند نقاط الكسر المعينة.

العينة جاهزة الآن لتجميع بيانات التمركز والانعراج. قم بتركيب حامل العينة على مقياس شعاعي وضمان تحديد الموضع الصحيح للصاحب. اعتمادا على هندسة الزينوميمتر، يمكن تدوير حامل العينة بنسبة تصل إلى 160 درجة دون التسبب في أي تظليل أثناء تجربة الحيود.

استخدام الفتيل ورقة ولمس بلطف احباط البوليميد الأصفر من المؤخر لإزالة الخمور الأم الزائدة. العينة جاهزة الآن لتجميع بيانات التمركز والانعراج. الاستعداد لجمع بيانات الحيود في الموقع في درجة حرارة التبريد كما فعلت بالنسبة لدرجة الحرارة المحيطة، ثم يغرق العينة في النيتروجين السائل ونقلها إلى قارورة متوافقة مع العمود الفقري.

هندسة العينة حامل أنواع 2 و 3 يسمح نقلها إلى قارورة عينة العمود الفقري القياسية, التي يمكن استخدامها لتركيب عينة بمساعدة الروبوت. وقد تم تصميم نوع حامل العينة 1 والنوع 2 لتناسب على بئر من 24 جيدا لينبرو على غرار لوحة. كل حامل عينة على حدة يحتوي على المعينات تحديد المواقع على جانبي الحافة الخارجية من أجل ضمان وضع الأمثل على حافة البئر.

تم استخدام لوحة على غرار لينبرو 24-well مع حامل عينة من النوع 1 لتكليبل انخفاض في 293 كلفن ضد 500 ميكرولترات من الخمور الأم. وقد لوحظت بلورات من 40 إلى 50 ميكرون بعد خمس ساعات باستخدام مجهر خفيف انتقال مع أو بدون المستقطب. تم وضع حامل عينة مع بلورات بيض بيض lysozyme في مجرى الهواء الذي تسيطر عليه الرطوبة على خط شعاع HZB-MX 14.3.

تظهر هنا صورة حيود نموذجية. لا يمكن الكشف عن أي تشتت في الخلفية المرتفعة على صورة الحيود. ومن الأهمية بمكان أن التلوث من رقائق بوليميد يجب تجنبها.

وعلاوة على ذلك، من المهم أن يتم وضع حامل العينة بدقة والتلاعب بالكريستال تنفيذ بعناية. يسمح حامل العينة بمعالجة البلورات الحساسة للغاية ، وهي واحدة من أهم الخطوات في التصوير البلوري الجزيئي الدقيق. استخدامه يقلل إلى حد كبير من فرصة لتدمير العينة.