نموذج زرع الشريان الاورطي لعنق الرحم من murine باستخدام تقنيه الكفة المعدلة غير الخياطة

أنا مارتن رايل من مختبرات البحوث في قسم عام وجراحة زرع الحشوية في LMU في ميونيخ. اليوم نحن نذهب لتظهر لك نموذج زرع الأبهر المورين غيريروتوبيك باستخدام تقنية معدلة غير خياطة الكفة. أولاً، تخدير الحيوان المتلقي بالحقن داخل الصفاق من ميدازولام، ميدتوميدين والفنتانيل.

قص جميع الشعر من منطقة عنق الرحم الجانبي مع مقص الشعر الكهربائي للحيوانات الصغيرة وتطبيق مرهم العيون مع مسحات القطن لمنع العينين من الجفاف أثناء العملية. وضع الحيوان في موقف supine على وسادة التدفئة تحت المجهر وشريط بلطف ساقيه إلى طاولة التشغيل مع شرائط الجص الحساسة للجلد. إمالة رأسه إلى الوراء وفرك حقل المنطوق عدة مرات مع الكحول.

جعل شق الجلد من شق الوداجي إلى الفك السفلي الأيمن مع مقص صغير. إزالة الفص السفلي الأيمن من الغدة تحت المناظرة عن طريق الكي ثنائي القطب من pedicle السفينة والاستئصال اللاحقة مع مقص صغير. إزالة العضلات الحق sternocleidomastoid عبر الكي ثنائي القطب من الجزء العلوي والسفلي والاستئصال اللاحقة مع مقص صغير للوصول إلى الشريان السباتي المشترك.

تعبئة الشريان السباتي المشترك بقدر ما distally و proximally ممكن عن طريق سحب الأنسجة الضامة المحيطة بها وبصرف النظر مع ملقط غرامة. التعادل اثنين من 7-0 خيوط الحرير مع الحد الأدنى من المسافة بين بعضها البعض حول منتصف الشريان السباتي المشترك، وعابرة الشريان السباتي المشترك مع مقص دقيق الدقيقة بين الأربطة. مرر الطرف القريب من الرباط من خلال الكفة وإصلاحها بمشبك شريان صغير.

إزالة الرباط مع مقص دقيق صغير أقرب إلى الرباط قدر الإمكان ومسح التجويف مع المالحة heparinized مع إبرة قياس 30 مع الحرص على عدم تلف جدران السفينة. Distend التجويف مفتوحة باستخدام توسع الأوعية الدموية غرامة وعكس جذع السباتي على الكفة عن طريق سحبه بلطف على أنبوب البولي أميد. إصلاح فورا السباتي المقلوب مع فضفاضة قبل تعادل حلقة الحرير 7-0.

إجراء نفس الإجراء على الطرف الآخر من الشريان السباتي مع الكفة الأخرى. مرر نهاية الرباط من خلال الكفة واصلحها بمشبك شريان صغير. إزالة الرباط مع مقص دقيق صغير أقرب إلى الرباط قدر الإمكان ومسح التجويف مع المالحة heparinized مع إبرة قياس 30 مع الحرص على عدم تلف جدران السفينة.

Distend التجويف مفتوحة باستخدام توسع الأوعية الدموية غرامة وعكس جذع السباتي على الكفة عن طريق سحبه بلطف على أنبوب البولي أميد. إصلاح فورا السباتي المقلوب مع فضفاضة قبل تعادل حلقة الحرير 7-0. وضع الحيوان المتلقي جانبا وترطيب الثلثين العلوي مع المالحة حتى يتم explanted الجزء الأبهري.

تخدير الماوس المانح بنفس الطريقة التي يتم بها الحيوان المتلقي. قص جميع شعر منطقة البطن والصدر بقصة شعر كهربائية للحيوانات الصغيرة وتطبيق مرهم العيون مع مسحات القطن لمنع جفاف العينين أثناء الإجراء. وضع الحيوان في موقف supine على وسادة التدفئة تحت المجهر وشريط بلطف ساقيه إلى طاولة التشغيل مع شرائط الجص الحساسة للجلد.

فرك حقل المنطوق عدة مرات مع الكحول. إجراء استئصال البطن في منتصف الخط مع مقص صغير ودفع الأمعاء إلى أعلى قليلا لفضح الكافا الوريدي السفلي. حقن IVC مع مكعب واحد من الملحية heparinized باستخدام إبرة قياس 30.

قطع الشريان الأورطي البطني و IVC تحت الشرايين الكلوية مع مقص صغير لssanguinate الحيوان المانح. ضع ضغطًا فضفاضًا في البطن لامتصاص الدم. إجراء استئصال الصدر عن طريق تحويل ثنائي من الأضلاع مع مقص وإمالة جدار الصدر الأمامي بقشري مع المشبك الجراحي لفضح الميديستينوم.

قطع IVC والمريء مباشرة فوق الحجاب الحاجز مع مقص صغير. إزالة القلب والرئتين عن طريق التمليك لهم صعودا مع ملقط عقد قطع IVC والمريء ومن ثم استئصالها مع مقص صغير من القاعدة للوصول إلى الشريان الأورطي الصدري وmediastinum الظهرية. تعبئة الشريان الأورطي الصدري من الأنسجة المحيطة بها عن طريق سحب بعيدا الأنسجة الضامة المحيطة والدهون مع ملقط غرامة مع الحرص على عدم تلف أي الشرايين الوربية.

الكي جميع الفروع من الشريان الأورطي الصدري مع ملقط كوتري ثنائي القطب واستئصال الجزء الأبهري بين الحجاب الحاجز وقوس الأبهر باستخدام مقص صغير. دافق الجزء الأبهري المُخَطَل مع محلول ملحي مُهدَّد مع إبرة قياس 30 مع الحرص على عدم إتلاف جدران الوعاء لإزالة أي دم أو جلطات متبقية ونقل الكسب غير المشروع إلى الحيوان المتلقي. سحب الطرف القريب من الجزء الأبهري المانحة على الكفة القريبة على رأس الشريان السباتي المقلوب مع ملقط غرامة وإصلاحه على الفور مع حلقة الحرير فضفاضة قبل تعادل 7-0.

تقليم نهاية حرة من الكسب غير المشروع الأبهري مع مقص صغير بحيث طول الكسب غير المشروع يناسب المسافة بين الأصفاد اثنين. سحب نهاية القعدة من الجزء الأبهري المانحة على الكفة القعدة على رأس الشريان السباتي المقلوب مع ملقط غرامة وإصلاحه على الفور مع حلقة حريرية فضفاضة قبل تعادل 7-0. إزالة المشبك القاصي أولاً للسماح بالضخ الرجعية.

بعد تحقيق الهدسات، وإزالة المشبك القريبة لإكمال تناسلية. وأخيرا، أغلق الجرح مع خياطة مستمرة 6-0. بعد 28 يوما، يتم التضحية بالحيوانات والحفاظ على الطعوم لتلطيخ النسيج.

كما هو مبين في هذه البقع فان غيسون من المقاطع الأبهري، تماما MHC غير متطابقة الأورعا allografted من Balb / c المانحين إلى ستة متلقين السود وضعت تضخم نيوينيمي كبير مما أدى إلى تضييق الإنارة. من ناحية أخرى ، وضعت عمليات زرع الأبهري سينجيني من المتبرعين الستة السود إلى ستة متلقين أسود فقط تضخم التنسج الجديد قليلا. يُظهر التلطيخ المناعي ضد SM22، وهو علامة لخلايا العضلات السلسة الوعائية، كما هو موضح في هذه الصورة في الفلورس الخضراء، أن النيوريسما يتكون بشكل رئيسي من خلايا العضلات السلسة الوعائية.

يعمل زرع المورين الأبهري كنموذج لاعتلال الأوعية الدموية المزمن الذي هو السبب الأكثر شيوعًا لفشل الكسب غير المشروع في وقت متأخر. بالمقارنة مع نموذج البطن التقويمي، لدينا تقنية الكفة المعدلة هي أقل تطلبا microsurgical مما يؤدي إلى نسبة نجاح عالية. بالإضافة إلى ذلك ، نظرًا لقطر الكفة الثابت ، يمكن إهمال الاختلافات في أوعية الأوعية الدموية كما هو مُشاهد في نماذج زرع الأعضاء المجهرية الأخرى.

وعلاوة على ذلك، يتم الاحتفاظ الوقت التروية الدافئة ثابتة في جميع أنحاء المجموعات التجريبية كما يتم إعداد الحيوان المتلقي أولا قبل أن يتم explanted الجزء الأبهري. وينبغي أن نموذجنا المعدلة تساعد مختبرات أخرى على إنشاء زرع مورين الأبهري.